李云海 陳麗華 張志豪
摘要 本試驗以紫皮石斛試管苗為試驗材料,通過在1/2MS培養(yǎng)基中添加不同濃度的NAA,探索促進紫皮石斛試管苗生根的適宜NAA濃度。結(jié)果表明,在1.0 mg/L NAA的作用下,其組培苗的生根狀況最佳。
關(guān)鍵詞 紫皮石斛;組織培養(yǎng);試管苗;NAA;生根
中圖分類號 S567.239 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739(2018)04-0080-01
石斛屬是蘭科中的最大屬之一,共有1 500多種,廣泛分布于亞洲、歐洲及大洋洲等熱帶及亞熱帶地區(qū)[1],其中的紫皮石斛(Dendrobium devonianum Paxt.)莖呈紫色,其藥用價值僅次于鐵皮石斛[2]。紫皮石斛比鐵皮石斛更容易生長,不需要有鐵皮石斛那樣苛刻的生長條件,其植株高度超過40 cm,多糖含量較高,為鐵皮石斛的60%,所具有的滋陰清熱、益胃生津、潤肺止咳和增強免疫力等保健藥理功效接近鐵皮石斛[3-4]。云南省是我國石斛的主產(chǎn)區(qū)之一,產(chǎn)量占全國的70%以上。但經(jīng)多年采集,野生的鐵皮石斛、紫皮石斛等幾乎滅絕,而市場需求逐年增加,產(chǎn)品供不應(yīng)求。因此,近年解決此供需矛盾的有效途徑即是利用植物組織培養(yǎng)繁殖技術(shù)快速生產(chǎn)繁育紫皮石斛等的試管種苗,擴大石斛人工或半人工種植的生產(chǎn)規(guī)模,以滿足市場需求。本試驗以紫皮石斛的試管苗為試驗材料,通過觀察不同濃度的NAA對試管苗生根情況的影響,篩選出適宜的NAA濃度,為紫皮石斛試管種苗的工廠化快速繁殖提供參考數(shù)據(jù)。
1 材料與方法
選擇經(jīng)過壯苗培養(yǎng)階段、大小較一致的紫皮石斛試管苗,均勻接種到添加不同濃度NAA的1/2MS培養(yǎng)基上。添加NAA的濃度分別為0.2 mg/L(Z1)、0.6 mg/L(Z2)、1.0 mg/L(Z3)、1.4 mg/L(Z4)。每處理接種5瓶,每瓶接種5叢,每叢為3株。于培養(yǎng)室中培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為21~23 ℃,光照強度2 000 lx,光照時間12 h/d。培養(yǎng)至第50天時,測定其根數(shù)、根長和莖粗等生理指標,并進行統(tǒng)計分析[5-6]。
2 結(jié)果與分析
2.1 不同處理試管苗生根數(shù)
不同處理下試管苗植株的生根數(shù)量(含氣生根)統(tǒng)計及單因素方差分析結(jié)果如表1所示。從植株生根數(shù)量這一指標來看,隨著植物生長調(diào)節(jié)劑NAA濃度的升高,紫皮石斛生根數(shù)量先升高后降低。多重比較發(fā)現(xiàn),處理Z1與處理Z2及處理Z3差異極顯著,與處理Z4差異不顯著;處理Z2與處理Z3差異不顯著,與處理Z4差異顯著;處理Z3與處理Z4差異極顯著。即在本試驗中,當NAA濃度為1.0 mg/L時,最適合紫皮石斛試管苗生根。
2.2 不同處理試管苗的根長
不同處理下,對培養(yǎng)瓶內(nèi)試管苗的植株根長進行統(tǒng)計,并利用單因素方差分析得出多重比較結(jié)果。由表2可知,處理Z1與處理Z3差異極顯著,與處理Z2、處理Z4差異不顯著;處理Z2與處理Z3和處理Z4差異均不顯著;處理Z3與處理Z4差異也不顯著。即從植株平均根長這一指標來看,隨著植物生長調(diào)節(jié)劑NAA濃度的升高,紫皮石斛試管苗植株的根長也有所增加,但處理Z2、Z3、Z4三者之間的平均根長差異不顯著。從經(jīng)濟節(jié)約和效率角度而言,處理Z3的NAA濃度仍然是較適宜根生長的濃度。
2.3 不同處理試管苗莖粗
不同處理下試管苗植株莖粗的統(tǒng)計和方差分析結(jié)果如表3所示。處理Z1與處理Z3差異極顯著,與處理Z4差異顯著,與處理Z2差異不顯著;處理Z2與處理Z3差異顯著,與處理Z4差異不顯著;處理Z3與處理Z4差異不顯著。即隨著植物生長調(diào)節(jié)劑NAA濃度的升高,紫皮石斛莖粗長勢情況呈現(xiàn)先快后慢的趨勢。在本次試驗中可以得出,當NAA濃度為1.0 mg/L時,對紫皮石斛試管苗植株莖增粗的效果最好。
3 結(jié)論與討論
本試驗通過控制NAA的濃度,研究其對紫皮石斛試管苗生根誘導培養(yǎng)的影響。通過觀察測量及統(tǒng)計分析所培養(yǎng)試管苗植株的生根數(shù)、根長和莖粗等指標可得出,當NAA濃度為1.0 mg/L時,紫皮石斛試管苗植株的生根數(shù)、根長和莖粗指標都最高。說明當其他生根誘導因素一致時,NAA濃度為
1.0 mg/L時最適合本試驗室紫皮石斛試管苗的生根培養(yǎng)。
本次試驗中,當試管苗培養(yǎng)到一定時間后,葉片呈黃綠色,植株的長勢不太強壯,且根數(shù)太多和根較細弱,是否會對后續(xù)的移栽成活產(chǎn)生較大影響,需要進一步試驗研究進行確定和改進[7]。
4 參考文獻
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[3] 陳曉梅,郭順星.石斛屬化學成分和藥理作用的研究進展[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2001,13(1):70-75.
[4] 林萍,畢志明,徐紅,等.石斛屬植物藥理活性研究進展[J].中草藥,2003,34(11):19-22.
[5] 何俊平,涂小云.不同培養(yǎng)基配方對鐵皮石斛生根培養(yǎng)的影響[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學,2013,41(2):57-59.
[6] 常美花,金亞征,王莉.鐵皮石斛快繁技術(shù)體系研究[J].中草藥,2012,43(7):1412-1417.
[7] 李瑩.鐵皮石斛組培及次生代謝物積累規(guī)律的研究[D].南京:南京林業(yè)大學,2012.