PTEN與Survivin分子在腎透明細(xì)胞癌組織中差異表達(dá)的意義

徐芝立 張麗紅 張翼 梁長春 馬志強(qiáng)

·論著·

PTEN與Survivin分子在腎透明細(xì)胞癌組織中差異表達(dá)的意義

徐芝立 張麗紅 張翼 梁長春 馬志強(qiáng)

目的檢測腎透明細(xì)胞癌組織中PTEN與Survivin蛋白分子的表達(dá)差異，探討其在基因靶向治療和外科手術(shù)中的應(yīng)用價(jià)值。方法利用Western blot實(shí)驗(yàn)檢測腎透明細(xì)胞癌組織、癌旁0.5 cm腎組織以及癌旁1.0 cm腎組織中PTEN與Survivin蛋白分子的表達(dá)量差異并進(jìn)行相關(guān)分析。結(jié)果Western Blot實(shí)驗(yàn)檢測PTEN蛋白相對(duì)表達(dá)量：癌組織的PTEN蛋白表達(dá)水平(1.482±0.320)明顯低于癌旁0.5 cm組(10.861±1.347)以及癌旁1.0 cm組(10.947±1.744)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05)。癌旁0.5 cm組與癌旁1.0 cm組的PTEN蛋白表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pgt;0.05)。Western Blot實(shí)驗(yàn)檢測Survivin蛋白相對(duì)表達(dá)量：癌組織的Survivin蛋白表達(dá)水平(17.113±3.367)明顯高于癌旁0.5 cm組(3.233±1.898)以及癌旁1.0 cm組(2.924±1.612)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05)。癌旁0.5 cm組與癌旁1.0 cm組的Survivin蛋白表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pgt;0.05)。Pearson相關(guān)分析顯示，癌組織中的PTEN蛋白與Survivin蛋白的表達(dá)水平呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)性(r=-0.908，Plt;0.05)。結(jié)論P(yáng)TEN和Survivin基因可能共同促進(jìn)了腎癌的發(fā)生與發(fā)展，對(duì)基因靶向治療和外科手術(shù)切口有應(yīng)用和指導(dǎo)價(jià)值。

Survivin基因；PTEN基因；Western blot；腎透明細(xì)胞癌

腎癌是泌尿生殖系統(tǒng)常見腫瘤，占腎臟惡性腫瘤的80%～90%，占成人惡性腫瘤的3%，近年來的發(fā)病率逐漸提高，大約60%的新發(fā)病例被偶然發(fā)現(xiàn)，其中約四分之一的患者確診時(shí)已經(jīng)出現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移[1]。盡管腫瘤分級(jí)、分期以及脈管浸潤程度能有效預(yù)測腎癌的惡性行為，但相同臨床分期、分級(jí)的腫瘤患者預(yù)后卻有明顯差別，這說明腎癌在發(fā)生進(jìn)展過程存在顯著的異質(zhì)性[2]。因此，尋找有效預(yù)測腎癌進(jìn)展與預(yù)后轉(zhuǎn)歸的瘤標(biāo)分子對(duì)于腎癌患者的臨床治療和預(yù)后判斷有重要導(dǎo)意義?，F(xiàn)代分子生物學(xué)認(rèn)為，惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與某些抑癌基因的失活、原癌基因的激活密切相關(guān)。PTEN(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome10)，又稱MMAC1或TEP1，是人體第10號(hào)染色體缺失的磷酸酶和張力蛋白同源基因，在眾多惡性腫瘤中頻繁丟失與突變，促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞增殖，抑制了腫瘤細(xì)胞凋亡，與腫瘤惡性進(jìn)展密切相關(guān)[3,4]。Survivin基因是凋亡抑制蛋白IAP家族的重要成員，可以調(diào)控腫瘤細(xì)胞凋亡與侵襲，腫瘤間質(zhì)血管生成等過程，參與了多種惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。臨床研究發(fā)現(xiàn)，尤文氏肉瘤、小細(xì)胞肺癌、膀胱癌等多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、不良預(yù)后與Survivin基因密切相關(guān)[5-7]。還有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，腎癌組織中Survivin基因表達(dá)增高與患者總生存時(shí)間及腫瘤特異性生存時(shí)間呈反向相關(guān)，提示Survivin分子表達(dá)增加促進(jìn)了腫瘤的惡性發(fā)展[2]。由于PTEN與Survivin基因在人體癌組織與正常組織中存在的顯著表達(dá)差異，使其成為腫瘤基因靶向治療的理想靶點(diǎn)。腎癌又名腎腺癌，其主要病理類型是透明細(xì)胞癌。我們的課題擬利用Western blot實(shí)驗(yàn)精確檢測腎透明細(xì)胞癌組織、癌旁0.5 cm正常腎組織以及癌旁1.0 cm正常腎組織中PTEN與Survivin分子表達(dá)量的差異，了解腎癌發(fā)展過程中兩分子的表達(dá)變化及相關(guān)性，為進(jìn)一步針對(duì)腎透明細(xì)胞癌患者開展PTEN與Survivin基因功能研究和靶向治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，也為早期局限性腎癌患者施行腎臟部分切除術(shù)選取安全手術(shù)邊距提供分子學(xué)實(shí)驗(yàn)依據(jù)，筆者在國內(nèi)尚未見相關(guān)報(bào)道。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2013至2015年我院泌尿外科腎癌患者施行根治性腎切除的離體新鮮腎臟標(biāo)本16例。其中男11例，女5例;年齡53～78歲，平均年齡(61±9)歲；患者均無腎炎、腎病、腎衰、腎盂腎炎及糖尿病、免疫性疾病史，術(shù)前均未接受放化療、免疫靶向藥物治療。所有腎癌標(biāo)本經(jīng)過HE染色、讀片，確診為腎透明細(xì)胞癌。分3組于癌組織、癌旁0.5 cm處、癌旁1.0 cm 處取材。組織細(xì)胞裂解液(RIPA)、蛋白酶抑制劑(PMSF)、蛋白上樣緩沖液均購自北京索萊寶公司，兔抗人PTEN單抗(ab32199)、Survivin單抗(ab76424)、β-actin單抗(ab8227)以及羊抗兔熒光二抗(ab131366)均購自英國Abcam公司。所有實(shí)驗(yàn)研究有患者知情同意授權(quán)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 組織細(xì)胞裂解：新鮮組織用微型粉碎器粉碎后，收集到1.5 ml EP管中。加入含蛋白酶抑制劑的細(xì)胞裂解液(RIPA∶PMSF=100∶1)，吹打混勻，冰置15 min。4℃，10 000 g離心20 min，收集上清為細(xì)胞總蛋白，進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.2.2 Western Blot實(shí)驗(yàn)：將提取的總蛋白先行定量測定，酶標(biāo)儀測定波長為572 nm時(shí)的吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算蛋白樣品的濃度。取適量蛋白樣品加入SDA-PAGE凝膠中4℃條件下，恒壓90 V，電泳，分別切下包含50～60 kDa (PTEN)、16～20 kDa (Survivin)、37～50 kDa (β-actin)蛋白區(qū)帶凝膠，置于轉(zhuǎn)膜緩沖液中浸泡轉(zhuǎn)膜，滴加一抗，4℃孵育過夜，滴加二抗，孵育，洗滌，Odyssey雙色紅外熒光掃描系統(tǒng)分析結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 Western Blot實(shí)驗(yàn)檢測PTEN蛋白相對(duì)表達(dá)量 癌組織的PTEN蛋白表達(dá)水平(1.482±0.320)明顯低于癌旁0.5 cm組織(10.861±1.347)以及癌旁1.0 cm 組織(10.947±1.744)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05)。癌旁0.5 cm組織與癌旁1.0 cm組織的PTEN蛋白表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pgt;0.05)。見表1，圖1、2。

2.2 Western Blot實(shí)驗(yàn)檢測Survivin蛋白相對(duì)表達(dá)量 癌組織的Survivin蛋白表達(dá)水平(17.113±3.367)明顯高于癌旁0.5 cm組織(3.233±1.898)以及癌旁1.0cm組織(2.924±1.612)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05)。癌旁0.5 cm組織與癌旁1.0 cm組織的Survivin蛋白表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pgt;0.05)。見表1，圖1、2。

表1 不同部位腎癌標(biāo)本中PTEN與Survivin蛋白相對(duì)表達(dá)量

注：與癌組織比較，*Plt;0.05

圖1 不同部位腎癌標(biāo)本中PTEN與Survivin蛋白表達(dá)差異

圖2 不不同部位腎癌標(biāo)本Survivin及PTEN蛋白電泳條帶

2.3 Pearson相關(guān)分析顯示，癌組織中的PTEN蛋白與Survivin蛋白的表達(dá)水平呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)性(r=-0.908，Plt;0.05)。見圖3。

圖3 腎癌標(biāo)本中PTEN與Survivin蛋白表達(dá)相關(guān)分析散點(diǎn)圖

3 討論

PTEN是人類惡性腫瘤中缺失和突變率最高的抑癌基因。Esteva等[8]對(duì)乳腺癌的研究發(fā)現(xiàn)，PTEN基因的突變、丟失和甲基化導(dǎo)致的分子表達(dá)異常與腫瘤的分化、轉(zhuǎn)移和預(yù)后等明顯相關(guān)。在泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤的研究中也發(fā)現(xiàn)了該基因的突變與失活，這導(dǎo)致PTEN蛋白表達(dá)出現(xiàn)異常，促進(jìn)了腫瘤的發(fā)生、進(jìn)展過程[4,9]。

基礎(chǔ)研究顯示，PTEN基因位于人類染色體10q23.3，廣泛表達(dá)于人體正常組織細(xì)胞，具有編碼脂質(zhì)磷酸酶和蛋白磷酸酶的雙重特異性磷酸酶活性，可以通過阻斷PIP3/PI3K/AKT通路、負(fù)向調(diào)節(jié)絲裂原激活的蛋白激酶信號(hào)通路以及調(diào)控P53/MDM2通路和NF-KB/IKB信號(hào)通路等影響腫瘤細(xì)胞的增殖、分化、凋亡等過程[10]。例如：通過使黏著斑激酶(FAK)去磷酸化引起FAK失活，下調(diào)其下游調(diào)控信號(hào)p130CAS，控制細(xì)胞的存活和黏附、運(yùn)動(dòng)，調(diào)節(jié)細(xì)胞的轉(zhuǎn)移與侵襲功能[11]；在結(jié)腸癌的研究中，Roy等[12]學(xué)者發(fā)現(xiàn)抑癌基因PTEN可使PIP3轉(zhuǎn)化成PIP2，進(jìn)而阻斷PIP3/PI3K/AKT信號(hào)通路，抑制細(xì)胞增殖、促進(jìn)細(xì)胞凋亡。另外，還有學(xué)者發(fā)現(xiàn)抑制PTEN/PI3K/AKT 通路的激活可有效抑制前列腺癌細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移[13]。

Schneider等[14]用Western Blot實(shí)驗(yàn)對(duì)腎癌組織檢測發(fā)現(xiàn)，低表達(dá)PTEN的大部分腎透明細(xì)胞癌患者多死于腎癌轉(zhuǎn)移，提示腎癌組織PTEN蛋白參與了腫瘤的惡性進(jìn)展，PTEN表達(dá)下降與腫瘤不良預(yù)后密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)利用Western Blot技術(shù)對(duì)新鮮離體腫瘤標(biāo)本的不同部位進(jìn)行取材并定量測定PTEN蛋白表達(dá)量。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，腎癌組織的PTEN蛋白表達(dá)水平明顯低于癌旁0.5 cm處腎組織，也明顯低于癌旁1.0 cm 處腎組織，而后兩者的PTEN蛋白表達(dá)水平無顯著差異，這表明了在正常腎組織漸變至癌組織的過程中PTEN基因突變或缺失所導(dǎo)致的蛋白表達(dá)變化，說明PTEN蛋白表達(dá)與腎癌發(fā)生與進(jìn)展密切相關(guān)。

Survivin是凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis proteins,IAPs)家族的新成員，Survivin基因位于人類染色體17q25，片段長14.7 kb，編碼142個(gè)氨基酸組成的蛋白，分子質(zhì)量約16.5 kDa，含有桿狀病毒IAPs(inhibition of apoptosis proteins)序列，是1997年由Ambrosini等利用效應(yīng)細(xì)胞蛋白酶受體-1(effector cell protease receptor-1，EPR-1)cDNA在人類基因組庫的雜交篩選中分離出來的[15]。Survivin分子高表達(dá)在人的胚胎組織和多種惡性腫瘤細(xì)胞中，除胸腺和生殖腺外，在人類正常分化成熟的組織中檢測不到Survivin表達(dá)，參與抑制細(xì)胞凋亡、調(diào)控細(xì)胞增殖和促進(jìn)腫瘤血管生成等生理過程，并在多種惡性腫瘤中呈現(xiàn)高表達(dá)，與腫瘤進(jìn)展密切相關(guān)[7,16]。

在泌尿系統(tǒng)腫瘤的臨床研究中，Xiong等[2]通過meta分析發(fā)現(xiàn)腎癌腫瘤組織中Survivin基因表達(dá)增高，會(huì)導(dǎo)致患者腫瘤特異性生存時(shí)間下降，認(rèn)為Survivin促進(jìn)了腫瘤惡性進(jìn)展過程。學(xué)者Wang等[17]報(bào)道Survivin分子高表達(dá)在前列腺癌組織中，且外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞的Survivin mRNA水平與前列腺癌遠(yuǎn)轉(zhuǎn)移率明顯相關(guān)，更進(jìn)一步揭示出Survivin基因表達(dá)可能通過促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移行為而參與了腫瘤進(jìn)展機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，腎癌組織的Survivin蛋白表達(dá)水平明顯高于癌旁0.5 cm處腎組織，也明顯高于癌旁1.0 cm處腎組織，這說明Survivin基因表達(dá)水平在腎癌組織及癌旁組織中的變化體現(xiàn)了腎臟細(xì)胞癌變的發(fā)生與進(jìn)展過程，Survivin基因表達(dá)對(duì)腎癌發(fā)揮促癌作用。

腫瘤的迅速增殖、組織浸潤、血管侵襲、轉(zhuǎn)移及耐藥產(chǎn)生是影響腫瘤預(yù)后的重要因素，Survivin能參與其中多個(gè)過程而顯著降低腫瘤的治療效果和縮短總生存時(shí)間，是惡性細(xì)胞轉(zhuǎn)化的標(biāo)志[18]。在腫瘤細(xì)胞中，Survivin主要表現(xiàn)為兩種功能作用[19]：(1)調(diào)控細(xì)胞有絲分裂影響細(xì)胞增殖。Survivin通過與紡錘體微管蛋白特異性結(jié)合形成染色體乘客絡(luò)合體(chromosomal passenger complex，CPC)，穩(wěn)定微管結(jié)構(gòu)，防治紡錘體被水解，保護(hù)有絲分裂細(xì)胞器的完整性，有利于有絲分裂持續(xù)進(jìn)行，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞不斷增殖。Survivin基因高表達(dá)可以促進(jìn)細(xì)胞由G1期向S期轉(zhuǎn)換，在G2/M期可見Survivin表達(dá)明顯升高[20]。(2)抑制細(xì)胞凋亡。Survivin蛋白的IAPs重復(fù)序列可以直接與凋亡通路下游蛋白酶Caspase3和Caspase7相結(jié)合，發(fā)揮直接的抗凋亡作用。Survivin蛋白與X連鎖凋亡抑制蛋白結(jié)合形成的Survivin-XIAP復(fù)合體可以抑制Caspase9的活性而發(fā)揮間接的抗凋亡作用。另外，腫瘤組織中Survivin基因的高表達(dá)增強(qiáng)了β-catenin、T細(xì)胞因子以及血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的轉(zhuǎn)錄活性與表達(dá)水平；提示Survivin基因可能促進(jìn)腫瘤間質(zhì)中血管的形成，而這種促進(jìn)基質(zhì)血管形成的能力是腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的必需因素[21]。

眾多研究已證實(shí)，腫瘤抑制基因PTEN的純合型或雜合性丟失可以導(dǎo)致磷酸肌醇3-激酶(phosphoinositide3-kinase，PI3K)信號(hào)網(wǎng)絡(luò)的異常激活，這在腫瘤發(fā)展中是最重要的常見事件之一，尤其多見于惡性侵襲與轉(zhuǎn)移性腫瘤疾病中。所以，PTEN經(jīng)常單獨(dú)或與其他分子聯(lián)合作為預(yù)測腫瘤預(yù)后的生物標(biāo)記物[22]。而PI3K可以通過產(chǎn)生許多因子和調(diào)控各種細(xì)胞通路促進(jìn)細(xì)胞生長增殖與分化，其中包括極為重要的PI3K/PIP3/AKT通路。有學(xué)者研究髓樣白血病發(fā)現(xiàn)，PI3K途徑在mRNA和蛋白水平均對(duì)Survivin有調(diào)控作用[23]。我們的實(shí)驗(yàn)對(duì)PTEN和Survivin 蛋白表達(dá)量進(jìn)行相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，兩個(gè)蛋白分子的表達(dá)水平呈現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān)性，這表明PTEN和Survivin 基因很可能通過調(diào)控細(xì)胞周期與凋亡的機(jī)制共同參與腎癌的發(fā)展過程。據(jù)此可以推理：在正常生理情況下，PTEN基因抑制PI3K/Akt通路，從而抑制Survivin的表達(dá)；而在腫瘤細(xì)胞PTEN基因表達(dá)下調(diào)或缺失的異常情況下，PTEN對(duì)PI3K/Akt通路的抑制作用減弱，Survivin表達(dá)上調(diào)，促進(jìn)細(xì)胞分裂與增殖，抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn)腎癌的形成與惡性進(jìn)展。

由于PTEN和Survivin基因在人體正常組織和腫瘤組織中表達(dá)水平的明顯差異，使其成為基因靶向治療的理想靶分子。因此，針對(duì)PTEN和Survivin基因的分子機(jī)制研究和靶向治療策略已經(jīng)成為腫瘤防治的重點(diǎn)領(lǐng)域。勞玲娟等[24]利用RNA干擾技術(shù)，降低直腸癌細(xì)胞株SW480的PTEN表達(dá)，可顯著削弱白藜蘆醇對(duì)體外SW480細(xì)胞的增殖抑制和凋亡誘導(dǎo)作用，證實(shí)PTEN在白藜蘆醇發(fā)揮抗直腸癌效應(yīng)中發(fā)揮了主導(dǎo)作用。在胃癌移植瘤模型中，利用Survivin顯性負(fù)性突變體C84A，可以抑制胃癌瘤體生長，并可增強(qiáng)5-氟尿嘧啶對(duì)胃癌細(xì)胞的化療效果[17]。這些研究表明，下調(diào)Survivin表達(dá)能阻抑腫瘤的發(fā)生、惡性發(fā)展，Survivin作為腫瘤抗原基因具有應(yīng)用于腫瘤基因治療的巨大潛力。

根治性腎切除術(shù)歷來是針對(duì)腎癌的金標(biāo)準(zhǔn)手術(shù)方式。但是近年來，對(duì)于局限性腎癌患者，腎部分切除手術(shù)逐漸被接受和推崇。對(duì)于直徑≤4.0 cm的腎臟腫瘤，實(shí)施保留腎單位的腎部分切除手術(shù)，其術(shù)后無瘤生存率和局部復(fù)發(fā)率與根治性腎切除手術(shù)有相似的效果。如何更好地確定保留腎部分切除術(shù)的安全手術(shù)邊距成為眾多外科醫(yī)師極為關(guān)心的問題。我們的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)癌旁0.5～1.0 cm范圍內(nèi)的腎組織沒有出現(xiàn)顯著的PTEN基因表達(dá)下調(diào)及Survivin基因表達(dá)增加，這從分子學(xué)水平上提示，腎部分切除術(shù)的安全手術(shù)邊距可以確定為腫瘤假包膜外0.5～1.0 cm范圍腎組織。

總之，本實(shí)驗(yàn)檢測到腎癌及癌旁組織的PTEN和Survivin 蛋白表達(dá)量有明顯差異，兩個(gè)基因分子可能共同促進(jìn)了腎癌的發(fā)生與發(fā)展。雖然眾學(xué)者的實(shí)驗(yàn)結(jié)果已經(jīng)強(qiáng)烈提示了PTEN和Survivin 在腫瘤發(fā)生進(jìn)展中的潛在相互作用機(jī)制，仍需進(jìn)一步進(jìn)行分子信號(hào)通路的研究，并進(jìn)行動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示了PTEN和Survivin 作為免疫治療靶分子的巨大潛力，并為保留腎單位的腎部分切除術(shù)確定安全手術(shù)邊距提供了有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 Koike H,Nitta,Sekine Y,et al.YM155 reverses rapamycin resistance in renal cancer by decreasing survivin.J Cancer Res Clin Oncol,2014,140:1705-1713.

2 Xiong CH,Liu HP,Chen,ZX,et al.Prognostic role of survivin in renal cell carcinoma:A system review and meta-analysis.Eur J Intern Med,2016,33:102-107.

3 Li J,Yen C,Liam D,et al.PTEN,a putative protein tyrosine phosphates gene mutated in human brain,breast,and prostate cancer.Science,1997,275:1943-1947.

4 Cairns P,Evron E,Okami K,et al.Point mutation and homozygous deletion of PTEN/MMAC1 in primary bladder cancers.Oncogene,1998,16:3215-3218.

5 Shelake S,Sankpal UT,Bowman WP,et al.Targeting specificity protein 1 transcription factor and survivin using tolfenamic acid for inhibiting Ewing sarcoma cell growth.Invest New Drug,2017,35:158-165.

6 Chen P,Zhu J,Liu DY,et al.Over-expression of survivin and VEGF in small-cell lung cancer may predict the poorer prognosis.Med Oncol,2014,31:775.

7 Srivastava AK,Singh PK,Srivastava K,et al.Diagnostic role of survivin in urinary bladder cancer.Asian Pac J Cancer Prev,2013,14:81-85.

8 Esteva FJ,Guo H,Zhang S,et al.PTEN,PIK3CA,p-p70S6K status association with trastuzumab response and survival in patients with HER2-positive metastatic breast cancer.Am J Patho,2010,177:1647-1656.

9 Hollander MC,Blumenthal GM,Dennis PA,et al.PTEN loss in the continuum of common cancers,rare syndromes and mouse models.Nat Rev Cancer,2011,11:289-301.

10 Bronisz A,Godlewski J,Wallace JA,et al.Reprogramming of the tumour microenvironment by stromal PTEN-regulated miR-320.Nat Cell Biol,2011,14:159-167.

11 John JK,Paraiso KH,Rebecca VW,et al.GSK3β inhibition blocks melanoma cell/host interactions by downregulating N-cadherin expression and decreasing FAK phosphorylation.J Invest Dermatol,2012,132:2818-2827.

12 Roy S,Yu Y,Padhye SB,et al.Difluorinated-Curcumin (CDF)restores PTEN epression in colon cancer cells by downregulating miR-21.PloS One,2013,8:e68543.

13 Gai WT，Yu DP，Wang XS，et al.Anti-cancer effect of ursolic acidactivates apoptosis through ROCK/PTEN mediated mitochondrial translocation of cofilin-1 in prostate cancer.Oncol Lett,2016,12:2885.

14 Schneider E,Keppler R,Prawitt D,et al.Migration of renaltumor cellsdepends on dephosphorylation of Shcby PTEN.Int J Oncol,2011,38:823-831．

15 Ambrosini G,Adida C,Altieri DC.A novel antiapoptosisgene,survivin,expressed in cancerand lymphoma.Nat Med,1997,3:917-921.

16 Sun B,Xu H,Zhang G,et al.Basic fibroblast growth factor upregulates survivin expression in hepatocellular carcinoma cells via aprotein kinase B-dependent pathway.Oncol Rep,2013,30:385-390.

17 Wang HS,Yang MS,Xu J,et al.Survivin mRNA-circulating tumor cells are associated with prostate cancer metastasis.Tumor Biol,2016,37:723-727.

18 殷海森，趙新穎，蘇長青.以Survivin為靶標(biāo)的腫瘤治療策略.第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2016,37:342-348.

19 Khan Z,Khan AA,Yadav H,et al.Survivin,a molecular target for therapeutic interventions in squamous cell carcinoma.Cell Mol Biol Lett,2017,22:1-32.

20 Wheatley SP.The functional repertoire of survivin’s tails.Cell Cycle,2015,14:261-268.

21 Fernandez JG,Rodriguez DA,Valenzuela M,et al.Survivin expression promotes VEGF-induced tumor angiogenesis via PI3K/Akt enhanced β-catenin/TCF-Lef dependent transcription.Mol Cancer,2014,13:209.

22 Wise HM,Hermida MA.Leslie NR.Prostate cancer,PI3K,PTEN and prognosis.Clinical Science,2017,131:197-210.

23 Carter BZ,Milella M,Altieri DC,et al.Cytokine-regulated expression of survivin myeloid leukemia.Blood,2001,97:2784-2790.

24 勞玲娟，宋新江，徐佳.PTEN在白藜蘆醇對(duì)體外直腸癌細(xì)胞生長和凋亡的影響.中國中藥雜志,2017,42:1730-1735.

25 Weng Y,Fei B,Chi AL,et al.Inhibition of gastric cancer cell growth in vivo by overexpression of adeno-associated virus-mediated survivin mutant C84A.Oncol Res,2013,20:411-417.

SignificanceofdifferentialexpressionofPTENandSurvivininhumanrenalclearcellcancer

XUZhili,ZHANGLihong,ZHANGYi,etal.

DepartmentofUrology,TheThirdHospitalofShijiazhuangCity,Shijiazhuang050011,China

ObjectiveTo investigate the differences of expressions of PTEN and Survivin in human renal clear cell cancer and tumor adjacent tissues,and to explore their application value in gene-targeted therapy and surgery.MethodsThe expression level of PTEN and Survivin protein in human renal clear cell cancer tissues,tumor adjacent tissues (0.5cm) and adjacent tissues (1.0cm) were detected by Western Blot,moreover, the differences of expressions of PTEN and Survivin were observed,and the correlation of expressions between PTEN and Survivin was analyzed.ResultsThe expression levels of PTEN protein in cancer tissues were significant lower than those in adjacent tissues of cancer (0.5cm) (1.482±0.320 vs 10.861±1.347,Plt;0.05) and lower than those in adjacent tissues of cancer (1.0cm) (1.482±0.320 vs 10.947±1.744,Plt;0.05). However there were no significant differences in the expression levels of PTEN protein between adjacent tissues of cancer (0.5cm) and adjacent tissues of cancer (1.0cm)(Pgt;0.05).The expression levels of Survivin in cancer tissues were significant higher than those in adjacent tissues of cancer (0.5cm) (17.113±3.367 vs 3.233±1.898,Plt;0.05) and higher than those in adjacent tissues of cancer (1.0cm) (17.113±3.367 vs 2.924±1.612,Plt;0.05). However there were no significant differences in the expression levels of Survivin between adjacent tissues of cance (0.5cm) and adjacent tissues of cancer (1.0cm)(Pgt;0.05).Besides the Pearson correlation analysis showed that the expression levels of PTEN protein were negatively correlated with those of Survivin protein in cancer tissues (r=-0.908,Plt;0.05).ConclusionPTEN and Survivin gene may jointly promote the pathogenesis and development of renal cancer,which has potential application and instruction value for gene-targeted therapy and surgery.

Survivin gene; PTEN gene;Western Blot; renal clear cell cancer

10.3969/j.issn.1002-7386.2017.24.002

項(xiàng)目來源：石家莊市科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展指導(dǎo)計(jì)劃(編號(hào)：131462333)

050011 河北省石家莊市第三醫(yī)院泌尿外科

R 737.11

A

1002-7386(2017)24-3689-05

2017-07-28)