TCF7L2基因多態(tài)性與2型糖尿病相關(guān)性研究

史南平 李 劍 劉佳南

2型糖尿病是臨床上較為常見(jiàn)的內(nèi)分泌疾病之一[1-2]，其發(fā)病率較高，慢性進(jìn)展，致死率及致殘率均較高，其是一種以胰島素抵抗、分泌缺陷為主要特征的多基因，遺傳性疾病[3]。目前研究多集中在第5、6、12號(hào)染色體變異具有一定的相關(guān)性，但關(guān)于某一種基因的相關(guān)性研究報(bào)道則較少，研究也較為微弱。核轉(zhuǎn)錄因子7類(lèi)似物2基因多態(tài)性與2型糖尿病具有一定的關(guān)聯(lián)，目前相關(guān)研究提示，TCF7L2基因微衛(wèi)星DG10S478與國(guó)內(nèi)2型糖尿病發(fā)病具有一定的關(guān)聯(lián)[4]，但具體病理機(jī)制尚不清楚。本研究探討TCF7L2基因多態(tài)性與2型糖尿病相關(guān)性的研究，現(xiàn)匯報(bào)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將我院2017年1月-2018年3月收治的186例2型糖尿病患者作為研究對(duì)象，并選擇同期我院120例健康體檢者作為對(duì)照組。入選標(biāo)準(zhǔn)：①患者均符合2型糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)患[5]；②均簽署研究知情同意書(shū)；無(wú)糖尿病家族病史者；③近4周未服用影響血糖藥物者；④無(wú)免疫性疾病者；⑤無(wú)精神異常者；⑥本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)；⑦臨床資料完整者；排除標(biāo)準(zhǔn)：①糖尿病家族病史者；②合并自身免疫系統(tǒng)疾病者；③未簽署研究檢查同意書(shū)；④精神異常者；⑤近4周服用影響血糖藥物者；⑤臨床資料缺失或失訪者。

1.2 方法

①對(duì)入組研究患者進(jìn)行詳細(xì)的體格檢查及病史采集，包括患者性別、年齡、病程、身高、血壓、腰圍等。②早晨對(duì)空腹患者靜脈采血3～5ml測(cè)定患者血糖水平、胰島素水平，并采集和測(cè)定膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)指數(shù)[6]；③TCF7L2基因微衛(wèi)星多態(tài)性檢查：對(duì)入選患者靜脈采集外周血，提取DNA水平，具體引物如下：上游5’：TGGTGAAAACCCCAAATCG；下游3’：GGGAGACTGCTCAACTTATC；后對(duì)DNA樣品進(jìn)行PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物長(zhǎng)度為135bp。采用ABI366測(cè)序儀器對(duì)擴(kuò)增DNA片段進(jìn)行具體的測(cè)序，并對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。④采用穩(wěn)態(tài)胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)評(píng)價(jià)青少年胰島素抵抗情況，其值為空腹血糖x空腹胰島素/22.5[7]；胰島B細(xì)胞功能指數(shù)(HBCI)評(píng)價(jià)青少年胰島素分泌情況,其值為空腹胰島素x20/(空腹血糖-3.5)[7]。

1.4 觀察項(xiàng)目

記錄兩組患者進(jìn)行測(cè)序分型，后根據(jù)穩(wěn)態(tài)模型評(píng)估患者胰島素β細(xì)胞及胰島素抵抗情況，并對(duì)2型糖尿病患者影響因素進(jìn)行分析研究。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 兩組患者一般臨床資料及血脂、胰島素功能的比較 2型糖尿病患者平均年齡高于對(duì)照組(P<0.05)；對(duì)兩組患者年齡、性別校正后，2型糖尿病患者FPG、TG、TC、LDL、Lg HOMA-IR、腰圍、收縮壓顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，其HDL、IgBMI、LgHBCI水平低于對(duì)照組(P<0.05)，兩組患者在臀圍方面無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；見(jiàn)表1。

組別例數(shù)(男/女)年齡腰圍(cm)臀圍(cm)收縮壓(kpa)IgBMIFPG(mmol/L)TG(mmol/L)TC(mmol/L)LDL(mmol/L)HDL(mmol/L)LgHOMA-IRLgHBCI2型糖尿病98/8851.73±7.371)88.48±8.471)96.37±6.7417.47±3.251)4.21±0.471)8.46±0.851)2.13±0.461)4.65±0.651)2.98±0.461)1.21±0.231)0.57±0.121)1.57±0.461)對(duì)照組63/5745.43±5.2778.36±6.3796.53±6.7814.26±2.864.98±0.565.23±0.641.23±0.344.21±0.542.34±0.321.48±0.320.13±0.111.98±0.52t8.1211.200.248.8312.9735.6118.436.1710.818.5832.347.23P<0.05<0.05>0.05<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05

注：與對(duì)照組比較，1)P<0.05。

2.3 零等位基因、非零等位基因在2型糖尿病患者間的比較 TCF7L2基因微衛(wèi)星DGl0S478在糖尿病零等位基因和非零等位基因結(jié)果示：零等位基因LDL水平低于非零等位基因，而其Lg HBCI高于非零等位基因(P<0.05)，兩組患者在其他項(xiàng)目間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；見(jiàn)表2。

組別例數(shù)年齡腰圍(cm)臀圍(cm)收縮壓(kpa)IgBMIFPG(mmol/L)TG(mmol/L)TC(mmol/L)LDL(mmol/L)HDL(mmol/L)Lg HOMA-IRLg HBCI零等位基因16750.67±7.3286.38±8.5795.33±6.7516.53±3.534.01±0.537.53±0.561.89±0.634.36±0.652.25±0.571)1.26±0.260.47±0.131.67±0.541)非零等位基因1951.63±7.2785.56±8.6395.56±6.7316.56±3.864.08±0.567.43±0.651.94±0.744.39±0.592.64±0.561.28±0.320.46±0.131.41±0.45 t0.540.390.140.030.540.730.320.192.830.310.322.02 P>0.05>0.05>0.05>0.05>0.05>0.05>0.05>0.05<0.05>0.05>0.05<0.05

注：與非零等位基因比較，1)P<0.05

3 討論

糖尿病是臨床上威脅人類(lèi)健康較為多見(jiàn)的慢性內(nèi)分泌疾病之一，其發(fā)病率較高，嚴(yán)重影響患者生存質(zhì)量及健康。目前關(guān)于糖尿病具體發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚，其是因遺傳、環(huán)境等多因素所致的疾病，其并非單一性疾病[8]。目前臨床上關(guān)于氧化應(yīng)激、慢性炎癥、遺傳等因素研究得到廣泛的研究，關(guān)于2型糖尿病基因遺傳方面的研究更為重要。TCF7L2是目前發(fā)現(xiàn)的2型糖尿病患者易感基因中相關(guān)性最強(qiáng)的的，其位于人類(lèi)10q25.3染色體上[9]，可編碼619個(gè)氨基酸，該基因功能與Wnt信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)，但其在糖尿病發(fā)病機(jī)制尚不完全闡釋清楚[10]。

本研究觀察TCF7L2基因多態(tài)性與2型糖尿病相關(guān)性的研究。其結(jié)果顯示：2型糖尿病FPG、TG、TC、LDL、Lg HOMA-IR、腰圍、收縮壓顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，其HDL、IgBMI、LgHBCI水平低于對(duì)照組(P<0.05)；發(fā)現(xiàn)6種等位基因、7種基因型， DGl0S478的非132等位基因在2型糖尿病組明顯高于對(duì)照組，分別為5.5%和2.4%；其相對(duì)危險(xiǎn)度為1.954；X/0基因型在2型糖尿病為9.7%，高于對(duì)照組，基因型相對(duì)危險(xiǎn)度為1.846；等位基因x的人群特異危險(xiǎn)度為1.748%；零等位基因LDL水平低于非零等位基因，而其Lg HBCI高于非零等位基因(P<0.05)；因此，TCF7L2基因微衛(wèi)星DGl0S478可能與2型糖尿病發(fā)病相關(guān)，可能是通過(guò)降低胰島素β細(xì)胞。筆者研究發(fā)現(xiàn)，2型糖尿病患者、收縮壓血脂水平高于對(duì)照組，進(jìn)而可提示2型糖尿病患者多合并高血壓、血脂異常等，在臨床上也與糖尿病臨床特征相符合。此外研究也發(fā)現(xiàn)肥胖患者血脂異常也存在胰島素抵抗、胰島素高水平，這可能與胰島素抵抗相關(guān)[11-12]。同時(shí)TC、TG、LDL等血脂長(zhǎng)期異常，可引起高胰島素水平，β細(xì)胞分泌功能持續(xù)亢進(jìn)，最終β細(xì)胞功能降低或衰竭，胰島素分泌不足，血糖升高。本研究結(jié)果也發(fā)現(xiàn)血脂異常、胰島素抵抗、腰圍、BMI是在一定程度上也參與糖尿病的發(fā)生，腹型肥胖者是糖耐量降低或惡化的關(guān)鍵病因，內(nèi)臟脂肪型形成的游離脂肪酸肝臟靜脈，導(dǎo)致高胰島素癥[13]，長(zhǎng)期發(fā)展形成高血糖。同時(shí)筆者研究也發(fā)現(xiàn)Lg HOMA-IR高于對(duì)照組，LgHBCI水平低于對(duì)照組，繼而說(shuō)明胰島素抵抗、β細(xì)胞功能減退是2型糖尿病發(fā)病的重要環(huán)節(jié)。目前相關(guān)學(xué)者研究結(jié)果顯示[14]，TCF7L2基因變異與糖尿病胰島素分泌功能減弱相關(guān)，其可通過(guò)Wnt信號(hào)途徑調(diào)節(jié)胰升糖樣肽分泌，胰升糖樣肽即可促進(jìn)胰島素分泌，還可維持胰島素β細(xì)胞分泌，并可抑制其凋亡[15]，若其合成減少則可引起血糖水平的升高。筆者研究發(fā)現(xiàn)，2型糖尿病患者中零等位基因LgHBCI水平高于非零等位基因，而胰島素抵抗功能無(wú)明顯差異，進(jìn)而提示該基因變異可能通過(guò)胰島素分泌而增加2型糖尿病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，而并非通過(guò)胰島素抵抗而引起血糖異常。

綜上所述，TCF7L2基因微衛(wèi)星DGl0S478可能與2型糖尿病發(fā)病相關(guān)，可能是通過(guò)降低胰島素β細(xì)胞。

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