“通督調(diào)神法”針刺對局灶性腦缺血大鼠認(rèn)知功能的影響

粟漩，錢虹，麥方永

（廣東省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院 康復(fù)科，廣東 佛山528200）

認(rèn)知障礙是腦卒中患者最常見的功能障礙之一，腦卒中患者3個月時認(rèn)知損害的發(fā)生率可達30%［1］，Ballard等［2］調(diào)查發(fā)現(xiàn)，年齡超過75歲的卒中患者腦卒中后3～15個月發(fā)生癡呆的概率高達9%。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn) “通督調(diào)神法”針刺能有效改善腦卒中患者的吞咽功能［3］，臨床實踐亦證明 “通督調(diào)神法”針刺治療神志相關(guān)疾病療效確切［4－5］。基于此，本研究通過觀察 “通督調(diào)神法”針刺對局灶性腦缺血模型大鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響，為 “通督調(diào)神法”針刺在腦卒中后認(rèn)知障礙的臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動物 SPF級雄性SD大鼠40只，體質(zhì)量250～300 g，廣州中醫(yī)藥大學(xué) （大學(xué)城校區(qū)）實驗動物中心提供 （合格證明編號：NO.44002100009037），飼養(yǎng)溫度在22℃～25℃，相對濕度在45%～60%，保持12小時明暗周期，自由進食與飲水。

1.2 儀器 Morris水迷宮設(shè)備 （廣州飛迪生物科技有限公司）。

1.3 模型制備 大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機分為假手術(shù)組10只與手術(shù)組30只，手術(shù)組參照改良Longa法制備左側(cè)大腦中動脈阻塞 （middle cerebral artery occlusion，MCAO）模型，假手術(shù)組僅分離動脈，不插入尼龍栓線。結(jié)果：假手術(shù)組死亡2只，手術(shù)組死亡6只，手術(shù)組大鼠再隨機分成模型組、針刺組、西藥組，每組各8只。

1.4 治療方法 ①假手術(shù)組不給予任何處理。②模型組不給予治療。③針刺組予 “通督調(diào)神法”針刺。操作：大鼠綁縛固定，參照大鼠穴位針灸圖譜［6］取百會、大椎、人中、風(fēng)府等穴，常規(guī)消毒后，用華佗牌1寸無菌針灸針針刺， “百會”向后斜刺 0.5寸， “大椎”直刺 0.5寸， “人中”直刺 0.5寸，“風(fēng)府”斜刺0.5寸，行針強度以大鼠安靜耐受為度，留針20 min。④西藥組予尼莫通12 mg／kg，按20 mL／kg灌胃。針刺及灌胃均為每日1次，連續(xù)治療15天。

1.5 行為學(xué)觀察 治療結(jié)束后第1天，所有大鼠進行水迷宮適應(yīng)性訓(xùn)練。治療結(jié)束后第2天和第4天進行Morris水迷宮測試，具體內(nèi)容包括：①定位航行實驗：將大鼠從第1象限邊緣面向水池壁放入水中，記錄大鼠在水池中尋找到平臺的時間（即逃避潛伏期）及游泳路徑，定位航行實驗上午、下午各2次。②空間探索實驗：完成最后1次定位航行實驗后撤除平臺，大鼠入水后自由游泳120 s，記錄每只大鼠的平臺穿越次數(shù)以及游泳軌跡。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 19.0分析數(shù)據(jù)，計量資料以x±s表示，組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較方差齊性時采用 LSD－t法， 方差不齊時采用 Dunnett＇s T3 法， P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 實驗動物情況 針刺組有2只大鼠因針刺意外死亡，假手術(shù)組和模型組各有1只狀態(tài)不佳，最終納入統(tǒng)計大鼠28只。

2.2 各組定位航行實驗結(jié)果比較 各組大鼠逃避潛伏期經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計學(xué)意義 （P<0.05）。兩兩比較：與假手術(shù)組比較，模型組的逃避潛伏期明顯增加 （P<0.05）；與模型組比較，針刺組和西藥組的逃避潛伏期明顯縮短 （P<0.05），且針刺組第4天的逃避潛伏期比西藥組更短 （P<0.05）。見表1、圖1。

表1 各組大鼠的定位航行實驗結(jié)果比較 （x±s）

圖1 定位航行實驗各組大鼠的游泳軌跡比較

2.3 各組空間探索實驗結(jié)果比較 各組大鼠平臺穿越次數(shù)經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計學(xué)意義 （P＜0.05）。兩兩比較：與假手術(shù)組比較，模型組平臺穿越次數(shù)減少 （P＜0.05）；與模型組比較，西藥組、針刺組平臺穿越次數(shù)增加 （P＜0.05），且針刺組多于西藥組 （P ＜0.05）。 見表 2、 圖 2。

表2 各組大鼠的空間探索實驗結(jié)果比較 （x±s）

圖2 空間探索實驗各組大鼠的游泳軌跡比較

3 討論

缺血性腦卒中是腦血管病的最常見類型［7］，據(jù)統(tǒng)計，我國缺血性腦卒中發(fā)病率高達 91.3／10 萬 ～ 263.1／10 萬［8］， 缺血性腦卒中和卒中后認(rèn)知障礙已成為我國最重要的公共衛(wèi)生問題之一。

腦卒中后認(rèn)知障礙屬中醫(yī)學(xué) “癡呆”范疇，該病多以陰精、氣血虧虛為本，以痰濁瘀血為標(biāo)，病位在腦。 《難經(jīng)·二十八難》： “督脈者……上至風(fēng)府，入屬于腦”、 “腦為元神之府”，可見督脈與腦、神志關(guān)系密切。 “通督調(diào)神法”是通過刺激督脈要穴以疏通督脈經(jīng)氣，最終達到醒腦調(diào)神功效的一種治療思路。針刺處方所選均為督脈穴位，其中 “百會”為 “三陽五會”， “大椎”與百會合用能調(diào)節(jié)一身陽氣， “風(fēng)府”為“風(fēng)邪所入之府，腦后之空竅” （《醫(yī)經(jīng)理解》）， “人中”為手足陽明經(jīng)與督脈的交會穴，針刺以上穴位能起到益氣通督、調(diào)神健腦的功效。本研究結(jié)果顯示，模型組的逃避潛伏期較假手術(shù)組增加，平臺穿越次數(shù)較假手術(shù)組減少，說明MCAO模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能出現(xiàn)障礙，而經(jīng) “通督調(diào)神法”針刺和尼莫通灌胃治療后，MCAO模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能明顯改善。

綜上所述， “通督調(diào)神法”針刺能改善局灶性腦缺血大鼠的認(rèn)知功能。 “通督調(diào)神法”針刺改善腦缺血大鼠認(rèn)知功能的作用機制是什么？遠期療效如何？ “通督調(diào)神法”針刺和尼莫通灌胃對缺血性認(rèn)知障礙是否有協(xié)同治療作用？以上問題均值得進一步研究探討。

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