軟膏劑制備及含量測定的研究進展分析

王柳云

【摘要】目的：分析軟膏劑制備及含量測定的研究價值。方法：選擇2017年6月-2017年12月作為研究時間段，以黃連素﹕凡士林比例1﹕10制成軟膏，并選擇Acclaim SEC-300（4.6×300mm，5.0μm），流動相為乙腈-0.1%磷酸（25：75），流速1.00ml/min，檢測波長均為270nm，柱溫30℃，分析液相色譜法檢測黃連素。結(jié)果：本次研究中，黃連素線性范圍（0.0211-0.2115）μg/mL，r值0.9994；精密度試驗所得平均峰面積為266.13mAu×min，RSD為1.65%；重復(fù)性試驗中黃連素檢測含量分別為1.22mg/g，RSD為1.40%；穩(wěn)定性試驗檢測黃連素峰面積RSD為0.69%，加樣回收率為99.99%。結(jié)論：黃連素軟膏制備方法操作便捷，采用高效液相色譜法測定黃連素能夠獲得良好線性關(guān)系，重復(fù)性及精密度均較好，可保證軟膏質(zhì)量。

【關(guān)鍵詞】軟膏；黃連素；制備；高效液相色譜法；測定

[中圖分類號]R9 [文獻標識碼]A [文章編號]2096-5249（2018）04-113-02

黃連素，通常又被稱作鹽酸小檗堿，屬于異喹啉類生物堿，藥理活性較強，以抗炎為主要藥理作用，但大量臨床實踐證實，黃連素在治療心血管疾病、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)疾病及降糖方面具有重要的臨床作用，而且多與其他藥物組成復(fù)方制劑，或多在中成藥內(nèi)被檢出，這表明黃連素應(yīng)用范圍廣泛。中藥成分軟膏主要是指將中藥粉末與軟膏基質(zhì)混合后制成的外用制劑，在實現(xiàn)中藥透皮起效治療目的的同時，體現(xiàn)保護創(chuàng)面及潤膚等功效，由于軟膏能夠直接抵達皮膚病灶，而且攜帶使用方便，因此應(yīng)用率逐年提高[1]。選擇2017年6月-2017年12月作為研究時間段，制備黃連素軟膏后，經(jīng)高效液相色譜法檢測黃連素含量，獲得一定研究成果，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 材料與設(shè)備 本次研究主要檢測材料及設(shè)備如下：（1）Dionex Ultimate3000（Thermo Scientific制造）型色譜儀；（2）采用Acclaim SEC-300（4.6×300mm，2.5μm），檢測柱溫為30℃；（3）濃度測量儀器為Nanodrop2000（Thermo Scientific制造）；（4）離心機為Thermo Legend Micro17離心機；（5）20μL環(huán)形Nano Viper/彩色PEEK管（內(nèi)部直徑為0.18mm）；（6）震蕩攪拌機，Mettler toledo 320 pH計；（7）HPLC梯度級水（Fisher Scientific制造，英國）；（8）超聲波清洗器KQ-800GKDV（上海精密儀器儀表有限公司）；（9）島津AUW120D半微量分析天平；（10）天津津騰GM-0.33A（無油）隔膜真空泵；（11）Kertone專用純水水箱及純水柱，湖南科爾頓水務(wù)有限公司；（12）黃連素，含量97%，陜西慧科植物開發(fā)有限公司；（3）對照品鹽酸小檗堿來自南昌貝塔生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1黃連素軟膏制備 取黃連素10g、凡士林100g；凡士林預(yù)先加熱至熔化狀態(tài)，過濾降溫后呈半凝狀態(tài)，逐步加入黃連素，混勻后，待冷凝后可見外觀細膩，呈棕黃或棕褐色，且易于涂布。

1.2.2黃連素溶液制備 精密測量黃連素軟膏0.25g，置于錐形瓶內(nèi)，加入甲醇25ml后混勻，經(jīng)超聲提取后在室溫條件下靜置；待發(fā)現(xiàn)已冷卻至室溫，加入適量鹽酸甲醇（比例1：100），補充丟失混合液重量，震蕩濾液后，獲取0.45μ濾膜濾液；分別精確稱量對照品鹽酸小檗堿，與鹽酸甲醇（比例1：100）混合經(jīng)微孔濾膜過濾后制成供試溶液，其中微孔濾膜規(guī)格0.22μm。

1.2.3黃連素檢測 精密稱量聯(lián)合供試溶液1、2、4、8，按照2.10、4.20、8.03、16.50μg/ml濃度，加入鹽酸甲醇，震蕩混勻，送入液相色譜儀內(nèi)，另連續(xù)進樣5次，每次進樣20μL，分析精密度、重復(fù)性及穩(wěn)定性。

2 結(jié)果

本次研究中，黃連素線性范圍（0.0211-0.2115）μg/mL，r值0.9994；精密度試驗所得平均峰面積為266.13mAu×min，RSD為1.65%；重復(fù)性試驗中黃連素檢測含量分別為1.22mg/g，RSD為1.40%，詳見表1；穩(wěn)定性試驗檢測黃連素峰面積RSD為0.69%，加樣回收率為99.99%，詳見表2。

3 討論

3.1 高效液相色譜法 液相色譜法是一類具備檢測效率高、準確率高、適用范圍較廣、重復(fù)性較好、操作便捷等優(yōu)勢的檢測方法，在中藥及西藥檢測分析試驗中應(yīng)用范圍較廣，比如經(jīng)典液相色譜、高效液相色譜法等。以高效液相色譜法為例，目前多應(yīng)用于藥物有效成分、藥品質(zhì)量把控試驗中，現(xiàn)已成為鑒定中藥材、評估藥品質(zhì)量的重要手段之一，有助于醫(yī)療機構(gòu)、制藥企業(yè)把控藥品質(zhì)量，從而保障臨床用藥安全[2-3]。

3.2 黃連素軟膏制備與檢測 黃連素在臨床上應(yīng)用范圍比較廣泛，最初由中藥黃連中提純，但目前因作用廣泛，臨床用量較大，故目前多為人工合成藥物。黃連素多用于霍亂弧菌屬細菌、志賀菌屬細菌等致病菌導(dǎo)致的感染性腸道疾病，但對于燒傷、腫瘤、非酒精性脂肪肝、糖脂代謝異常等疾病同樣具有良好的抗炎或抑制效果[4-5]。黃連素檢測方法較多，如紫外-可見分光光度法、二階導(dǎo)數(shù)光譜法、薄層掃描法及高效液相色譜法等，其中以高效液相色譜法應(yīng)用率最高，該方法具有重復(fù)性好、層析速度快、分離效率高、特異性較好等優(yōu)勢，在藥物分析中應(yīng)用范圍廣泛。本次研究以黃連素及凡士林為原材料制成黃連素軟膏后通過高效液相色譜進行檢測，結(jié)果顯示，黃連素軟膏外觀細膩，呈棕黃或棕褐色，且易于涂布，制備過程簡單易于操作，檢測后顯示黃連素線性范圍（0.0211-0.2115）μg/mL，r值0.9994；而且重復(fù)性及精密度均較好。

總之，利用黃連素及凡士林制成黃連素乳膏具有操作便捷、吸收較好等優(yōu)點，而且HPLC法檢測后提示重復(fù)性及精密度均較好。

參考文獻：

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[3]王閏， 孟慧， 許勇.復(fù)方甘草軟膏的制備及含量測定法的建立[J].東南國防醫(yī)藥， 2015（4）： 389-392.

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[5]劉曉琰.復(fù)方黃連及黃連素的臨床應(yīng)用及研究新進展[J].社區(qū)醫(yī)學(xué)雜志， 2015， 13（6）： 63-64.