25?羥維生素D3與IL?10在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中的臨床應(yīng)用研究

張韶斌 陳斯亮 符青松 羅莞超 黃望香

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythemato?sus，SLE）是一種累及多臟器的自身免疫性炎癥性結(jié)締組織病，好發(fā)于青年女性，其發(fā)病與免疫異常、內(nèi)分泌、遺傳、感染和一些環(huán)境因素有關(guān)。雖然SLE發(fā)病機制尚未完全闡明，但普遍認為其是一種免疫性疾病，其病理損傷主要由抗體介導的免疫性炎癥反應(yīng)引起，以B淋巴細胞過度增殖活化、產(chǎn)生多種自身抗體為突出特點［1］。維生素D是一種固醇類衍生物，目前認為是一種類固醇激素，其主要作用是參與鈣磷調(diào)節(jié)，但是其免疫作用日趨受到研究者的重視。近年來有許多研究者對維生素D的免疫作用進行了深入的研究，發(fā)現(xiàn)其有明顯的免疫調(diào)節(jié)作用［2?3］。SLE患者維生素D的代謝狀況在國外逐漸受到關(guān)注，世界不同地區(qū)陸續(xù)有SLE患者存在維生素D缺乏的報道［4?5］。最近的研究證實維生素D在淋巴細胞、巨噬細胞和自然殺傷細胞的調(diào)節(jié)、分化以及影響抗炎細胞因子的表達等方面發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)的作用［6?7］。IL?10 主要由Th2細胞產(chǎn)生，具有抑制細胞免疫作用，同時通過誘導B淋巴細胞增殖分化介導體液免疫，是SLE 的易感因子之一［8?9］。本研究通過檢測 SLE 患者血清的25?羥維生素D3和IL?10水平，探討其在SLE的臨床應(yīng)用。

1 材料與方法

1.1 一般資料

病例選取2016年1月至2017年6月來本院就診的SLE患者為實驗組，共計182例，患者均符合系統(tǒng)性紅斑狼瘡國際臨床協(xié)作組（Systemic Lupus International Collaborating Clinics，SLICC）在美國風濕病學會（American College of Rheumatology，ACR）2009年費城年會提出新的分類診斷標準［10］，其中男的18例，女的164例，年齡17～56歲，平均（32±12.3）歲。按照SLE疾病活動性指數(shù)（SLE dis?ease activity index，SLEDAI）評分標準將SLE實驗組分為SLE活動組和緩解組，SLE活動組SLEDAI評分大于或等于5分，共100例，SLE緩解組SLE?DAI評分小于5分，共計82例。同時收集同期來本院體檢的性別和年齡相匹配的非SLE患者作為對照組，共計150例，男的15例，女的135例，年齡15～60歲，平均（33±11.8）歲。對照組的性別與年齡與SLE實驗組比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。排除近3個月服用鈣劑及維生素D治療、其他自身免疫性疾病者或近期合并感染者。

1.2 檢測方法

患者入院后24 h內(nèi)采集靜脈非抗凝血各2 mL，離心分離血清。25?羥維生素D3和IL?10檢測試劑盒購自英國IDS公司，采用ELISA方法進行檢測，實驗步驟嚴格按照試劑盒說明書操作。

1.3 統(tǒng)計學方法

運用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，資料符合正態(tài)分布，故采用均數(shù)±標準差（±s）表示進行統(tǒng)計描述，兩組間的比較采用t檢驗，采用Pearson線性相關(guān)分析SLEDAI、血清25?羥維生素D3和IL?10水平指標間的相關(guān)性，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 SLE實驗組與對照組血清25?羥維生素D3、IL?10水平的測定結(jié)果

SLE實驗組血清25?羥維生素D3水平明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。SLE實驗組血清IL?10水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表1。

2.2 SLE活動組、緩解組和對照組血清25?羥維生素D3、IL?10水平比較

SLE活動組血清25?羥維生素D3水平明顯低于緩解組和對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。SLE活動組血清IL?10水平明顯高于緩解組和對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表2。

表1 SLE實驗組與對照組血清25?羥維生素D3和IL?10水平比較Table 1 The comparison of serum 25?hydroxyl vitamin D3 and IL?10 levels between SLE group and control group

表2 SLE活動組、緩解組和對照組血清25?羥維生素D3和IL?10水平比較Table 2 Comparison of serum 25?hydroxylvitamin D3 and IL?10 levels among SLE activity group，SLE remission group and control group

2.3 SLE活動組、緩解組和對照組25?羥維生素D3不足及缺乏情況比較

參照 Hamza等［4］的標準，25?羥維生素 D3水平30 ng/mL以上定義為維生素D充足，10～30 ng/mL定義為維生素D不足，低于10 ng/mL定義為維生素D缺乏，對各組進行統(tǒng)計分析。SLE活動組與緩解組血清25?羥維生素D3水平充足率分別為3.00%和10.98%，明顯低于對照組76.67%，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；SLE活動組與緩解組血清25?羥維生素D3水平不足率分別為56.00%和74.39%，明顯高于對照組21.33%，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；SLE活動組與緩解組血清25?羥維生素D3水平缺乏率分別為41.00%和14.63%，明顯高于對照組2.00%，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表3。

2.4 SLEDAI、25?羥維生素 D3 和 IL?10 水平相關(guān)性

采用Pearson線性相關(guān)分析SLEDAI、血清25?羥維生素D3和IL?10水平指標間的相關(guān)性。SLE患者血清25?羥維生素D3水平與SLEDAI呈負相關(guān)，r=-0.478，P＜0.05；血清 IL?10 水平與 SLE?DAI呈正相關(guān)r=0.638，P＜0.05；血清 25?羥維生素D3水平與IL?10水平呈負相關(guān)，r=-0.354，P＜0.05。

表3 SLE活動組、緩解組和對照組血清25?羥維生素D3不足及缺乏情況［n（%）］Table 3 Deficiency and lack of serum 25?hydroxyl vitamin D3 among SLE activity group，SLE remission group and control group［n（%）］

3 討論

SLE是一種累及多臟器的自身免疫性炎癥性結(jié)締組織病，好發(fā)于青年女性，其發(fā)病與免疫異常、內(nèi)分泌、遺傳、感染和一些環(huán)境因素有關(guān)。目前SLE發(fā)病機制尚未完全闡明，普遍認為是一種免疫性疾病，病情較復(fù)雜，多呈慢性遷延且難以治愈，病程中活動期與緩解期反復(fù)交替出現(xiàn)［11?12］。臨床表現(xiàn)多樣化，免疫炎癥常導致各臟器損傷，甚至危及生命。漿膜炎是SLE主要病理改變，涉及皮膚、關(guān)節(jié)、腎臟等臟器。臨床治療多采用非固醇類抗炎藥物緩解癥狀，嚴重者使用免疫抑制劑或激素類藥物治療，但毒副作用較大。因此深入研究SLE的發(fā)病機制，早期診斷早期干預(yù)，對該病的防治具有重要意義。

維生素D是一種新發(fā)現(xiàn)的神經(jīng)內(nèi)分泌免疫調(diào)節(jié)激素，通過與維生素D受體結(jié)合，除參與鈣磷代謝外，還具有免疫調(diào)節(jié)作用。近年來維生素D免疫調(diào)節(jié)作用的研究日趨增多，維生素D能影響細胞的增殖、分化，通過調(diào)控多條免疫信號通路對機體的免疫系統(tǒng)和功能發(fā)揮干預(yù)效應(yīng)［13］。25?羥維生素D3是維生素D在血中主要循環(huán)形式，目前臨床多通過檢測血清25?羥維生素D3來反映機體維生素D的水平［14］。研究發(fā)現(xiàn)自身免疫性疾病患者維生素D缺乏比例比正常人群要高［15］，SLE患者維生素D的代謝狀況近年在國外逐漸受到關(guān)注，低維生素D水平對SLE發(fā)生和疾病發(fā)展有影響作用［16］。本研究發(fā)現(xiàn)SLE患者血清25?羥維生素D3水平與正常人相比明顯下降，和周萍等報道一致［17］。對SLE活動組、緩解組與對照組的25?羥維生素D3水平進行統(tǒng)計分析，發(fā)現(xiàn)SLE活動組、緩解組的25?羥維生素D3不足及缺乏的比例比正常人群要高。SLE患者血清25?羥維生素D3水平與SLEDAI呈負相關(guān)，和 Terrier和 Ben?Zvi報道一致［18?19］，提示 25?羥維生素D3水平在 SLE發(fā)病中起著重要作用，與SLE發(fā)病狀態(tài)相關(guān)，可作為判斷SLE疾病嚴重程度的臨床指標。

IL?10是主要由Th2細胞分泌的一種多功能性細胞因子，起免疫抑制作用，主要表現(xiàn)為2個方面：①抑制T細胞的增殖，抑制細胞免疫；②誘導B淋巴細胞增殖分化，介導體液免疫，是SLE的易感因子之一［8?9］。有研究報道 SLE 患者外周血 IL?10 增高，PBMC中IL?10表達水平增高，體外培養(yǎng)的PBMC上清液中IL?10含量亦明顯增高，認為SLE患者的自身抗體的產(chǎn)生與IL?10的過度表達可能有關(guān)［20?21］。本研究發(fā)現(xiàn)SLE 實驗組血清 IL?10 水平與正常人相比明顯升高；無論SLE活動組還是緩解組的IL?10水平明顯高于對照組，與國內(nèi)外報道相一致［20］。通過SLE患者血清IL?10水平與SLEDAI相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)SLE患者血清IL?10水平與SLE?DAI呈正相關(guān)，提示IL?10水平在SLE病中可能發(fā)揮重要作用，并與疾病的活動度相關(guān)。同時對SLE患者血清25?羥維生素D3水平與IL?10水平相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)SLE患者血清25?羥維生素D3水平與IL?10水平呈負相關(guān)。

綜上所述，本研究證實SLE患者普遍存在25?羥維生素D3水平不足或缺乏的問題，血清25?羥維生素D3水平在SLE發(fā)病中起著重要作用，與SLE發(fā)病狀態(tài)相關(guān)。SLE患者血清IL?10水平與正常人相比明顯升高，與SLE疾病活動度相關(guān)，在SLE發(fā)病中可能發(fā)揮重要作用。25?羥維生素D3水平和IL?10水平在SLE發(fā)病中起著重要作用，與SLE發(fā)病狀態(tài)相關(guān)，可作為臨床指標用于SLE的診斷、疾病嚴重程度的判斷、療效的觀察等，具有重要臨床應(yīng)用價值。但是SLE患者血清25?羥維生素D3水平與IL?10水平呈負相關(guān)，血清25?羥維生素D3與IL?10在SLE患者中的相互作用機制有待進一步的研究。

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