植物乳桿菌和苦蕎黃酮及其復(fù)合物對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率及血清指標(biāo)的影響

王 強(qiáng) 張乃鋒 崔 凱 王世琴 呂小康 刁其玉

(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室，生物飼料開發(fā)國家工程研究中心，北京 100081；2.四川省涼山州畜牧獸醫(yī)科學(xué)研究所，西昌 615042)

斷奶仔豬受生理、環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)等應(yīng)激因素的影響，常導(dǎo)致生長(zhǎng)抑制、飼料報(bào)酬低、腹瀉甚至死亡?？股匾詠喼委焺┝刻砑佑陲暭Z中可以預(yù)防仔豬疾病發(fā)生和促進(jìn)生長(zhǎng)，但由此帶來的細(xì)菌耐藥性、藥物殘留以及對(duì)人類健康威脅等問題[1]促使世界各國陸續(xù)采取措施禁止或限制抗生素在飼糧中的使用。因此，尋找抗生素替代品顯得尤為重要。目前研究較多的抗生素替代物質(zhì)包括益生素(寡糖類物質(zhì)、益生菌)、植物提取物、抗菌肽和噬菌體等[2]。益生菌作為一類安全無污染、無殘留、無耐藥性的新型生物飼料添加劑，已被廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖業(yè)[3]。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum)GF103具備良好的體外益生特性[4]，并且在飼糧中添加植物乳桿菌GF103具有改善斷奶仔豬生長(zhǎng)性能[5]、促進(jìn)斷奶仔豬腸道菌群平衡、維持腸道健康的作用[6]。植物提取物是一類來源于植物的、具有一種或多種生物學(xué)功能的活性物質(zhì)，當(dāng)前應(yīng)用較多的有植物精油、多糖、黃酮類化合物等[7]?？嗍w黃酮(buckwheat flavone)存在于苦蕎各組織部位，含量在0.51%～6.28%，具有抗氧化、抗癌、抗菌和增強(qiáng)免疫等作用[8]。目前黃酮類植物提取物在畜禽養(yǎng)殖上的應(yīng)用主要集中在大豆異黃酮等[9]的研究上，有關(guān)苦蕎黃酮抗氧化性和增強(qiáng)免疫功能等作用對(duì)斷奶仔豬是否有影響值得研究，而植物乳桿菌和苦蕎黃酮聯(lián)合應(yīng)用對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響則未見報(bào)道。因此，本試驗(yàn)旨在通過研究植物乳桿菌和苦蕎黃酮及其復(fù)合物對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率及血清指標(biāo)的影響，為植物乳桿菌和苦蕎黃酮在斷奶仔豬上的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

植物乳桿菌GF103由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所家畜研究室實(shí)驗(yàn)室制備，活菌數(shù)≥2×109CFU/g。苦蕎黃酮由南京景竹生物科技有限公司提供，苦蕎黃酮含量≥70%。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，選取(35±3)日齡、平均體重為(7.85±0.67) kg的“長(zhǎng)×大”二元雜交斷奶仔豬50頭，隨機(jī)分為5組，每組10個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1頭仔豬。5個(gè)組分別為：負(fù)對(duì)照組(NC組)，飼喂基礎(chǔ)飼糧(不添加抗生素、植物乳桿菌和苦蕎黃酮)；正對(duì)照組(PC組)，飼喂基礎(chǔ)飼糧+抗生素(40 mg/kg硫酸黏桿菌素)；植物乳桿菌組(LP組)，飼喂基礎(chǔ)飼糧+植物乳桿菌(1×109CFU/kg)；苦蕎黃酮組(BF組)，飼喂基礎(chǔ)飼糧+苦蕎黃酮(40 mg/kg)；植物乳桿菌和苦蕎黃酮復(fù)合組(LB組)，飼喂基礎(chǔ)飼糧+植物乳桿菌(1×109CFU/kg)+苦蕎黃酮(40 mg/kg)。上述各組中硫酸黏桿菌素、植物乳桿菌和苦蕎黃酮的添加量均為有效成分添加量。

試驗(yàn)期共28 d，分為2個(gè)階段，第1階段為第1～14天，第2階段為第15～28天。

1.3 試驗(yàn)飼糧及飼養(yǎng)管理

參照NRC(1998)關(guān)于仔豬的營(yíng)養(yǎng)需要配制玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，各試驗(yàn)組按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)要求在基礎(chǔ)飼糧中添加抗生素、植物乳桿菌或苦蕎黃酮?；A(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供 Premix provided the following per kg of the diet：VA 8 000 IU，VD33 000 IU，VE 20 IU，VK32 mg，VB14 mg，VB23.6 mg，VB540 mg，VB64 mg，VB120.02 mg，生物素 biotin 0.15 mg，葉酸 folic acid 1.0 mg，D-泛酸D-pantothenic acid 11 mg，煙酸 nicotinic acid 10 mg，抗氧化劑 antioxidant 100 mg，Cu 10 mg，F(xiàn)e 80 mg，Mn 80 mg，Zn 75 mg，I 0.40 mg，Se 0.30 mg。

2)消化能為計(jì)算值，其余為實(shí)測(cè)值。DE was a calculated value, while the others were measured values.

試驗(yàn)在北京昌平區(qū)軼雄養(yǎng)殖場(chǎng)完成，試驗(yàn)豬在漏縫式高床上飼養(yǎng)，粉料自動(dòng)拌濕飼喂，自由采食與飲水，通風(fēng)良好，舍溫保持在20～25 ℃，每日清糞1次，保持舍內(nèi)清潔，每周消毒2次。試驗(yàn)期間，按照豬場(chǎng)常規(guī)免疫、驅(qū)蟲程序進(jìn)行。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能

生長(zhǎng)性能指標(biāo)包括平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。于試驗(yàn)的第1天、第15天和第29天08:00逐頭空腹稱重，記錄每頭仔豬體重(BW)，用于計(jì)算ADG；以組為單位記錄每次加料量，于試驗(yàn)的第15天和第29天早晨稱剩料量，用于計(jì)算ADFI。根據(jù)ADG和ADFI計(jì)算F/G。計(jì)算公式如下：

ADG(g/d)=每頭豬總增重/飼養(yǎng)天數(shù)；ADFI(g/d)=每欄總采食量/
(每欄仔豬頭數(shù)×飼養(yǎng)天數(shù))；F/G=ADFI/ADG。

1.4.2 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率

試驗(yàn)采用二氧化鈦(TiO2)作為外源指示劑進(jìn)行消化試驗(yàn)，試驗(yàn)期為10 d。于試驗(yàn)的第19天向飼糧中添加0.1%的TiO2，預(yù)飼4 d后連續(xù)采飼料樣、糞樣6 d。每天從各組料槽中取部分飼料樣約50 g，采樣結(jié)束后按組將6 d的飼料樣均勻混合存放；每天以組為單位采集仔豬剛排出的新鮮糞便約50 g/頭，對(duì)當(dāng)天已采豬只作好標(biāo)記，當(dāng)天不再重復(fù)采集，每組采集頭數(shù)必須大于6頭，每組盡量在1～2 h內(nèi)完成采集，并按糞便重量的10%加入10%鹽酸(HCl)固氮，每組每天的糞樣作為一個(gè)樣品，放置冰箱冷凍保存。試驗(yàn)結(jié)束后，將糞樣在65 ℃條件下烘48 h，在室內(nèi)回潮24 h，粉碎過40目待測(cè)。

分析測(cè)定飼料樣及糞樣中的總能(GE)及干物質(zhì)(DM)、粗蛋白質(zhì)(CP)、粗脂肪(EE)、粗灰分(Ash)、鈣(Ca)和磷(P)的含量，方法參照《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》(第3版)。鈦(Ti)含量的測(cè)定參照鄧雪娟等[10]的方法進(jìn)行。

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率(%)=[1-(飼料樣中鈦的含量/
糞樣中鈦的含量)×(糞樣中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的含量/
飼料樣中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的含量)]×100。

1.4.3 血清指標(biāo)

于試驗(yàn)第29天08:00，每組隨機(jī)選取6頭仔豬，于前腔靜脈采血10 mL，3 000 r/min離心20 min，分離血清，于-20 ℃保存?zhèn)錂z。測(cè)定血清中總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、尿素氮(UN)、葡萄糖(GLU)、游離脂肪酸(NEFA)、胰島素生長(zhǎng)因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)和生長(zhǎng)激素(GH)的含量；測(cè)定血清中免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)等免疫指標(biāo)的含量；測(cè)定血清中總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)、丙二醛(MDA)等抗氧化指標(biāo)的含量或活性。

TP、ALB、GLB、UN、GLU、IgG、IgA和IgM含量使用KHB-1280全自動(dòng)生化儀測(cè)定；IGF-Ⅰ和GH含量測(cè)定采用放免法，使用GC-1200全自動(dòng)放免計(jì)數(shù)儀測(cè)定；NEFA、T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT和MDA含量或活性測(cè)定采用比色法，使用L-3180半自動(dòng)生化分析儀測(cè)定。

1.5 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2007軟件進(jìn)行整理，采用SPSS V17.0統(tǒng)計(jì)軟件的one-way ANOVA程序進(jìn)行單因素方差分析，差異顯著則用Duncan氏法進(jìn)行多重比較。P<0.05為差異顯著，0.05≤P<0.10為有顯著性趨勢(shì)。

2 結(jié) 果

2.1 植物乳桿菌和苦蕎黃酮及其復(fù)合物對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，各組之間斷奶仔豬初重差異不顯著(P>0.05)，符合試驗(yàn)要求。從末重來看，BF組顯著高于NC組和LP組(P<0.05)，與LB組和PC組差異不顯著(P>0.05)。在1～14 d和15～28 d 2個(gè)階段，各組之間ADG差異不顯著(P>0.05)，在2個(gè)階段BF組的ADG比NC組分別提高了65.88%和46.42%(0.05≤P<0.10)，比PC組分別提高了12.37%和49.94%(0.05≤P<0.10)；在試驗(yàn)全期(1～28 d)，BF組的ADG顯著高于NC組、PC組和LP組(P<0.05)，與LB組差異不顯著(P>0.05)。試驗(yàn)全期各組之間F/G差異不顯著(P<0.05)，但BF組F/G為1.63，與NC組和PC組相比有降低趨勢(shì)(0.05≤P<0.10)。

2.2 植物乳桿菌和苦蕎黃酮及其復(fù)合物對(duì)斷奶仔豬營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

由表3可知，PC組、LP組、BF組和LB組飼糧GE、DM、OM、CP、EE、Ca和P的消化率均顯著高于NC組(P<0.05)。LB組的GE、DM、OM和P的消化率顯著高于其余各組(P<0.05)。

2.3 植物乳桿菌和苦蕎黃酮及其復(fù)合物對(duì)斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響

由表4可知，各組之間血清GLB含量差異不顯著(P>0.05)，但BF組與NC組相比有上升趨勢(shì)(0.05≤P<0.10)，各組間血清ALB/GLB和IGF-Ⅰ含量差異不顯著(P>0.05)。BF組血清TP含量顯著高于PC組、LP組和NC組(P<0.05)，與LB組差異不顯著(P>0.05)。BF組血清ALB含量顯著高于其他各組(P<0.05)。BF組血清UN含量顯著高于LB組、LP組和NC組(P<0.05)，與PC組差異不顯著(P>0.05)。BF組和LB組血清GLU含量顯著高于LP組和NC組(P<0.05)，與PC組差異不顯著(P>0.05)。BF組血清NEFA含量顯著高于LP組和NC組(P<0.05)，與LB組和PC組差異不顯著(P>0.05)。LP組血清GH含量顯著高于其他各組(P<0.05)，而BF組、NC組、LB組和PC組之間差異不顯著(P>0.05)。

表2 植物乳桿菌和苦蕎黃酮及其復(fù)合物對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示有顯著性趨勢(shì)(0.05≤P<0.10)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with different capital letter superscripts mean trending significant difference (0.05≤P<0.10). The same as below.

表3 植物乳桿菌和苦蕎黃酮及其復(fù)合物對(duì)斷奶仔豬營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

2.4 植物乳桿菌和苦蕎黃酮及其復(fù)合物對(duì)斷奶仔豬血清免疫指標(biāo)的影響

由表5可知，BF組血清IgG含量顯著高于LP組和NC組(P<0.05)，與LB組和PC組差異不顯著(P>0.05)。BF組血清IgA含量顯著高于其他各組(P<0.05)，而LB組、NC組、PC組和LP組之間差異不顯著(P>0.05)。BF組血清IgM含量顯著高于PC組、LP組和NC組(P<0.05)，與LB組差異不顯著(P>0.05)；LB組血清IgM含量顯著高于NC組(P<0.05)，與PC組和LP組差異不顯著(P>0.05)。

表4 植物乳桿菌和苦蕎黃酮及其復(fù)合物對(duì)斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響

表5 植物乳桿菌和苦蕎黃酮及其復(fù)合物對(duì)斷奶仔豬血清免疫指標(biāo)的影響

2.5 植物乳桿菌和苦蕎黃酮及其復(fù)合物對(duì)斷奶仔豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

由表6可知，LP組血清T-AOC顯著高于PC組、BF組和NC組(P<0.05)，與LB組差異不顯著(P>0.05)。LP組和LB組血清SOD活性均顯著高于PC組、BF組和NC組(P<0.05)。LP組血清GSH-Px活性顯著高于其余各組(P<0.05)，LB組顯著高于PC組、BF組和NC組(P<0.05)。LP組血清CAT活性顯著高于其余各組(P<0.05)，LB組和PC組顯著高于BF組和NC組(P<0.05)。LP組和LB組血清MDA含量顯著低于PC組、BF組和NC組(P<0.05)。

表6 植物乳桿菌和苦蕎黃酮及其復(fù)合物對(duì)斷奶仔豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 植物乳桿菌和苦蕎黃酮及其復(fù)合物對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

斷奶應(yīng)激和胃腸道菌群失衡是引起仔豬食欲減弱、腹瀉、生長(zhǎng)緩慢甚至停滯等現(xiàn)象的主要原因，如何減少應(yīng)激和改善胃腸道微生物菌群平衡是提高仔豬生長(zhǎng)性能的重要手段。硫酸黏桿菌素具有強(qiáng)大的抗革蘭氏陰性菌作用，被認(rèn)為是治療陰性菌感染的最后一道防線，鑒于動(dòng)物產(chǎn)品質(zhì)量安全和公共衛(wèi)生安全的考慮，目前已被禁止用于動(dòng)物飼料。本試驗(yàn)采用硫酸黏桿菌素作正對(duì)照研究，目的在于響應(yīng)行業(yè)發(fā)展需求，尋找合適的能替代硫酸黏桿菌素促生長(zhǎng)作用的添加劑，為產(chǎn)業(yè)發(fā)展做技術(shù)儲(chǔ)備。植物乳桿菌是一種同型發(fā)酵乳酸菌，能通過胃并定植于腸道發(fā)揮有益作用[11]。黃酮類化合物是植物重要的次級(jí)代謝產(chǎn)物，含有的多種活性成分，可以通過調(diào)節(jié)畜禽免疫功能、生長(zhǎng)軸和性腺軸功能，從而影響畜禽免疫力、生長(zhǎng)性能和繁殖性能。本試驗(yàn)中，飼糧添加苦蕎黃酮組仔豬的全期ADG和F/G顯著好于NC組，說明飼糧中添加苦蕎黃酮可以達(dá)到替代抗生素促生長(zhǎng)的目的。前人對(duì)黃酮類物質(zhì)的研究也有類似結(jié)果，在斷奶仔豬飼糧中添加竹葉黃酮[12]、藤茶黃酮[13]增加仔豬ADG，降低F/G，改善了仔豬生長(zhǎng)性能。而本試驗(yàn)添加植物乳桿菌以及苦蕎黃酮與植物乳桿菌的復(fù)合物，與NC組相比無顯著差異。前人研究關(guān)于飼糧添加植物乳桿菌對(duì)仔豬的生長(zhǎng)性能的影響效果并不一致，如王士長(zhǎng)等[14]、索成等[15]均發(fā)現(xiàn)飼糧中添加植物乳桿菌可以顯著提高斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能，而柴建民等[6]、董曉麗等[16]在飼糧中添加植物乳桿菌對(duì)仔豬的ADG、ADFI和F/G均無顯著影響，后者與本試驗(yàn)結(jié)果類似。本試驗(yàn)中PC組仔豬ADG高于NC組13.9%，但統(tǒng)計(jì)上并無顯著差異，其原因可能與組內(nèi)離散度偏大有關(guān)系。

3.2 植物乳桿菌和苦蕎黃酮及其復(fù)合物對(duì)斷奶仔豬營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

斷奶對(duì)仔豬腸道菌群影響較大，主要表現(xiàn)在大腸桿菌數(shù)量的上升和乳酸桿菌數(shù)量的下降，通過飼喂外源益生菌來調(diào)節(jié)仔豬腸道菌群結(jié)構(gòu)，可以提高飼糧消化率，促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)[17]。前人在研究植物乳桿菌和黃酮類化合物對(duì)飼糧消化率影響的結(jié)果上并不一致。如黃金華等[18]、周盟等[19]發(fā)現(xiàn)，植物乳桿菌在不同程度上改善了仔豬對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率。李方方等[20]研究表明，斷奶仔豬飼糧中添加大豆異黃酮，可以顯著提高飼糧中CP和P的消化率，極顯著提高EE和Ca的消化率，且呈現(xiàn)劑量效應(yīng)。然而，張乃鋒等[21]在生長(zhǎng)豬飼糧中添加1×109CFU/kg植物乳桿菌后，其GE、DM、OM、CP、EE、中性洗滌纖維(NDF)、Ca和P的消化率沒有顯著變化。本試驗(yàn)中PC組、LP組、BF組和LB組飼糧GE、DM、OM、CP、EE、Ca、P的消化率均顯著高于NC組，表明添加植物乳桿菌或苦蕎黃酮可以顯著提高仔豬飼糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率。這可能是因?yàn)橹参锶闂U菌能提高小腸絨毛長(zhǎng)度，加深胃底腺小凹深度，從而有利于對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收[14]。也可能是通過植物乳桿菌產(chǎn)酸降低腸道pH，促進(jìn)蛋白酶等消化酶的分泌[22]，提高腸道蛋白酶、淀粉酶和纖維酶的活性，從而提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收[23]。本試驗(yàn)聯(lián)合添加植物乳桿菌和苦蕎黃酮對(duì)飼糧GE、DM、OM和P的消化率顯著高于單獨(dú)添加，提示植物乳桿菌和苦蕎黃酮對(duì)飼糧GE、DM、OM和P的消化有協(xié)同提高作用，其相互作用的機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

3.3 植物乳桿菌和苦蕎黃酮及其復(fù)合物對(duì)斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響

TP含量高低主要反映肝臟蛋白質(zhì)合成能力的強(qiáng)弱[14]。血清ALB在維持血液膠體滲透壓、體內(nèi)代謝物質(zhì)運(yùn)輸、營(yíng)養(yǎng)等方面均起著很重要的作用。血清GLB含量的高低在一定程度上反映了動(dòng)物機(jī)體的免疫狀況。白球比主要反映脾臟免疫功能狀況，其比值的下降表明F/G的合成增加，說明機(jī)體提升了特異性免疫應(yīng)答水平，增強(qiáng)了免疫力[24]。本試驗(yàn)中，添加苦蕎黃酮后血清中TP、ALB含量顯著高于NC組，GLB含量有升高趨勢(shì)，說明添加苦蕎黃酮后仔豬的蛋白質(zhì)消化、合成得到提高，這與前面生長(zhǎng)性能的表現(xiàn)是一致的。趙萌等[25]在仔豬飼糧中添加藤茶黃酮，也同樣提高了仔豬血清中TP和ALB含量。

血清UN是蛋白質(zhì)分解的最終產(chǎn)物，能夠反映氨基酸代謝和利用狀況。關(guān)于植物乳桿菌和苦蕎黃酮對(duì)仔豬血清UN含量的影響，前人研究結(jié)果不盡相同。有報(bào)道發(fā)現(xiàn)[6，26]，在斷奶仔豬飼糧中添加植物乳桿菌或大豆黃酮對(duì)血清UN含量沒有影響。而也有研究表明，植物乳桿菌或藤茶黃酮可以降低血清UN含量[25，27]。本試驗(yàn)植物乳桿菌對(duì)血清UN含量的影響與前者一致，而苦蕎黃酮卻提高了血清UN含量，與前人研究不一致。蛋白質(zhì)、氨基酸、尿素氮在機(jī)體內(nèi)的分解、合成、轉(zhuǎn)化處于一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡的狀態(tài)，影響血清UN含量的因素很多。血清UN含量升高，一般情況下是大量氨基酸代謝的結(jié)果[28]，本試驗(yàn)BF組血清UN含量的提高可能與相對(duì)于NC組來講采食量和消化率的提高導(dǎo)致的蛋白質(zhì)攝入量的改變、蛋白質(zhì)分解與合成、肝臟氨基酸代謝等方面的變化有關(guān)。而苦蕎黃酮所起作用及其機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

GLU是血液中最重要的單糖，是維持細(xì)胞功能的必需能量供體。NEFA是中性脂肪分解代謝的中間產(chǎn)物，是機(jī)體重要的能源物質(zhì)之一。糖代謝和脂代謝關(guān)系極為密切，兩者可循糖酵解途徑相通。從本試驗(yàn)血清GLU和NEFA含量在各組間的變化和差異性表現(xiàn)來看基本上是一致的。本試驗(yàn)BF組血清GLU和NEFA含量增加顯著，說明苦蕎黃酮增加了腸道吸收入血液的GLU含量，提高了機(jī)體能量代謝水平，在正常范圍內(nèi)血清GLU含量的增加有助于提高動(dòng)物的免疫力。

GH具有刺激骨及軟骨組織生長(zhǎng)，調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和糖類代謝的功能，能提高豬的生長(zhǎng)速度[29]；IGF-Ⅰ是多功能生長(zhǎng)因子，具有類胰島素功能，可提高小腸黏膜質(zhì)量及絨毛高度(VH)，增加養(yǎng)分吸收[30]。本試驗(yàn)中，除LP組仔豬血清GH含量顯著提高外，其余各組仔豬血清GH、IGF-Ⅰ含量無差異，這與柴建民等[6]的報(bào)道一致。但也有研究表明，類黃酮化合物有提高動(dòng)物GH和IGF-Ⅰ的作用[31]。這可能與受試動(dòng)物的生長(zhǎng)階段、類黃酮成分和劑量有關(guān)，也可能是因?yàn)镚H以脈沖式釋放，很難反映GH與生長(zhǎng)特性的關(guān)系，其促生長(zhǎng)作用是通過影響IGF-Ⅰ含量來實(shí)現(xiàn)的，且IGF-Ⅰ含量與豬體重和增重呈正相關(guān)，故IGF-Ⅰ相對(duì)于GH更能反映動(dòng)物的生長(zhǎng)狀況[32]。

3.4 植物乳桿菌和苦蕎黃酮及其復(fù)合物對(duì)斷奶仔豬血清免疫指標(biāo)的影響

免疫球蛋白是介導(dǎo)體液免疫的主要抗體，也是反映機(jī)體免疫功能的重要指標(biāo)，血清中抗體的升高一定程度上反映機(jī)體免疫功能增強(qiáng)[33]。IgG占總的免疫球蛋白的75%，在特異性免疫中起主力軍作用。IgA是黏膜免疫的主要抗體，作為抗感染的最初屏障，起著十分重要的作用[34]。IgM是抗原刺激誘導(dǎo)體液免疫應(yīng)答中最先產(chǎn)生的抗體，其殺菌、溶菌、促吞噬和凝集作用比IgG高500～1 000倍，在機(jī)體的早期防御中起著重要的作用。本試驗(yàn)中，添加植物乳桿菌對(duì)斷奶仔豬血清IgG、IgM、IgA含量沒有影響。前人研究也有相似結(jié)果，如王杰等[35]在斷奶仔豬飼糧中添加含植物乳桿菌的復(fù)合益生菌對(duì)仔豬血清IgG、IgM、IgA含量沒有顯著影響。Kin等[36]發(fā)現(xiàn)在仔豬飼糧中添加益生菌復(fù)合劑，不影響血清免疫球蛋白含量。本試驗(yàn)中，BF組與NC組相比顯著提高了斷奶仔豬血清中IgG、IgM、IgA的含量，說明苦蕎黃酮可以顯著提高斷奶仔豬的免疫球蛋白含量，增強(qiáng)免疫功能。許效群等[37]研究發(fā)現(xiàn)，苦蕎糖皮總黃酮可以顯著提高脾臟指數(shù)，提高吞噬細(xì)胞的吞噬能力和血清血溶水平，增強(qiáng)細(xì)胞免疫和體液免疫，從而提高機(jī)體的特異性免疫和非特異性免疫能力，增強(qiáng)免疫功能，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。腸道是最大的消化器官，也是最大的免疫器官，BF組仔豬血清IgA含量顯著高于其余各組，說明BF組仔豬黏膜免疫應(yīng)答良好，腸道發(fā)育完善。結(jié)合生長(zhǎng)性能和血清指標(biāo)，苦蕎黃酮未通過生長(zhǎng)軸途徑表現(xiàn)出對(duì)生長(zhǎng)的促進(jìn)作用，而可能是通過提高機(jī)體免疫力，特別是腸道健康促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收，達(dá)到促生長(zhǎng)的作用。

3.5 植物乳桿菌和苦蕎黃酮及其復(fù)合物對(duì)斷奶仔豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

在新陳代謝過程中不斷產(chǎn)生的一系列自由基通過氧化作用會(huì)加速機(jī)體衰老進(jìn)程，降低免疫功能并誘發(fā)各種疾病。因此，機(jī)體防御體系中抗氧化能力的強(qiáng)弱與健康程度存在著密切聯(lián)系，該抗氧化防御體系有酶促類和非酶促類2個(gè)體系，酶促類包括SOD、GSH-Px和CAT，非酶促類包括維生素C、維生素E、谷光甘肽(GSH)等。T-AOC是反映整個(gè)機(jī)體總的抗氧化能力的指標(biāo)，其高低決定了機(jī)體清除自由基的能力。SOD、GSH-Px和CAT是酶促體系中常用反映抗氧化能力的指標(biāo)，反映了機(jī)體清除氧自由基的能力。SOD主要清除超氧陰離子自由基，GSH-Px是體內(nèi)重要的自由基捕獲酶之一，具有清除自由機(jī)和衍生物的作用，減少脂質(zhì)過氧化物的形成。CAT可以將SOD清除超氧陰離子自由基時(shí)產(chǎn)生的過氧化氫清除而生成水。MDA是氧自由基攻擊細(xì)胞膜中多不飽和脂肪酸引發(fā)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)形成的脂質(zhì)過氧化物，可直接或間接引起細(xì)胞損傷。因此，MDA含量的高低可以反映體內(nèi)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)程度，間接反映細(xì)胞受氧自由基攻擊損傷的嚴(yán)重程度。本試驗(yàn)中，BF組仔豬血清T-AOC與NC組沒有顯著差異，其原因可能是苦蕎黃酮已有的抗氧化性研究主要基于體外化學(xué)環(huán)境的抗氧化試驗(yàn)，而本試驗(yàn)是通過體內(nèi)試驗(yàn)后測(cè)定部分反映抗氧化能力的指標(biāo)，動(dòng)物體內(nèi)生物反應(yīng)復(fù)雜，受影響因素多，苦蕎黃酮的抗氧化作用在經(jīng)過動(dòng)物復(fù)雜的生物環(huán)境后在某些抗氧化指標(biāo)上不一定表現(xiàn)出作用。也有可能是添加劑量不足以引起抗氧化指標(biāo)的變化。另外，飼糧中的抗氧化劑與苦蕎黃酮是否相互作用而影響抗氧化能力也可能是原因之一。LP組可以顯著提高斷奶仔豬血清T-AOC、SOD、GSH-Px和CAT的活性，顯著降低血清MDA含量，表明添加植物乳桿菌提高了機(jī)體清除新陳代謝過程中產(chǎn)生自由基的能力，降低了機(jī)體氧化受損程度，提高了機(jī)體的健康水平。

4 結(jié) 論

在本試驗(yàn)條件下，飼糧中添加苦蕎黃酮提高了斷奶仔豬ADG，改善了斷奶仔豬機(jī)體免疫功能；飼糧中添加植物乳桿菌或植物乳桿菌與苦蕎黃酮復(fù)合物增強(qiáng)了斷奶仔豬機(jī)體抗氧化能力；植物乳桿菌、苦蕎黃酮及其復(fù)合物還提高了仔豬對(duì)飼糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率。

[1] BARTON M D.Antibiotic use in animal feed and its impact on human health[J].Nutrition Research Reviews,2000,13(2):279-299.

[2] 盧國民,孫虎芝,任慧英,等.抗生素替代品及其作用機(jī)理的研究進(jìn)展[J].中國畜牧獸醫(yī),2014,41(12):276-281.

[3] 朱丹,張佩華,文宇,等.益生菌在養(yǎng)豬生產(chǎn)上的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].養(yǎng)豬,2014(3):17-19.

[4] 董曉麗,張乃鋒,周盟,等.一株乳酸菌GF103的分離鑒定及體外益生效果評(píng)價(jià)[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2012,24(9):1832-1838.

[5] 周盟,張乃鋒,董曉麗,等.益生菌對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、免疫器官指數(shù)及胃腸道pH的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2014,26(2):445-452.

[6] 柴建民,魏榮貴,劉希峰,等.植物乳桿菌和非淀粉多糖復(fù)合酶對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、糞便微生物菌群及血清指標(biāo)的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2016,28(6):1859-1866.

[7] 甘利平,楊維仁,張崇玉,等.植物提取物的生物學(xué)功能及其作用機(jī)理[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2015,27(9):2667-2675.

[8] 劉栓娣,趙媛媛.苦蕎麥的藥理作用研究進(jìn)展[J].國際中醫(yī)中藥雜志,2016,38(11):1053-1056.

[9] 于光遠(yuǎn),邊連全.大豆黃酮在養(yǎng)豬生產(chǎn)中的應(yīng)用與研究進(jìn)展[J].豬業(yè)科學(xué),2014(2):64-66.

[10] 鄧雪娟,劉國華,蔡輝益,等.分光光度計(jì)法測(cè)定家禽飼料和食糜中二氧化鈦[J].飼料工業(yè),2008,29(2):57-58.

[11] 王水泉,包艷,董喜梅,等.植物乳桿菌的生理功能及應(yīng)用[J].中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào),2010,12(4):49-55.

[12] 張婧菲,王建軍,王恬.竹葉提取物對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能、血漿抗氧化水平和免疫性能的影響[C]//中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2011學(xué)術(shù)年會(huì)論文集.成都:中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì),2011:228.

[13] 武書庚,刁其玉,石波,等.藤茶黃酮對(duì)仔豬生產(chǎn)性能的影響[J].飼料工業(yè),2005,26(7):29-31.

[14] 王士長(zhǎng),陳靜,潘健存,等.植物乳桿菌對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能和血液生化指標(biāo)的影響[J].中國畜牧獸醫(yī),2006,33(8):67-70.

[15] 索成,尹業(yè)師,王小娜,等.植物乳桿菌對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能及豬肉品質(zhì)的影響[J].中國食品學(xué)報(bào),2012,12(7):155-161.

[16] 董曉麗,張乃鋒,周盟,等.復(fù)合菌制劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、糞便微生物和血清指標(biāo)的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2013,25(6):1285-1292.

[17] 朱偉云,姚文,毛勝勇.腸道微生物研究:從組成到功能——腸道健康功能微生物的研究進(jìn)展[C]//第三屆第八次全國學(xué)術(shù)研討會(huì)暨動(dòng)物微生態(tài)企業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略論壇論文集.珠海:中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì),2006:191-194.

[18] 黃金華,梁珠民,寧國信,等.復(fù)合益生菌制劑對(duì)斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分消化率和血清生化指標(biāo)的影響[J].飼料工業(yè),2014,35(12):27-31.

[19] 周盟,張乃鋒,董曉麗,等.益生菌對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)及消化性能的影響[J].飼料工業(yè),2013,34(2):18-21.

[20] 李方方,朱濤濤,朱宇旌,等.大豆異黃酮對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、免疫性能、養(yǎng)分消化率和糞中微生物菌群的影響[J].養(yǎng)豬,2015(5):25-29.

[21] 張乃鋒,王杰,崔凱,等.植物乳桿菌GF103對(duì)生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率及糞便微生物數(shù)量的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2015,27(6):1853-1860.

[22] HUANG C H,QIAO S Y,LI D F,et al.Effects ofLactobacillion the performance,diarrhea incidence,VFA concentration and gastrointestinal microbial flora of weaning pigs[J].Asian-Australasian Journal of Animal Sciences,2004,17(3):401-409.

[23] 楊繼瓊.植物乳桿菌對(duì)肉兔養(yǎng)分消化率及腸道消化酶活性的影響[J].飼料研究,2016(9):1-3,22.

[24] 林謙,戴求仲,賓石玉,等.益生菌與酶制劑對(duì)黃羽肉雞血液生化指標(biāo)和免疫性能影響的協(xié)同效應(yīng)研究[J].飼料工業(yè),2012,33(14):31-36.

[25] 趙萌,郁建生,郁建平,等.藤茶總黃酮對(duì)仔豬血清生化指標(biāo)及免疫功能的影響[J].中國畜牧獸醫(yī),2016,43(5):1221-1225.

[26] 程忠剛,林映才,周桂蓮,等.大豆黃酮對(duì)仔豬生產(chǎn)性能及血液生化指標(biāo)的影響[J].河南科技大學(xué)學(xué)報(bào):農(nóng)學(xué)版,2003,23(4):44-48.

[27] 張建梅,李曉穎,謝全喜,等.復(fù)合微生態(tài)制劑對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能、糞便菌群及血液指標(biāo)的影響[J].中國微生態(tài)學(xué)雜志,2012,24(9):796-800,804.

[28] KO T C,LEE J H,KIM B C,et al.Effects of phase feeding and sugar beet pulp on growth performance,nutrient digestibility,blood urea nitrogen,nutrient excretion and carcass characteristics in finishing pigs[J].Asian-Australasian Journal of Animal Sciences,2004,17(8):1150-1157.

[29] 李丹,張乃鋒,張秀云,等.飼糧添加代乳品對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能及血清指標(biāo)的影響[J].中國畜牧雜志,2015,51(11):64-68.

[30] 徐子偉.仔豬腸道損傷修復(fù)營(yíng)養(yǎng)調(diào)控及其機(jī)制和應(yīng)用[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2014,26(10):3033-3035.

[31] 曲培濱.桑葉黃酮和熱帶假絲酵母對(duì)犢牛生長(zhǎng)性能、屠宰性能、肉品質(zhì)及血清指標(biāo)的影響[D].碩士學(xué)位論文.邯鄲:河北工程大學(xué),2015.

[32] 甘蔭全.中草藥提取物對(duì)豬血清GH和IGF-Ⅰ水平的影響[D].碩士學(xué)位論文.長(zhǎng)沙:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué),2004.

[33] 劉輝,季海峰,王四新,等.益生菌對(duì)生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能、糞便微生物數(shù)量、養(yǎng)分表觀消化率和血清免疫指標(biāo)的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2015,27(3):829-837.

[34] 上官明軍,王芳,張紅崗,等.菊粉對(duì)蛋雛雞生長(zhǎng)性能、免疫器官指數(shù)和血清免疫球蛋白的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2009,21(1):118-122.

[35] 王杰,艾萍萍,刁其玉,等.復(fù)合益生菌和纖維寡糖對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、糞便微生物及血清指標(biāo)的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2016,28(3):881-890.

[36] KIM K H,INGALE S L,KIM J S,et al.Bacteriophage and probiotics both enhance the performance of growing pigs but bacteriophage are more effective[J].Animal Feed Science and Technology,2014,196:88-95.

[37] 許效群,劉志芳,霍乃蕊,等.苦蕎糠皮總黃酮的抗氧化活性及免疫調(diào)節(jié)活性[J].中國食品學(xué)報(bào),2012,12(6):42-47.

*Corresponding authors: ZHANG Naifeng, professor, E-mail: zhangnaifeng@caas.cn; DIAO Qiyu, professor, E-mail: diaoqiyu@caas.cn