非洲豬瘟緊急預(yù)防控制技術(shù)需求

趙啟祖，王 琴

(中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究室/國(guó)家(OIE)豬瘟參考實(shí)驗(yàn)室，北京 100081)

非洲豬瘟(African swine fever)是由非洲豬瘟病毒引起家豬和野豬的一種病死率極高的急性出血性傳染病。非洲豬瘟最早發(fā)現(xiàn)于非洲，持續(xù)流行于非洲大陸，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為必須通報(bào)的疫病，我國(guó)將其列為一類動(dòng)物疫病。非洲豬瘟臨床表現(xiàn)與古典豬瘟(Classical swine fever)類似，但病原不同。古典豬瘟在我國(guó)有流行，但2018年前非洲豬瘟對(duì)我國(guó)來(lái)說(shuō)還是一種外來(lái)動(dòng)物疫病。不幸的是，非洲豬瘟還是傳了進(jìn)來(lái)，遼寧、河南、江蘇、浙江、安徽、黑龍江、內(nèi)蒙古、吉林、天津等省份相繼發(fā)現(xiàn)疫情，防控形勢(shì)極為嚴(yán)峻。既然非洲豬瘟這個(gè)“外來(lái)病”進(jìn)來(lái)了，就應(yīng)準(zhǔn)確認(rèn)識(shí)、冷靜應(yīng)對(duì)，盡快消滅“外來(lái)者”，保障我國(guó)養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)穩(wěn)定發(fā)展。

1 病 原

非洲豬瘟病毒是非洲豬瘟病毒科非洲豬瘟病毒屬的唯一成員，是有四層復(fù)雜結(jié)構(gòu)囊膜的雙股DNA病毒，病毒顆粒約200 nm，基因組170～192 kb，中間保守區(qū)約125 kb，兩端為變異區(qū)，基因組約有160個(gè)開放閱讀框(ORF)，編碼50多種結(jié)構(gòu)蛋白，100多種多肽，主要感染單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，在胞漿中復(fù)制。非洲豬瘟病毒主要采用豬原代細(xì)胞，如外周血單核細(xì)胞、肺巨噬細(xì)胞等進(jìn)行分離培養(yǎng)，有些分離株可進(jìn)一步用傳代細(xì)胞培養(yǎng)。該病毒僅有一個(gè)血清型，但可根據(jù)其血細(xì)胞吸附特性，用血細(xì)胞吸附抑制試驗(yàn)(HAI)劃分為8個(gè)血清組。非洲豬瘟病毒衣殼主要組成蛋白p72、病毒結(jié)構(gòu)蛋白p30和p54，以及聚蛋白pp62等已鑒定清楚，并作為血清診斷的靶蛋白，其編碼基因如B646L、E183L、CP204L等也作為核酸檢測(cè)的靶基因。其中編碼p72的B646L基因是非洲豬瘟病毒分子流行病學(xué)研究的目標(biāo)基因。根據(jù)p72 C末端序列可以將非洲豬瘟病毒分離株劃分為24個(gè)基因型，除基因型Ⅰ在歐洲、美洲和加勒比海地區(qū)流行，基因型Ⅱ2007年傳入高加索地區(qū)并擴(kuò)散到東歐外，其他基因型病毒局限于非洲地區(qū)[1]。

2 流行狀況

非洲豬瘟最早記錄可追溯至1921年，該病首先發(fā)現(xiàn)于肯尼亞，歐洲殖民者引入的歐洲種家豬接觸到當(dāng)?shù)胤侵挢i瘟病毒感染的野豬和軟蜱后發(fā)病，表明該病毒早已存在于非洲野豬和軟蜱之中。目前在撒哈拉以南非洲大多數(shù)國(guó)家呈地方性流行。非洲豬的數(shù)量增長(zhǎng)非常緩慢，占世界豬總數(shù)不到2%，主要原因是非洲豬瘟的流行。1957年，非洲豬瘟首次跨出非洲大陸，傳入歐洲葡萄牙，雖得以成功控制，但1960年再次傳入歐洲并進(jìn)一步擴(kuò)散，葡萄牙、西班牙、馬耳他、法國(guó)、比利時(shí)、荷蘭、意大利等國(guó)家都曾受影響。歐洲歷時(shí)30多年，除意大利撒丁島外，通過(guò)區(qū)域化管理和撲殺凈化等措施徹底撲滅了疫情。

非洲豬瘟也漂洋過(guò)海傳播至南美及加勒比海地區(qū)。自20世紀(jì)70年代初古巴(1971,1980)、巴西(1978)、多米尼加(1978)和海地(1979)等國(guó)家相繼暴發(fā)疫情。截至1987年，這些國(guó)家的疫情都得到了徹底撲滅。

2007年以來(lái)，非洲豬瘟流行版圖發(fā)生重大變化，疫情從格魯吉亞波蒂(POTI)港開始向周邊擴(kuò)散蔓延，并在高加索地區(qū)定殖，疫情逐年向外延伸，向西已越過(guò)東歐進(jìn)入歐洲腹地國(guó)家，直接威脅著養(yǎng)豬業(yè)發(fā)達(dá)的西歐各國(guó)；向東傳播至遠(yuǎn)東地區(qū)并傳入我國(guó)，直接威脅著我國(guó)的養(yǎng)豬業(yè)[2-3]。

據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公布的疫情信息，2018年8月3日，遼寧省沈陽(yáng)市沈北新區(qū)某養(yǎng)殖戶確診發(fā)生非洲豬瘟疫情，發(fā)病47頭，死亡47頭。8月16日，河南省鄭州市經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)某食品公司屠宰場(chǎng)從外地調(diào)入一車生豬確診發(fā)生非洲豬瘟疫情，發(fā)病30頭，死亡30頭。8月19日起，江蘇省連云港市海州區(qū)某養(yǎng)殖場(chǎng)確診發(fā)生疫情，發(fā)病615頭，死亡88頭。8月23日，浙江省溫州市樂(lè)清市某養(yǎng)殖小區(qū)確診發(fā)生疫情，發(fā)病430頭，死亡340頭。8月30日，安徽省蕪湖市南陵縣某養(yǎng)殖場(chǎng)確診發(fā)生疫情，發(fā)病185頭，死亡80頭。截至10月16日，非洲豬瘟在我國(guó)已經(jīng)擴(kuò)散至9個(gè)省份23個(gè)地市[4]。

3 預(yù)防控制

非洲豬瘟病毒不感染人，不存在公共衛(wèi)生問(wèn)題，但它是一種可能對(duì)我國(guó)的養(yǎng)豬業(yè)和國(guó)人整體飲食結(jié)構(gòu)產(chǎn)生巨大負(fù)面影響的動(dòng)物傳染病。每位公民都有防止動(dòng)物疫病擴(kuò)散傳播的責(zé)任和義務(wù)，做到可疑疫情必須報(bào)告、不屠宰銷售病死豬及產(chǎn)品、不購(gòu)買或非法帶入染疫豬及豬產(chǎn)品回國(guó)。

非洲豬瘟既沒(méi)有有效疫苗也沒(méi)有治療方法，只能依賴于早期診斷和嚴(yán)格的生物安全措施。預(yù)防控制根據(jù)不同的流行情況采取適宜的措施。對(duì)于無(wú)疫國(guó)家而言，應(yīng)禁止從非洲豬瘟流行國(guó)家進(jìn)口生豬及其產(chǎn)品，嚴(yán)格對(duì)來(lái)自風(fēng)險(xiǎn)區(qū)的航班、輪船、郵包進(jìn)行監(jiān)控。加強(qiáng)港口碼頭的集裝箱及其餐廚垃圾管理，防止疫情傳入。無(wú)疫國(guó)家因突發(fā)新傳入疫情成為疫病暴發(fā)國(guó)家時(shí)，應(yīng)迅速安全地?fù)錃⒉o(wú)害化處理發(fā)病豬、同群豬以及污染物，徹底清潔消毒，劃定疫區(qū)和危險(xiǎn)區(qū)限制動(dòng)物流動(dòng)，進(jìn)行詳實(shí)的流行病學(xué)調(diào)查，追蹤可能的疫源和去向，加強(qiáng)感染區(qū)及周邊的監(jiān)測(cè)。如果不幸非洲豬瘟病毒“滯留”下來(lái)，形成地方性流行，除疫病暴發(fā)應(yīng)急措施外，應(yīng)建立國(guó)家非洲豬瘟撲滅凈化方案，全方位研究非洲豬瘟凈化根除的技術(shù)措施。

非洲豬瘟傳入后，不僅可造成巨大的直接經(jīng)濟(jì)損失，疫情處置和凈化根除工作也會(huì)耗資巨大。國(guó)際經(jīng)驗(yàn)證明，只要措施正確，執(zhí)行得力，非洲豬瘟是可以控制和撲滅的。例如巴西，1978年，由于里約熱內(nèi)盧機(jī)場(chǎng)內(nèi)工作人員收集國(guó)際航班的殘羹喂養(yǎng)自己農(nóng)場(chǎng)的豬只導(dǎo)致非洲豬瘟的出現(xiàn)。1978年4月該農(nóng)場(chǎng)的豬開始死亡，傳播到10余個(gè)州。巴西政府采取一系列有效措施，花費(fèi)了7年時(shí)間，耗資無(wú)數(shù)、損失巨大，終于1984年宣布無(wú)疫。再如西班牙，從1960年起發(fā)生了4次非洲豬瘟大流行，數(shù)百個(gè)規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)被感染，1977年曾緊急宰殺生豬30多萬(wàn)頭，補(bǔ)貼養(yǎng)殖戶700多萬(wàn)美元，此后3年又緊急宰豬60多萬(wàn)頭。西班牙飽受非洲豬瘟折磨，始終難以根除。1985年，西班牙轉(zhuǎn)換思路，實(shí)施“非洲豬瘟根除計(jì)劃”，1995年，西班牙政府對(duì)外宣布“非洲豬瘟根除計(jì)劃”完成，前后共計(jì)花費(fèi)了10年之久[5-7]。

建立科學(xué)、適宜、合理、可實(shí)施、經(jīng)濟(jì)、高效的非洲豬瘟控制撲滅技術(shù)方案，非洲豬瘟還是可防可控的。應(yīng)按照《非洲豬瘟防治技術(shù)規(guī)范(試行)》和《非洲豬瘟疫情應(yīng)急預(yù)案》要求對(duì)疫點(diǎn)和疫區(qū)采取封鎖、撲殺、無(wú)害化處理、清洗消毒等處置措施。禁止所有生豬等易感動(dòng)物和動(dòng)物產(chǎn)品進(jìn)入或流出封鎖區(qū)。對(duì)疫區(qū)周圍及有流行病等關(guān)聯(lián)的地區(qū)徹底排查。

4 防控技術(shù)需求

非洲豬瘟屬于外來(lái)動(dòng)物傳染病，雖然我國(guó)已經(jīng)建立了一系列應(yīng)急處理預(yù)案和處理技術(shù)規(guī)范，且進(jìn)行了模擬演練，但這些技術(shù)措施缺乏實(shí)戰(zhàn)檢驗(yàn)，需要在實(shí)際實(shí)施過(guò)程中不斷完善。而且這些防控技術(shù)、檢測(cè)技術(shù)、病毒生物學(xué)特性、病毒傳播流行模式等的研究都是建立在無(wú)活病毒基礎(chǔ)之上的。為了防控重大動(dòng)物疫病，目前我國(guó)已建設(shè)并運(yùn)行了生物安全BSL-3實(shí)驗(yàn)室，完全具備實(shí)驗(yàn)安全條件，可根據(jù)國(guó)內(nèi)外疫情情況，適時(shí)啟動(dòng)應(yīng)急預(yù)防控制技術(shù)研究和完善技術(shù)支持，為有效控制和撲滅非洲豬瘟疫情提供堅(jiān)實(shí)的技術(shù)支撐。

4.1 診斷技術(shù) 非洲豬瘟除了與古典豬瘟臨床表現(xiàn)極為相似外，也與其他多種疫病例如高致病性豬藍(lán)耳病(PRRS)、豬丹毒、沙門氏菌、偽狂犬、巴氏桿菌以及其他敗血癥狀疫病需要進(jìn)行鑒別診斷。及時(shí)準(zhǔn)確的診斷對(duì)疫情控制極為重要：臨床診斷的目的不同，如臨床病例的確診、流行病學(xué)排查、屠宰場(chǎng)檢驗(yàn)等等，或診斷檢測(cè)樣品不同，如死亡病豬組織樣品的檢測(cè)，豬肉(冷凍肉和鮮肉)及其產(chǎn)品的檢測(cè)，豬飼料、填料、糞便的檢測(cè)，環(huán)境樣品包括運(yùn)輸車輛、污染水源等的檢測(cè)等，都需要建立敏感、特異、方便和快速的檢測(cè)方法。目前病原學(xué)檢測(cè)方法基于p72編碼基因B464L基因1941bp建立的普通PCR方法和熒光PCR方法是使用最廣的診斷檢測(cè)技術(shù)。國(guó)內(nèi)急需深入開展診斷技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化研究，針對(duì)不同檢測(cè)樣品如肉品、環(huán)境、飼料等的快速、特異、敏感的檢測(cè)方法。同時(shí)也急需多種疫病同時(shí)檢測(cè)的檢測(cè)技術(shù)方法。

4.2 病原學(xué)特性 針對(duì)國(guó)內(nèi)分離病毒株，開展致病性、傳播能力、繁殖特性、環(huán)境抵抗力等基本生物學(xué)特性的研究，了解病毒對(duì)不同年齡，品種豬的致病性，病毒最小感染計(jì)量，感染途徑，病毒在機(jī)體內(nèi)分布，病毒在不同組織、環(huán)境、介質(zhì)中的存活能力等，只有充分認(rèn)識(shí)病毒的一些基本特性，才能制定切實(shí)有效的防控措施。

4.3 流行病學(xué) 流行病學(xué)研究和綜合防控技術(shù)研究關(guān)系到國(guó)家防控政策的制定與效果評(píng)估，針對(duì)我國(guó)養(yǎng)殖模式、動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品流通的方式方法，研究其與非洲豬瘟的流行關(guān)系。建立高效合理的流行病學(xué)調(diào)查方法和評(píng)估技術(shù)。建立合理有效的無(wú)害化處理技術(shù)方法和程序。建立合理有效的環(huán)境，車輛，圈舍等的消毒標(biāo)準(zhǔn)化程序等。

4.4 野豬與非洲豬瘟的關(guān)系研究 逐步開展我國(guó)野豬的生態(tài)學(xué)研究，如果非洲豬瘟在我國(guó)擴(kuò)散和滯留，可能造成非洲豬瘟病毒在野豬之間，野豬家豬之間的循環(huán)傳播，應(yīng)研究野豬的分布、生態(tài)特性、品系、野豬在傳染病(非洲豬瘟和古典豬瘟)中的作用，我國(guó)流行毒株對(duì)野豬致病和非洲豬瘟在國(guó)內(nèi)的傳播關(guān)系。野豬在我國(guó)屬于國(guó)家保護(hù)動(dòng)物，非洲豬瘟研究必須開展野豬生態(tài)學(xué)研究，應(yīng)多部門協(xié)作研究。

4.5 鈍緣軟蜱與非洲豬瘟的關(guān)系 非洲豬瘟病毒天然媒介宿主是鈍緣軟蜱，如果非洲豬瘟在我國(guó)擴(kuò)散和滯留，鈍緣軟蜱生態(tài)學(xué)研究、與非洲豬瘟關(guān)系研究應(yīng)啟動(dòng)，將有助于非洲豬瘟病毒的根除。

4.6 疫苗研究的可行性與展望 疫苗是我國(guó)以“預(yù)防為主”的動(dòng)物防控策略的重要物資，非洲豬瘟自發(fā)現(xiàn)以來(lái)，雖然多個(gè)國(guó)家都在開展疫苗研發(fā)，但一直未取得實(shí)質(zhì)性突破性進(jìn)展，傳統(tǒng)技術(shù)研究疫苗、滅活疫苗、新型佐劑滅活疫苗均證實(shí)無(wú)效，人工傳代弱毒疫苗、自然弱毒疫苗在不同毒株交叉保護(hù)以及安全性問(wèn)題中存在問(wèn)題。隨著生物技術(shù)的巨大進(jìn)步，對(duì)病毒致病基因、保護(hù)性抗原基因的認(rèn)識(shí)有了不斷深入，已具備開展新型疫苗研究的技術(shù)條件和外部環(huán)境。近年來(lái)在美國(guó)、西班牙等實(shí)驗(yàn)室取得了一定進(jìn)展，考慮到弱毒苗的一些不確定性，我國(guó)應(yīng)謹(jǐn)慎開展弱毒疫苗研究，建議采用新型技術(shù)方法和策略開展疫苗的研究。