當(dāng)歸芍藥散對圍絕經(jīng)期模型大鼠子宮結(jié)構(gòu)及雌激素受體表達的影響Δ

丁巖，華永慶，林紫微，楊菲，洪敏（1.南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，南京210023；2.江蘇省中藥藥效與安全性評價重點實驗室，南京210023）

當(dāng)歸芍藥散對圍絕經(jīng)期模型大鼠子宮結(jié)構(gòu)及雌激素受體表達的影響Δ

丁巖1，2＊，華永慶1，2#，林紫微1，2，楊菲1，2，洪敏1，2（1.南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，南京210023；2.江蘇省中藥藥效與安全性評價重點實驗室，南京210023）

目的：探討當(dāng)歸芍藥散（DSS）對圍絕經(jīng)期模型大鼠子宮結(jié)構(gòu)及子宮腔上皮和基質(zhì)中雌激素受體α（ERα）、雌激素受體β（ERβ）表達的影響。方法：將40只雌性SD大鼠隨機分為假手術(shù)組（生理鹽水）、模型組（生理鹽水）和DSS低、中、高劑量組（1.94、3.87、7.44 g/kg），每組8只。除假手術(shù)組大鼠切除卵巢附近脂肪外，其余各組大鼠切除雙側(cè)卵巢以建立圍絕經(jīng)期模型。造模成功后，大鼠每天ig給藥1次，連續(xù)8周。給藥結(jié)束后，稱定大鼠子宮濕質(zhì)量，觀察大鼠子宮形態(tài)和結(jié)構(gòu)的變化，測定子宮腔上皮及基質(zhì)中ERα、ERβ表達水平。結(jié)果：與假手術(shù)組比較，模型組大鼠子宮內(nèi)膜柱狀上皮呈低柱狀，固有層、肌層與漿膜層均顯著萎縮，基質(zhì)細胞可見明顯核固縮，子宮濕質(zhì)量、宮腔面積、內(nèi)膜厚度及腺體數(shù)量均顯著減少（P＜0.01），子宮腔上皮及基質(zhì)中ERα、ERβ表達水平均顯著降低（P＜0.01）。與模型組比較，DSS各劑量組大鼠子宮內(nèi)膜及固有層萎縮程度差異無統(tǒng)計學(xué)意義，但固有層內(nèi)腺體豐富，子宮濕質(zhì)量、宮腔面積、內(nèi)膜厚度以及子宮腔上皮和基質(zhì)中ERα表達水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），但DSS中、高劑量組大鼠子宮腺體數(shù)量顯著增加（P＜0.01），DSS高劑量組大鼠子宮腔上皮及基質(zhì)中ERβ表達水平顯著升高（P＜0.05或P＜0.01）。結(jié)論：DSS對圍絕經(jīng)期模型大鼠子宮腺體萎縮癥狀的改善作用不明顯，但可增加模型大鼠的腺體數(shù)量，這可能與提高子宮腔上皮及基質(zhì)中ERβ表達水平有關(guān)。

當(dāng)歸芍藥散；圍絕經(jīng)期；子宮結(jié)構(gòu)；雌激素受體α；雌激素受體β；大鼠

圍絕經(jīng)期綜合征（Menopause syndrome，MPS）是指婦女在絕經(jīng)前后雌激素水平波動或下降所致的以自主神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂為主，伴有神經(jīng)心理癥狀的一組癥候群，中醫(yī)學(xué)稱之為“絕經(jīng)前后諸證”。激素替代療法（Hormone replacement therapy，HRT）是目前臨床治療MPS的主要方法，但長期應(yīng)用HRT會增加卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌的患病風(fēng)險[1]。中醫(yī)秉承整體論治、辨證施治的觀點，治療MPS具有獨特的效果和優(yōu)勢[2]。當(dāng)歸芍藥散（DSS）出自張仲景所著《金匱要略·婦人篇》，方中當(dāng)歸、芍藥、川芎具有疏肝理氣、活血化瘀功效；白術(shù)、茯苓、澤瀉具有利水滲濕功效[3]，臨床用于治療圍絕經(jīng)期婦女潮熱、失眠、焦慮、水腫有較好療效[4-5]。HRT治療MPS會使女性子宮內(nèi)膜過度增生[6]，然而DSS在治療MPS的同時，對子宮的影響目前未見報道。本研究建立大鼠卵巢摘除模型模擬圍絕經(jīng)期卵巢激素下降病理過程，觀察DSS對模型大鼠子宮結(jié)構(gòu)及雌激素受體α（ERα）、雌激素受體β（ERβ）表達的影響，為安全應(yīng)用DSS治療MPS提供參考。

1 材料

1.1 儀器

BSA224S-CW電子天平[賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司]；EG1150包埋儀、RM 2245半自動輪轉(zhuǎn)式切片機、HI 1210攤片機（上海徠卡儀器有限公司）；BX43手動系統(tǒng)顯微鏡、Mantra定量病理成像分析系統(tǒng)（美國Perkin Elmer公司）。

1.2 藥材

當(dāng)歸為傘形科植物當(dāng)歸[Angelica sinensis（Oliv.）Diels]的干燥根，來源于甘肅岷縣當(dāng)歸生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GAP）種植基地；川芎為傘形科植物川芎（Ligusticum chuanxiong Hort.）的干燥根莖，來源于四川彭州川芎GAP種植基地；白芍為毛茛科植物芍藥（Paeonia lactiflora Pall.）的干燥根，產(chǎn)地為安徽亳州；白術(shù)為菊科植物白術(shù)（Atractylodesmacrocephala Koidz.）的干燥根莖，產(chǎn)地為內(nèi)蒙古海格爾；茯苓為多孔菌科真菌茯苓[Poria cocos（Schw.）Wolf]的干燥菌核，產(chǎn)地為浙江松陽；澤瀉為澤瀉科植物澤瀉Alisma orientalis（Sam.）Juzep.的干燥塊莖，產(chǎn)地為四川彭州。以上藥材經(jīng)南京中醫(yī)藥大學(xué)段金廒教授鑒定，均符合2015年版《中國藥典》（一部）相關(guān)藥材項下標(biāo)準。

1.3 藥品與試劑

兩步法免疫組化試劑盒、二氨基聯(lián)苯胺（DAB）顯色試劑盒（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，批號：K166616J、K166614A）；ERα抗體、ERβ抗體[艾博抗（上海）貿(mào)易有限公司，批號：GR277257-2、GR269422-4]；其余試劑均為分析純。

1.4 動物

SPF級3月齡SD大鼠40只，♀，體質(zhì)量（250±20）g，由浙江省實驗動物中心提供，動物生產(chǎn)許可證號：SCXK（浙）2014-0001。

2 方法

2.1 DSS提取物的制備

DSS由當(dāng)歸3 g、芍藥16 g、川芎8 g、茯苓4 g、澤瀉8 g、白術(shù)4 g組成。稱取10倍處方量的藥材，粉碎至40目，水加熱提取2次，第1次加入10倍量水回流提取2 h，第2次加入8倍量水回流提取1.5 h，合并2次提取液，減壓回收溶劑，濃縮至生藥量為2 g/mL，即得DSS水提取物。殘渣趁熱晾干，用80%乙醇回流提取2次，第1次加入10倍量80%乙醇回流提取2 h，第2次加入8倍量80%乙醇回流提取1.5 h，合并2次提取液，70℃減壓濃縮至無醇味，即得DSS醇提物，此時以生藥計質(zhì)量濃度為2 g/mL，4℃保存，備用。給藥時水提物與醇提物按1∶1（V/V）混合，即得DSS總提取物，按給藥劑量要求稀釋，搖勻后ig給藥。質(zhì)量控制參照文獻[7]方法。

2.2 造模、分組與給藥

將大鼠隨機分為假手術(shù)組、模型組（OVX組）和DSS低、中、高劑量組，每組8只。假手術(shù)組大鼠僅切除卵巢附近脂肪，其余各組大鼠切除雙側(cè)卵巢，去卵巢手術(shù)方法參照文獻[8]。術(shù)后大鼠每天im 5萬U青霉素鈉鹽，連續(xù)3 d，以預(yù)防感染。造模大鼠于術(shù)后第5天開始觀察陰道細胞涂片，連續(xù)觀察3 d，若大鼠陰道涂片呈現(xiàn)大量多核白細胞及少量上皮細胞，表明大鼠處于間情期，判定為造模成功[9]。術(shù)后第7天開始給藥：假手術(shù)組、OVX組大鼠ig等體積生理鹽水，DSS低、中、高劑量組大鼠每天按1.94、3.87、7.44 g/kg劑量ig給藥1次，連續(xù)給藥8周。大鼠每3天稱體質(zhì)量1次，按照體質(zhì)量調(diào)整給藥劑量。

2.3 子宮組織病理學(xué)觀察

末次給藥后24 h，脫頸處死大鼠，打開腹腔，取出子宮，稱定并記錄子宮濕質(zhì)量（mg）。然后將子宮立即放入4%多聚甲醛溶液中固定24 h，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，切片厚度為5μm，常規(guī)脫蠟復(fù)水后，進行蘇木精-伊紅（HE）染色；梯度乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。顯微鏡下拍攝分析大鼠子宮HE染色標(biāo)本，統(tǒng)計大鼠子宮所有腺體數(shù)目；將染色子宮標(biāo)本放大40倍，測量子宮宮腔面積；將染色子宮標(biāo)本放大200倍，測量子宮內(nèi)膜厚度，每個標(biāo)本選取5個視野，以5個視野的平均值代表單個標(biāo)本的子宮內(nèi)膜厚度。

2.4 子宮上皮和基質(zhì)中ERα、ERβ表達

大鼠子宮石蠟切片常規(guī)脫蠟復(fù)水，將切片置入抗原修復(fù)液（檸檬酸緩沖液，pH 6.0）中，微波中火15 min進行抗原修復(fù)。磷酸鹽緩沖液（PBS）洗滌，組織區(qū)域滴加3%雙氧水滅活內(nèi)源性過氧化物酶。PBS洗滌后，滴加ERα、ERβ抗體，按照兩步法免疫組化試劑盒、DAB顯色試劑盒說明操作進行免疫組織化學(xué)染色（IHC）。顯色后，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。采用Mantra定量病理成像分析系統(tǒng)統(tǒng)計子宮腔上皮和基質(zhì)中ERα、ERβ的平均光密度（OD）值。每組選5個標(biāo)本，放大400倍，每個標(biāo)本選取3個視野，以3個視野的平均OD值代表單個標(biāo)本的OD值。

2.5 統(tǒng)計學(xué)方法

采用GraphPad Prism 5.0軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以±s表示，采用單因素方差分析和Dunnett’s T3檢驗進行組間比較。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 大鼠子宮組織的變化

3.1.1 大鼠子宮整體形態(tài)的變化假手術(shù)組大鼠子宮內(nèi)膜柱狀上皮呈高柱狀，基質(zhì)細胞胞質(zhì)充盈，固有層、肌層與漿膜層組織輪廓清晰；OVX組大鼠子宮內(nèi)膜柱狀上皮呈低柱狀，固有層、肌層與漿膜層均顯著萎縮，基質(zhì)細胞可見明顯核固縮；與OVX組比較，DSS各劑量組大鼠子宮內(nèi)膜及固有層萎縮程度無顯著差異，但固有層內(nèi)腺體豐富。子宮HE染色圖見圖1（箭頭指示腺體）。

3.1.2 大鼠子宮濕質(zhì)量和結(jié)構(gòu)的變化與假手術(shù)組比較，OVX組大鼠子宮濕質(zhì)量、宮腔面積、內(nèi)膜厚度及腺體數(shù)量均顯著減少（P＜0.01）；與OVX組比較，DSS各劑量組大鼠子宮濕質(zhì)量、宮腔面積及內(nèi)膜厚度均無顯著差異（P＞0.05），但DSS中、高劑量組大鼠子宮腺體數(shù)量顯著增加（P＜0.01），結(jié)果見表1。

圖1 各組大鼠子宮病理切片圖（HE染色，×100）Fig 1Pathological sections of uterus of rats in each group（HE staining，×100）

表1 各組大鼠子宮濕質(zhì)量、宮腔面積、內(nèi)膜厚度及腺體數(shù)量測定結(jié)果（±s，n＝8）Tab1Determinationresultsofuterinewetmass，uterine cavity area，endometrial thicknessandthenumberofuterine glands of rats in each group（±s，n＝8）

表1 各組大鼠子宮濕質(zhì)量、宮腔面積、內(nèi)膜厚度及腺體數(shù)量測定結(jié)果（±s，n＝8）Tab1Determinationresultsofuterinewetmass，uterine cavity area，endometrial thicknessandthenumberofuterine glands of rats in each group（±s，n＝8）

注：與假手術(shù)組比較，＊＊P＜0.01；與OVX組比較，##P＜0.01Note：vs.shamoperationgroup，＊＊P＜0.01；vs.OVX group，##P＜0.01

子宮內(nèi)膜厚度，μm 637.2±242.9 297.1±120.1＊＊284.1±62.90 290.9±101.9 327.1±112.3組別假手術(shù)組OVX組DSS低劑量組DSS中劑量組DSS高劑量組劑量，g/kg 1.94 3.87 7.44子宮濕質(zhì)量，mg 649.3±247.10 187.5±72.06＊＊189.0±58.94 187.9±32.66 229.8±94.06子宮宮腔面積，mm2 0.105±0.074 0.032±0.012＊＊0.032±0.010 0.031±0.011 0.031±0.017腺體數(shù)量，個15.80±2.77 7.00±1.00＊＊9.00±5.83 14.40±4.72##16.00±1.00##

3.2 大鼠子宮腔上皮及基質(zhì)中ERα表達的變化

與假手術(shù)組比較，OVX組大鼠子宮腔上皮及基質(zhì)中ERα的表達水平均顯著降低（P＜0.01），假手術(shù)組大鼠子宮腔上皮及基質(zhì)中ERα表達水平約為OVX組的2倍；與OVX組比較，DSS各劑量組大鼠子宮腔上皮及基質(zhì)中ERα的表達水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。IHC圖見圖2，測定結(jié)果見表2。

圖2 各組大鼠子宮腔上皮及基質(zhì)中ERα表達的IHC圖（×400）Fig 2IHC figures of ERα expression in uterine cavity epithelium and matrix of rats in each group（×400）

表2 各組大鼠子宮腔上皮及基質(zhì)中ERα、ERβ表達水平的測定結(jié)果（±s，n＝5）Tab 2Determination results of the expression levels of ERα and ERβ in uterine cavity epithelium and matrix in each group（±s，n＝5）

表2 各組大鼠子宮腔上皮及基質(zhì)中ERα、ERβ表達水平的測定結(jié)果（±s，n＝5）Tab 2Determination results of the expression levels of ERα and ERβ in uterine cavity epithelium and matrix in each group（±s，n＝5）

注：與假手術(shù)組比較，＊＊P＜0.01；與OVX組比較，#P＜0.05，##P＜0.01Note：vs.shamoperationgroup，＊＊P＜0.01；vs.OVX group，#P＜0.05，##P＜0.01

ERβ 0.023±0.013 0.005±0.004＊＊0.012±0.009 0.010±0.003 0.017±0.007##組別假手術(shù)組OVX組DSS低劑量組DSS中劑量組DSS高劑量組劑量，g/kg 1.94 3.87 7.44子宮腔上皮（OD值）ERα 0.137±0.032 0.050±0.065＊＊0.050±0.024 0.056±0.052 0.056±0.053 ERβ 0.157±0.063 0.049±0.038＊＊0.067±0.040 0.042±0.008 0.088±0.007#子宮基質(zhì)（OD值）ERα 0.050±0.016 0.028±0.013＊＊0.030±0.012 0.032±0.014 0.036±0.019

3.3 大鼠子宮腔上皮及基質(zhì)中ERβ表達的變化

與假手術(shù)組比較，OVX組大鼠子宮腔上皮及基質(zhì)中ERβ表達水平均顯著降低（P＜0.01），假手術(shù)組大鼠子宮腔上皮中ERβ表達水平約為OVX組的3倍，基質(zhì)中ERβ表達水平約為OVX組的4倍；與OVX組比較，DSS高劑量組

圖3 各組大鼠子宮腔上皮及基質(zhì)中ERβ表達的IHC圖（×400）Fig 3IHC figures of ERβ expression in uterine cavity epithelium and matrix of rats in each group（×400）

大鼠子宮腔上皮及基質(zhì)中ERβ的表達水平均顯著升高（P＜0.05或P＜0.01），DSS高劑量組大鼠子宮腔上皮中ERβ表達水平約為OVX組的2倍，基質(zhì)中ERβ表達水平約為OVX組的3倍。IHC圖見圖3，測定結(jié)果見表2。

4 討論

女性進入圍絕經(jīng)期后，卵巢功能逐漸衰退，生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)紊亂，出現(xiàn)潮熱、失眠、焦慮、易怒等癥狀，以及由于雌激素水平降低導(dǎo)致的子宮、陰道、乳腺等生殖器官萎縮[10]。臨床采用HRT治療MPS可能引起子宮內(nèi)膜癌等副作用，因此，療效顯著、副作用較少的中醫(yī)藥療法日益受到關(guān)注。DSS作為經(jīng)典方劑，原方主治“婦人懷妊，腹中療痛”，現(xiàn)代臨床證實其治療功能性子宮出血、子宮下垂具有良好療效。DSS對子宮的調(diào)節(jié)具有雙向性，且較為復(fù)雜，既能通過抑制子宮平滑肌收縮治療原發(fā)性痛經(jīng)[7]，亦有促進受孕安胎的功效[3]。臨床上同樣廣泛使用DSS治療MPS，雖然療效顯著，然而其對子宮的影響仍不明確。

子宮是雌激素的靶器官，也是女性生殖系統(tǒng)中重要器官。雌激素作用于子宮主要通過ER發(fā)揮效應(yīng)，ERα和ERβ是ER的兩個主要亞型。在圍絕經(jīng)期，由于雌激素水平下降，子宮迅速萎縮[11]，同時子宮中ERα、ERβ的表達也顯著下調(diào)[12]。在給予雌激素后，去卵巢大鼠子宮內(nèi)膜顯著性增厚且腺體數(shù)量增多，子宮組織中ERα和ERβ表達均顯著上升[13]，但長期應(yīng)用HRT會使子宮內(nèi)膜顯著增生[6]，誘發(fā)子宮內(nèi)膜癌[14]。本研究結(jié)果顯示，DSS對去卵巢大鼠子宮濕質(zhì)量無明顯影響，這與其他實驗報道[15]一致；雖然DSS對去卵巢大鼠子宮腔面積和內(nèi)膜厚度的影響均不顯著，但可顯著增加去卵巢大鼠子宮腺體數(shù)量。免疫組化測定結(jié)果顯示，去卵巢大鼠子宮腔上皮及基質(zhì)中ERα、ERβ表達水平均顯著降低，DSS對去卵巢大鼠子宮腔上皮及基質(zhì)中ERα的表達水平無顯著影響，但可顯著提高子宮腔上皮和基質(zhì)中ERβ的表達水平。目前研究認為，促進子宮細胞增殖的作用主要由ERα介導(dǎo)。敲除ERα將導(dǎo)致雌激素促進子宮生長的作用消失[16]、子宮內(nèi)膜腺體數(shù)量下降[17]，這表明在子宮的發(fā)育及成熟過程中ERα起著主要作用。但另有研究表明，敲除ERα、ERβ的小鼠子宮表型雖與敲除ERα小鼠相似，但前者子宮直徑更為狹窄、子宮壁厚度也更薄、子宮萎縮程度更為嚴重[18]?？梢?，雖然ERα為雌激素在子宮中的主要作用靶點，但ERβ亦可直接作用于子宮調(diào)節(jié)細胞增殖[19]，在ERα缺失時發(fā)揮某些作用，協(xié)助維持子宮功能。本研究結(jié)果顯示，DSS對去卵巢大鼠子宮上皮及基質(zhì)中ERα表達均無顯著影響，因此其拮抗OVX大鼠子宮萎縮效應(yīng)不顯著；但DSS對ERβ表達有明顯上調(diào)作用，這是否與腺體數(shù)量有關(guān)，仍有待進一步研究。植物雌激素對ERβ的親和力高于ERα[20]，DSS中白芍、澤瀉、當(dāng)歸、川芎具有植物雌激素樣作用[21]，且方中當(dāng)歸具有上調(diào)大鼠子宮內(nèi)膜及固有層ERβ表達的作用[22]，這可能是DSS提高子宮腔上皮及內(nèi)膜中ERβ表達水平的原因。有同類研究發(fā)現(xiàn)，中藥復(fù)方可選擇性上調(diào)OVX大鼠子宮ERβ表達[23]，與本研究結(jié)果一致。

綜上所述，DSS對去卵巢大鼠子宮濕質(zhì)量及內(nèi)膜均無顯著影響，但可增加子宮腺體數(shù)量，這可能與其選擇性上調(diào)子宮腔上皮和基質(zhì)中ERβ表達有關(guān)。本研究為臨床安全應(yīng)用DSS治療MPS提供了一定的實驗依據(jù)。

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Effect of Danggui Shaoyao Powder on the Uterine Structure and Estrogen Receptor Expression in Model Rats in Perimenopausal Period

DING Yan1，2，HUA Yongqing1，2，LIN Ziwei1，2，YANG Fei1，2，HONG Min1，2（1.School of Pharmacy，Nanjing University of Chinese Medicine，Nanjing 210023，China；2.Jiangsu Key Laboratory for Pharmacology and Safety Evaluation of Chinese Materia Medica，Nanjing 210023，China）

OBJECTIVE：To investigate the effect of Danggui shaoyao powder（DSS）on uterine structure and expressions of estrogen receptor α（ERα），estrogen receptor β（ERβ）in uterine cavity epithelium and matrix in model rats in perimenopausal period.METHODS：40 female SD rats were randomly divided into sham operation group（normal saline），model group（normal saline），DSS low-dose，medium-dose，high-dose groups（1.94，3.87，7.44 g/kg），8 in each group.Except that rats in sham operation group

resection of fat nearby ovaries，rats in other groups received resection of bilateral ovaries to induce models in perimenopausal period.After modeling，rats were intragastrically administrated once a day，for 8 weeks.After administration，wet mass of uterine was weighted.Changes in uterine morphology and structure of rats were observed，expressions levels of ERα and ERβ in uterine cavity epithelium and matrix were determined.RESULTS：Compared with sham operation group，rats in model group showed low columnar in endometrial columnar epithelium，lamina propria layer，muscular layer and serous layer were significantly atrophied，stromal cells had obvious nuclear condensation.There was marked decrease in uterine wet mass，uterine cavity area and endometrial thickness as well as the number of uterine glands（P＜0.01），and the expression levels of ERα and ERβ in uterine cavity epithelium and matrix were significantly reduced（P＜0.01）.Compared with model group，the atrophy degree of endometrium and lamina propria layer had no significant differences in DSS each dose groups.However，lamina propria layer was rich in glands，and there were significant differences in uterine wet mass，uterine cavity area，endometrial thickness，ERα expression level in uterine cavity epithelium and matrix（P＞0.05）.However，the number of uterine glands in DSS medium-dose，high-dose groups was significantly increased（P＜0.01），and ERβ expression level in uterine cavity epithelium and matrix in DSS high-dose group was significantly increased（P＜0.05 or P＜0.01）.CONCLUSIONS：DSS has not obvious effect on improving the symptoms of uterine gland atrophy of model rats in perimenopausal period，but it can increase the number of uterine glands，and the mechanism may be associated with improving the ERβ expression level in uterine cavity epithelium and matrix.

Danggui shaoyao powder；Perimenopausal period；Uterine structure；Estrogen receptor α；Estrogen receptor β；Rats

R285

A

1001-0408（2017）34-4788-05

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.34.09

國家自然科學(xué)基金資助項目（No.81473390）；江蘇省中藥資源產(chǎn)業(yè)化過程協(xié)同創(chuàng)新中心開放課題（No.ZDXM-2-7）；江蘇省中藥藥效與安全性評價重點實驗室資助項目（No.JKLPSE201607）；江蘇省高校中藥學(xué)優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程資助項目（No.PAPD）

＊碩士研究生。研究方向：生殖內(nèi)分泌中藥藥理。電話：025-85811248。E-mail：956743780@qq.com

#通信作者：副研究員，博士。研究方向：生殖內(nèi)分泌中藥藥理。電話：025-85811248。E-mail：huayongqing@126.com

2017-06-21

2017-09-28）

（編輯：林靜）