鑒別高致病性禽流感與新城疫的實(shí)踐總結(jié)

吳榮華，呂英然

摘要：高致病性禽流感和新城疫都是由病毒引起的禽類高度傳染性疾病，在《中華人民共和國動物防疫法》上同被列為一類動物疫病，都具有傳播快、發(fā)病急、死亡率高的特征。因此對基層檢驗(yàn)檢疫機(jī)構(gòu)和各地獸醫(yī)站來說，能夠快速準(zhǔn)確地將二者區(qū)分開來顯得非常重要。本文從臨床、血清學(xué)等方面介紹了實(shí)踐中可用于二者的鑒別診斷方法為有效的鑒別高致病性禽流感和新城疫提供參考。

關(guān)鍵詞：禽流感；新城疫；鑒別

中圖分類號： S858.31 文獻(xiàn)標(biāo)識碼： A DOI編號： 10.14025/j.cnki.jlny.2018.16.035

高致病性禽流感是一種人、禽共患的急性傳染病，其發(fā)病率和死亡率非常高，感染的雞群常?！叭姼矝]”，嚴(yán)重威脅著養(yǎng)禽業(yè)甚至很多珍稀野生動物的繁衍和生存，從而對經(jīng)濟(jì)也造成極大的影響。人接觸了病禽及其分泌物，吸入了病禽飛沫，以及誤食病禽制品或被病禽污染的食品后，都可能被感染。與此同時，新城疫也一直嚴(yán)重危害養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展，新城疫是由副黏病毒引起的家禽呼吸困難、神經(jīng)紊亂、漿膜和黏膜出血的一種急性敗血性傳染病，該病傳播快，死亡率高。發(fā)病時若不及時將二者鑒別和控制，則可能引起疫病的流行。

高致病性禽流感和新城疫的診斷主要從臨床診斷和實(shí)驗(yàn)室診斷兩個方面考慮。

1 高致病性禽流感和新城疫的臨床診斷

1.1病原學(xué)

從病原學(xué)上看：高致病性禽流感屬正黏病毒科流感病毒屬的A型流感病毒。禽流感病毒有兩類重要的抗原，它們分別為：表面抗原和型特異性抗原。表面抗原主要指HA和NA，目前已發(fā)現(xiàn)有15種，分別命名為H1-H15，N1-N9，其中H5N1可感染人。新城疫病毒屬RNA病毒中單股負(fù)鏈病毒目、副黏病毒科、副黏病毒亞科、腮腺炎病毒屬的禽副黏病毒。其目前有9個血清型，新城疫病毒屬Ⅰ型禽副黏病毒。

1.2流行病學(xué)

高致病性禽流感一年四季均可流行，但在冬季和氣溫驟冷驟熱的季節(jié)更易爆發(fā)。而新城疫一年四季均可發(fā)生，但以冬季多發(fā)，不同日齡的雞均敏感。高致病性禽流感病毒宿主廣泛，除感染雞外，鴨、鵝、野鳥、水禽、海鳥、豬等哺乳動物甚至人均可感染。新城疫對鵝、鴨的致病力弱，一般不發(fā)病，沒有感染人的報(bào)道。

1.3臨床癥狀

高致病性禽流感潛伏期和病程比新城疫短，即發(fā)病急、病程短、死亡快，家禽呈急性發(fā)病死亡；雞冠出血或發(fā)紺，頭部水腫，腳鱗出血；鴨、鵝等水禽可見神經(jīng)癥狀和腹瀉。高致病性（最急性）的新城疫則表現(xiàn)為雞無癥狀突然死亡，張口呼吸、嗜睡，嗉囊積液、糞便呈黃綠色，但這種最急性型的新城疫已不多見。常見的是急性、亞急性的新城疫，表現(xiàn)為離群呆立、閉目縮頸、呈瞌睡狀，發(fā)出呼嚕聲和甩頭癥狀，倒提病禽會有酸水或粘液從口鼻流出，部分雞拉綠色稀糞，病程長的病雞會出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，多呈現(xiàn)漸進(jìn)死亡。

1.4病理變化

高致病性禽流感主要是全身敗血癥變化，各內(nèi)臟器官廣泛性充血、出血。以肝腫大淤血、出血，肺淤血、出血、水腫，肌胃角質(zhì)層有出血點(diǎn)，十二指腸出血，胰腺壞死。而新城疫剖檢主要病變在消化道，腺胃粘膜水腫、出血，盲腸腫大出血，其他腸段粘膜及泄殖腔出血。

1.5高致病性禽流感和新城疫的鑒別要點(diǎn)

2 實(shí)驗(yàn)室診斷

由于急性新城疫和高致病性禽流感的癥狀非常相似，根據(jù)臨床癥狀和解剖變化很難確診，若確診需要進(jìn)行病毒分離鑒定和實(shí)驗(yàn)室診斷。

2.1病毒的分離和鑒定

2.1.1病料采集 高致病性禽流感病毒：主要在呼吸道和腦組織中采集病料；新城疫病毒：活禽主要采集泄殖腔和氣管部位病料，死禽則主要采集腦組織，其次也可以采集心、肝、脾等內(nèi)臟器官。

2.1.2接種雞胚 高致病性禽流感病毒：病毒能在9～11日齡雞胚中生長，可在雞胚中達(dá)到較高滴度。將禽流感病毒接種于9～11日齡雞胚中，無菌收集接種后24～96h的尿囊液，若雞胚在24h內(nèi)死亡，則不收集尿囊液，棄掉。通過血液凝集試驗(yàn)來檢測尿囊液中是否含有高致病性禽流感病毒，即尿囊液中含有禽流感病毒，則可以凝集雞的紅細(xì)胞。若初次分離不到病毒，可盲傳2代再進(jìn)行檢測，若盲傳3～5代，仍不能凝集紅細(xì)胞，則判斷為陰性；新城疫病毒：需要接種于7～9日齡的SPF雞胚，無菌收集接種后4～7d的尿囊液。通過血液凝集試驗(yàn)和血液凝集抑制試驗(yàn)（HA-HI試驗(yàn)）來檢測尿囊液中是否有新城疫病毒。

2.1.3病毒的鑒定 新城疫病毒具有凝集禽類和某些哺乳動物紅細(xì)胞的特性。首先通過血液凝集試驗(yàn)（HA）檢測所分離的病料是否有血凝特性；若病料能夠凝集雞的紅細(xì)胞，則需通過血液凝集抑制試驗(yàn)（HI）進(jìn)一步檢測是否為新城疫病毒，即利用已知的抗新城疫病毒血清進(jìn)行血液凝抑制試驗(yàn)（HI），若抗新城疫病毒血清能夠抑制分離的病毒凝集紅細(xì)胞，則證明該病毒是新城疫病毒。HI試驗(yàn)除可以鑒定病毒外，還可以檢測感染雞群的血清中是否有抑制紅細(xì)胞凝集的抗體。如果可疑病雞的血清能抑制新城疫病毒對紅細(xì)胞的凝集，即可判定該雞血清中含有新城疫抗體。感染雞群一般在感染后10～15天，HI抗體效價可達(dá)1∶1280。通過雙血清法即比較雞群發(fā)病前后兩次血清中HI抗體效價的變化，即可確定是否有新城疫感染。如果一個雞群在發(fā)病前HI抗體平均值為1∶32～64，15天后HI抗體效價平均值為1∶512～1024，則證明該雞群已感染新城疫強(qiáng)毒。

若雞胚尿囊液或細(xì)胞培養(yǎng)液對雞的紅細(xì)胞有血凝活性時，則應(yīng)先用新城疫病毒抗血清做血凝抑制試驗(yàn)，來判定是新城疫感染還是禽流感感染。若是禽流感感染，則需要用特定的抗禽流感血清來判斷禽流感病毒的HA亞型和NA亞型。

2.2血清學(xué)診斷方法

2.2.1禽流感和新城疫在檢測過程中操作方法基本相同，即通過血凝和血凝抑制試驗(yàn)（HA-HI試驗(yàn)），其主要區(qū)別：禽流感病毒亞型比較多，并且各亞型之間交叉保護(hù)性比較差，而新城疫只有一種血清型，因此檢測禽流感時需要分別檢測。若懷疑其他型存在，則必須做其他亞型診斷。若以診斷為目的，則可用血凝抑制試驗(yàn)（HI試驗(yàn)）和ELISA做血清學(xué)檢查。利用雙血清法即采集急性期和恢復(fù)期雙份血清，當(dāng)出現(xiàn)4倍以上HI抗體升高時，即可確診為禽流感感染。

2.2.2血凝和血凝抑制試驗(yàn)的局限性 用于檢測免疫群的抗體，不能區(qū)分感染與免疫；對感染后發(fā)病、死亡率高的高致病性禽流感，往往檢測不到抗體。

3 結(jié)語

禽流感和新城疫不僅對養(yǎng)禽業(yè)的影響巨大，而且禽流感對人類的健康造成越來越大的威脅。在對兩種疫病提高警惕的同時，應(yīng)建立更敏感、準(zhǔn)確、快速的檢測方法用于流行病學(xué)監(jiān)測。另外，應(yīng)注意將一般傳染病和禽流感與新城疫進(jìn)行區(qū)別，以減少不必要的損失。

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作者簡介：吳榮華，中專學(xué)歷，獸醫(yī)師；呂英然，碩士研究生，畜牧獸醫(yī)講師，研究方向：獸醫(yī)微生物與免疫學(xué)。