DNA定量分析檢查在宮頸病變篩查中的應(yīng)用價(jià)值

梁建

[摘要] 目的 探究DNA定量分析檢查于宮頸病變篩查中的應(yīng)用價(jià)值。方法 整群選取該院2014年1月—2016年1月的4 213例患者做DNA倍體檢測(cè)與宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查，其中的138例液基細(xì)胞學(xué)陽(yáng)性與DNA異倍體者做宮頸活檢，總結(jié)DNA倍體檢測(cè)于宮頸疾病篩查中的應(yīng)用價(jià)值。結(jié)果 4 213例患者中，液基細(xì)胞學(xué)的陽(yáng)性檢出率為4.1%（共計(jì)171例），DNA異倍體細(xì)胞檢出率為4.9%（共計(jì)206例），檢出率的對(duì)比提示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；在DNA異倍體細(xì)胞檢出增多的同時(shí)、液基細(xì)胞學(xué)陽(yáng)性檢出率也隨之升高。234例DNA異倍體與液基細(xì)胞檢查陽(yáng)性者中有138例進(jìn)行活檢，少量、中量以及大量DNA倍體異常者檢出率分別是8.7%、48.6%、41.3%；以DNA異倍體出現(xiàn)為活檢標(biāo)準(zhǔn)，宮頸病變敏感性是98.6%。結(jié)論 DNA倍體檢測(cè)具有精準(zhǔn)、快速、客觀的應(yīng)用優(yōu)點(diǎn)，可作為宮頸疾病篩查的的有效工具在臨床做積極推廣。

[關(guān)鍵詞] DNA定量分析；宮頸病變；篩查；應(yīng)用價(jià)值

[中圖分類號(hào)] R4 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2018）01（b）-0027-03

[Abstract] Objective To study the application value of DNA quantitative analysis and examination in the screening of cervical lesions. Methods 4 213 cases of patients in our department from January 2014 to January 2016 were selected as a group for DNA ploid test and TCT examination， and 138 cases of positive liquid based cytology and DNA heteroploid patients were for cervical biopsy， and the application value of DNA ploid in the screening of cervical lesions was summarized. Results Of 4 213 cases， the positive test rate of liquid based cytology was 4.1%（171 cases in total）， and the test rate of DNA heteroploid cells was 4.9% （206 cases in total）， and the difference in the test rate between the two groups was statistically significant（P<0.05）， and with the increase of DNA heteroploid cell test， the positive test rate of liquid based cytology increased， and 234 cases of DNA heteroploid patients and 138 cases of positive liquid based cytology were for biopsy， and the test rates of a small amount， a medium amount， and a large amount of DNA heteroploid patients were respectively 8.7%，48.6%，41.3%， and the sensitivity of cervical lesions was 98.6% taking the DNA heteroploid as the biopsy standards. Conclusion The DNA ploid test is accurate， rapid and objective， which can be actively promoted as an effective screening means of cervical lesions.

[Key words] DNA quantitative analysis； Cervical lesions； Screening； Application value

宮頸癌為婦科普遍可見的一種惡性腫瘤，其發(fā)生率和致死率僅位居乳腺癌之后。宮頸癌會(huì)經(jīng)歷癌前病變、原位癌以及浸潤(rùn)癌這樣一個(gè)漫長(zhǎng)的病變過(guò)程，想要積極落實(shí)宮頸癌的防治，最重要的手段便是篩查與盡早診斷，當(dāng)前臨床上常用來(lái)篩查的方法便是宮頸細(xì)胞學(xué)檢查，但是傳統(tǒng)使用的巴氏涂片染色方法有較高的假陰性率[1]，因此，該次研究選用聯(lián)合全自動(dòng)DNA圖像分析系統(tǒng)、液基薄層制片的手段，以該院2014年1月—2016年1月的4 213例患者為例，將其應(yīng)用到對(duì)宮頸病變的臨床篩查中去，將相關(guān)研究結(jié)果作出論述。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

整群選取該科進(jìn)行婦科普查的患者共計(jì)4 213例，年齡最低22歲、最高70歲，平均年齡（45.7±3.6）歲。

1.2 方法

1.2.1 制片 在陰道窺器的直視條件下，使用宮頸刷采集宮頸脫落的細(xì)胞，并將其放到固定液里做固定和離心處理，拋棄上清液，分別把細(xì)胞懸液制成兩張薄層細(xì)胞學(xué)片，進(jìn)行風(fēng)干處理，風(fēng)干后，用濃度為95%的乙醇作為固定物，兩張涂片分別做Feulgen染色做DNA定量分析，和巴氏染色做細(xì)胞學(xué)檢查。

1.2.2 分析細(xì)胞DNA含量 Feulgen染色涂片使用全自動(dòng)圖像分析系統(tǒng)做細(xì)胞圖像的分析處理，對(duì)受檢的細(xì)胞進(jìn)行分類和計(jì)數(shù)。之后打印出DNA倍體分析直方圖和細(xì)胞點(diǎn)陣分布圖，憑借于此做檢測(cè)報(bào)告。NDA倍體異常細(xì)胞評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[2]：①少量：共計(jì)檢出1～2個(gè)>5C（倍體）非整倍體細(xì)胞（即DNA指數(shù)≥2.5的細(xì)胞）；②中量：共計(jì)檢出3～10個(gè)>5C的非整倍體細(xì)胞；③大量：共計(jì)檢出超過(guò)10個(gè)的>5C非整倍體細(xì)胞。

1.2.3 液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查 對(duì)巴氏染色閱片結(jié)果分成5類：①正常亦或是良性；②未被確定診斷的不典型鱗狀上皮細(xì)胞（ASCUS）、不排除高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）的ASCUS（ASC-H）；③低級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）；④重度鱗狀上皮不典型增生以及原位癌（HSIL）；⑤鱗狀上皮浸潤(rùn)癌。在這5類中，除了第1項(xiàng)代表陰性之外，其它4項(xiàng)皆是代表陽(yáng)性。

1.2.4 組織病理學(xué)檢查 所確定的DNA倍體異常細(xì)胞者、液基檢查陽(yáng)性患者，組織病理學(xué)檢查結(jié)果可明確為：正常良性，宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN1，CIN2，CIN3）和宮頸癌。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

將該次研究所得數(shù)據(jù)輸入SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，進(jìn)行總匯與處理，采用百分率（%）表示計(jì)數(shù)指標(biāo)，行χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患者一般情況概括

4 213例中，液細(xì)胞與（或）DNA異倍體陽(yáng)性檢出共計(jì)234例。其中113例患者無(wú)論是液基細(xì)胞還是DNA異倍體都是陽(yáng)性。液基細(xì)胞學(xué)陽(yáng)性檢出率為4.1%（總計(jì)171例），DNA異倍體細(xì)胞檢出率為4.9%（總計(jì)206例），組間數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.402，P<0.05）。當(dāng)DNA異倍體細(xì)胞檢出增多的同時(shí)，液基細(xì)胞學(xué)檢出陽(yáng)性率也隨之升高，細(xì)胞病變?cè)絹?lái)越嚴(yán)重。見表1。

2.2 DNA異倍體檢測(cè)與組織病理學(xué)檢查結(jié)果的比較

234例患者中活檢例數(shù)為138例，其中少量、中量、大量DNA倍體細(xì)胞異常者檢出率分別是8.7%、48.6%、41.3%。在異常細(xì)胞數(shù)量增多時(shí)，繼而也會(huì)提高宮頸癌前病變的發(fā)生率和宮頸癌的發(fā)生率，見表2。將DNA異倍體出現(xiàn)作為活檢標(biāo)準(zhǔn)，宮頸病變敏感性為98.6%（136/138）。

3 討論

臨床上對(duì)宮頸癌和癌前病變的主要篩查方法便是宮頸細(xì)胞學(xué)檢查，但是就以往常用的巴氏涂片來(lái)說(shuō)，由于會(huì)受到各方面因素的影響，例如標(biāo)本采集、制片和閱片者的水平高低等，都會(huì)容易導(dǎo)致發(fā)生較高的假陰性率[3]。

如果應(yīng)用宮頸細(xì)胞學(xué)描述性診斷診斷報(bào)告系統(tǒng)聯(lián)合液基薄層制片的方式，能夠?qū)崿F(xiàn)于液態(tài)條件基礎(chǔ)上，落實(shí)細(xì)胞的固定處理，能夠去除掉粘液的背景，有利于保證宮頸抹片強(qiáng)有效的可讀性，并提高檢出率、控制假陰性的發(fā)生率[4]。經(jīng)過(guò)該文研究，依照結(jié)果來(lái)看，發(fā)現(xiàn)液基細(xì)胞檢出率在4.1%，若將液基細(xì)胞陽(yáng)性視作活檢的標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)，那么可得到宮頸病變敏感性是98.6%，這和細(xì)胞學(xué)醫(yī)生的實(shí)際臨床操作水平是有很大的相關(guān)性的，而且如果是在大規(guī)模普查的情況下，由于醫(yī)生會(huì)伴有一定程度的眼睛疲勞，所以可能會(huì)發(fā)生誤診、漏診的問(wèn)題[5]。

人們正常的體細(xì)胞是有著較為既定的DNA倍體含量的，也就是二倍體，但是如果說(shuō)由于細(xì)胞會(huì)受到致癌因素的影響，在此前提下染色體基因突變，繼而DNA不僅在含量方面會(huì)發(fā)生變化，而且在信息方面也會(huì)發(fā)生變化，最終造成染色體數(shù)量上和結(jié)構(gòu)上呈現(xiàn)出異常狀態(tài)，異倍體細(xì)胞由此發(fā)生[6]。當(dāng)DNA含量突飛猛進(jìn)時(shí)，細(xì)胞會(huì)隨時(shí)有分裂、增殖的表現(xiàn)，這也從某種程度上能夠表明，可以把細(xì)胞核DNA的變化視作是反映腫瘤增殖能力的一個(gè)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。就這點(diǎn)來(lái)說(shuō)，國(guó)外發(fā)達(dá)國(guó)家在很早便已經(jīng)開始借助DNA倍體檢測(cè)系統(tǒng)來(lái)做對(duì)宮頸癌與癌前病變的檢查了[5]。

以液基薄層制片作為基本，加上計(jì)算機(jī)技術(shù)的應(yīng)用，這便是全自動(dòng)細(xì)胞NDA倍體分析系統(tǒng)，它能快速、準(zhǔn)確的確定細(xì)胞核與DNA的含量，以此來(lái)實(shí)現(xiàn)盡早明確癌變?cè)\斷[7]。結(jié)合該次研究結(jié)果來(lái)看，液基細(xì)胞學(xué)陽(yáng)性檢出率為4.1%（有171例）；DNA異倍體細(xì)胞檢出率為4.9%（有206例）。組間數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這與徐姍等人[8]研究報(bào)道中：液基細(xì)胞學(xué)陽(yáng)性率與DNA異倍體細(xì)胞檢出率分別是8.98%、13.18%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）的這一結(jié)果相符。可見細(xì)胞DNA定量分析是可以減少漏診的。另外，138例活檢患者中，少量、中量、大量DNA倍體細(xì)胞異常者檢出率分別是8.7%、48.6%、41.3%。

綜上所述，DNA倍體檢測(cè)具有精準(zhǔn)、快速、客觀的應(yīng)用優(yōu)點(diǎn)，可作為宮頸復(fù)查的有效工具在臨床做積極推廣。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 甘密密，張錫流.DNA定量分析及TCT技術(shù)診斷宮頸病變的臨床研究[J].實(shí)用婦產(chǎn)科雜志，2014，30（9）：674-677.

[2] 王洪珍，史紅錦，李峰，等.4種人乳頭狀瘤病毒DNA檢測(cè)方法在宮頸病變?cè)\斷中的比較研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2014，23（9）：2329-2331.

[3] 林丹，羅新，蔣學(xué)風(fēng)，等.DNA倍體分析聯(lián)合高危型人乳頭瘤病毒檢測(cè)篩查宮頸病變[J].實(shí)用婦產(chǎn)科雜志，2014，30（7）：531-534.

[4] 張雪梅，覃福寧，孫奇，等.宮頸DNA倍體分析及TCT在宮頸病變?cè)缙诤Y查中的臨床意義[J].重慶醫(yī)學(xué)，2016，45（14）：1974-1976.

[5] 倪亞琴，艾小娥.高危型HPV-DNA檢測(cè)聯(lián)合陰道鏡在宮頸病變篩查中的臨床應(yīng)用價(jià)值分析[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2017， 14（12）：62-65.

[6] 鐘萍萍，顧依群，王軍，等.宮頸癌篩查中DNA定量分析與薄層液基細(xì)胞學(xué)檢查對(duì)比分析[J].中國(guó)基層醫(yī)藥，2014，21（8）：1129-1131.

[7] 李敏，張春梅，周仕嫻，等.TCT 聯(lián)合DNA 定量分析在宮頸病變篩查中的臨床應(yīng)用[J].重慶醫(yī)學(xué)，2015，44（15）：2045-2047.

[8] 徐姍，梅金紅，韓永良，等.宮頸脫落細(xì)胞DNA定量分析與薄層液基細(xì)胞學(xué)檢查在宮頸早期病變篩查中的應(yīng)用比較[J].廣東醫(yī)學(xué)，2013，34（9）：1387-1390.

（收稿日期：2017-10-14）