尿液干化學(xué)法檢測(cè)的影響因素及處理方法

阮小娥

尿檢驗(yàn)是臨床上最常用的重要檢測(cè)項(xiàng)目之一，主要用于泌尿系統(tǒng)疾病診斷和治療監(jiān)測(cè)，也用于其他系統(tǒng)疾病診斷，這是因?yàn)槿魏蜗到y(tǒng)疾病的病變影響血液成分時(shí)，均可引起尿成分的變化。尿干化學(xué)法具有操作方便，測(cè)定迅速等優(yōu)點(diǎn)，但其實(shí)在整個(gè)檢測(cè)過(guò)程中，其檢測(cè)結(jié)果易受到諸多因素的影響。在日常工作中我們應(yīng)該掌握這些影響因素及其解決的方法，以便發(fā)揮儀器應(yīng)有的效能，達(dá)到測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確?，F(xiàn)就筆者二十多年的工作經(jīng)驗(yàn)，結(jié)合本科使用的由北京華晟源科技有限公司生產(chǎn)的華晟H-II尿干化學(xué)分析儀來(lái)淺談一下尿液干化學(xué)法檢測(cè)的影響因素及處理方法。

1 干化學(xué)法測(cè)定pH值

根據(jù)酸堿指示劑法測(cè)得，因此標(biāo)本必須新鮮。另外，大量實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證得出室溫20℃是最佳溫度值，pH及其他項(xiàng)目結(jié)果也最接近靶值，因此在進(jìn)行pH測(cè)定時(shí)，實(shí)驗(yàn)室溫度最好保持在20℃上下[1]。

2 干化學(xué)法測(cè)定尿糖

尿糖檢測(cè)的基本原理是基于葡萄糖氧化酶的酶促反應(yīng)，如果尿液中存有比色素還原能力還要強(qiáng)的物質(zhì)，很可能導(dǎo)致尿糖檢測(cè)結(jié)果偏低，而出現(xiàn)所謂的“假陰性”。一般情況下，如果尿液中的L-多巴、水楊酸鹽、氟化鈉或者尿比密等含量過(guò)高，則將使尿糖呈現(xiàn)假陰性結(jié)果；而當(dāng)尿液中的VitC濃度過(guò)大，超過(guò)500 mg/L時(shí)，會(huì)出現(xiàn)“假陰性”；如果尿液標(biāo)本被過(guò)氧化物、強(qiáng)氧化性清潔劑、次氯酸鹽等物質(zhì)污染，則可能出現(xiàn)“假陽(yáng)性”。

3 干化學(xué)法測(cè)定尿比重

不論檢測(cè)尿液的哪一項(xiàng)指標(biāo)，都要求尿液標(biāo)本的新鮮，而且決不能含有強(qiáng)酸、堿物質(zhì)。在使用干化學(xué)法測(cè)定尿液的尿比重時(shí)，如果pH值變化范圍在6.2到7.0之間，那么這一酸堿度及其所引起來(lái)的尿液中蛋白質(zhì)的變化，都會(huì)對(duì)尿比重測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生直接影響，一般情況是蛋白質(zhì)濃度增加相應(yīng)尿比重的結(jié)果也會(huì)增加。

4 干化學(xué)法測(cè)定尿蛋白

尿液中的蛋白質(zhì)含量會(huì)受到多種藥物的影響；如：青霉素藥物影響下可出現(xiàn)假陰性測(cè)定結(jié)果，奎寧、嘧啶等藥物影響下，或者尿液中含有少量的聚乙烯、季銨鹽成份時(shí)，導(dǎo)致尿液的pH＞9.0而呈強(qiáng)堿性，可使測(cè)得結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性。防腐劑、洗滌劑、殺蟲劑的混入，亦可能出現(xiàn)假陽(yáng)性測(cè)定結(jié)果。醫(yī)學(xué)上使用的試帶主要測(cè)定的是尿中的白蛋白，而對(duì)球蛋白的靈敏度較低，一般只有白蛋白總量或者說(shuō)靈敏度的1%～2%；鑒于上述問(wèn)題的存在，對(duì)于那些患有腎病或者需要經(jīng)常進(jìn)行蛋白測(cè)定的患者，就不能使用尿干化學(xué)法，而應(yīng)該使用10%磺基水楊酸法或者加熱乙酸法。

5 干化學(xué)法測(cè)定尿潛血

干化學(xué)法檢測(cè)對(duì)于尿液中的血紅蛋白有極強(qiáng)的敏感性[2]。試紙帶法除與游離血紅蛋白反應(yīng)外，也與完整的紅細(xì)胞反應(yīng)，但在高蛋白、高比密尿液中，RBC不溶解，試紙帶法靈敏度減低。在日常工作經(jīng)常出現(xiàn)的干化學(xué)潛血+++，而同一患者的沉渣鏡檢紅細(xì)胞400倍每視野只有2～4個(gè)，出現(xiàn)這種情況極有可能是尿液中含有肌紅蛋白、對(duì)熱不穩(wěn)定酶、氧化劑，或者標(biāo)本被細(xì)菌感染而變成菌尿等而引起的假陽(yáng)性[3]；如果尿液標(biāo)本中含大量Vit C，確切來(lái)說(shuō)當(dāng)濃度超過(guò)100 mg/L時(shí)，由于競(jìng)爭(zhēng)性抑制反應(yīng)的存在，則可能會(huì)出現(xiàn)假陰性[4]。

6 干化學(xué)法測(cè)定酮體

酮體主要含有四種成份，分別是乙酸、乙酰、丙酮和β-羥丁酸，干化學(xué)法對(duì)前三者有較強(qiáng)的敏感性，但是卻不與β-羥丁酸作用。由于乙酸、乙酰很容易受到溫度影響而受熱分解，丙酮在細(xì)菌大量繁殖情況下則會(huì)消失，因此為保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，尿液標(biāo)本必須要新鮮，否則很可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果出現(xiàn)。

7 干化學(xué)法測(cè)定尿膽紅素、尿膽原

干化學(xué)法檢測(cè)尿液除了要求標(biāo)本新鮮外，還不能受強(qiáng)光照射，而且檢測(cè)必須在2小時(shí)內(nèi)完成，主要目的是避免尿液中的膽紅素變成膽綠素。如果尿液標(biāo)本放置的時(shí)間太長(zhǎng)，尿液中的尿膽原就會(huì)被氧化成尿膽素。此外，尿液中還含少量的源性物質(zhì)，如吲哚、膽色素原和磺胺藥等，它們很可能干擾尿液的顏色，而出現(xiàn)假陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果。

8 干化學(xué)法測(cè)定亞硝酸鹽

亞硝酸鹽測(cè)定通常用來(lái)診斷標(biāo)本是否為菌尿，這也是保持尿液標(biāo)本新鮮的原因所在，首先盛放尿液標(biāo)本的容器必須干燥、清潔，而且采集好標(biāo)本后要立刻送檢，因?yàn)榉胖脮r(shí)間過(guò)長(zhǎng)就無(wú)形中增大了被亞硝酸鹽、偶氮?jiǎng)┑任廴镜目赡苄裕霈F(xiàn)假陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果。如果患者使用了利尿劑，尿中的亞硝酸鹽含量可能會(huì)降低而出現(xiàn)假陰性結(jié)果；如果患者使用了抗生素，尿液中的細(xì)菌會(huì)被抑制，這時(shí)就可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

9 干化學(xué)法測(cè)定白細(xì)胞

由于試紙帶只能與尿液中的粒細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)的酯酶發(fā)生作用，因此干化學(xué)法只能用來(lái)測(cè)定尿液中的粒細(xì)胞。對(duì)于腎移植患者，由于可能存在排異反應(yīng)，尿液中的粒細(xì)胞較少而會(huì)出現(xiàn)陰性結(jié)果，這時(shí)需要結(jié)合尿沉渣鏡檢做出進(jìn)一步診斷[5]。如果尿液中含有少量的Vit C、或者大劑量的先鋒霉素IV、慶大霉素等藥物，或者尿蛋白大于5 g/L時(shí)，也可以出現(xiàn)假陰性。

10 干化學(xué)法測(cè)定Vit C

Vit C會(huì)對(duì)尿液中的膽紅素、血紅蛋白、葡萄糖、亞硝酸鹽等產(chǎn)生嚴(yán)重負(fù)干擾。另外，如果尿液中含有半胺氨酸、硫代硫酸鈉等，Vit C的結(jié)果可能會(huì)偏高。另外，Vit C在堿性尿中是極不穩(wěn)定的，應(yīng)該及時(shí)進(jìn)行測(cè)定[6]。

綜上所述，在整個(gè)檢測(cè)過(guò)程中，從標(biāo)本的采集與處理到試紙帶的使用到顯微鏡鏡檢的復(fù)檢，要注意以下幾點(diǎn)：（1）用潔凈和干燥的容器收集新鮮尿液，在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)完成檢測(cè)[7]；（2）尿液檢測(cè)前要混勻，不然白細(xì)胞放置過(guò)久會(huì)沉淀，就造成與鏡檢法不符；（3）試紙條浸入尿液時(shí)間要適中，過(guò)短反應(yīng)不充分，過(guò)長(zhǎng)會(huì)因?yàn)樵噭┻^(guò)多擴(kuò)散到尿液中而影響檢測(cè)結(jié)果；（4）干化學(xué)法測(cè)定尿液的室溫以20～25℃為最佳。

尿干化學(xué)分析儀具有操作方便、測(cè)定迅速等優(yōu)點(diǎn)。但其檢測(cè)結(jié)果易受主觀因素的影響。在實(shí)踐工作中我們應(yīng)該綜合考慮力爭(zhēng)測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確。此外，檢驗(yàn)人員應(yīng)了解尿干化學(xué)分析結(jié)果與顯微鏡鏡檢結(jié)果的相互關(guān)系，如出現(xiàn)化學(xué)分析結(jié)果與鏡檢結(jié)果不相符，如出現(xiàn)化學(xué)分析潛血陰性，而鏡檢見(jiàn)大量紅細(xì)胞等，這些均應(yīng)視其為可疑結(jié)果，應(yīng)進(jìn)一步查明原因[8]。另外，要注意Vit C的含量會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生重要影響，應(yīng)結(jié)合臨床診斷等確定檢測(cè)結(jié)果的符合性。

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