食品微生物檢驗(yàn)方法分析

□ 王孟陽(yáng) 滄州市食品藥品檢驗(yàn)所

食品安全直接影響到人們的健康安全，所以檢驗(yàn)和控制食品微生物對(duì)人類(lèi)的健康生活具有重大意義。微生物并非生物學(xué)中的某個(gè)專(zhuān)業(yè)名詞，它指的是所有結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的多個(gè)細(xì)胞、單細(xì)胞或者沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物。微生物群體種類(lèi)十分復(fù)雜，包含細(xì)胞和非細(xì)胞兩個(gè)類(lèi)別。因此，食品微生物檢測(cè)起來(lái)也是過(guò)程繁瑣，根據(jù)研究對(duì)象特性的不同，選擇的檢測(cè)方式也會(huì)不一樣[1]。食品微生物是評(píng)判食品衛(wèi)生質(zhì)量安全的主要指標(biāo)，通過(guò)檢驗(yàn)食品微生物，分析食品是否被細(xì)菌污染以及污染的程度，為食品衛(wèi)生管理部門(mén)提供科學(xué)有效的數(shù)據(jù)，及時(shí)避免食品中毒、人畜共患病的情況發(fā)生，以確保人們的飲食健康。下文就食品微生物的幾種不同檢驗(yàn)方法進(jìn)行分析論述。

1 微生物培養(yǎng)法

1.1 傳統(tǒng)微生物培養(yǎng)鑒定法

傳統(tǒng)的微生物培養(yǎng)檢驗(yàn)法實(shí)際就是通過(guò)分析各種微生物所需的營(yíng)養(yǎng)及其特性等要求，展開(kāi)諸多檢驗(yàn)步驟，例如根據(jù)微生物特性進(jìn)行分離培養(yǎng)、増菌以及化檢驗(yàn)等，計(jì)算食品中所有微生物的數(shù)量。傳統(tǒng)微生物培養(yǎng)檢驗(yàn)方法通常不會(huì)出現(xiàn)因?yàn)榧訇幮曰蛘呒訇?yáng)性導(dǎo)致判斷失誤，鑒定的結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠，但其實(shí)際檢驗(yàn)操作起來(lái)流程太過(guò)復(fù)雜和繁瑣，并且檢驗(yàn)的時(shí)間也比較長(zhǎng)。

1.2 改進(jìn)后的微生物培養(yǎng)鑒定法

食品微生物改進(jìn)后的鑒定方法就是在傳統(tǒng)的鑒定方法上加入抑菌劑加以控制，用熒光物質(zhì)做標(biāo)記，用指示劑進(jìn)行判斷，用預(yù)處理的方式減短增加菌種的時(shí)間，將諸多的檢驗(yàn)流程有效地合并起來(lái)，保證微生物培養(yǎng)、鑒定一步到位，實(shí)現(xiàn)快速鑒定。

2 商品化快速檢驗(yàn)法

2.1 染色成像計(jì)算法

染色成像計(jì)算法就是通過(guò)染料對(duì)微生物細(xì)胞進(jìn)行染色，再通過(guò)熒光過(guò)濾膜，同時(shí)，借助紫外線(xiàn)顯微鏡進(jìn)行進(jìn)一步的觀察，通過(guò)仔細(xì)觀察，快速測(cè)定出微生物活菌的數(shù)目。鏡頭下面呈現(xiàn)熒光橙的是有生命的細(xì)胞，顏色呈現(xiàn)出熒光綠色的是沒(méi)有死的細(xì)胞。這種檢測(cè)方法耗時(shí)只有半個(gè)小時(shí)左右。若微生物樣品的含菌數(shù)量較低，依然要增加菌群數(shù)量，再進(jìn)行檢驗(yàn)。染色成像計(jì)算法不能檢測(cè)出微生物的種類(lèi)，只能檢驗(yàn)出微生物的數(shù)量[2]。

2.2 定量PCR計(jì)數(shù)法

PCR技術(shù)就是在微生物體外快速放大DNA片段，在這種DNA的擴(kuò)增過(guò)程中，用熒光染劑檢測(cè)PCR循環(huán)后產(chǎn)物的總數(shù)量，這種檢測(cè)方式能夠針對(duì)具體的微生物展開(kāi)檢驗(yàn)。這種方法在金黃色葡萄球菌的測(cè)定中已有廣泛的應(yīng)用。定量PCR檢測(cè)技術(shù)具有諸多優(yōu)勢(shì)，如檢測(cè)速度快、針對(duì)性和專(zhuān)一性強(qiáng)，靈敏度高等，但由于其假陽(yáng)性概率高、檢測(cè)重復(fù)性高等缺點(diǎn)，所以該檢驗(yàn)方法只能作為初級(jí)篩選的手段技術(shù)。

3 現(xiàn)代微生物檢驗(yàn)法

3.1 免疫學(xué)技術(shù)法

免疫學(xué)計(jì)數(shù)法是在抗原抗體特異性共同反應(yīng)的基礎(chǔ)上，通過(guò)免疫放大技術(shù)，讓病原體生成球蛋白[3]。免疫學(xué)技術(shù)的最大特點(diǎn)就是靈敏度高，増菌后可以直接篩選，不用再對(duì)樣品進(jìn)行選擇性分離。根據(jù)檢測(cè)方法的不同特征，免疫學(xué)技術(shù)法還能分為免疫擴(kuò)散反應(yīng)法、凝集反應(yīng)法以及免疫熒光反應(yīng)法等。

3.2 氣相色譜法

微生物經(jīng)過(guò)分解、提取、硅烷化和甲基化等處理過(guò)后，其細(xì)胞早就被化解城多個(gè)化學(xué)成分，因此根據(jù)氣相色譜分析儀對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分析，得出相應(yīng)的色譜，再結(jié)合色譜呈現(xiàn)的峰值能夠精確地檢驗(yàn)出食品中含有的微生物。目前。氣相色譜法已廣泛應(yīng)用于檢測(cè)酵母菌、霉菌以及一些常見(jiàn)的細(xì)菌等。

3.3 抗阻測(cè)定法

抗阻測(cè)定法就是將食品微生物樣品分別放在具備不同底物的培養(yǎng)基上，對(duì)它們進(jìn)行培養(yǎng)，再通過(guò)抗阻測(cè)量?jī)x檢驗(yàn)培養(yǎng)基上微生物的生長(zhǎng)情況，分析其生長(zhǎng)特點(diǎn)，從而確定微生物的類(lèi)別。抗阻測(cè)定法具有重復(fù)率高、特異性、敏感性高以及檢驗(yàn)結(jié)果所需時(shí)長(zhǎng)較短等特點(diǎn)?？棺铚y(cè)定法可以用于酵母菌、支原體、細(xì)菌以及霉菌等這類(lèi)微生物的檢測(cè)。

4 結(jié)語(yǔ)

最近幾年來(lái)，世界各國(guó)都發(fā)生過(guò)不少?lài)?yán)重的食品安全問(wèn)題，因?yàn)槭称肺⑸镂廴径鴮?dǎo)致的質(zhì)量問(wèn)題對(duì)人類(lèi)的身體健康造成了嚴(yán)重威脅，怎樣對(duì)食品微生物進(jìn)行快速有效的檢驗(yàn)和分析，保障人們的健康飲食，這還需要全社會(huì)的共同努力。隨著社會(huì)的不斷發(fā)展，人們生活水平的不斷提高，食品安全問(wèn)題早已逐漸成為世界性公共衛(wèi)生問(wèn)題，食品安全將直接關(guān)系到人類(lèi)的健康。本文主要列舉了幾個(gè)方面的食品微生物的檢測(cè)技術(shù)，雖然有些技術(shù)還有待進(jìn)一步完善，有的還處在初級(jí)階段，但其檢驗(yàn)運(yùn)用價(jià)值逐漸突出。