大豆?jié)饪s蛋白替代魚粉對黃顙魚生長、飼料利用、消化酶和抗氧化酶活性的影響

李晨晨 黃文文 金 敏 朱婷婷 羅嘉翔 馬紅娜 袁 野 周歧存

(寧波大學海洋學院魚類營養(yǎng)研究室，寧波 315211)

黃顙魚(Pelteobagrusfulvidraco)是我國內陸的一種小型淡水經(jīng)濟魚類[1]，其隸屬鲇形目(Siluriformes)，鲿科(Bagridae)，黃顙魚屬(Pelteobagrus)，在我國俗稱嘎牙子、黃臘丁、嘎魚等。屬于溫水性底層魚類，喜棲息于緩流或者靜水中，其肉質細膩、口感鮮美、營養(yǎng)價值高、無肌間刺等優(yōu)點[2]，深受人們的喜愛，具有很大的市場潛力。近年來，黃顙魚的養(yǎng)殖規(guī)模迅速擴大[3]，成了內陸淡水地區(qū)一種重要的養(yǎng)殖品種。

魚粉是一種優(yōu)質的蛋白質來源，可以廣泛的應用于水產(chǎn)飼料中。隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè)的不斷發(fā)展，對水產(chǎn)飼料的需求越來越大，對魚粉的需求量也不斷增加。但由于資源的減少以及過度捕撈，使得魚粉供應不足，市場價格高昂。為有效降低水產(chǎn)飼料的成本，尋求其他可靠的蛋白質源部分或全部替代魚粉，成為一個必然的趨勢。豆粕的蛋白質含量高，氨基酸相對較為平衡。菜籽粕也是廣泛用于淡水魚類的植物蛋白質源，但在實際生產(chǎn)中，菜籽粕經(jīng)常與大豆蛋白質混合使用以達到最適的氨基酸平衡[4]；在日本鱸魚[5]等魚類的研究中表明，菜籽粕可以替代一定比例的魚粉。棉籽粕是繼豆粕、菜籽粕之后的第三大植物蛋白質源。在中國，每年棉籽粕的產(chǎn)量都在600萬t以上[6]?，F(xiàn)有的研究表明，棉籽粕可以替代一定比例的魚粉[7-8]。限制棉籽粕使用的主要因素是其內較高含量的棉酚，棉酚通常以多酚二醛的形式存在。近年來研究發(fā)現(xiàn)，以豆粕為代表的植物蛋白質源替代魚粉會破壞魚類消化和代謝系統(tǒng)的組織結構，抑制魚類消化和代謝能力，魚類對含有豆粕的飼料，表現(xiàn)出攝食率、消化率降低[9]。

大豆?jié)饪s蛋白(SPC)是由大豆制作而成的，品質穩(wěn)定、氨基酸消化率高、抗營養(yǎng)因子含量極低[10-11]。SPC除去豆腥味物質及大豆的脹氣因子，粗蛋白質含量一般為65%～70%[12-13]。由于去除豆粕中大部分的可溶性碳水化合物、粗纖維、抗營養(yǎng)因子等影響水生動物對植物蛋白質源吸收利用的物質，SPC在水產(chǎn)飼料行業(yè)中具有很好的應用前景[12]。SPC雖然氨基酸含量豐富，但氨基酸平衡遠不如魚粉，某些必需氨基酸含量仍然不足，尤其是蛋氨酸含量不到優(yōu)質魚粉含量的一半[14-15]。在多種魚類的研究中發(fā)現(xiàn)，SPC雖可以替代25%～100%的魚粉[16-18]，但SPC部分或全部替代魚粉時結果差異較大[12,16,19]。在瓦式黃顙魚的研究中發(fā)現(xiàn)SPC替代魚粉對幼魚存活率的影響不顯著，但對生長以及攝食產(chǎn)生了顯著影響[13]。本試驗在前述研究的基礎上，通過在飼料中添加賴氨酸和蛋氨酸，保證必需氨基酸供給充足的前提下，探討SPC替代魚粉水平對黃顙魚生長、飼料利用、消化酶和抗氧化酶活性的影響，從而為研制高效環(huán)保黃顙魚配合飼料提供科學的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗飼料

以魚粉、豆粕和魷魚粉為蛋白質源，魚油和大豆卵磷脂為脂肪源，面粉為糖源，配制成6組等氮等脂的飼料(粗蛋白質45%，粗脂肪10%)。以飼料魚粉含量為50%的組為對照組，替代組飼料中SPC替代魚粉水平分別為10.0%、20.0%、30.0%、40.0%和60.0%，同時在替代組飼料中添加蛋氨酸和賴氨酸，使其蛋氨酸和賴氨酸含量與對照組飼料一致。試驗飼料組成及營養(yǎng)成分見表1，試驗飼料的氨基酸組成見表2。飼料原料粉碎后過60目篩，按照配方表1稱取各種飼料原料，微量添加成分采取逐級擴大法混合均勻，添加35%左右的水混勻后，壓制成粒徑為2～3 mm的顆粒飼料。自然風干至含水量約10%，分組置于封口袋中并放于-20 ℃冰柜冷凍保存?zhèn)溆谩?/p>

表1 試驗飼料組成及營養(yǎng)水平(干物質基礎)

續(xù)表1項目Items大豆?jié)饪s蛋白質替代魚粉水平ReplacementleveloffishmealwithSPC/%01020304060維生素預混料Vitaminpremix2)1．501．501．501．501．501．50礦物質預混料Mineralpremix2)1．501．501．501．501．501．50賴氨酸Lysine3)0．050．100．150．190．29蛋氨酸Methionine3)0．050．110．160．220．33氯化膽堿Cholinechloride0．300．300．300．300．300．30磷酸二氫鈣Ca(H2PO4)21．001．001．001．001．001．00纖維素Cellulose5．564．643．712．781．86合計Total100．00100．00100．00100．00100．00100．00營養(yǎng)水平Nutrientlevels4)干物質Drymatter89．8290．2690．1990．2689．8789．94粗蛋白質Crudeprotein45．3946．0145．8345．7246．1346．13粗脂肪Crudelipid10．1010．0410．0410．0710．1610．27粗灰分Ash11．6311．8310．0710．139．939．24

1)大豆?jié)饪s蛋白采購于益海(泰州)糧油工業(yè)有限公司。SPC was purchased fromYihai(Taizhou) grain and oil industry Co., Ltd.

2)維生素預混料和礦物質預混料組成參考黃文文等[20]。Vitamin premix and mineral premix composition referred to Huang, et al[20].

3)賴氨酸和蛋氨酸為L晶體形式，純度≥99%。Lysine and methionine wereL-crystal style, and purity≥99%.

4)營養(yǎng)水平均為實測值。 Nutrient levels were all measured values.

表2 試驗飼料的氨基酸組成(干物質基礎)

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗所用黃顙魚魚苗購自浙江省嘉興市，于寧波大學魚類營養(yǎng)研究室淡水養(yǎng)殖基地養(yǎng)殖車間進行投喂試驗。試驗前黃顙魚苗用商品飼料(寧波天邦股份有限公司，粗蛋白質含量45%，粗脂肪含量10%)暫養(yǎng)2周，分組前停食24 h，挑選體格健壯、規(guī)格基本一致的個體540尾[初始體重約為(2.17±0.02) g]，每個300 L玻璃鋼養(yǎng)殖桶中隨機放養(yǎng)30尾，每組飼料隨機投喂3個養(yǎng)殖桶里的試驗魚，即每組的3個重復。每天投喂2次，日投喂量為其體重的4%～6%，投喂時間分別為07:30和17:00，投喂后1 h內觀察其攝食情況，養(yǎng)殖前期每隔1 d換水50%左右，養(yǎng)殖中后期每天換水量50%～100%。養(yǎng)殖期間每天檢查充氣和水溫情況，及時記錄死魚數(shù)量及重量，投喂周期為8周。每2周稱重、計數(shù)并以此次調整隨后2周飼料投喂量。試驗期間，不間斷充氧以保證水體中含有足夠的溶解氧(>6.0 mg/L)，水溫為23.0～29.5 ℃，pH為7.5～8.0。

1.3 樣品采集與分析方法

投喂試驗結束后，魚停食24 h，取樣前每桶單獨稱重并計數(shù)，計算增重率、特定生長率、存活率、飼料效率及蛋白質效率。每個試驗桶隨機取3尾魚分別測出其體長和體重，剝離內臟團和腸系膜脂肪稱重，用于計算臟體比、腸脂比和肥滿度；剝離肌肉(無皮膚的背部肌肉)置于封口袋，用于肌肉常規(guī)營養(yǎng)成分的分析。每桶隨機取4尾魚置于封口袋中，用于全魚常規(guī)營養(yǎng)成分的分析。每個試驗桶另隨機取3尾魚，分別剝離肝臟、胃、前腸于1.5 mL離心管中，用于抗氧化酶及消化酶活性的檢測。用注射器抽取5～8尾魚的血液注入1.5 mL離心管中，于4 ℃下靜置過夜后5 000 r/min離心10 min，取上清液保存于-80 ℃?zhèn)溆茫糜谘逯猩笜说姆治觥?/p>

飼料、肌肉及全魚常規(guī)營養(yǎng)成分分析：水分含量測定采用105 ℃常壓干燥法；粗蛋白質含量測定采用蛋白質分析儀(FP-528，美國LECO公司)；粗脂肪含量測定采用索氏抽提法；粗灰分含量測定采用550 ℃馬福爐灼燒法。飼料樣品中氨基酸含量采用高速氨基酸自動分析儀(L-8900，日本HITACHI公司)進行測定。

血清中生化指標分析：總蛋白、白蛋白、球蛋白、總膽固醇和甘油三酯含量均由寧波大學附屬醫(yī)院使用全自動生化分析儀(7600-110，日本HITACHI公司)測定。谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶活性均采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的相關試劑盒測定，相應操作均參照說明書進行。

肝臟抗氧化指標分析：超氧化物歧化酶、過氧化氫酶活性及丙二醛含量均采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的相關試劑盒測定，相應操作均參照說明書進行。

消化酶活性分析：胃蛋白酶以及胃、前腸和肝臟淀粉酶活性均采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的相關試劑盒測定，相應操作均參照說明書進行。

1.4 計算公式

攝食率[feed intake,g/(g BW·d)]=攝入的
干物質含量/[飼養(yǎng)天數(shù)×(終末體重+
初始體重)/2]；增重率(weight gain rate,WGR,%)=100×
(終末均重-初始均重)/初始均重；特定生長率(specific growth rate,SGR,%/d)=
100×(ln終末體重-ln初始體重)/
飼養(yǎng)天數(shù)；蛋白質效率(protein efficiency ratio,PER)=
(終末體重-初始體重)/蛋白質攝入量；飼料效率(feed efficiency,FE)=(終末總重+
死亡總重-初始總重)/(投飼總量×
飼料干物質含量)；肥滿度(condition factor,CF,g/cm3)=
100×體重/體長3；腸脂比(intraperitoneal fat ratio,IPF,%)=
100×腸系膜脂肪重/體重；臟體比(viserosomatic index,VSI,%)=
100×內臟團重/體重；

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

采用SPSS 17.0軟件對所有數(shù)據(jù)進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，當處理之間有差異顯著時，進行Duncan多重比較。以P<0.05作為差異顯著判斷標準。結果以平均值±標準差(mean±SD)表示。

2 結 果

2.1 SPC替代魚粉對黃顙魚生長性能、飼料利用以及形態(tài)學指標的影響

各組黃顙魚成活率均為100%。表3的結果表明，隨著飼料中SPC替代魚粉水平增加，攝食率、飼料效率和蛋白質效率各組間無顯著差異(P>0.05)。增重率和特定生長率隨SPC替代魚粉水平升高而降低，當SPC替代魚粉水平不超過20%時，增重率和特定生長率無顯著變化(P>0.05)，而當飼料中SPC替代魚粉水平提高到30%以上時，這2個指標顯著降低(P<0.05)，提高到60%時，增重率較其他替代水平顯著降低(P<0.05)。黃顙魚肥滿度、臟體比與腸脂比在各試驗組間無顯著差異(P>0.05)，但均有隨SPC替代魚粉水平升高而下降的趨勢。

表3 大豆?jié)饪s蛋白替代魚粉對黃顙魚生長性能、飼料利用以及形態(tài)學指標的影響

同行數(shù)據(jù)肩標無字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

2.2 SPC替代魚粉對黃顙魚全魚和肌肉常規(guī)營養(yǎng)成分的影響

表4的結果表明，SPC替代魚粉水平對全魚干物質、粗蛋白質及灰分含量無顯著影響(P>0.05)，但對全魚粗脂肪含量有顯著影響(P<0.05)。SPC替代魚粉水平為10%時，全魚粗脂肪含量與對照組無顯著性差異(P>0.05)，當SPC替代魚粉水平從10%升高到20%和30%時，全魚粗脂肪含量顯著降低(P<0.05)。SPC替代魚粉水平對黃顙魚肌肉干物質、粗蛋白質與粗脂肪含量影響不顯著(P>0.05)，但對肌肉灰分含量有顯著影響(P<0.05)。當SPC替代魚粉水平為10%時，肌肉灰分含量與對照組無顯著差異(P>0.05)，當SPC替代魚粉的水平由10%提高到20%以上時，肌肉粗灰分含量顯著下降(P<0.05)。

表4 大豆?jié)饪s蛋白替代魚粉對黃顙魚全魚和肌肉常規(guī)營養(yǎng)成分的影響

2.3 SPC替代魚粉對黃顙魚血清生化指標的影響

表5的結果表明，血清中總蛋白、白蛋白、球蛋白和甘油三酯含量及谷草轉氨酶活性在各組間無顯著差異(P>0.05)。SPC替代魚粉水平對血清中葡萄糖、總膽固醇含量及谷丙轉氨酶活性有顯著影響(P<0.05)。血清葡萄糖含量隨SPC替代魚粉水平的升高呈先升高后下降的趨勢，當SPC替代魚粉水平由10%提高到30%時，血清葡萄糖含量顯著升高(P<0.05)，隨SPC替代魚粉水平由30%提高到40%以上時，血清葡萄糖含量顯著下降(P<0.05)，在SPC替代水平為30%時為最大值。隨SPC替代魚粉水平升高，血清谷丙轉氨酶活性總體呈上升的趨勢，血清總膽固醇含量總體呈下降趨勢。

表5 大豆?jié)饪s蛋白替代魚粉對黃顙魚血清生化指標的影響

2.4 SPC替代魚粉對黃顙魚肝臟抗氧化酶活性的影響

表6的結果表明，隨SPC替代魚粉水平升高，肝臟超氧化物歧化酶、過氧化氫酶活性及丙二醛含量有顯著變化(P<0.05)。在SPC替代魚粉水平為30%時，肝臟超氧化物歧化酶和過氧化氫酶活性達到最大值，肝臟丙二醛含量達到最小值。當SPC替代魚粉水平不低于20%時，肝臟超氧化物歧化酶活性升高，且顯著高于對照組(P<0.05)，當SPC替代魚粉水平在10%以上時，肝臟丙二醛含量顯著降低(P<0.05)。

表6 大豆?jié)饪s蛋白替代魚粉對黃顙魚肝臟抗氧化酶活性的影響

2.5 SPC替代魚粉對黃顙魚消化酶活性的影響

表7的結果表明，胃蛋白酶活性在各組間無顯著差異(P>0.05)，當SPC替代魚粉水平為30%以下時，胃蛋白酶活性基本保持恒定，當SPC替代魚粉水平在40%以上時，胃蛋白酶活性有下降趨勢。SPC替代魚粉水平對胃淀粉酶、前腸淀粉酶和肝臟淀粉酶活性有顯著影響(P<0.05)，當SPC替代魚粉水平為10%和30%時，胃淀粉酶活性顯著高于其他替代水平(P<0.05)；前腸淀粉酶活性最小的SPC替代魚粉水平為10%；肝臟淀粉酶活性在SPC替代魚粉水平為40%時為到最小值，且顯著低于對照組和SPC替代魚粉水平為10%、20%時(P<0.05)。

表7 大豆?jié)饪s蛋白替代魚粉對黃顙魚消化酶活性的影響

3 討 論

3.1 SPC替代魚粉對黃顙魚生長性能、飼料利用以及形態(tài)學指標的影響

有研究發(fā)現(xiàn)，攝食以豆粕為主要蛋白質源的飼料時，大西洋鮭(SalmosalarL.)[28]和虹鱒(Onchorynchusmykiss)[29]出現(xiàn)了腸炎等健康問題，Storebakken[30]在研究中發(fā)現(xiàn)大豆類蛋白質源中非淀粉多糖會引起腸炎從而使脂肪吸收率下降。本試驗中，當SPC替代魚粉水平為10%～60%時，全魚粗脂肪含量隨SPC替代魚粉水平的增加而下降，黃顙魚肥滿度、臟體比和腸脂比的變化趨勢與其基本一致，可能是由于植物蛋白質源對脂肪代謝的影響所致，此結果與劉興旺等[12]在大菱鲆和Nahashon等[31]在黑鯛(Acanthopagrusschlegelii)中的研究結果相似。

3.2 SPC替代魚粉對黃顙魚全魚及肌肉常規(guī)營養(yǎng)成分的影響

本試驗結果表明，SPC替代魚粉水平為10%～60%時，黃顙魚全魚粗脂肪含量隨著SPC替代魚粉水平升高呈下降的趨勢。這與Elangovan等[32]關于飼料中添加豆粕蛋白質對全魚常規(guī)營養(yǎng)成分以及Wang等[33]對于飼料中不同蛋白質水平對黃顙魚中全魚常規(guī)營養(yǎng)成分所得到的研究結果相似。推測出現(xiàn)本試驗結果的原因可能是SPC中含有較多的非淀粉多糖，它會引起腸炎，導致脂肪吸收率下降，從而間接影響機體粗脂肪的含量[30]。肌肉灰分含量在SPC替代魚粉水平為10%～60%時，隨替代水平的增加呈下降趨勢，其他魚體和肌肉常規(guī)營養(yǎng)成分無顯著變化，這與López等[34]的研究發(fā)現(xiàn)相似。

3.3 SPC替代魚粉對黃顙魚血清生化指標的影響

動物血液中的總蛋白與總膽固醇的含量會受到蛋白質代謝、脂質代謝和碳水化合物代謝的影響[35]，總膽固醇作為脂質代謝的重要組成部分，與肝臟細胞發(fā)揮正常功能、機體脂質正常代謝息息相關，總膽固醇含量的高低變化可以反映肝臟細胞功能狀態(tài)。本試驗中總膽固醇含量隨SPC替代魚粉水平升高而下降，這與劉偉等[19]在中華鱘(Acipensersinensis)和Dias等[36]在歐洲海鱸(Barbodesaltus)發(fā)現(xiàn)血清中甘油三酯和總膽固醇含量隨SPC替代魚粉水平升高逐漸下降的結果一致。一般來講，動物蛋白質原料中含有較高的膽固醇，而植物蛋白質原料中膽固醇含量很低[37]，飼料中膽固醇含量會影響?zhàn)B殖動物血液膽固醇含量[23,38]。有研究報道，在狼鱸飼料中使用植物蛋白質源替代魚粉，導致血清的總膽固醇含量降低。這可能是因為膽汁鹽排泄量增加，也有可能是由于膽固醇胃腸道吸收受到限制，或者是植物蛋白質源替代使得飼料中膽固醇的含量不足[39]，大部分學者認為植物蛋白質源中含有的抗營養(yǎng)因子等非蛋白質組分使得其具有降血液膽固醇含量的作用[40-41]。但有關植物蛋白質源中抗營養(yǎng)因子是否會干擾魚類膽固醇代謝，目前還沒有定論。葡萄糖是魚體營養(yǎng)指標之一，也是反映動物糖代謝和全身組織細胞功能狀態(tài)以及內分泌機能的一個重要指標。在一定的閾值內，血液葡萄糖含量越高，表明魚類攝食越積極，健康狀況良好。但當葡萄糖含量超過一定閾值時，會造成機體的營養(yǎng)生理脅迫，損害魚體健康[42]。在本試驗中，當SPC替代魚粉水平為20%和30%時血清葡萄糖含量顯著高于對照組，而在SPC替代魚粉水平超過30%時，增重率和特定生長率也顯著低于對照組，說明SPC替代魚粉水平超過30%時，SPC會通過影響魚體的糖脂代謝進而影響魚的生長。

谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶是參與體內氨基酸、蛋白質、脂質、糖類代謝的重要酶，谷草轉氨酶主要與草酰乙酸與谷氨酸間的轉氨反應有關，谷丙轉氨酶則主要參與丙酮酸和谷氨酸之間的轉氨作用[43]。谷丙轉氨酶正常情況下主要存在于肝細胞中，而谷草轉氨酶主要存在于肝細胞線粒體，它們在血清中的活性很低，只有在肝功能發(fā)生障礙時才會大量進入血液，使血清酶活性增加[44]。血清谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶的活性可作為反映肝功能的重要指標。在本試驗中，當SPC替代魚粉水平不超過40%時，血清谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶活性與對照組間差異不顯著，但當SPC替代魚粉水平為60%時，血清谷丙轉氨酶活性顯著高于對照組。這一結果表明當SPC替代魚粉水平不超過40%時，未造成魚體肝臟損傷，這可能是由于SPC中含有的抗營養(yǎng)因子含量極低，從而減小了對肝功能的影響。有研究發(fā)現(xiàn)，添加過多的豆粕會導致軍曹魚肝臟受損，引發(fā)功能性障礙[45]。植物蛋白質源中的抗營養(yǎng)因子可能是造成免疫指標變化的主要原因[46]。當SPC替代魚粉水平為60%時可能是因為高水平的SPC替代魚粉使得氨基酸代謝增強，產(chǎn)生更多的代謝廢物，造成肝臟的負擔，從而導致血清谷丙轉氨酶活性的上升。關于這方面的原因還有待進一步的探究。

3.4 SPC替代魚粉對黃顙魚抗氧化酶活性的影響

超氧化物歧化酶和過氧化氫酶是生物防御體系中的關鍵酶，分別可以清除生物體內的超氧陰離子、過氧化氫，減少自由基對機體的危害，從而反映了魚體的抗應激能力，丙二醛是機體內自由基作用于脂肪發(fā)生過氧化反應的氧化終產(chǎn)物，具有細胞毒性[47]，其含量可反映機體中脂質過氧化程度以及細胞的損傷程度[48]。本試驗中，SPC替代魚粉水平對肝臟超氧化物歧化酶和過氧化氫酶活性以及丙二醛含量均有顯著影響。當SPC替代魚粉水平不低于20%時，肝臟超氧化物歧化酶活性顯著高于對照組，肝臟過氧化氫酶活性在SPC替代魚粉水平為20%和30%時顯著高于對照組，當SPC替代魚粉水平在10%以上時，肝臟丙二醛含量顯著降低。以上結果說明，SPC替代魚粉水平為20%和30%時顯著提高了魚體抗氧化能力。這可能與SPC中含有大豆異黃酮有關，大豆異黃酮具有抗氧化活性以及較強的超氧陰離子自由基清除作用[49]。

3.5 SPC替代魚粉對黃顙魚消化酶活性的影響

消化酶是檢測魚類的消化能力及飼料利用的關鍵酶，同種魚類中不同部位的消化酶活性不同，其活性與食性有關[50]。淀粉酶的作用是催化淀粉水解，使得碳水化合物降解為糖，提高魚類對碳水化合物的利用率[51]。本試驗中，腸道淀粉酶活性明顯高于肝臟淀粉酶活性，這與吳婷婷[52]與Hidalgo等[53]在其他魚類中的研究結果一致。黃顙魚屬于肉食性魚類，其淀粉酶生成的主要部位不是肝臟[54]。當SPC替代魚粉水平為30%～60%時，肝臟淀粉酶活性低于對照組。楊英豪[9]通過組織切片觀察發(fā)現(xiàn)，隨著SPC替代魚粉水平的提高，伴隨有腸炎的發(fā)生，飼料中SPC對瓦氏黃顙魚肝臟組織結構的破壞程度逐漸加大。所以推測在本試驗中這可能是由于飼料中SPC替代魚粉水平的提高，導致魚體肝臟組織結構受到一定程度的破壞。試驗組前腸淀粉酶活性均低于對照組，且在SPC替代魚粉水平為10%時出現(xiàn)顯著差異，這可能是因為飼料中SPC損害了后腸結構的穩(wěn)定性，抑制了酶活性。當SPC替代魚粉水平低于30%時，胃蛋白酶活性基本保持不變，在30%～60%時，胃蛋白酶活性下降，Lin等[55]在羅非魚和Xu等[56]在史氏鱘中的研究顯示，隨豆粕替代魚粉水平的升高蛋白酶活性降低，與本試驗中的結果相似。這說明黃顙魚的胃對SPC比較敏感，當SPC替代魚粉水平低于30%時，黃顙魚胃消化吸收能力受到的影響較小。今后評估植物蛋白質源替代魚粉時，要考慮其對魚體肝臟胃腸道等的影響機制。

4 結 論

SPC是優(yōu)質的植物蛋白質源，SPC替代魚粉水平不超過20%(對應飼料中SPC的添加量為10.72%)時，黃顙魚生長性能、飼料利用、形態(tài)學指標、體成分、消化酶活性、總膽固醇含量變化不顯著，抗氧化能力和健康狀況良好，推薦在實際生產(chǎn)中采用該水平替代魚粉。

[1] 白東清,吳旋,郭永軍,等.長期投喂黃芪多糖對黃顙魚抗氧化及非特異性免疫指標的影響[J].動物營養(yǎng)學報,2011,23(9):1622-1630.

[2] 文遠紅,曹俊明,黃燕華,等.黃顙魚營養(yǎng)需求研究進展[J].廣東農(nóng)業(yè)科學,2011,38(18):108-111.

[3] ZHENG K K,ZHU X M,DONG H,et al.Effects of dietary lipid levels on growth,survival and lipid metabolism during early ontogeny ofPelteobagrusvachellilarvae.[J].Aquaculture,2010,299(1/2/3/4):121-127.

[4] DAVIS D A,ARNOLD C R,MCCALLUM I.Nutritional value of feed peas (Pisum sativum) in practical diet formulations forLitopenaeusvannamei[J].Aquaculture Nutrition,2015,8(2):87-94.

[5] CHENG Z Y,AI Q H,MAI K S,et al.Effects of dietary canola meal on growth performance,digestion and metabolism of Japanese seabass,Lateolabraxjaponicus[J].Aquaculture,2010,305(1/2/3/4):102-108.

[6] LUO L,XUE M,WU X,et al.Partial or total replacement of fishmeal by solvent-extracted cottonseed meal in diets for juvenile rainbow trout (Oncorhynchusmykiss)[J].Aquaculture Nutrition,2010,12(6):418-424.

[7] ROBINSON E H,TIERSCH T R.Effects of long-term feeding of cottonseed meal on growth,testis development,and sperm motility of male channel catfishIctaluruspunctatusbroodfish[J].Journal of the World Aquaculture Society,1995,26(4):426-431.

[8] CHENG Z J,HARDY R W.Apparent digestibility coefficients and nutritional value of cottonseed meal for rainbow trout (Oncorhynchusmykiss)[J].Aquaculture,2002,212(1/2/3/4):361-372.

[9] 楊英豪.大豆?jié)饪s蛋白對瓦氏黃顙魚幼魚攝食、生長、消化和蛋白質代謝的影響[D].碩士學位論文.青島:中國海洋大學,2011.

[10] 李二超,陳立僑,彭士明,等.大豆?jié)饪s蛋白作為水產(chǎn)飼料蛋白源的評價[J].水產(chǎn)養(yǎng)殖,2005,26(1):18-20.

[11] LUSAS E W,RIAZ M N.Soy protein products:processing and use[J].The Journal of Nutrition,1995,125(3 S):573S-580S.

[12] 劉興旺,艾慶輝,麥康森,等.大豆?jié)饪s蛋白替代魚粉對大菱鲆攝食、生長及體組成的影響[J].水產(chǎn)學報,2014,38(1):91-98.

[13] 楊英豪.大豆?jié)饪s蛋白調控瓦氏黃顙魚幼魚攝食和蛋白質代謝的研究[D].博士學位論文.青島:中國海洋大學,2014.

[14] STOREBAKKEN T,REFSTIE S,RUYTER B.Soy products as fat and protein sources in fish feeds for intensive aquaculture[J].Soy in Animal Nutrition,2000:127-170.

[15] 李林桂,肖偉偉,葛夢蘭.大豆?jié)饪s蛋白的生產(chǎn)工藝、營養(yǎng)組成及在動物日糧中的應用[J].飼料工業(yè),2015,36(S1):29-32.

[16] DENG J M,MAI K S,AI Q H,et al.Effects of replacing fish meal with soy protein concentrate on feed intake and growth of juvenile Japanese flounder,Paralichthysolivaceus[J].Aquaculture,2006,258(1/2/3/4):503-513.

[17] USTAOGLU S,RENNERT B.The apparent nutrient digestibility of diets containing fish meal or isolated soy protein in sterlet (Acipenserruthenus)[J].International Review of Hydrobiology,2002,87(5/6):577-584.

[18] ROMARHEIM O H,SKREDE A,GAO Y L,et al.Comparison of white flakes and toasted soybean meal partly replacing fish meal as protein source in extruded feed for rainbow trout (Oncorhynchusmykiss)[J].Aquaculture,2006,256(1/2/3/4):354-364.

[19] 劉偉,文華,蔣明,等.大豆?jié)饪s蛋白對中華鱘幼魚生長、血脂和體成分的影響研究[J].淡水漁業(yè),2010,40(4):27-32.

[20] 黃文文,李弋,周歧存.不同品質魚粉對黃顙魚幼魚生長性能、飼料利用及肝臟抗氧化能力的影響[J].動物營養(yǎng)學報,2015,27(12):3744-3753.

[21] ARAGAO C,LEC C,DIAS J,et al.Soy protein concentrate as a protein source for Senegalese sole (SoleasenegalensisKaup 1858) diets:effects on growth and amino acid metabolism of postlarvae.[J].Aquaculture Research,2004,34(15):1443-1452.

[22] SALZE G,MCLEAN E,BATTLE P R,et al.Use of soy protein concentrate and novel ingredients in the total elimination of fish meal and fish oil in diets for juvenile cobia,Rachycentroncanadum[J].Aquaculture,2010,298(3/4):294-299.

[23] KAUSHIK S J,CRAVEDI J P,LALLES J P,et al.Partial or total replacement of fish meal by soybean protein on growth,protein utilization,potential estrogenic or antigenic effects,cholesterolemia and flesh quality in rainbow trout,Oncorhynchusmykiss[J].Aquaculture,1995,133(3/4):257-274.

[24] KISSINGER K R,GARCA-ORTEGA A,TRUSHENSKI J T.Partial fish meal replacement by soy protein concentrate,squid and algal meals in low fish-oil diets containingSchizochytriumlimacinum,for longfin yellowtailSeriolarivoliana[J].Aquaculture,2016,452:37-44.

[25] KISSIL G W,LUPATSCH I,HIGGS D A,et al.Dietary substitution of soy and rapeseed protein concentrates for fish meal,and their effects on growth and nutrient utilization in gilthead seabreamSparusaurataL[J].Aquaculture Research,2000,31(7):595-601.

[26] AI Q H,XIE X J.Effects of replacement of fish meal by soybean meal and supplementation of methionine in fish meal/soybean meal-based diets on growth performance of the southern catfishSilurusmeridionalis[J].Journal of the World Aquaculture Society,2010,36(4):498-507.

[28] BAEVERFJORD G,KROGDAHL A.Development and regression of soybean meal induced enteritis in Atlantic salmon,SalmosalarL.,distal intestine:a comparison with the intestines of fasted fish[J].Journal of Fish Diseases,2010,19(5):375-387.

[29] BUREAU D P,HARRIS A M,CHO C Y.The effects of purified alcohol extracts from soy products on feed intake and growth of chinook salmon (Oncorhynchustshawytscha) and rainbow trout (Oncorhynchusmykiss)[J].Aquaculture,1998,161(1/2/3/4):27-43.

[30] STOREBAKKEN T,SHEARER K D,ROEM A J.Availability of protein,phosphorus and other elements in fish meal,soy-protein concentrate and phytase-treated soy-protein-concentrate-based diets to Atlantic salmon,Salmosalar[J].Aquaculture,1998,161(1/2/3/4):365-379.

[31] NAHASHON S N,KILONZO-NTHENGE A K.Advances in soybean and soybean by-products in monogastric nutrition and health[M]//EL-SHEMY H.Soybean and nutrition.[S.l.]:InTech.,2011.

[32] ELANGOVAN A,SHIM K F.The influence of replacing fish meal partially in the diet with soybean meal on growth and body composition of juvenile tin foil barb (Barbodesaltus)[J].Aquaculture,2000,189(1/2):133-144.

[33] WANG C F,XIE S Q,ZHU X M,et al.Effects of age and dietary protein level on digestive enzyme activity and gene expression ofPelteobagrusfulvidracolarvae[J].Aquaculture,2006,254(1/2/3/4):554-562.

[35] ANDERSEN D E,REID S D,MOON T W,et al.Metabolic effects associated with chronically elevated cortisol in rainbow trout (Oncorhynchusmykiss)[J].Canadian Journal of Fisheries & Aquatic Sciences,1993,48(9):1811-1817.

[36] DIAS J,ALVAREZ M J,ARZEL J,et al.Dietary protein source affects lipid metabolism in the European seabass (Dicentrarchuslabrax)[J].Comparative Biochemistry and Physiology Part A:Molecular & Integrative Physiology,2005,142(1):19-31.

[37] CHENG Z J,HARDY R W.Protein and lipid sources affect cholesterol concentrations of juvenile Pacific white shrimp,Litopenaeusvannamei(Boone)[J].Journal of Animal Science,2004,82(4):1136-1145.

[38] GOULDING N J,GIBNEY M J,TAYLOR T G,et al.Reversible hypercholesterolaemia produced by cholesterol-free fish meal protein diets[J].Atherosclerosis,1983,49(2):127-137.

[39] KAUSHIK S J,COVS D,DUTTO G,et al.Almost total replacement of fish meal by plant protein sources in the diet of a marine teleost,the European seabass,Dicentrarchuslabrax[J].Aquaculture,2004,230(1/2/3/4):391-404.

[40] HOSSAIN M A,FOCKEN U,BECKER K.Antinutritive effects of galactomannan-rich endosperm of Sesbania (Sesbaniaaculeata) seeds on growth and feed utilization in tilapia,Oreochromisniloticus[J].Aquaculture Research,2015,34(13):1171-1179.

[41] HANSEN A C,ROSENLUND G,KARLSEN ?,et al.Total replacement of fish meal with plant proteins in diets for Atlantic cod (GadusmorhuaL.) Ⅰ-Effects on growth and protein retention[J].Aquaculture,2007,272(1/2/3/4):599-611.

[42] 林小植,羅毅平,謝小軍.飼料碳水化合物水平對南方鲇幼魚餐后糖酵解酶活性及血糖濃度的影響[J].水生生物學報,2006,30(3):304-310.

[43] 成艷波,張月星,董智勇,等.小麥蛋白替代魚粉及大豆蛋白對日本黃姑魚(Nibeajaponica)和黑鯛(Sparusmacrocephalus)血清生化指標及肝臟抗氧化指標的影響[J].漁業(yè)科學進展,2017,38(3):106-114.

[44] 馮建,王萍,何嬌嬌,等.大豆?jié)饪s蛋白替代魚粉對大黃魚幼魚生長、體成分、血清生化指標及肝組織學的影響[J].中國水產(chǎn)科學,2017,24(2):268-277.

[45] 王廣軍,吳銳全,謝駿,等.軍曹魚飼料中用豆粕代替魚粉的研究[J].大連海洋大學學報,2005,20(4):304-307.

[46] 于曉彤.不同蛋白源對草魚攝食反應、免疫應答及肉質的影響研究[D].碩士學位論文.北京:中國農(nóng)業(yè)科學院,2016.

[47] 付晶晶,黃燕華,曹俊明,等.五種植物蛋白源替代魚粉對花鱸血清生化指標、轉氨酶活性及抗氧化應激參數(shù)的影響[J].湖北農(nóng)業(yè)科學,2015,54(20):5087-5091,5095.

[48] 周顯青,梁洪蒙.擁擠脅迫下小鼠肝臟脂質過氧化物含量和抗氧化物酶活性的變化[J].動物學研究,2003,24(3):238-240.

[49] 石冬冬.大豆異黃酮的提取純化工藝及其抗氧化性的研究[D].碩士學位論文.哈爾濱:東北農(nóng)業(yè)大學,2002.

[50] 錢曦,王桂芹,周洪琪,等.飼料蛋白水平及豆粕替代魚粉比例對翹嘴紅鲌消化酶活性的影響[J].動物營養(yǎng)學報,2007,19(2):182-187.

[51] 吳莉芳,秦貴信,趙元,等.飼料中去皮豆粕替代魚粉比例對草魚消化酶活力的影響[J].中國畜牧雜志,2010,46(1):23-27.

[52] 吳婷婷,朱曉鳴.鱖魚、青魚、草魚、鯉、鯽、鰱消化酶活性的研究[J].中國水產(chǎn)科學,1994,1(2):10-17.

[53] HIDALGO M C,UREA E,SANZ A.Comparative study of digestive enzymes in fish with different nutritional habits.Proteolytic and amylase activities[J].Aquaculture,1999,170(3/4):267-283.

[54] AGRAWAL V P,SASTRY K V,KAUSHAB S K.Digestive enzymes of three teleost fishes[J].Acta Physiologica Academiae Scientiarum Hungaricae,1975,46(2):93-98.

[55] LIN S M,LUO L.Effects of different levels of soybean meal inclusion in replacement for fish meal on growth,digestive enzymes and transaminase activities in practical diets for juvenile tilapia,Oreochromisniloticus×O.aureus[J].Animal Feed Science and Technology,2011,168(1/2):80-87.

[56] XU Q Y,WANG C A,ZHAO Z G,et al.Effects of replacement of fish meal by soy protein isolate on the growth,digestive enzyme activity and serum biochemical parameters for juvenile Amur sturgeon (Acipenserschrenckii)[J].Asian-Australasian Journal of Animal Sciences,2012,25(11):1588-1594.

*Corresponding author, professor, E-mail: zhouqicun@nbu.edu.cn