8個(gè)不同產(chǎn)地絞股藍(lán)多糖含量的測(cè)定

吳秀麗 馬澤剛 鐘輝云

摘 要 為比較8個(gè)不同產(chǎn)地絞股藍(lán)中多糖含量的差異，采用水加熱回流提取法提取絞股藍(lán)中多糖，采用蒽酮-硫酸比色法測(cè)定不同產(chǎn)地絞股藍(lán)中多糖含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同產(chǎn)地的絞股藍(lán)中多糖含量分別為7.85%、6.18%、7.47%、6.31%、4.84%、6.25%、6.04%、3.87%。本試驗(yàn)建立的絞股藍(lán)中多糖含量測(cè)定方法簡(jiǎn)便、穩(wěn)定、可行，不同產(chǎn)地絞股藍(lán)中多糖含量存在差異，該結(jié)果為今后絞股藍(lán)的開發(fā)利用和深入研究提供一定的參考。

關(guān)鍵詞 絞股藍(lán)；多糖；含量測(cè)定；不同產(chǎn)地

中圖分類號(hào)：R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2018.09.055

絞股藍(lán)[Gynostemma pentaphyllum（Thunb.） Makino]系葫蘆科（Cucurbitaceae）絞股藍(lán)屬（Gynostemma）多年生草質(zhì)藤本植物[1]。《中藥大辭典》名七葉膽，別名小苦藥、遍地生根、五葉參，日本名甘茶蔓等[2-4]。該屬植物基源復(fù)雜、品種繁多，我國(guó)有14種和3變種[5]，廣泛分布于陜西、四川、湖北、福建、云南等地。絞股藍(lán)中含有皂苷、多糖、黃酮類等化合物及鐵、鋅、銅、錳、硒等20多種微量元素[6]，有“南方人參”“第二人參”的美譽(yù)[7-9]，其中絞股藍(lán)皂苷是絞股藍(lán)主要的藥效成分[10-11]，國(guó)內(nèi)外對(duì)其研究較多。目前對(duì)絞股藍(lán)多糖的研究相對(duì)較少，但有研究表明絞股藍(lán)多糖具有抗癌、抗疲勞、抗氧化、抗衰老等顯著作用[12]。本研究采用蒽酮-硫酸法比較了8個(gè)不同產(chǎn)地絞股藍(lán)多糖的含量，以期為絞股藍(lán)今后的開發(fā)利用和深入研究提供一定的參考。

1 儀器與材料

1.1 儀器

7200型可見分光光度計(jì)（尤尼科儀器有限公司）。

1.2 材料

8種不同產(chǎn)地的絞股藍(lán)購(gòu)自于成都藥材市場(chǎng)，經(jīng)四川衛(wèi)生康復(fù)職業(yè)學(xué)院副主任藥師鐘輝云鑒定為葫蘆科絞股藍(lán)屬植物絞股藍(lán)；所用試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純，水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 對(duì)照品溶液的制備

準(zhǔn)確稱取葡萄糖對(duì)照品22.5 mg、12.5 mg、8.3 mg、6.2 mg、3.1 mg加水定容至50 mL。

2.2 供試品溶液的配制

分別取1 g不同產(chǎn)地絞股藍(lán)干燥粗粉，加10 mL 95%乙醇，80 ℃條件下回流提取2次，每次2 h，過(guò)濾。藥渣用10 mL水90 ℃回流提取2次，每次2 h，過(guò)濾，濾液定容至25 mL，得供試品溶液。

2.3 顯色劑配制

取硫酸190 mL，緩慢加入含有約50 mL水的250 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。準(zhǔn)確稱取蒽酮50 mg置于50 mL容量瓶中，逐漸加入上述硫酸溶液至刻度，搖勻即得。

2.4 線性關(guān)系的考察

分別準(zhǔn)確量取1 mL對(duì)照品溶液，加入 5 m L顯色劑，同法操作為空白對(duì)照，然后沸水浴，10 min后冷卻至室溫，在625 nm處測(cè)吸光度[13]。以吸光度為縱坐標(biāo)，葡萄糖的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程Y=

2 278.3X+0.407 4，R2=0.999 1，線性范圍62～450 μg/mL。

2.5 精密度試驗(yàn)

準(zhǔn)確量取同一對(duì)照品溶液，依2.4項(xiàng)下方法操作，連續(xù)測(cè)定5次，對(duì)照品吸光度RSD為0.53%。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

準(zhǔn)確量取同一供試品溶液，按2.4項(xiàng)下方法操作，分別于0 h、1 h、2 h、3 h、4 h、5 h測(cè)定吸光度，樣品吸光度RSD為0.82%，表明供試品溶液在5 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn)

準(zhǔn)確量取同一供試品溶液6份，依2.4項(xiàng)下方法操作，在相同條件下測(cè)定并計(jì)算多糖的含量，結(jié)果RSD為0.75%。

2.8 回收率試驗(yàn)

取63 mg葡萄糖加入1 g云南絞股藍(lán)中，按2.2項(xiàng)操作，平行6份。依2.4項(xiàng)下方法操作，樣品吸光度RSD為0.63%。

2.9 多糖的含量測(cè)定

按照2.2項(xiàng)下制備供試品溶液，分別準(zhǔn)確量取1 mL，按2.4項(xiàng)下方法測(cè)定吸光度，由回歸方程計(jì)算多糖含量，不同產(chǎn)地絞股藍(lán)中多糖的含量見表1。

由表1可見，多糖由多至少依次為陜西、內(nèi)蒙古、云南、江西、四川、廣東、湖北、福建。

3 討論

多糖是絞股藍(lán)藥理活性的有效成分，多糖的開發(fā)利用具有廣闊的市場(chǎng)前景，選擇多糖含量高的絞股藍(lán)品種可提高絞股藍(lán)的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。采用水加熱回流提取法對(duì)絞股藍(lán)中多糖進(jìn)行提取，采用蒽酮-硫酸比色法對(duì)不同產(chǎn)地絞股藍(lán)中多糖含量進(jìn)行測(cè)定，不同產(chǎn)地絞股藍(lán)總多糖含量為：陜西>內(nèi)蒙古>云南>江西>四川>廣東>湖北>福建。不同產(chǎn)地的絞股藍(lán)多糖含量存在一定的差異，可能是由于生長(zhǎng)環(huán)境的不同造成的，比較8個(gè)不同產(chǎn)地絞股藍(lán)多糖含量，對(duì)今后絞股藍(lán)的開發(fā)利用和深入研究有一定的參考意義。

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（責(zé)任編輯：趙中正）