保健食品中鉻測定的方法學(xué)驗(yàn)證

□ 黃玲珠 龐 恩 李 庚 廣州金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心有限公司

鉻是葡萄糖代謝中的一種物質(zhì)，對膽固醇、脂肪和蛋白質(zhì)的合成十分重要。健康的食物能促進(jìn)鉻的吸收。從減肥到降低膽固醇，到擺脫抑郁癥，再到治療低血糖癥和糖尿病，都需要鉻元素。許多全麥?zhǔn)称?、肉類、奶制品，甚至啤酒中都含有鉻。顯然，體內(nèi)鉻元素水平正常對血糖代謝是必不可少的。同時，鉻還有助于促進(jìn)葡萄糖代謝的正?；?，部分糖尿病患者服用鉻元素來提高胰島素的含量。因此，富鉻類保健食品的功效指標(biāo)顯得尤其重要。

本文旨在通過對方法的檢出限、定量限、專屬性、重復(fù)性、中間精密度及準(zhǔn)確度等指標(biāo)進(jìn)行驗(yàn)證，證明該檢測方法對保健食品中鉻含量測定的可行性[1,2]。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

1.1.1 試劑

GB/T 6682中規(guī)定的一級水；硝酸（HNO3)，優(yōu)級純；30%過氧化氫（H2O2），優(yōu)級純；1 %的硝酸溶液；磷酸二氫銨溶液（20g/L）。

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：鉻元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000 mg/L），GBW08614，來自中國計(jì)量科學(xué)研究院。

1.1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：鉻元素標(biāo)準(zhǔn)中間儲備液1（10 mg/L）：用1 %的硝酸溶液定容至刻度，搖勻備用。

鉻元素標(biāo)準(zhǔn)中間儲備液2（1 mg/L）：用1 %的硝酸溶液定容至刻度，搖勻備用[3]。

鉻標(biāo)準(zhǔn)系列工作曲線：分別精密吸取適當(dāng)體積的鉻元素標(biāo)準(zhǔn)中間儲備液2（1 mg/L）于容量瓶中，用1 %硝酸溶液定容至刻度，混勻，此標(biāo)準(zhǔn)使用液中鉻的濃度為0、5.0、10. 0、15. 0、20. 0、30. 0 μg/L。

1.1.3 主要儀器與設(shè)備

原子吸收光譜儀，配石墨爐原子化器，附鉻空心陰極燈，Z2010，日立；微波消解儀，ETHOS UP，麥爾斯通；趕酸器，VB24，萊伯泰科；電子天平，SQP QUINTIX 224-1CN，賽多利斯；超純水機(jī)，Milli-Q IQ7000，默克。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 樣品前處理

于微波消解內(nèi)罐中稱取樣品約0.25 g（精確至0.0001 g），于趕酸器上90℃預(yù)消解30 min，旋緊罐蓋，按照微波消解儀標(biāo)準(zhǔn)操作步驟設(shè)定條件、安裝罐子[4]。微波消解儀消解完畢后取出，緩慢打開罐蓋泄壓，將消解罐放在趕酸器上于120 ℃加熱120 min后用一級水轉(zhuǎn)移到容量瓶中，冷卻至室溫，再用一級水定容至50 mL，搖勻，同時做空白試驗(yàn)。微波消解儀儀器參數(shù)見表1。

1.2.2 儀器條件參數(shù)設(shè)定

打開空心陰極燈進(jìn)行預(yù)熱30 min，儀器測定參數(shù)見表2。

1.2.3 測定標(biāo)準(zhǔn)曲線

將標(biāo)準(zhǔn)系列溶液工作液按濃度由低到高的順序分別取10、5μL磷酸二氫銨溶液（20g/L），注入石墨管，原子化后測其吸光度值，以濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線[5]。

1.2.4 測定樣品

在與測定標(biāo)準(zhǔn)溶液相同的實(shí)驗(yàn)條件下，將空白溶液和樣品溶液分別取10、5μL磷酸二氫銨溶液（20g/L），注入石墨管，原子化后測其吸光度值，與標(biāo)準(zhǔn)系列溶液比較定量。

表1 微波消解儀儀器參數(shù)

表2 原子吸收分光譜儀儀器參數(shù)

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

對 0 、5.0、10.0、15.0、20.0、30.0μg/L這一系列的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線進(jìn)行測定，結(jié)果見表3。

圖1以鉻溶液濃度為橫軸，儀器測定吸光值為縱坐標(biāo)，線性回歸方程為y=0.0090x+0.0063，相關(guān)系數(shù)R=0.9992＞0.9990，滿足分析需求。

表3 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線測定結(jié)果

圖1 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

圖2 儀器信號圖

2.2 檢出限與定量限

2.3 專屬性

選取空白樣品，陽性樣品，陽性加標(biāo)樣品進(jìn)行試驗(yàn)，通過儀器信號圖進(jìn)行分析。信號如圖2所示。

通過空白樣品、陽性樣品及陽性加標(biāo)樣品的信號圖可以看出，空白樣品儀器基本無吸光值，陽性樣品于357.9 nm處有明顯的吸收信號，陽性加標(biāo)樣品于357.9 nm處有明顯的信號值疊加[7]。因此可以得出結(jié)論，采用原子吸收光譜儀于357.9 nm處可以準(zhǔn)確測定鉻元素，滿足分析需求。

2.4 重復(fù)性

平行稱取7個樣品，對樣品進(jìn)行前處理，使用原子吸收光譜儀對樣品進(jìn)行測定，對7個平行樣品的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD進(jìn)行計(jì)算。試驗(yàn)結(jié)果見表4。

根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，均能滿足GB/T 27404-2008 《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》中規(guī)定的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD（%）要求。

2.5 準(zhǔn)確度

根據(jù)重復(fù)性試驗(yàn)，7次平行樣品的平均值為186.6mg/kg，以此為基準(zhǔn)，設(shè)計(jì)3種不同濃度，每種濃度分別制備3份平行品溶液進(jìn)行測定，用9份樣品的測定結(jié)果進(jìn)行評價。髙、中、低濃度樣品加標(biāo)量與所取樣品中鉻測定濃度之比控制在1.2∶1，1∶1，0.8∶1范圍內(nèi)[8]。

對樣品進(jìn)行前處理，同時做空白試驗(yàn)，采用原子吸收光譜儀進(jìn)行測定，分析結(jié)果見表5。

根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，均能滿足GB/T 27404-2008 《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》中回收率95%～105%的相關(guān)規(guī)定。

2.6 中間精密度

由相同人員連續(xù)三天測試同一批號樣品，稱取平行樣，對樣品進(jìn)行前處理，結(jié)果分別為186.4、178.5、184.3、191.6、191.2、186.2 mg/kg，樣品中鉻含量測定結(jié)果的RSD為2.59 %[9]。

由三個不同人員，相同儀器，對同一批次樣品，稱取平行樣，對樣品進(jìn)行前處理，結(jié)果分別為181.4、177.9、187.1、184.2、181.6、181.5mg/kg， 樣品中鉻含量測定結(jié)果的RSD為1.70 %。

根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，同一人員連續(xù)3天對同一樣品進(jìn)行測定，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為2.59%，三個人員對同一樣品進(jìn)行測定，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為1.70%。根據(jù)GB/T 27404-2008 《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》中對精密度的規(guī)定，含量范圍為100～1000 mg/kg的精密度要求為RSD＜5.3 %，故本次試驗(yàn)滿足需求。

表4 重復(fù)性試驗(yàn)測定結(jié)果

表5 加標(biāo)試驗(yàn)測定結(jié)果

3 結(jié)論

本文通過微波消解對樣品進(jìn)行前處理，采用原子吸收光譜儀對樣品進(jìn)行分析。通過對各種指標(biāo)對該方法進(jìn)行驗(yàn)證，均能符合試驗(yàn)需求，故本試驗(yàn)方法能準(zhǔn)確測定保健食品中鉻的含量。