冰片的研究進展

成都市雙流區(qū)婦幼保健院，四川 成都 610200

冰片為芳香開竅藥“涼開”之代表藥，始載于《新修本草》，系龍腦香科植物龍腦香樹脂的加工品。明代醫(yī)家李時珍《本草綱目》記載冰片具“通諸竅，散郁火”之功。其“開竅”的功用與現(xiàn)代藥理研究結(jié)果相符合，證明其確有促進藥物透過血腦屏障(blood brain barrier,BBB)的作用。臨床常作為麝香的輔助藥，可用于寒閉及熱閉神昏。天然冰片、合成冰片、艾片均被《中國藥典》2015版收載。

1 三種冰片的來源、成分及主產(chǎn)地

天然冰片是從龍腦香的樹脂和揮發(fā)油中提取的冰較純的右旋龍腦(d-borneo1)[1]。近代以樟腦、松節(jié)油等為原料經(jīng)化學(xué)反應(yīng)人工合成的，稱為合成冰片，又稱機片，為目前臨床所常用，除含有不低于55%消旋龍腦外，還含有約35%的異龍腦以及其它成分。艾片是菊科植物艾納香(Blumea balsamifeara DC.)葉片和嫩枝的加工品，始見于《增訂偽條辨》(1928年版)。艾納香喜溫暖氣候環(huán)境，貴州羅甸縣為我國的道地產(chǎn)區(qū)，另在海南、廣東，廣西、等地均有分布，作為臨床使用的冰片來源之一。艾片主要為左旋龍腦。天然冰片是《中國藥典》(2005版)新增的品種，1987年江西省吉安地區(qū)林科所發(fā)現(xiàn)[2]。2007年新晃縣已開發(fā)成年產(chǎn)35噸天然冰片的現(xiàn)代化工業(yè)生產(chǎn)基地。合成冰片生產(chǎn)工藝較為成熟，生產(chǎn)過程中的使用成本低。

2 三種冰片的提取工藝

天然冰片的提取主要利用水蒸氣蒸餾法和通汽蒸餾法[3]。通汽蒸餾法:采用高壓蒸汽直接用于枝葉，控制溫度在180℃，萃取35～40 min,用冷凝器進行冷凝，使精油、天然冰片、水等同時分離，此法制備可使產(chǎn)能提高20倍，另外還有學(xué)者采用超聲波強化水蒸氣蒸餾法、超臨界萃取法等。冰片的純化工藝主要有重結(jié)晶法、化學(xué)純化法等，其中重結(jié)晶法是利用樟腦與鹽酸羥胺等發(fā)生反應(yīng)后，再進行重結(jié)晶得到高純度的左旋冰片，工藝成熟。

合成冰片是臨床使用的主要來源，主要通過樟腦的還原反應(yīng)或松節(jié)油中α-蒎烯(α-Pinene)經(jīng)過酯化、水解得到。α-Pinene主要用于合成松油醇、芳樟醇以及一些檀香型香料，有松木、針葉及樹脂樣的氣息。常用的3種酯化反應(yīng)為：①α-Pinene+草酸=草酸龍腦酯；②α-Pinene+苯氧乙酸=苯氧乙酸龍腦酯；③α-Pinene+氯乙酸=氯乙酸龍腦酯。上述3種酯類再經(jīng)水解即得合成冰片。

艾片可通過艾納香的新鮮葉片水蒸氣蒸餾冷卻，再壓榨去油，最后提煉結(jié)晶劈削成片狀即成。有研究[4]對艾納香葉片6種預(yù)處理方法(水蒸氣蒸餾-溶劑萃取法、蒸餾萃取法、溶劑浸提法、超聲輔助提取法、微波輔助提取法、超聲-微波協(xié)同萃取法)對比發(fā)現(xiàn)，若同時測定左旋龍腦、樟腦和異龍腦，水蒸氣蒸餾-溶劑萃取法可行(回收率100%～105%)。若僅測定左旋龍腦，超聲-微波協(xié)同萃取法即可(回收率87%)。比較上述6種方法的時間、能量、溶劑等因素，消耗最少的是超聲-微波協(xié)同萃取法，微波功率100W，提取時間30s，可作為快速測定艾納香中左旋龍腦的預(yù)處理選擇之一。采收期的不同對艾納香葉的含量也存在影響，有研究發(fā)現(xiàn)[4]每年10月15日至次年1月15日采收的樣品中左旋龍腦含量較高，即為最佳采收期。

3 三種冰片的鑒別方法

3.1 性狀鑒別 天然冰片、合成冰片、艾片外觀形狀極為相似，三者均為片狀或塊狀結(jié)晶，色白，氣芳香，火試有濃煙，其中天然冰片散發(fā)的清涼味相對較弱，艾片部分呈顆粒狀結(jié)晶，火試為黑煙。單獨以性形狀鑒別雖可以對其進行區(qū)分，但難度較大。

3.2 旋光測定 由于三種冰片的來源不同，其化學(xué)成分存在一定差異。按藥典規(guī)定，天然冰片比旋度為+34°～+38°，艾片-36.5°～-38.5°。李海燕等[5]按《中國藥典》2010版一部附錄VIIE旋光度測定法，結(jié)果顯示三者的旋光度有較大差異，天然冰片主要成分為右旋龍腦，比旋度為(+35.1°)，合成冰片為消旋龍腦，其比旋度為(0°)，艾片為左旋龍腦，其比旋度(-37.8°)，由此可見，用旋光測定法進行3種冰品冰片鑒別，方法可靠。

3.3 含量測定 冰片目前常用的含量測定方法有：氣相色譜法、氣相色譜法質(zhì)譜聯(lián)用法、衍生化高效液相色譜法、薄層掃描法、薄層層析法、紅外光譜法、紫外-可見光譜法及重量法。其中氣相色譜法以及氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用能同時對雜質(zhì)進行測定。據(jù)《中國藥典》(2015版)記載[6]，在色譜條件為聚乙二醇20000(PEG-20M)、毛細管柱(柱長為30 m，內(nèi)徑0.53 mm，膜厚度為1.0 μm)、柱溫為170 ℃，可以對龍腦、異龍腦及樟腦很好地進行分離。

4 三種冰片的主要藥理學(xué)作用

4.1 鎮(zhèn)靜、醒腦 冰片可明顯延長戊巴比妥鈉所致小鼠睡眠時間，產(chǎn)生協(xié)同作用。異龍腦作用明顯，可能與其脂溶性有關(guān)[7]。在培養(yǎng)的海馬椎體神經(jīng)元上，冰片以open-channel blocker的方式抑制內(nèi)向電流(IGABA)，洗去冰片后，抑制作用迅速消失，說明冰片可能通過抑制其海馬神經(jīng)元受體來提高大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)的興奮性，從而發(fā)揮其醒腦功效[8]。

4.2 腦保護 倪朱漠認為冰片“一切卒暴氣閉，痰結(jié)神昏之病，非此不能治也”。研究顯示[9]，艾片及合成冰片均能明顯延長小鼠的存活時間，消除腦損傷時白細胞與內(nèi)皮細胞的粘附，有助于外傷腦水腫的恢復(fù)，說明艾片與合成冰片均有腦保護作用。另外，均可有效減輕MACO大鼠NO造成的損傷級聯(lián)反應(yīng)[11]，減輕腦損傷。筆麗梅等[10]認為合成冰片可以改善缺血腦區(qū)能量代謝，從而改善小鼠腦缺血后記憶障礙。倪彩霞等[11]觀察芳香開竅藥及其不同提取部位對腦缺血再灌注損傷小鼠BBB通透性的影響發(fā)現(xiàn)，麝香、合成冰片能對抗不完全缺血再灌注損傷模型小鼠BBB通透性的異常增高，表現(xiàn)出對病理狀態(tài)下BBB的保護作用。冰片與丹參相配伍協(xié)同增效，可用于臨床缺血性腦卒中的治療[12]。周宗元等[13]研究發(fā)現(xiàn)艾片與合成冰片可以通過降低腦水腫，抑制鈣離子以發(fā)揮腦保護作用。急救時以艾片為佳。

4.3 抗心肌缺血 據(jù)現(xiàn)代藥理研究證實，冰片有減輕缺血性心肌損傷，降低心肌耗氧量的作用。與蘇合香配伍組成的蘇冰滴丸對心肌缺血損傷有明顯的保護作用。對比研究[14]天然冰片與合成冰片抗急性心肌缺血作用，由天然冰片配伍組成的復(fù)方丹參滴丸能顯著提高SOD 活性，降低MDA含量，改善大鼠心肌缺血心電圖的變化，與同劑量合成冰片組比較無統(tǒng)計學(xué)差異，但天然冰片組3.04 g/kg劑量組在30 min前各時間點心電圖恢復(fù)正常的例數(shù)有優(yōu)于合成冰片組的趨勢。

4.4 促進藥物吸收 冰片促進藥物吸收主要通過3種方式[15]。一是增加BBB的通透性，促進其他藥物透過BBB；二是提高其他藥物的血藥濃度，提高其他藥物生物利用度，發(fā)揮其“佐使則有功”特點；三是促透皮吸收，其促透皮作用主要是改變皮膚的角質(zhì)層的脂質(zhì)分子排列以增加流動性。達到一定濃度的冰片可以促進藥物的鼻腔吸收、口腔黏膜吸收、腸段吸收作用。楊樂等[16]以小鼠微血管內(nèi)皮細胞制備BBB模型，發(fā)現(xiàn)冰片可以促進葛根素(P-gp底物)透過BBB，顯著優(yōu)于單獨給藥葛根素的吸收率，其機制可從細胞的相關(guān)緊密連接蛋白的表達水平來考慮。燈盞花素其水溶性較高，難以透過BBB，但與冰片聯(lián)合用藥后明顯增強了藥理效應(yīng)，這可能與上調(diào)ZO-1、Claudin-5的表達相關(guān)[17]，對腦缺血再灌注大鼠具有同樣的促透作用。

冰片近年來多用于配伍各類抗腫瘤藥物，通過開發(fā)新劑型來提高其生物利用度。梁詩婷等[18]將不同濃度冰片配伍丹酚酸，測試在大鼠不同腸段的吸收率，在一定范圍內(nèi)增加冰片濃度后，丹酚酸B，紫草酸、迷迭香吸收速率有所增加。用于治療消化道腫瘤的5-氟尿嘧啶口服給藥后血藥濃度低，天然冰片、艾片、合成冰片均可不同程度的提高5-氟尿嘧啶在小腸的吸收[19]。劉冰壘等[20]認為促進鼻腔吸收的機制可能與抑制MUC5AC的基因表達有關(guān)，延長藥物在鼻腔的滯留時間后使藥物“上行入腦”增加了新西蘭兔腦脊液中川芎嗪的濃度。冰片作為吸收促進劑可顯著提高P-gp蛋白底物檸檬苦素在大鼠體內(nèi)的血藥濃度[21]，對檸檬苦素的劑型設(shè)計提供思路。賴玲等[22]研究結(jié)果顯示，冰片對三七總皂苷(PNS)在小腸段的促吸收作用優(yōu)于其他促吸收劑，如卡波姆、聚山梨酯-80以及牛膽鹽和殼聚糖等，體現(xiàn)了冰片作為使藥的“引經(jīng)”作用。但實驗證實[23]，冰片對CGA通過體外吸收模型Caco-2細胞單層膜的轉(zhuǎn)運過程沒有促進作用。

4.5 其他 趙雨千等[24]研究顯示,在新型戰(zhàn)傷急救止血劑的止痛成分研究中，沸石-冰片組大鼠術(shù)后痛閾明顯高于對照組,可有效控制急性疼痛(P<0.05)，說明沸石-冰片樣品對急性疼痛具有鎮(zhèn)痛作用。有研究表明[25]，不同冰片對LPS 80 μg/kg誘導(dǎo)的發(fā)熱模型大鼠體溫的影響持續(xù)效應(yīng)及強弱呈艾片>天然冰片>合成冰片趨勢。因此，治溫病發(fā)熱組方中建議用艾片為宜。

5 小結(jié)

綜上可知，古代醫(yī)藥學(xué)家對冰片的記載頗多，古用多為天然冰片，因其資源稀缺，售價昂貴，現(xiàn)臨床多用合成冰片替代，《藥典》(2010版)中又載有植物艾納香的提取物艾片作為冰片使用。據(jù)統(tǒng)計，《藥典》(2015版)中含冰片的成方制劑達160余種，不同來源的冰片其四氣五味亦有不同，對其來源、成分、產(chǎn)地及鑒別方法、臨床藥理作用作出嚴格區(qū)分顯得尤為重要。從其“四氣”的記載可知，天然冰片為“涼”，合成冰片與艾片均為“微寒”，三者歸心、脾、肺經(jīng)。從化學(xué)成分來看，天然冰片主成分為右旋龍腦，分布于江西、湖南一帶；艾片主成分為左旋龍腦，主產(chǎn)于云南、廣西、貴州等地。合成冰片含龍腦、異龍腦及少量樟腦。3種冰片雖性狀極為相似，但仍有細微差別：天然冰片的清涼味較弱，艾片呈顆粒狀結(jié)晶，火試為黑煙，鑒別以旋光測定法較為可行；冰片具有抗炎鎮(zhèn)痛、抗心肌缺血、腦保護、促透等作用，多用于促進吸收劑，發(fā)揮其“佐使則有功”之效。用于急救或溫?zé)岵r以艾片為最優(yōu)選擇。

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