糖足顆粒劑外用對(duì)神經(jīng)性糖尿病足大鼠模型的影響

毛黎黎，高曉斐，岳仁宋(.成都中醫(yī)藥大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院， 四川 成都 6007； .重慶市中醫(yī)院，重慶 40000； .成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，四川 成都 6007)

糖尿病高危足是糖尿病患者足部存在周圍神經(jīng)病變或外周血管病變或皮膚病變，但無(wú)開放性病灶，伴有嚴(yán)重的足部潰瘍風(fēng)險(xiǎn)的糖尿病足早期病變的總稱，也就是處于糖尿病足Wagner分級(jí)法的0級(jí)[1]。處在糖尿病高危足期的患者多無(wú)明顯的不適，加之目前醫(yī)學(xué)界對(duì)該病的認(rèn)識(shí)并不明確，無(wú)統(tǒng)一的防治標(biāo)準(zhǔn)[2-3]，致使糖尿病足部潰瘍的發(fā)生率日漸增長(zhǎng)，糖尿病高危足的防治形勢(shì)日趨嚴(yán)峻。筆者針對(duì)糖尿病高危足的病理特點(diǎn)，結(jié)合多年臨床經(jīng)驗(yàn)，引入“未病先防”的思想，臨床上運(yùn)用中藥糖足煎劑浴足治療糖尿病高危足，總有效率達(dá)92.3%，減慢或阻斷了糖尿病高危足發(fā)展成為足潰瘍的進(jìn)程[4]。本研究意將糖足煎劑改為顆粒劑，藥物組成不變，以動(dòng)物實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)該中藥的藥效動(dòng)力學(xué)，以期為糖足顆粒劑的臨床大量使用提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng) 物

SPF級(jí)SD大鼠50只，雄性，體質(zhì)量180～220 g，購(gòu)自簡(jiǎn)陽(yáng)達(dá)碩動(dòng)物科技有限公司，由四川省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物檢測(cè)中心檢測(cè)，許可證號(hào)SCXK(川)2013-24。所有動(dòng)物均在SPF級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室里喂養(yǎng)，室內(nèi)空氣流通良好，室溫(22±2)℃，相對(duì)濕度26%～30%。普通飼料喂養(yǎng)，自由飲水和攝食，適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d后進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)。

1.2 藥品、試劑與儀器

糖足顆粒劑藥物組成：黃芪、當(dāng)歸、雞血藤、乳香、沒(méi)藥、忍冬藤、川芎。中藥均由成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院藥劑科提供，并由其制備成顆粒劑。黃芪含黃芪甲苷、毛蕊異黃酮及多糖類等，忍冬藤含綠原酸、馬錢苷及黃酮類化合物等，雞血藤含芒柄花素及多糖類，鑒于這些成分大多能溶于水，故將其采用水煎煮法提取。當(dāng)歸含揮發(fā)油類、當(dāng)歸多糖及水溶性成分阿魏酸等，川芎含揮發(fā)油類及酚酸類等，兩味藥材均含有揮發(fā)油，且其水溶性成分為主要有效成分，故先將藥材中的揮發(fā)油以水蒸氣蒸餾法提取，再加水煎煮剩余藥渣。乳香、沒(méi)藥為樹脂類中藥，粉碎成細(xì)粉后直接入藥。STZ，Sigma公司產(chǎn)品，批號(hào)WXBB4624V；精蛋白鋅重組人胰島素注射液，商品名為優(yōu)泌林，禮來(lái)蘇州制藥有限公司產(chǎn)品，批號(hào)C093656A；二甲苯(批號(hào)WG0069530)、冰醋酸(批號(hào)1093651)，均為成都艾科達(dá)化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品；蘇木素-伊紅液，北京索萊寶科技有限公司產(chǎn)品，批號(hào)G1120；變色酸2R，成都格雷西亞化學(xué)技術(shù)有限公司產(chǎn)品，批號(hào)C0681840251。One-Touch-Ⅱ型血糖儀及血糖試紙，美國(guó)強(qiáng)生公司產(chǎn)品；MS9557型胰島素注射筆，美國(guó)禮來(lái)公司產(chǎn)品；HH.W21.600型電熱恒溫水箱，余姚市東方電工儀器廠產(chǎn)品；9030(A)101(A)-0(S)電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司產(chǎn)品；BMJ-Ⅲ型包埋機(jī)、BMJ-Ⅲ型病理組織包埋冷凍臺(tái)、PHY-Ⅲ病理組織漂烘處理儀，均為常州中威電子儀器廠產(chǎn)品；LEICA RM2245切片機(jī)，購(gòu)自德國(guó)；ZT-12P2生物組織自動(dòng)脫水機(jī)，孝感亞光醫(yī)用電子技術(shù)有限公司產(chǎn)品。

1.3 動(dòng)物分組

將60只雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組，模型對(duì)照組，蒸餾水組，糖足顆粒劑高、中、低劑量組6組，每組各10只。

1.4 模型的建立

1.4.1 STZ糖尿病模型的建立

禁食不禁水12 h，手術(shù)組一次性腹腔內(nèi)快速注射STZ 2 μL/g。分別在注射STZ后第3 d、第5 d、第7 d檢測(cè)空腹血糖，空腹血糖≥13.9 mmol/L者為造模成功(餐后血糖>16.7 mmol/L[5])。此后每?jī)商觳捎脭辔踩⊙z測(cè)各組大鼠的隨機(jī)血糖，給予血糖>25 mmol/L的大鼠胰島素注射，每天腹腔注射中效胰島素約4個(gè)單位[6]。每周稱量體質(zhì)量1次。造模期間死亡大鼠6只，分別為模型對(duì)照組2只，糖足顆粒劑高劑量組1只，糖足顆粒劑中劑量組1只，糖足顆粒劑低劑量組2只。手術(shù)組剩余44只造模成功大鼠。死亡大鼠解剖未見臟器異常，估計(jì)死亡原因?yàn)镾TZ造模而致的低血糖。

1.4.2 神經(jīng)性糖尿病足模型的建立

按照參考文獻(xiàn)[7]方法：將STZ糖尿病模型大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周；以質(zhì)量分?jǐn)?shù)為100 g/L的水合氯醛0.3 μL/g 腹腔注射麻醉，取俯臥位，固定大鼠四肢；使用電推剪在左側(cè)大腿去毛；以左側(cè)大腿股骨的體表投影位置為骨性標(biāo)志，在股骨外側(cè)淺層和股骨平行做縱形切開，切口長(zhǎng)約1.5 cm；鈍性分離筋膜、股骨直肌和二頭肌肌間隙，暴露坐骨神經(jīng)，盡量不損傷肌肉組織；沿坐骨結(jié)節(jié)向下約1 cm處用無(wú)齒鉗子鉗夾坐骨神經(jīng)干，持續(xù)10 s，咬合2齒為度，間歇10 s，重復(fù)3次，鉗夾過(guò)程中不能將神經(jīng)干夾斷，損傷寬度約為3 mm；鉗夾完成后，神經(jīng)干由圓柱狀變?yōu)楸馄綘?，并且呈現(xiàn)半透明；損傷部位遠(yuǎn)端用手術(shù)縫合線標(biāo)記，將神經(jīng)放回原肌層，縫合皮膚；大鼠右側(cè)大腿坐骨神經(jīng)僅需打開肌層暴露后縫合。造模過(guò)程中死亡2只大鼠，其中蒸餾水組1只，糖足顆粒劑高劑量組1只。術(shù)后造模大鼠左側(cè)后爪展爪反射消失[8]。

1.5 給藥方法

根據(jù)體表面積換算法，糖足顆粒劑高、中、低劑量組的給藥量依次為4.08 ，2.04，1.02 μg/g 體質(zhì)量，用溫蒸餾水12.5×10-3L(37～40 ℃)溶解后備用。將糖足顆粒劑均勻涂布于大鼠左側(cè)大腿裸露皮膚上，用紗布包裹并用無(wú)刺激醫(yī)用膠布固定，接觸1 h后洗凈。蒸餾水組同法給予等量等溫蒸餾水。正常對(duì)照組、模型對(duì)照組不予任何處理。每天給藥1 h，持續(xù)30 d。

1.6 檢測(cè)指標(biāo)

1.6.1 大體觀察

術(shù)后每天觀察大鼠傷口愈合情況，是否有感染、化膿、潰爛，足部是否出現(xiàn)紅腫、潰爛，小腿肌肉萎縮程度和跛足行走狀態(tài)。處死大鼠后解剖觀察經(jīng)鉗夾處理的坐骨神經(jīng)形態(tài)變化。

1.6.2 坐骨神經(jīng)功能指數(shù)(SFI)

以硬紙板制作兩端均不封口的暗箱，尺寸60 cm×15 cm×10 cm。實(shí)驗(yàn)開始前在暗箱里放置與箱底面積相等的白紙，將大鼠雙后足浸沒(méi)在純黑墨水里，保證大鼠行走時(shí)能在紙面上留下清晰的黑色腳印。實(shí)驗(yàn)開始，將1只用墨水處理過(guò)雙后足的大鼠從紙箱一端放入，驅(qū)使大鼠行走到另一端，然后撤出白紙，測(cè)量白紙上相對(duì)清晰的黑色腳印。分別于術(shù)后第2天、第2周和第4周進(jìn)行SFI的測(cè)量和計(jì)算。根據(jù)沈江寧[9]改良的公式:SFI=-38.3(EPL-NPL)/NPL+109.5(ETS-NTS)/NTS+13.3(EIT-NIT)/NIT-8.8。其中PL指足印長(zhǎng)度，即足跟到足趾的最長(zhǎng)距離；TS指足趾寬度，第一足趾到第五足趾的距離；IT是指中間足趾寬度，第二足趾到第四足趾的距離；E和N分別代表實(shí)驗(yàn)側(cè)和正常側(cè)。正常SFI為0，神經(jīng)功能完全喪失為-100[10]。

1.6.3 坐骨神經(jīng)組織學(xué)觀察

術(shù)后第4周，測(cè)量完大鼠足跡并計(jì)算SFI后，腹腔注射100 g/L 水合氯醛(0.3 μg/g)以麻醉大鼠，待其全身松軟后，在術(shù)側(cè)坐骨神經(jīng)遠(yuǎn)端吻合口2 mm處切取再生神經(jīng)約10 mm，F(xiàn)AA液固定48 h，切片脫蠟，變色酸2R染色 約10 min，2 g/L冰醋酸沖洗 2～3次，5 g/L亮綠冰醋酸染色10 min，自來(lái)水沖洗2 min，脫水封固。光鏡下觀察坐骨神經(jīng)縱切面軸突再生和髓鞘形成情況。采用Mias 3.0圖形分析系統(tǒng)(由四川大學(xué)圖像圖形研究所提供)，隨機(jī)取5個(gè)視野，對(duì)軸突面積、髓鞘面積進(jìn)行半定量分析。

1.6.4 雙側(cè)腓腸肌濕重

取坐骨神經(jīng)后，從肌肉起止點(diǎn)分離、剪取雙側(cè)腓腸肌，小心清除多余組織，稱量、記錄手術(shù)側(cè)與正常側(cè)腓腸肌質(zhì)量，并將同只大鼠的兩側(cè)肌肉濕重相對(duì)比，計(jì)算恢復(fù)率。腓腸肌濕重恢復(fù)率=左側(cè)腓腸肌濕重/右側(cè)腓腸肌濕重×100%。腓腸肌濕重恢復(fù)率可以間接反映神經(jīng)再生的情況。

1.6.5 腓腸肌組織學(xué)觀察

迅速測(cè)量雙側(cè)腓腸肌濕重后，將術(shù)側(cè)腓腸肌用FAA液固定48 h，逐級(jí)以1 000 g/L、900 g/L、800 g/L、700 g/L酒精脫水，二甲苯透明、浸蠟，石蠟包埋，常規(guī)切片4 μm，蘇木素-伊紅液染色3 min。采用Mias 3.0圖形分析系統(tǒng)光鏡下觀察肌細(xì)胞生長(zhǎng)情況。在每張切片上隨機(jī)選取50個(gè)橫紋肌細(xì)胞，采用半自動(dòng)法測(cè)量每個(gè)肌細(xì)胞的最大橫徑，計(jì)算其均值作為每張切片的肌細(xì)胞直徑，進(jìn)行分析。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 各組大鼠大體觀察

手術(shù)組大鼠皮膚切口愈合良好，均屬Ⅰ期愈合；術(shù)后1周左右，各組大鼠術(shù)側(cè)足趾大多呈現(xiàn)蒼白、無(wú)力，少數(shù)有紅腫、潰瘍現(xiàn)象出現(xiàn)。手術(shù)組大鼠跛行嚴(yán)重，術(shù)側(cè)小腿三頭肌體積均有不同程度縮小，糖足顆粒劑各劑量組萎縮程度較模型對(duì)照組和蒸餾水組輕。術(shù)后第4周，手術(shù)組神經(jīng)鉗夾刺激處近側(cè)較正常對(duì)照組明顯變細(xì)，手術(shù)組各組間神經(jīng)近側(cè)粗細(xì)相差不大。

2.2 各組大鼠SFI對(duì)比

5個(gè)手術(shù)組大鼠手術(shù)蘇醒后步態(tài)即表現(xiàn)為跛行，呈現(xiàn)顯著的坐骨神經(jīng)功能損傷表現(xiàn)；術(shù)后第2天、第2周和第4周坐骨神經(jīng)功能無(wú)明顯恢復(fù)跡象，SFI為-70～-100。步態(tài)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：術(shù)后第2天各手術(shù)組大鼠術(shù)側(cè)腳印細(xì)長(zhǎng)，腳趾與腳趾之間的空隙不明顯，對(duì)比正常側(cè)，PL明顯增長(zhǎng)，TS明顯縮窄；術(shù)后第4周末，糖足顆粒劑各劑量組大鼠術(shù)側(cè)腳趾仍無(wú)法分開，腳印模糊，測(cè)量困難。SFI測(cè)定顯示：與正常對(duì)照組對(duì)比，同一時(shí)間點(diǎn)模型對(duì)照組、蒸餾水組和糖足顆粒劑各劑量組的SFI均上升，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。同一時(shí)間點(diǎn)糖足顆粒劑各劑量組的SFI與模型對(duì)照組對(duì)比，差別均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。同一時(shí)間糖足顆粒各劑量組間SFI對(duì)比，差別均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

組 別動(dòng)物數(shù)術(shù)后第2天第2周第4周 正常對(duì)照組10-(3．61±2．34)-(5．21±2．24)-(3．45±2．76) 模型對(duì)照組8-(86．17±6．25)??-(85．94±11．64)??-(83．28±5．28)?? 蒸餾水組9-(87．26±7．35)??#-(85．46±7．88)??#-(83．58±5．56)??# 糖足顆粒高劑量組8-(87．78±2．18)??#△-(84．34±6．09)??#△-(84．68±8．62)??#△ 糖足顆粒中劑量組9-(87．48±5．12)??#△＊-(84．55±2．78)??#△＊-(84．18±5．22)??#△＊ 糖足顆粒低劑量組8-(87．48±5．85)??#△＊▲-(84．26±13．28)??#△＊▲-(83．31±9．32)??#△＊▲

注：與正常對(duì)照組對(duì)比，**P<0.05；與模型對(duì)照組對(duì)比，#P>0.05；與蒸餾水組對(duì)比，△P>0.05；與糖足顆粒高劑量組對(duì)比，＊P>0.05；與糖足顆粒中劑量組對(duì)比，▲P>0.05

2.3 各組大鼠坐骨神經(jīng)組織學(xué)對(duì)比

光學(xué)顯微鏡下：正常對(duì)照組神經(jīng)纖維髓鞘形態(tài)完整，排列有序、致密，厚薄比較均勻；模型對(duì)照組坐骨神經(jīng)損傷遠(yuǎn)端軸突面積增多、形態(tài)不規(guī)則、排列混亂，髓鞘幾乎消失；蒸餾水組坐骨神經(jīng)損傷形態(tài)與模型對(duì)照組相似；糖足顆粒劑高劑量組新生纖維較多，有髓神經(jīng)纖維比例增多, 排列緊密；糖足顆粒劑低劑量組出現(xiàn)新生纖維，有髓神經(jīng)纖維比例增多，排列較整齊；糖足顆粒劑中劑量組坐骨神經(jīng)組織學(xué)形態(tài)介于糖足顆粒劑高、低劑量組之間。與正常對(duì)照組對(duì)比，各手術(shù)組髓鞘面積總和減小，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05 )；軸突面積總和大小不一，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。與模型對(duì)照組對(duì)比，蒸餾水組和糖足顆粒各劑量組的髓鞘面積總和減小，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05 )，軸突面積總和差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。與蒸餾水組對(duì)比，糖足顆粒各劑量組的髓鞘面積總和、軸突面積總和差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。糖足顆粒各劑量組間的髓鞘面積總和、軸突面積總和對(duì)比，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

組 別動(dòng)物數(shù)髓鞘面積總和軸突面積總和 正常對(duì)照組10191．42±34．55128．61±9．21 模型對(duì)照組8109．22±53．76??134．57±117．56? 蒸餾水組953．84±14．31??##133．13±22．75?# 糖足顆粒高劑量組854．15±12．64??##△131．45±37．53?#△ 糖足顆粒中劑量組955．46±16．26??##△＊132．55±46．29?#△＊ 糖足顆粒低劑量組854．18±23．26??##△＊▲132．72±21．89?#△＊▲

注：與正常對(duì)照組對(duì)比，*P>0.05，**P<0.05；與模型對(duì)照組對(duì)比，#P>0.05，##P<0.05；與蒸餾水組對(duì)比，△P>0.05；與糖足顆粒高劑量組對(duì)比，＊P>0.05；與糖足顆粒中劑量組對(duì)比，▲P>0.05

2.4 各組大鼠腓腸肌濕重恢復(fù)率對(duì)比

肉眼大體觀：正常對(duì)照組大鼠雙側(cè)腓腸肌肌肉最飽滿，富有光澤與彈性。各手術(shù)組中糖足顆粒劑高劑量組大鼠術(shù)側(cè)腓腸肌肌肉最飽滿，最有光澤，觸之有彈性；糖足顆粒劑中、低劑量組次之；蒸餾水組再次之；模型對(duì)照組最差。糖足顆粒劑3個(gè)劑量組的腓腸肌濕重恢復(fù)率分別與蒸餾水組、模型對(duì)照組對(duì)比，差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。糖足顆粒劑中、低劑量組的腓腸肌濕重恢復(fù)率與高劑量組對(duì)比，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；低劑量與中劑量組對(duì)比，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

組 別動(dòng)物數(shù)腓腸肌濕重恢復(fù)率 正常對(duì)照組1096．80±3．11 模型對(duì)照組830．85±4．63? 蒸餾水組939．56±5．33?# 糖足顆粒高劑量組861．90±4．55?#△ 糖足顆粒中劑量組953．73±8．12?#△＊ 糖足顆粒低劑量組846．90±6．89?#△＊▲

注：與正常對(duì)照組對(duì)比，*P<0.05；與模型對(duì)照組對(duì)比，#P<0.05；與蒸餾水組對(duì)比，△P<0.05；與糖足顆粒高劑量組對(duì)比，＊P<0.05；與糖足顆粒中劑量組對(duì)比，▲P>0.05

2.5 各組大鼠腓腸肌組織學(xué)對(duì)比

光學(xué)顯微鏡下觀察：正常對(duì)照組肌纖維飽滿，排列規(guī)則。模型對(duì)照組的肌纖維直徑較正常對(duì)照組顯著縮短，肌纖維不飽滿，顯著皺縮，排列無(wú)規(guī)則，大多數(shù)細(xì)胞核游離于肌細(xì)胞之外，細(xì)胞間隙顯著增加，肌纖維細(xì)胞整體呈現(xiàn)顯著萎縮變性狀態(tài)。糖足顆粒劑各劑量組肌纖維形態(tài)較規(guī)則，細(xì)胞間隙縮短。糖足顆粒劑高劑量組可見大部分肌細(xì)胞飽滿，細(xì)胞核仍緊貼于肌纖維的周邊，細(xì)胞間隙變小，肌纖維細(xì)胞整體呈現(xiàn)輕度萎縮變性狀態(tài)。糖足顆粒劑低劑量組與模型對(duì)照組對(duì)比，肌纖維直徑稍增大，形態(tài)較飽滿，肌細(xì)胞核丟失不嚴(yán)重，細(xì)胞間隙減小，肌纖維萎縮變性狀態(tài)減輕。糖足顆粒劑中劑量組肌細(xì)胞改變介于糖足顆粒劑高、低劑量組之間。與正常對(duì)照組對(duì)比，5個(gè)手術(shù)組大鼠的腓腸肌肌細(xì)胞直徑減小，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與模型對(duì)照組對(duì)比，糖足顆粒劑各劑量組腓腸肌肌細(xì)胞直徑增大，差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與蒸餾水組對(duì)比，糖足顆粒劑各劑量組肌細(xì)胞直徑增大，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與糖足顆粒劑高劑量組對(duì)比，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與糖足顆粒中劑量組對(duì)比，糖足顆粒低劑量組肌細(xì)胞直徑無(wú)顯著增加，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表4。

組 別動(dòng)物數(shù)直徑/μm 正常對(duì)照組1069．10±1．09 模型對(duì)照組838．01±16．04? 蒸餾水組930．05±3．59? 糖足顆粒高劑量組856．34±12．65?# 糖足顆粒中劑量組950．46±6．26?#△＊ 糖足顆粒低劑量組849．19±8．39?#△＊▲

注：與正常對(duì)照組對(duì)比，*P<0.05；與模型對(duì)照組對(duì)比，#P<0.05；與蒸餾水組對(duì)比，#P<0.05；與糖足顆粒高劑量組對(duì)比，＊P>0.05；與糖足顆粒中劑量組對(duì)比，▲P>0.05

3 討 論

糖足顆粒劑是專門用于治療糖尿病高危足的中藥復(fù)方，由黃芪、當(dāng)歸、雞血藤、乳香、沒(méi)藥、忍冬藤、川芎7味中藥組成，具有溫經(jīng)通絡(luò)、活血化瘀的作用。

在本實(shí)驗(yàn)中，進(jìn)行坐骨神經(jīng)夾傷后，糖尿病大鼠表現(xiàn)出：術(shù)側(cè)足趾蒼白、無(wú)力，少數(shù)出現(xiàn)紅腫、潰瘍的現(xiàn)象，且術(shù)側(cè)小腿三頭肌體積均有不同程度縮?。徊綉B(tài)表現(xiàn)為跛行，坐骨神經(jīng)功能術(shù)后第2天SFI均在-70～-100。腓腸肌組織學(xué)觀察示：肌纖維細(xì)胞整體呈現(xiàn)顯著萎縮變性狀態(tài)。坐骨神經(jīng)組織學(xué)觀察示：神經(jīng)細(xì)胞脫髓鞘，軸突面積增多、形狀不規(guī)則、排列混亂。糖足顆粒劑治療組在進(jìn)行了1個(gè)月的糖足顆粒劑溫敷后，術(shù)側(cè)小腿三頭肌雖肉眼觀察恢復(fù)不明顯，但腓腸肌濕重恢復(fù)率有所升高，糖足顆粒劑各劑量組的恢復(fù)率高于蒸餾水對(duì)照組，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；光鏡觀察肌纖維呈現(xiàn)輕度萎縮變性狀態(tài)，糖足顆粒劑治療組與蒸餾水對(duì)照組對(duì)比，肌細(xì)胞直徑有所增加，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。但是，在坐骨神經(jīng)功能和坐骨神經(jīng)組織學(xué)觀察上，糖足顆粒劑各劑量組的恢復(fù)與對(duì)照組無(wú)明顯差別。也就是說(shuō)，經(jīng)過(guò)1個(gè)月的糖足顆粒劑治療，治療組大鼠的皮膚和腓腸肌有明顯恢復(fù)，而遭到破壞的神經(jīng)則恢復(fù)不明顯。由于實(shí)驗(yàn)條件限制，沒(méi)有進(jìn)行大鼠足部血管形態(tài)觀察。根據(jù)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)者猜測(cè)原因在于：糖足顆粒劑復(fù)方通過(guò)改善大鼠足部血管功能，使肌肉和神經(jīng)內(nèi)因高糖環(huán)境導(dǎo)致的血管形態(tài)改變[11-12]有所恢復(fù)，微血管功能障礙減少，增加肌肉、神經(jīng)血流和含氧水平，營(yíng)養(yǎng)肌細(xì)胞和神經(jīng)纖維細(xì)胞，在一定程度上改善了肌細(xì)胞和神經(jīng)纖維細(xì)胞的功能。

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通信作者：岳仁宋，教授，主任醫(yī)師，成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，四川省成都市金牛區(qū)十二橋路39號(hào)，610072，1580229694@qq.com

*基金項(xiàng)目：四川省干?？蒲姓n題(H2017033)；成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院基金(2016-D-YY-01)