• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    頭穴透刺對(duì)JNK通路抑制后腦出血大鼠腦組織p-STAT3影響的研究*

    2017-11-29 06:18:56段洪超譚元奇
    中國(guó)中醫(yī)急癥 2017年11期
    關(guān)鍵詞:百會(huì)造模中醫(yī)藥大學(xué)

    孔 瑩 段洪超 劉 洋 王 策 譚元奇

    (1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué),黑龍江 哈爾濱 150001;2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院,黑龍江哈爾濱 150040;3.北京市石景山區(qū)中醫(yī)院,北京 100043)

    頭穴透刺對(duì)JNK通路抑制后腦出血大鼠腦組織p-STAT3影響的研究*

    孔 瑩1段洪超2劉 洋1王 策1譚元奇3△

    (1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué),黑龍江 哈爾濱 150001;2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院,黑龍江哈爾濱 150040;3.北京市石景山區(qū)中醫(yī)院,北京 100043)

    目的針刺急性期腦出血模型大鼠百會(huì)透曲鬢穴,觀察JNK通路被抑制后其下游通路蛋白p-STAT3的表達(dá)變化及頭針對(duì)腦組織是否起到保護(hù)作用。方法選用雄性SD大鼠84只隨機(jī)分為空白組與假手術(shù)組各6只,模型組、針刺組(模型+針刺組)與SP600125(模型+抑制劑組)各24只;造自體血腦出血模型,選擇針刺百會(huì)穴透曲鬢穴的方法,在頭部一針貫穿頂額顳三區(qū)。于造模成功后針刺,在6 h,1 d,3 d,7 d 4個(gè)時(shí)間點(diǎn)取材,采用免疫組化分析法(IHC)觀察腦組織內(nèi)p-STAT3的陽(yáng)性細(xì)胞灰度值。結(jié)果針刺百會(huì)透曲鬢穴可以減輕模型動(dòng)物神經(jīng)缺損癥狀,提高評(píng)分。p-STAT3在大鼠腦出血后6 h表達(dá)開(kāi)始增多,1 d表達(dá)相對(duì)最多,3 d達(dá)高峰后迅速減少,7 d仍有表達(dá)。針刺組各時(shí)間點(diǎn)陽(yáng)性細(xì)胞灰度值均比模型組降低,具有顯著差異。針刺組與SP600125組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論針刺百會(huì)透曲鬢穴能夠減輕大鼠神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分,并降低p-STAT3蛋白的表達(dá),表明針刺在腦出血的治療中起到了腦保護(hù)作用。

    腦出血 百會(huì)透曲鬢 p-STAT3

    腦出血(ICH)是指非外傷性腦實(shí)質(zhì)內(nèi)血管破裂引起的出血,ICH和蛛網(wǎng)膜下腔出血(SAH)占所有卒中的20%。腦出血的發(fā)病率有種族差異:黑種人、西班牙人和亞洲人的發(fā)病率較高,白種人發(fā)病率較低,西方以缺血性腦卒中為主,而中國(guó)人更易發(fā)生出血性腦卒中,中國(guó)人出血性腦卒中與缺血性腦卒中的發(fā)病率相當(dāng)[1]。JAK/STAT細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑是由JAKS蛋白家族和STATS蛋白家族組成,JAKs活化后可以募集細(xì)胞漿內(nèi)相應(yīng)的信號(hào)傳導(dǎo)和底物STATS,從而使STATS活化,轉(zhuǎn)變?yōu)榱姿峄腟TATS,即p-STAT。p-STAT以二聚體(同源或異源)的存在方式移向核內(nèi),作用于目的基因的啟動(dòng)子,直接激活目的基因表達(dá)[2]。許多研究發(fā)現(xiàn)JAK/STAT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑可以誘導(dǎo)細(xì)胞的增殖、分化或凋亡過(guò)程,而STAT3與神經(jīng)細(xì)胞密切相關(guān)。本課題觀察JNK通路被抑制劑后,針刺百會(huì)透曲鬢穴療法對(duì)不同組大鼠p-STAT3表達(dá)的影響,探討本針刺方法對(duì)腦出血急性期后繼發(fā)性損傷的神經(jīng)保護(hù)機(jī)理及與大鼠腦組織中p-STAT3免疫組化表達(dá)的相關(guān)性。

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    健康清潔級(jí)雄性SD大鼠,8周齡,體質(zhì)量 (300±20)g,購(gòu)于哈爾濱獸醫(yī)研究所,動(dòng)物許可證號(hào):SCXK(吉)-2013-0002。飼養(yǎng)1周后開(kāi)始造模,造模前給予光照周期12 h,黑暗 12 h,禁食12 h,禁水6 h。

    1.2 試藥與儀器

    立體定位儀,成都市儀器廠,ST-5ND-C;臺(tái)式牙鉆機(jī),上海市齒科醫(yī)械廠,307-6型;組織包埋機(jī),天津市久圣醫(yī)療電子儀器有限公司,JBM-A;自動(dòng)脫水機(jī),天津市航空機(jī)電公司,TSJ-1型;石蠟展片機(jī),天津航空機(jī)電公司,ZPJ-1型;50 μL微量注射器,上海市高鴿儀器廠;1.5 寸針灸針,安迪牌;SP600125,碧云天生物;DMSO,Sigma美國(guó)中國(guó)分裝;p-STAT3免疫組化試劑盒,碧云天生物;多聚甲醛,天津博迪化工分析純;羊抗兔IgG,武漢博士德;PV-6001二步免疫組化檢測(cè)試劑,北京中衫金橋生物;PV-6002二步免疫組化檢測(cè)試劑,北京中衫金橋生物;DAB顯色試劑盒,北京中衫金橋生物。

    1.3 模型制備

    首先腹腔麻醉大鼠,使其固定于立體定位儀上,頭部矢狀位切皮,根據(jù)大鼠腦立體定位圖譜[3]確定右側(cè)尾殼核位置,參照鄒氏法和Rosenberg BG方法[4]制作腦出血大鼠模型。暴露前囟及冠狀縫,確定了前囟Bregma 點(diǎn),用牙科鉆頭在其右側(cè)旁開(kāi) 3.5 mm,后 0.2 mm鉆直徑約為1.0 mm的圓孔至硬腦膜后停止。用微量注射器取自體血(斷尾)50 μL注射,注射后留針約5 min。造模過(guò)程中的數(shù)量大于84只,如有死亡,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)均可以補(bǔ)充。待麻藥代謝后大鼠轉(zhuǎn)為清醒狀態(tài),采取Berderson[5]評(píng)分法選擇符合標(biāo)準(zhǔn)的模型。

    1.4 分組與干預(yù)

    將健康雄性SD大鼠隨機(jī)選取12只:空白組6只大鼠,假手術(shù)組6只大鼠。其余造模,分為模型組、針刺組、SP600125組,此3組每組24只??瞻捉M不作任何處理。假手術(shù)組:顱骨鉆孔,術(shù)后縫合,不注入自體血。模型組隨機(jī)選取24只大鼠,按時(shí)相分為6 h,1 d,3 d,7 d 4個(gè)時(shí)間點(diǎn),每個(gè)時(shí)間點(diǎn)6只大鼠,于造模成功后相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)取材。針刺組隨機(jī)選取24只大鼠,按時(shí)相分為 6 h,1 d,3 d,7 d 4個(gè)時(shí)間點(diǎn),每個(gè)時(shí)間點(diǎn) 6 只大鼠,于腦出血造模后6 h,1 d,3 d,7 d分別給予針刺治療。根據(jù)華興邦的大鼠穴位圖譜針刺患側(cè)百會(huì)透曲鬢穴。參照針灸技術(shù)操作規(guī)范[6](頭針部分)操作:大鼠針刺部位用75%的酒精消毒,由中心區(qū)向外擦拭,將1.5寸針灸針迅速刺入帽狀腱膜下層,針體與皮膚呈30°角進(jìn)針,每次進(jìn)針0.8寸,操作者肩肘腕關(guān)節(jié)和拇指固定不動(dòng),保持毫針固定,食指第一、二節(jié)呈半屈曲狀,用拇指食指持住針柄,食指掌指關(guān)節(jié)做屈伸運(yùn)動(dòng),以200r/min速度捻轉(zhuǎn)。各時(shí)間點(diǎn)給予針刺1次,留針30min,期間捻轉(zhuǎn)3次,每次3 min(同一人操作)。SP600125組隨機(jī)選取24只大鼠,按時(shí)相分為 6 h,1 d,3 d,7 d 4個(gè)時(shí)間點(diǎn),每個(gè)時(shí)間點(diǎn)6只大鼠。配置的DMSO質(zhì)量濃度為10mL/L,SP600125質(zhì)量濃度為3g/L。使SP600125溶于DMSO溶液,取10 μL,于腦出血造模前10 min給藥,注入側(cè)腦室,造模同模型組。

    1.5 標(biāo)本采集與檢測(cè)

    造模成功后在相應(yīng)時(shí)相點(diǎn),腹腔注射水合氯醛進(jìn)行麻醉,麻醉后快速用多聚甲醛灌注,待大鼠雙肺呈白色,軀體如板狀后,斷頭取腦。以注射自體血針道為中心做厚度約5mm冠狀切片。部分標(biāo)本將其放入4%多聚甲醛/0.1 mol/L PBS固定液中固定用于HE染色,按常規(guī)步驟進(jìn)行脫水、浸蠟、包埋,最后制成厚度大約為5 μm的石蠟切片。

    1.5.1 HE染色 石蠟切片,脫蠟水化,蘇木精 5 min,然后水洗。經(jīng)過(guò)20 s的鹽酸酒精分化后水洗,水洗要求充分。用弱氨水返藍(lán),再次持續(xù)20 s。然后用水浸泡10 min后,給予伊紅染色,用酒精和二甲苯分別脫水,透明,中性樹(shù)膠封片。

    1.5.2 p-STAT3的 IHC測(cè)定 首先切片常規(guī)脫蠟至水,置于3%雙氧水中充分在室溫下浸泡孵育后,熱抗原修復(fù)至自然冷卻與室溫一致,滴加一抗(適當(dāng)稀釋的p-STAT3多克隆抗體 1∶200),4℃孵育過(guò)夜,用0.01 mol/L PBS沖洗。然后滴加生物素化二抗工作液30 min,再次用 0.01 mol/L PBS 沖洗,清洗后 DAB 顯色5~30 min,鏡下控制顯色時(shí)間,并用蒸餾水充分沖洗,蘇木素復(fù)染并用中性樹(shù)膠封片。

    1.5.3 圖像分析 顯微鏡下,DAB顯色陽(yáng)性細(xì)胞呈棕黃色或褐色,利用Motic image 3.2圖像采集系統(tǒng)采集圖像并進(jìn)行分析在Motic-BA 400倍顯微鏡視野下觀察。

    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    2 結(jié) 果

    2.1 排除大鼠應(yīng)激反應(yīng)造成的神經(jīng)功能缺損

    大鼠造模蘇醒后,不排除會(huì)出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng),所以本實(shí)驗(yàn)經(jīng)過(guò)評(píng)分后篩選造模成功(成模標(biāo)準(zhǔn):提尾倒掛大鼠患側(cè)前肢緊貼胸壁或活動(dòng)時(shí)向?qū)?cè)傾倒,甚至不能行走)大鼠。如果是應(yīng)激反應(yīng)造成神經(jīng)功能的缺損,隨著時(shí)間的延長(zhǎng)(3 d內(nèi)),大鼠癥狀會(huì)減輕,而本實(shí)驗(yàn)造模成功的大鼠,神經(jīng)缺損癥狀會(huì)加重,評(píng)分增高。

    2.2 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)和不同干預(yù)方法下的神經(jīng)功評(píng)分情況

    見(jiàn)表1。大鼠平均在術(shù)后30 min蘇醒,空白組大鼠和假手術(shù)組無(wú)神經(jīng)功能缺損,大鼠活動(dòng)能力與之前無(wú)明顯差異。而造模成功后大鼠出現(xiàn)了不同程度的神經(jīng)功能缺損癥狀。腦出血病灶對(duì)側(cè)肢體出現(xiàn)了爬行時(shí)劃圈和與人類(lèi)相似的前肢屈曲回收于腹下,后肢外展的癥狀。造模后的大鼠6 h即有上述癥狀,3 d時(shí)受損情況最為明顯,隨后逐漸減輕。針刺組與SP600125組大鼠的臨床表現(xiàn)優(yōu)于模型組大鼠,針刺組與模型組比較,6 h,1 d 評(píng)分差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),3 d,7 d評(píng)分有顯著差異 (P<0.01)。SP600125組與模型組比較有明顯差異(P<0.01),而針刺組與SP 600125組比較,在各時(shí)間點(diǎn)均有顯著差異(P<0.01)。

    表1 各組大鼠神經(jīng)功能缺損體征評(píng)分比較(分,±s)

    表1 各組大鼠神經(jīng)功能缺損體征評(píng)分比較(分,±s)

    與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01;與SP600125組比較,△P<0.01。下同。

    6 h 1 d 3 d 7 d 0.00±0.00 0.00±0.00 0.00±0.00 0.00±0.00 0.00±0.00 0.00±0.00 0.00±0.00 0.00±0.00 2.17±0.72 2.25±0.44 2.83±0.83 1.75±0.44針刺組 24 1.53±0.48*△ 1.75±0.45*△ 2.15±0.44**△ 1.08±0.50**△SP600125 組 24 1.12±0.75**1.38±0.60**1.50±0.62**0.63±0.60**組 別 n空白組 6假手術(shù)組 6模型組 24

    2.3 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)p-STAT3的表達(dá)

    見(jiàn)表2。空白組和假手術(shù)組大鼠腦組織神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)及形態(tài)正常,未見(jiàn)p-STAT3陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá),故未計(jì)入統(tǒng)計(jì)范圍內(nèi)。p-STAT3主要表達(dá)于細(xì)胞核和胞質(zhì)中,胞質(zhì)內(nèi)表達(dá)量較少。表達(dá)在大鼠腦出血1 d后增多,3 d達(dá)高峰后迅速減少,7 d仍有表達(dá)。p-STAT3在大鼠腦出血后6 h表達(dá)開(kāi)始增多,1 d表達(dá)相對(duì)最多,3 d達(dá)高峰后迅速減少,7 d仍有表達(dá)。針刺組各時(shí)間點(diǎn)陽(yáng)性細(xì)胞灰度值均比模型組降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。針刺組與SP600125組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

    表2 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)p-STAT3灰度值比較(±s)

    表2 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)p-STAT3灰度值比較(±s)

    6 h 1 d 3 d 7 d 2.67±0.82 2.67±0.82 2.67±0.82 2.67±0.82 3.17±0.75 3.17±0.75 3.17±0.75 3.17±0.75 8.25±0.93 45.56±5.41 32.63±4.02 17.50±1.51針刺組 24 7.33±1.75*△ 39.17±4.23*△ 28.00±1.79*△ 14.18±1.47*△SP600125 組 24 5.45±0.84**31.67±4.75**24.92±3.88**10.50±2.88**組 別 n空白組 6假手術(shù)組 6模型組 24

    2.4 各組大鼠腦組織形態(tài)學(xué)觀察

    光鏡下可見(jiàn),空白組和假手術(shù)組標(biāo)本神經(jīng)元細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞飽滿,未見(jiàn)炎性浸潤(rùn),血管內(nèi)皮結(jié)構(gòu)正常,胞內(nèi)核仁清晰,核染色質(zhì)分布均勻,組腦組織結(jié)構(gòu)完整。術(shù)后6 h,組織內(nèi)血腫帶出現(xiàn),且邊界混亂不清晰,部分神經(jīng)細(xì)胞表現(xiàn)出核固縮,炎性細(xì)胞開(kāi)始表現(xiàn)出浸潤(rùn),膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)生了腫脹改變,組織細(xì)胞間隙可見(jiàn)條索狀等不規(guī)則空泡,腦組織液化,開(kāi)始出現(xiàn)壞死。1 d逐漸加重,3 d表現(xiàn)比其他時(shí)間點(diǎn)明顯,7 d后,血腫組織縮小,膠質(zhì)細(xì)胞在增生后回縮,細(xì)胞層次混亂不清。針刺組和SP600125組較模型組損害減輕。

    3 討 論

    JNK家族是促分裂原活化蛋白激酶家族的成員之一,JNK信號(hào)通路可被細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子、應(yīng)激等多種因素激活,在細(xì)胞增殖與分化、細(xì)胞凋亡、應(yīng)激反應(yīng)等多種細(xì)胞調(diào)控方面起著至關(guān)重要的作用[7]。其主要作用是參與了細(xì)胞的凋亡過(guò)程。SP600125通過(guò)可逆性競(jìng)爭(zhēng)ATP抑制JNK磷酸化,選擇性抑制JNK-1、2、3,從而起到抑制JNK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的作用[8]。同時(shí),SP600125參與了抑制細(xì)胞活化和分化,并且影響炎癥基因的表達(dá),Bennett等通過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí)SP600125具有抑制細(xì)胞凋亡的發(fā)生和對(duì)細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)起到良性作用[9]。STAT3作為JNK下游的JAK/STAT3信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路蛋白,參與了細(xì)胞的增殖,分化,凋亡等多個(gè)生理病理過(guò)程[10],有研究顯示大鼠在腦出血和腦缺血時(shí),JAK/STAT3信號(hào)通路可立即被引發(fā)激活,而抑制本條通路的激活可以通過(guò)減少神經(jīng)元死亡而起到腦保護(hù)作用[11-12]。本實(shí)驗(yàn)選取百會(huì)透曲鬢穴進(jìn)行針刺,此兩穴是治療中風(fēng)效果較為理想的經(jīng)驗(yàn)效穴,現(xiàn)代研究證明[13-17]可以減輕水腫程度、影響自噬相關(guān)蛋白,抑制或減輕炎性反應(yīng),抑制細(xì)胞凋亡,從而保護(hù)了受損的神經(jīng),起到對(duì)腦的良性調(diào)節(jié)作用。古代醫(yī)學(xué)認(rèn)為百會(huì)位于頭巔頂部,屬督脈,是手足三陽(yáng)、足厥陰、督脈諸經(jīng)之會(huì),功能祛風(fēng)、醒腦、宣閉、開(kāi)竅、泄熱,且是為諸陽(yáng)之會(huì),百脈之宗。其穴位解剖位置在淺表皮膚層布有枕動(dòng)、靜脈吻合網(wǎng)及額神經(jīng)和枕大神經(jīng),腦內(nèi)深層布有大腦皮質(zhì)運(yùn)動(dòng)區(qū)、旁中央小葉和動(dòng)靜脈網(wǎng),針刺百會(huì)穴通過(guò)神經(jīng)體液調(diào)節(jié)可以達(dá)到改善神經(jīng)缺損癥狀[18-19]。曲鬢位于足少陽(yáng)經(jīng),是足太陽(yáng)和足少陽(yáng)之會(huì),其解剖位置在顳肌中,有顳淺動(dòng)、靜脈,耳顳神經(jīng)顳支分布。此種針刺方法跨過(guò)了頂、額、顳3區(qū),同時(shí)督脈、足太陽(yáng)、足少陽(yáng)3經(jīng)貫穿,這一穴區(qū)經(jīng)脈從頭至足縱貫全身,起到統(tǒng)調(diào)一身之陽(yáng)氣、醒腦開(kāi)竅的功能。在百會(huì)至曲鬢穴區(qū)進(jìn)行透刺,其現(xiàn)代解剖位置同樣與本病相符合,再施以快速捻轉(zhuǎn)手法,可以鼓動(dòng)頭部經(jīng)氣的運(yùn)行,通達(dá)全身經(jīng)絡(luò)系統(tǒng)。

    從本實(shí)驗(yàn)觀察到腦出血造模成功后,p-STAT3的表達(dá)即開(kāi)始升高,針刺組p-STAT3的表達(dá)同樣升高,但是低于模型組,且與抑制劑的作用方向一致,表明本針刺方法抑制了p-STAT3的表達(dá),起到了腦保護(hù)作用,為臨床中醫(yī)治療腦出血提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

    [1]白永懌.L-精氨酸影響動(dòng)脈內(nèi)皮功能的薈萃分析及腦卒中的遺傳易感性研究[D].北京:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院,2009.

    [2]謝惠芳.JAK/STAT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在局灶性腦缺血再灌注損傷中作用的研究[D].廣州:第一軍醫(yī)大學(xué),2007.

    [3]包新民,舒斯云.大鼠腦立體定位圖譜[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1991:35-40.

    [4]Rosenberg GA,Mun-Bryce S,Wesley M,et al.Collagenaseinduced intrecerebr-alhe morrhage in rats[J].Stroke,1990,21(5):801-807.

    [5]Berderson JB,Pitts LH,Tsuji M,et al.Rat middle cerebral artery occlusion:evaluation of the model and development of neurologic examination[J].Stroke,1986,17:472-476.

    [6]針灸技術(shù)操作規(guī)范[J].中國(guó)針灸,2009,12(29):1004-1007.

    [7]黎增輝.JNK信號(hào)通路[J].國(guó)際病理科學(xué)與臨床雜志,2010,30(3):273-276.

    [8]張霞,錢(qián)濤,高維娟,等.JNK通路促進(jìn)大鼠腦缺血再灌注海馬神經(jīng)元凋亡[J].中國(guó)病理生理志,2012,28(8):1431-1435.

    [9]Bennett BL,Dennis T,Sasaki B,et al.SP600125,an anthrapyrazolone inhibitor of Jun N-terminal Kinase[J].Proc-Natl AcadSci USA,2001,98(24):13681-13686.

    [10]王緒常.JAK2-STAT3信號(hào)通路在大鼠腦出血模型中作用機(jī)制的研究[D].錦州:遼寧醫(yī)學(xué)院,2015.

    [11]袁志俊,李小剛,何曉英.JAK/STAT3通路介導(dǎo)熱休克蛋白對(duì)腦出血的神經(jīng)保護(hù)作用[J].中國(guó)神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志,2016,17(1):14-18.

    [12]陳真珍,王凱華,黃龍堅(jiān).JAK2/STAT3信號(hào)傳導(dǎo)通路在腦缺血再灌注損傷中的作用研究[J].中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志,2013,10(16):29-32.

    [13]鄒偉,王瓏,孫曉偉,等.頭針透刺對(duì)腦出血大鼠腦組織IL-6 表達(dá)影響的研究[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào),2012,40(1):81-83.

    [14]牛明明,鄒偉,于學(xué)平.百會(huì)透曲鬢針刺法對(duì)腦出血大鼠自噬相關(guān)蛋白LC3A/B的影響研究[J].中醫(yī)臨床研究,2016,8(12):15-18.

    [15]關(guān)瑞橋.針刺“百會(huì)”透“曲鬢”對(duì)腦出血大鼠血清中CD62P的表達(dá)影響及相關(guān)性的實(shí)驗(yàn)研究[D].哈爾濱:黑龍江中醫(yī)藥大學(xué),2016.

    [16]包宇.針刺“百會(huì)”透“曲鬢”對(duì)腦出血急性期大鼠PI3K、PAKT、Bax影響的研究[D].哈爾濱:黑龍江中醫(yī)藥大學(xué),2015.

    [17]李大信.基于炎癥反應(yīng)及PKA/CR巧通路硏究針刺對(duì)腦出血大鼠的腦保護(hù)化機(jī)制[D].哈爾濱:黑龍江中醫(yī)藥大學(xué),2016.

    [18]韋羨萍,姚寶農(nóng),李仕光,等.艾灸百會(huì)穴治療急性腦梗死的療效及對(duì)超敏C-反應(yīng)蛋白和D-二聚體的影響[J].中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥,2013,20(23):118-119.

    [19]石學(xué)敏.針灸學(xué)[M].北京:中國(guó)中醫(yī)藥出版社,2006:108-109.

    Study of Penetration Acupuncture on p-STAT3 of Cerebral Hemorrhage Rats′Brain Tissues after JNK Pathway Inhibition

    KONG Ying,DUAN Hongchao,LIU Yang,et al. Heilongjiang University of Chinese Medicine,Heilongjiang,Harbin 150001,China.

    Objective:To observe the expression variation of JNK pathway′s downstream of molecule-p-STAT3,after JNK pathway inhibition by acupuncture penetrating Baihui(GV20) and Qubin(GB7) on acute cerebral hemorrhage model rats,and to observe whether acupuncture had protection on brain tissues.Methods:84 male SD rats were randomly divided into 5 groups: blank groups,sham operation group,the model group,acupuncture group(model and acupuncture group) and inhibitor group(SP600125).Each group had 24 rats.The mode rats of autologous blood cerebral hemorrhage were made,and after modeling success,they were acupunctured through the three parts of frontal,parietal and temporal with one needle by the method of acupuncture penetrating Baihui(GV20) and Qubin(GB7).After successful modeling,acupuncture was taken at four points: 6 h,3 d and 7 d,and the gray value of p-STAT3 positive cells in brain tissue was observed by immunohistochemistry (IHC).Results:Acupuncture penetrating Baihui(GV20)and Qubin (GB7)could reduce the nerve defect symptoms and improve the score of model animals.The expression of p-STAT3 began to increase in the six hours after intracerebral hemorrhage in rats,and the expression was the most in the first day,and decreased rapidly after reaching the peak on the third day,and still expressed on the seventh day.The gray value of the positive cells in the acupuncture group was lower than that in the model group at each time point,and the difference was significant.There was statistical significance between acupuncture group and SP600125 group.Conclusion:Acupuncture penetrating Baihui(GV20) and Qubin(GB7) can reduce the degree of neurologic impairment and reduce the expression of p-STAT3 protein in rats,which indicates that acupuncture plays a neuroprotective role in the treatment of intracerebral hemorrhage.

    Cerebral hemorrhage;Acupuncture penetrating Baihui(GV20) and Qubin(GB7);p-STAT3

    R245.3

    A

    1004-745X(2017)11-1895-04

    10.3969/j.issn.1004-745X.2017.11.005

    黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)博士創(chuàng)新基金 (2017bs05);黑龍江省教育廳科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目(12531633);黑龍江省博士后資助項(xiàng)目(LBH-Z12249);黑龍江省中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院科研基金資助面上項(xiàng)目(YM-201701)

    △通信作者(電子郵箱:damwaongi123@aliyun.com)

    2017-07-24)

    猜你喜歡
    百會(huì)造模中醫(yī)藥大學(xué)
    《山西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)》征稿簡(jiǎn)則
    腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型建立方法及評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)研究進(jìn)展
    《江中中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)》簡(jiǎn)介
    脾腎陽(yáng)虛型骨質(zhì)疏松癥動(dòng)物模型造模方法及模型評(píng)價(jià)
    濕熱證動(dòng)物模型造模方法及評(píng)價(jià)研究
    “三才逆灸法”干預(yù)高血壓前期即刻效應(yīng)臨床觀
    針刺結(jié)合推拿治療頸性眩暈67例
    中醫(yī)藥大學(xué)本科生流行病學(xué)教學(xué)改革初探
    湖北中醫(yī)藥大學(xué)
    改良百會(huì)壓灸配合耳穴壓豆治療虛寒型頸性眩暈30例
    免费观看人在逋| 免费观看人在逋| 国产不卡一卡二| 国产一区二区三区视频了| 国内精品一区二区在线观看| 在线播放无遮挡| 日韩高清综合在线| 91在线精品国自产拍蜜月 | 听说在线观看完整版免费高清| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲国产精品999在线| 特大巨黑吊av在线直播| 男人舔女人下体高潮全视频| 老司机在亚洲福利影院| 亚洲在线观看片| 国产亚洲欧美98| 女警被强在线播放| av视频在线观看入口| 欧美黄色片欧美黄色片| 日本与韩国留学比较| 内射极品少妇av片p| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 亚洲av免费高清在线观看| 欧美一区二区国产精品久久精品| 午夜福利18| netflix在线观看网站| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 黄片大片在线免费观看| 哪里可以看免费的av片| 欧美日本亚洲视频在线播放| 少妇熟女aⅴ在线视频| 一本精品99久久精品77| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 一区二区三区免费毛片| 国产成人福利小说| 亚洲国产精品sss在线观看| 婷婷精品国产亚洲av| 午夜精品一区二区三区免费看| 男人和女人高潮做爰伦理| 天天添夜夜摸| 少妇人妻一区二区三区视频| 欧美日韩黄片免| 国产爱豆传媒在线观看| 一区二区三区激情视频| 99热这里只有是精品50| 亚洲avbb在线观看| 老司机午夜十八禁免费视频| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 久99久视频精品免费| 久久久久久久精品吃奶| 哪里可以看免费的av片| 精品乱码久久久久久99久播| 国产av不卡久久| 九色成人免费人妻av| 日韩精品青青久久久久久| 中文字幕高清在线视频| 制服人妻中文乱码| 精品午夜福利视频在线观看一区| 美女 人体艺术 gogo| 日本黄色片子视频| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 国产欧美日韩一区二区精品| 亚洲国产色片| 久久九九热精品免费| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 18禁在线播放成人免费| 国产三级黄色录像| 丰满乱子伦码专区| 床上黄色一级片| 亚洲精品成人久久久久久| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 久久精品影院6| 2021天堂中文幕一二区在线观| 动漫黄色视频在线观看| 99久久九九国产精品国产免费| 中文字幕高清在线视频| 国产在视频线在精品| 欧美中文综合在线视频| 亚洲久久久久久中文字幕| 亚洲一区高清亚洲精品| 国产伦人伦偷精品视频| 亚洲av免费在线观看| 国产真实伦视频高清在线观看 | 男女视频在线观看网站免费| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 久久久久久久久大av| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 啦啦啦韩国在线观看视频| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 午夜福利在线观看吧| 69av精品久久久久久| 免费观看人在逋| 搡老妇女老女人老熟妇| 成年女人永久免费观看视频| 精品国产美女av久久久久小说| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 国产精品亚洲一级av第二区| 麻豆久久精品国产亚洲av| 97碰自拍视频| 日韩成人在线观看一区二区三区| 久久精品人妻少妇| 国产乱人伦免费视频| 国产成+人综合+亚洲专区| 麻豆一二三区av精品| 国产av麻豆久久久久久久| 老司机深夜福利视频在线观看| 成人永久免费在线观看视频| 看片在线看免费视频| 国产综合懂色| 亚洲国产中文字幕在线视频| 99热这里只有精品一区| 级片在线观看| 国产色婷婷99| 国产亚洲精品av在线| 少妇的逼水好多| 精品国内亚洲2022精品成人| 国模一区二区三区四区视频| 欧美黑人巨大hd| 1024手机看黄色片| 黄色女人牲交| 国产av在哪里看| 男人舔奶头视频| 波多野结衣高清无吗| ponron亚洲| 两个人的视频大全免费| 国产一级毛片七仙女欲春2| 国产精品综合久久久久久久免费| 亚洲av五月六月丁香网| 国产乱人伦免费视频| 又黄又爽又免费观看的视频| 日韩欧美在线乱码| 免费在线观看日本一区| 观看免费一级毛片| 真实男女啪啪啪动态图| 欧美大码av| 国产在视频线在精品| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 亚洲欧美日韩东京热| 亚洲国产欧美网| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 亚洲av成人精品一区久久| 在线国产一区二区在线| 亚洲av二区三区四区| 日本黄色视频三级网站网址| 精品不卡国产一区二区三区| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| av国产免费在线观看| 国产精品免费一区二区三区在线| 午夜亚洲福利在线播放| 国产精品 国内视频| 久久午夜亚洲精品久久| 国产成人av教育| 51国产日韩欧美| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 色视频www国产| 真实男女啪啪啪动态图| 人人妻人人看人人澡| 日韩欧美在线乱码| 中文字幕高清在线视频| 99久久精品一区二区三区| 一级毛片高清免费大全| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 在线视频色国产色| 男人舔女人下体高潮全视频| 国产高清激情床上av| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲欧美日韩无卡精品| 最新中文字幕久久久久| 一a级毛片在线观看| 国产欧美日韩一区二区三| 久久中文看片网| 99热只有精品国产| 国产一区二区在线av高清观看| a级毛片a级免费在线| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 亚洲精品色激情综合| 亚洲av成人av| 亚洲内射少妇av| 淫秽高清视频在线观看| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 偷拍熟女少妇极品色| 香蕉丝袜av| 欧美zozozo另类| 午夜老司机福利剧场| 亚洲精品久久国产高清桃花| 久久久久国内视频| 嫁个100分男人电影在线观看| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国产中年淑女户外野战色| 日本三级黄在线观看| 看黄色毛片网站| 欧美+日韩+精品| 欧美最新免费一区二区三区 | 天美传媒精品一区二区| 国模一区二区三区四区视频| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 最近最新中文字幕大全电影3| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 国产极品精品免费视频能看的| 好男人电影高清在线观看| 国内揄拍国产精品人妻在线| 久久久久久久午夜电影| 午夜免费激情av| 成年女人毛片免费观看观看9| 国产成人a区在线观看| 中文资源天堂在线| 日韩精品中文字幕看吧| 久久香蕉精品热| 欧美+亚洲+日韩+国产| 午夜免费观看网址| 国产高清有码在线观看视频| 三级毛片av免费| www.熟女人妻精品国产| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 激情在线观看视频在线高清| 成人av一区二区三区在线看| 国产男靠女视频免费网站| 久久久久久久久大av| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲精品色激情综合| 麻豆国产97在线/欧美| 一夜夜www| 好男人在线观看高清免费视频| 色视频www国产| 成人一区二区视频在线观看| 日本三级黄在线观看| 男女那种视频在线观看| 欧美日韩国产亚洲二区| 午夜两性在线视频| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| www.色视频.com| 99国产综合亚洲精品| 亚洲五月婷婷丁香| 女人被狂操c到高潮| 国产成人a区在线观看| 成人国产综合亚洲| 最好的美女福利视频网| 十八禁网站免费在线| 两个人视频免费观看高清| 俺也久久电影网| 国产麻豆成人av免费视频| 精品午夜福利视频在线观看一区| xxx96com| 久久久久免费精品人妻一区二区| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 国产爱豆传媒在线观看| 国产真人三级小视频在线观看| 欧美黄色片欧美黄色片| 欧美日韩乱码在线| 午夜福利视频1000在线观看| 99久久精品国产亚洲精品| www.熟女人妻精品国产| 亚洲中文日韩欧美视频| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 色在线成人网| 一二三四社区在线视频社区8| 欧美在线一区亚洲| 日本黄色片子视频| 亚洲中文日韩欧美视频| 在线a可以看的网站| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 亚洲激情在线av| 欧美性感艳星| 亚洲人与动物交配视频| 老师上课跳d突然被开到最大视频 久久午夜综合久久蜜桃 | 日本黄大片高清| 欧美黑人欧美精品刺激| 日韩欧美精品免费久久 | 禁无遮挡网站| 国产69精品久久久久777片| 日本一本二区三区精品| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 一本一本综合久久| 欧美成人免费av一区二区三区| a级一级毛片免费在线观看| 全区人妻精品视频| 一区福利在线观看| 欧美日韩乱码在线| 欧美3d第一页| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 国语自产精品视频在线第100页| 国产99白浆流出| 国产高清激情床上av| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 成人鲁丝片一二三区免费| 久久人妻av系列| 无限看片的www在线观看| 成人av一区二区三区在线看| 99久久精品热视频| 超碰av人人做人人爽久久 | 成人亚洲精品av一区二区| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 国产亚洲av嫩草精品影院| 国产91精品成人一区二区三区| 日本与韩国留学比较| 制服丝袜大香蕉在线| 日本黄色片子视频| 日韩大尺度精品在线看网址| 999久久久精品免费观看国产| 草草在线视频免费看| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 久久草成人影院| 国内精品一区二区在线观看| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲黑人精品在线| 一级作爱视频免费观看| 天堂影院成人在线观看| 麻豆成人av在线观看| 成人三级黄色视频| 欧美日韩乱码在线| 校园春色视频在线观看| 黄色成人免费大全| 黄色女人牲交| or卡值多少钱| 两人在一起打扑克的视频| 亚洲成av人片在线播放无| 午夜福利在线在线| 免费观看人在逋| 国产97色在线日韩免费| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 在线观看免费视频日本深夜| 国产伦精品一区二区三区视频9 | 国产亚洲精品久久久com| 怎么达到女性高潮| 老熟妇仑乱视频hdxx| 99精品欧美一区二区三区四区| 99在线人妻在线中文字幕| 欧美激情在线99| 亚洲avbb在线观看| 日本成人三级电影网站| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 夜夜爽天天搞| 中文在线观看免费www的网站| 国产一区二区三区视频了| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 真人一进一出gif抽搐免费| 欧美大码av| 久久香蕉精品热| 18禁国产床啪视频网站| 成年人黄色毛片网站| 窝窝影院91人妻| 91字幕亚洲| 听说在线观看完整版免费高清| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 成人欧美大片| 成人av一区二区三区在线看| 亚洲av成人av| 亚洲成人久久爱视频| 在线播放无遮挡| 国产不卡一卡二| 欧美成人a在线观看| 久久伊人香网站| 亚洲色图av天堂| www日本黄色视频网| 欧美日韩乱码在线| e午夜精品久久久久久久| 欧美高清成人免费视频www| 欧美+亚洲+日韩+国产| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 精品一区二区三区视频在线 | 午夜福利18| 观看美女的网站| 老司机午夜福利在线观看视频| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 成人亚洲精品av一区二区| 亚洲最大成人中文| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 日本a在线网址| 老司机午夜福利在线观看视频| 日韩精品中文字幕看吧| 美女大奶头视频| 性色avwww在线观看| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产一区在线观看成人免费| 桃红色精品国产亚洲av| 99热精品在线国产| 国产男靠女视频免费网站| 欧美一区二区亚洲| 人妻久久中文字幕网| 又紧又爽又黄一区二区| 18禁国产床啪视频网站| 一区二区三区免费毛片| 国产在线精品亚洲第一网站| 日韩免费av在线播放| 天美传媒精品一区二区| www.熟女人妻精品国产| 亚洲精品在线美女| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| x7x7x7水蜜桃| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 国产日本99.免费观看| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 人人妻人人澡欧美一区二区| 天美传媒精品一区二区| www.熟女人妻精品国产| 国内精品美女久久久久久| 九色成人免费人妻av| 美女高潮的动态| 在线观看66精品国产| 亚洲,欧美精品.| 黄色片一级片一级黄色片| 天天一区二区日本电影三级| 他把我摸到了高潮在线观看| 国产欧美日韩一区二区精品| 国产午夜精品论理片| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 欧美乱妇无乱码| 国产午夜精品论理片| 国产精品免费一区二区三区在线| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 久久久久免费精品人妻一区二区| 国产一区在线观看成人免费| 国产亚洲av嫩草精品影院| 国产亚洲精品一区二区www| 香蕉av资源在线| 国产麻豆成人av免费视频| h日本视频在线播放| 国产私拍福利视频在线观看| 精品熟女少妇八av免费久了| 国产精品亚洲美女久久久| 婷婷六月久久综合丁香| 亚洲国产色片| 黄色日韩在线| 观看美女的网站| 午夜视频国产福利| 丰满的人妻完整版| 免费观看的影片在线观看| 国产激情偷乱视频一区二区| 成人三级黄色视频| 男插女下体视频免费在线播放| 中文字幕av在线有码专区| 男人舔女人下体高潮全视频| 色精品久久人妻99蜜桃| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产高清激情床上av| bbb黄色大片| 亚洲av二区三区四区| 床上黄色一级片| 亚洲欧美精品综合久久99| 在线天堂最新版资源| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产美女午夜福利| 757午夜福利合集在线观看| 美女黄网站色视频| 在线免费观看不下载黄p国产 | 欧美高清成人免费视频www| 成人特级黄色片久久久久久久| 五月玫瑰六月丁香| 亚洲成a人片在线一区二区| 精品不卡国产一区二区三区| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 久久草成人影院| 三级国产精品欧美在线观看| 91在线精品国自产拍蜜月 | 久久精品国产清高在天天线| av片东京热男人的天堂| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 毛片女人毛片| 亚洲一区二区三区不卡视频| 国产主播在线观看一区二区| 熟女人妻精品中文字幕| 亚洲av二区三区四区| 偷拍熟女少妇极品色| 欧美最黄视频在线播放免费| 一区福利在线观看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 亚洲专区国产一区二区| 极品教师在线免费播放| xxx96com| 国产不卡一卡二| 两人在一起打扑克的视频| 亚洲成人久久性| 亚洲精华国产精华精| netflix在线观看网站| 国产精品久久久久久精品电影| 99精品久久久久人妻精品| 欧美激情久久久久久爽电影| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 特大巨黑吊av在线直播| 亚洲精品在线美女| 岛国在线免费视频观看| 麻豆一二三区av精品| 久久久成人免费电影| 亚洲成a人片在线一区二区| 国产精品久久久久久久电影 | 一级毛片女人18水好多| 热99在线观看视频| 国产成人欧美在线观看| 国产高潮美女av| 美女cb高潮喷水在线观看| 国产精品国产高清国产av| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 天堂影院成人在线观看| 少妇人妻一区二区三区视频| 麻豆成人午夜福利视频| 网址你懂的国产日韩在线| 国产精品爽爽va在线观看网站| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 少妇的丰满在线观看| 国产乱人视频| 日韩亚洲欧美综合| 国产黄片美女视频| 欧美一区二区亚洲| 午夜视频国产福利| 亚洲av美国av| 欧美中文综合在线视频| 最好的美女福利视频网| 亚洲国产色片| 午夜两性在线视频| 欧美在线一区亚洲| 欧美日韩国产亚洲二区| 麻豆国产97在线/欧美| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美 | 成年人黄色毛片网站| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 久久6这里有精品| 伊人久久精品亚洲午夜| 深爱激情五月婷婷| 丁香六月欧美| 丰满人妻一区二区三区视频av | 中文字幕av在线有码专区| 国产精品免费一区二区三区在线| 国产单亲对白刺激| 好男人电影高清在线观看| 免费观看的影片在线观看| 手机成人av网站| 亚洲性夜色夜夜综合| 欧美最黄视频在线播放免费| www.色视频.com| 国产v大片淫在线免费观看| 嫩草影视91久久| 亚洲av免费高清在线观看| 黄色日韩在线| 69人妻影院| 亚洲无线观看免费| 久久久久久国产a免费观看| 两个人看的免费小视频| 国产高清激情床上av| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 日韩免费av在线播放| 青草久久国产| av天堂中文字幕网| 成人午夜高清在线视频| 国产伦在线观看视频一区| 麻豆国产97在线/欧美| 亚洲在线自拍视频| 亚洲激情在线av| 99热这里只有精品一区| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲av一区综合| 欧美大码av| 国产高清激情床上av| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 丁香欧美五月| 免费看日本二区| 免费看a级黄色片| 少妇人妻精品综合一区二区 | 19禁男女啪啪无遮挡网站| 亚洲av成人精品一区久久| 国产精品,欧美在线| 国产精品久久电影中文字幕| 亚洲欧美日韩无卡精品| 少妇的丰满在线观看| 亚洲国产精品999在线| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 午夜影院日韩av| 夜夜夜夜夜久久久久| 亚洲自拍偷在线| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 日韩欧美精品v在线| 性欧美人与动物交配| 无遮挡黄片免费观看| 久久草成人影院| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 亚洲av电影不卡..在线观看| 亚洲精品日韩av片在线观看 | 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美 | 成人亚洲精品av一区二区| 日韩成人在线观看一区二区三区| 国产精品亚洲av一区麻豆| 国产真实伦视频高清在线观看 | 午夜a级毛片| 亚洲avbb在线观看| 国产伦精品一区二区三区视频9 | 老司机在亚洲福利影院| 亚洲黑人精品在线| 亚洲色图av天堂| 欧美成人一区二区免费高清观看| 国产精品98久久久久久宅男小说| 俺也久久电影网| 三级国产精品欧美在线观看| 黄色片一级片一级黄色片| 人人妻人人澡欧美一区二区| 少妇的丰满在线观看| 一a级毛片在线观看| 国产久久久一区二区三区| 欧美午夜高清在线| 色尼玛亚洲综合影院| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 久久九九热精品免费| 一区二区三区高清视频在线| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 男女午夜视频在线观看| 免费看日本二区| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 黄色丝袜av网址大全| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 天堂网av新在线| 国产成人福利小说| 中文资源天堂在线|