急性白血病患兒血清鐵調(diào)素及白細(xì)胞介素-6表達(dá)的水平分析*

李程輝，高 暉，邊 爽，梁亞軍

(1.大連醫(yī)科大學(xué)附屬大連市兒童醫(yī)院血液科，遼寧大連 116012；2.濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院兒童醫(yī)學(xué)研究所，山東濟(jì)寧 272001)

急性白血病是血液系統(tǒng)一種惡性克隆性病，主要表現(xiàn)為造血干細(xì)胞的異常分化及成熟障礙。急性白血病占所有小兒惡性腫瘤第一位，貧血為其常見的臨床癥狀[1]。急性白血病貧血產(chǎn)生機(jī)制較為復(fù)雜，常因白血病細(xì)胞的惡性增殖而致使骨髓中紅系細(xì)胞的生成減少，即炎性因子水平上升造成紅系細(xì)胞的生成受抑制，且腎臟合成紅細(xì)胞生成素功能受影響、鐵的吸收利用障礙及紅細(xì)胞的壽命縮短等都是貧血發(fā)生的可能原因，嚴(yán)重影響患兒生活質(zhì)量，且影響患兒預(yù)后[2-4]。鐵調(diào)素和白細(xì)胞介素(IL)-6在貧血發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用。本研究旨在探討急性白血病患兒血清鐵調(diào)素及IL-6表達(dá)的臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2012年1月至2017年6月大連醫(yī)科大學(xué)附屬大連市兒童醫(yī)院收治的73例初診急性白血病患兒作為觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)經(jīng)骨髓細(xì)胞遺傳學(xué)、形態(tài)學(xué)及流式細(xì)胞免疫學(xué)分型首次確診，均未接受過治療；(2)患兒家屬同意參與本研究，并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并造成貧血的其他疾病；(2)合并肺、腎、肝功能損傷者；(3)合并內(nèi)分泌系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)疾病者。73例患兒中，男42例，女31例，年齡3～14歲，平均(7.94±1.65)歲，包括急性髓性細(xì)胞白血病(AML)患兒38例(AML組)，急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)患兒35例(ALL組)。另選擇本院同期健康體檢兒童60例納入對(duì)照組，其中男35例，女25例，年齡3～14歲，平均(7.65±1.71)歲。2組研究對(duì)象性別比例及年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)過本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)后進(jìn)行。

1.2儀器與試劑 芬蘭Thermo公司酶標(biāo)儀，日立7600型全自動(dòng)生化分析儀。人鐵調(diào)素酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒購(gòu)自上?？道噬锟萍加邢薰荆薎L-6試劑盒(上海雙贏生物科技有限公司)。

1.3鐵調(diào)素和IL-6檢測(cè) 所有研究對(duì)象均于清晨空腹采集靜脈血3 mL，放置于促凝管中，凝固0.5 h，以離心半徑15 cm，轉(zhuǎn)速3 000 r/min，離心時(shí)間為12 min，分離血清標(biāo)本，于-20 ℃下保存待測(cè)。采用ELISA法測(cè)定鐵調(diào)素和IL-6水平，嚴(yán)格按照試劑盒說明書標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定。

2 結(jié) 果

2.1觀察組與對(duì)照組血清鐵調(diào)素和IL-6水平比較 觀察組初診未治時(shí)血清鐵調(diào)素和IL-6水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

2.2AML組與對(duì)照組血清鐵調(diào)素和IL-6水平變化比較 38例初診未治的AML患兒經(jīng)首次化療1個(gè)月后，其中32例患兒達(dá)到病情緩解，繼續(xù)化療6個(gè)月后，32例患兒均持續(xù)完全緩解。AML組各個(gè)時(shí)期血清鐵調(diào)素和IL-6水平均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。AML組中，首次化療1個(gè)月后緩解和繼續(xù)化療6個(gè)月緩解的患兒血清鐵調(diào)素和IL-6水平均低于AML患兒初診未治時(shí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表1 觀察組與對(duì)照組血清鐵調(diào)素和IL-6水平比較

表2 AML組與對(duì)照組血清鐵調(diào)素和IL-6水平比較

2.3ALL組與對(duì)照組血清鐵調(diào)素和IL-6水平比較 初診未治的ALL患兒35例經(jīng)首次化療1個(gè)月后，其中31例患兒達(dá)到病情緩解，繼續(xù)化療6個(gè)月后，31例患兒均持續(xù)完全緩解。ALL組各個(gè)時(shí)期血清鐵調(diào)素和IL-6水平均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。ALL組中，首次化療1個(gè)月后緩解和繼續(xù)化療6個(gè)月緩解的患兒血清鐵調(diào)素和IL-6水平均低于ALL患兒初診未治時(shí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 ALL組與對(duì)照組血清鐵調(diào)素和IL-6水平比較

3 討 論

急性白血病常存在不同程度的貧血，當(dāng)急性白血病患兒發(fā)生貧血時(shí)，患兒生活質(zhì)量嚴(yán)重下降，也是急性白血病預(yù)后不良的重要因素[5-6]。因此，探討小兒急性白血病分子機(jī)制，尤其是急性白血病貧血分子機(jī)制具有重要意義，可為臨床治療提供作用靶標(biāo)。

鐵調(diào)素在貧血發(fā)生、發(fā)展中越來越受到重視。人類的鐵調(diào)素基因HAMP定位于19號(hào)染色體上的長(zhǎng)臂上，組成包括2個(gè)內(nèi)含子和3個(gè)外顯子。鐵調(diào)素主要由肝臟合成，能夠經(jīng)調(diào)控十二指腸對(duì)鐵的吸收及巨噬細(xì)胞對(duì)鐵的釋放，進(jìn)一步調(diào)節(jié)組織細(xì)胞內(nèi)鐵的穩(wěn)態(tài)[7-8]。近年來，鐵調(diào)素被發(fā)現(xiàn)是富含半胱氨酸的一種抗菌多肽，能夠經(jīng)泛素化及鐵調(diào)素受體內(nèi)化降解進(jìn)行鐵的負(fù)性調(diào)節(jié)[9]。有研究顯示，急性白血病患者初治組與緩解組鐵調(diào)素水平明顯高于健康對(duì)照組，且初治組鐵調(diào)素水平高于緩解組，隨著鐵調(diào)素增加，血紅蛋白明顯下降，二者呈負(fù)相關(guān)，提示鐵調(diào)素水平與急性白血病貧血程度相關(guān)[10]。本研究結(jié)果表明，觀察組血清鐵調(diào)素水平高于對(duì)照組，說明急性白血病患兒血清鐵調(diào)素水平明顯升高；AML和ALL初診未治患兒、初次化療1個(gè)月后緩解患兒、治療6個(gè)月后緩解患兒血清鐵調(diào)素水平高于對(duì)照組，而AML和ALL初次化療1個(gè)月后緩解患兒、治療6個(gè)月后緩解患兒血清鐵調(diào)素水平低于初診未治患兒，說明血清鐵調(diào)素水平在一定程度上反映了急性白血病患兒的病情嚴(yán)重程度及治療效果。

IL-6是由184個(gè)氨基酸組成的一種糖蛋白，其生物學(xué)活性包括誘導(dǎo)B細(xì)胞增殖分化，活性T細(xì)胞和自然殺傷(NK)細(xì)胞，促進(jìn)造血祖細(xì)胞增殖，且參與自身免疫疾病及惡性腫瘤的形成等[11-12]。有研究顯示，急性白血病患兒血清IL-6水平明顯升高，但其具體機(jī)制尚未完全闡明，認(rèn)為可能與異常B淋巴細(xì)胞的出現(xiàn)相關(guān)[13]。有研究顯示，IL-6與其受體可通過結(jié)合來激活JAK/STAT信號(hào)通路，促進(jìn)鐵調(diào)素基因啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄，進(jìn)一步促使鐵調(diào)素表達(dá)增加而引發(fā)貧血[14-15]。本研究結(jié)果表明，觀察組血清IL-6水平高于對(duì)照組，說明AML患兒血清IL-6水平明顯升高；AML和ALL初診未治患兒、初次化療1個(gè)月后緩解患兒、治療6個(gè)月后緩解患兒IL-6水平高于對(duì)照組，而AML和ALL初次化療1個(gè)月后緩解患兒、治療6個(gè)月后緩解患兒IL-6水平低于初診未治患兒，說明IL-6水平也在一定程度上反映了急性白血病患兒的病情嚴(yán)重程度及治療效果。

綜上所述，血清鐵調(diào)素和IL-6水平在一定程度上反映了急性白血病患兒的病情嚴(yán)重程度及治療效果。