氯化銨糖漿劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)再評(píng)價(jià)和提高

嚴(yán) 佳 ，陳 丹

（1.福建中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，福建 福州 350122；2.福州總醫(yī)院，福建 福州 350025）

氯化銨糖漿劑屬福州總醫(yī)院院內(nèi)制劑，具有祛痰、輔助利尿的作用，臨床上用于祛痰、利尿、代謝性堿中毒或酸化尿液［1］，使用方便，價(jià)格低廉，療效穩(wěn)定，毒副作用小。氯化銨糖漿劑處方由氯化銨、苯甲酸鈉、單糖漿等組成，原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)已有十多年沒有修訂，在檢測項(xiàng)目及分析技術(shù)等方面已跟不上當(dāng)前國家、軍隊(duì)對(duì)藥品安全監(jiān)管的要求［2］。依據(jù)《中華人民共和國藥典（四部）》［3］202015 年版規(guī)定，要求糖漿劑“一般應(yīng)檢查相對(duì)密度、pH值等”；同時(shí)，對(duì)糖漿劑中防腐劑苯甲酸及其鹽類的含量亦有限制，規(guī)定苯甲酸的用量不得超過0.3%（其鉀鹽、鈉鹽的用量分別按酸計(jì)）［3］。而氯化銨糖漿劑處方中添加0.3%苯甲酸鈉已為最大限度值，有必要對(duì)苯甲酸鈉的含量進(jìn)行檢測。因此，本文對(duì)氯化銨糖漿劑原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行提高研究，增加相對(duì)密度、pH值等檢查項(xiàng)目，建立HPLC法控制苯甲酸含量，推動(dòng)制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的再評(píng)價(jià)和提高。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 1200型高效液相色譜儀（美國Agilent公司）；AR-124CN型分析天平［奧豪斯儀器（上海）有限公司］；ORION-410A酸度計(jì)（上海羅素科技有限公司）。

1.2 試藥 苯甲酸鈉對(duì)照品（中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)：100433-200301）；氯化銨糖漿劑（福州總醫(yī)院藥學(xué)科制劑室，批號(hào)：20130813、20130814、20130815），單糖漿（廣東邦民制藥廠有限公司，批號(hào)：130306），甲醇為色譜純，醋酸銨等其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 增加pH值檢查項(xiàng) 取三批氯化銨糖漿劑供試品各20 mL于25 mL的燒杯中，照《中華人民共和國藥典（四部）》［3］772015 年版通則 0631 pH 值測定法檢測。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：三批供試品的pH值分別為4.41、4.52、4.44，根據(jù)此 pH值測量結(jié)果，暫設(shè)定其pH值限定范圍為4.0～6.0。

2.2 增加相對(duì)密度檢查項(xiàng) 依據(jù)《中華人民共和國藥典（四部）》［3］73規(guī)定，糖漿劑中含蔗糖量應(yīng)不低于45%（g／mL）。氯化銨糖漿劑含蔗糖量約為60%，實(shí)驗(yàn)取自配的氯化銨糖漿劑、60%蔗糖、45%蔗糖各三批依法檢查。取潔凈、干燥并精密稱定重量的比重瓶，裝滿供試品后，裝上溫度計(jì)，置20℃的水浴中放置若干分鐘，使內(nèi)容物的溫度達(dá)到20℃，用濾紙除去溢出側(cè)管的液體，立即蓋上罩。然后將比重瓶自水浴中取出，再用濾紙將比重瓶的外面插凈，精密稱定，減去比重瓶的重量，求得供試品的重量后，將供試品傾去，洗凈比重瓶，裝滿新沸過的冷水，再照上法測得同一溫度時(shí)水重量，按公式計(jì)算：

供試品的相對(duì)密度＝供試品重量／水重量

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：三批氯化銨糖漿劑、60%蔗糖、45%蔗糖的相對(duì)密度平均測量結(jié)果分別為1.242、1.152、1.098，以60%蔗糖測得平均值作為本品相對(duì)密度下限，暫設(shè)定其相對(duì)密度不得低于1.152。

2.3 建立苯甲酸鈉的HPLC含量測定方法

2.3.1 色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 色譜柱E-clipse XDB-C18（150 mm×4.6 mm，5 μm，美國安捷倫公司），流動(dòng)相：甲醇∶0.02 mol／L 醋酸銨溶液（10∶90），檢測波長 230 nm，流速 1.0 mL／min，進(jìn)樣量 10 μL，柱溫 30℃，理論塔板數(shù)按苯甲酸鈉峰計(jì)，不得低于5 000。

2.3.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取苯甲酸鈉對(duì)照品約12.0 mg置50 mL量瓶中，加水超聲溶解并稀釋至刻度，作為儲(chǔ)備液。精密量取儲(chǔ)備液5 mL置10 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，制成每1 mL含120 μg 溶液，即得。

2.3.3 供試品溶液的制備 精密量取氯化銨糖漿劑1 mL置25 mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3.4 陰性對(duì)照溶液的制備 按處方量取缺苯甲酸鈉的其余成分及輔料，按氯化銨糖漿劑制備工藝及供試品溶液同法制備陰性對(duì)照溶液，即得。

2.3.5 專屬性試驗(yàn) 分別取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照溶液注入液相色譜儀，測定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：苯甲酸鈉的保留時(shí)間約為3.6 min，其他成分對(duì)苯甲酸鈉的測定無干擾，方法具有專屬性。見圖1。

圖1 氯化銨糖漿劑中苯甲酸鈉測定HPLC色譜圖

2.3.6 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備及線性關(guān)系考察 精密量取苯甲酸鈉儲(chǔ)備液 1.0、2.0、4.0、6.0、7.0、8.0 mL，置10 mL量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。取系列對(duì)照品溶液各10 μL，分別注入液相色譜儀，測定。以對(duì)照品峰面積 A為縱坐標(biāo)，濃度 C（μg／mL）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。計(jì)算回歸方程為A＝2.902×10C＋3.164×10，r＝0.999 9，苯甲酸鈉在 24～192 μg／mL濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.3.7 精密度試驗(yàn) 取濃度為120 μg／mL同一對(duì)照品溶液，在上述色譜條件下，連續(xù)注入液相色譜儀6次，計(jì)算苯甲酸鈉峰面積的RSD為0.12%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：儀器精密度良好。

2.3.8 加樣回收率試驗(yàn) 取已知含量的同一批次的氯化銨糖漿劑，分別精密量取0.1 mL置5 mL量瓶中，精密加入24、30、36 mg苯甲酸鈉對(duì)照品，制備不同濃度的供試品溶液，每一濃度三份，按“供試品溶液的制備”項(xiàng)下操作，在上述色譜條件下進(jìn)行測定。計(jì)算回收率，回收率均在95%～105%，RSD小于2%。見表1。

表1 加樣回收率測定結(jié)果（n＝9）

2.3.9 穩(wěn)定性考察 取供試品溶液，室溫放置，分別在 0、4、8、12、24 h 取樣注入液相色譜儀，計(jì)算峰面積RSD小于0.22%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：樣品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.3.10 檢測限與定量限 精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液，在低濃度處逐步稀釋，取樣注入液相色譜儀，測定，于信噪比為1∶3時(shí)，測得苯甲酸鈉的檢測限為0.09 μg／mL；在信噪比為 1∶10 時(shí)，測得苯甲酸鈉的定量限為 0.36 μg／mL。

2.3.11 重復(fù)性試驗(yàn) 分別取同一批樣品6份，制備供試品溶液，注入液相色譜儀，測定。測得苯甲酸鈉的平均含量為0.28%，RSD為0.15%（n＝6）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：該方法重復(fù)性良好。

2.3.12 樣品測定 取氯化銨糖漿劑三批制備供試品溶液，取供試品溶液10 μL，注入液相色譜儀，在上述色譜條件下測定，計(jì)算苯甲酸鈉含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：三批樣品含苯甲酸鈉含量分別為0.29%（RSD＝0.09%，n＝3）、0.28%（RSD＝0.11%，n＝3）、0.29%（RSD＝0.15%，n＝3）。

2.3.13 某廠家生產(chǎn)的單糖漿中苯甲酸鈉的測定取某廠家生產(chǎn)的單糖漿三批，按照“2.3.12”項(xiàng)下同法測定，計(jì)算該單糖漿中的苯甲酸鈉平均含量為0.1%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：該廠家的單糖漿中有添加一定量的苯甲酸鈉。見圖2。

圖2 單糖漿中苯甲酸鈉的HPLC色譜圖

3 討論

3.1 氯化銨味咸微澀，對(duì)胃黏膜有局部刺激性，制備成糖漿劑能改善其口感，減少刺激性。根據(jù)《中華人民共和國藥典（四部）》［3］20，測定其相對(duì)密度值能控制蔗糖含量。氯化銨糖漿劑約含60%蔗糖，以60%蔗糖為最低下限值，暫設(shè)定其相對(duì)密度為不得低于1.152。實(shí)驗(yàn)建立的苯甲酸鈉HPLC測定方法操作簡便，靈敏度高，在實(shí)驗(yàn)室用不同廠家、不同型號(hào)、不同規(guī)格的色譜柱試驗(yàn)分析，均能達(dá)到滿意的測定結(jié)果。

3.2 實(shí)驗(yàn)過程中曾使用市售的單糖漿來配制氯化銨糖漿劑，在陰性對(duì)照溶液中出現(xiàn)苯甲酸鈉吸收峰，后發(fā)現(xiàn)市售單糖漿本身添加了苯甲酸鈉，經(jīng)測定其含苯甲酸鈉約為0.1%，故會(huì)對(duì)氯化銨糖漿劑中苯甲酸鈉的含量測定結(jié)果產(chǎn)生影響。因此建議生產(chǎn)單位在制備氯化銨糖漿劑前對(duì)市售單糖漿中苯甲酸鈉的含量進(jìn)行檢測，如有檢測到苯甲酸鈉，應(yīng)考慮自配單糖漿或減少制劑中苯甲酸鈉的添加量。否則按常規(guī)劑量添加，會(huì)使苯甲酸鈉含量偏高，不僅影響制劑質(zhì)量，還可能對(duì)人體產(chǎn)生毒性［4-7］，這也說明了在糖漿劑中檢查防腐劑的必要性。另外，單糖漿中是否需加入防腐劑，所加防腐劑的用量與保存時(shí)間存在何種關(guān)系，有待筆者進(jìn)一步研究。

3.3 苯甲酸及其鈉鹽由于價(jià)格低廉及抑菌范圍廣，目前在國內(nèi)仍作為主要防腐劑添加到口服液類藥品、食品中，但過量攝入防腐劑對(duì)人體有一定毒性［8］，故苯甲酸及其鈉鹽的使用頗受爭議，在有些國家已經(jīng)被限制或禁止使用［9］。我國尚未對(duì)口服液類藥品中防腐劑的含量測定方法作出規(guī)定。本實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜法對(duì)氯化銨糖漿劑中的苯甲酸鈉含量進(jìn)行測定，控制制劑中防腐劑使用量，同時(shí)增加pH值、相對(duì)密度等檢測項(xiàng)目，提高了該制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，保證了臨床用藥安全。

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