高效液相色譜法測(cè)定10%甲維鹽·甲蟲肼懸浮劑中有效成分含量方法研究

顧愛國(guó)　曹磊　王莉

摘要 本文采用高效液相色譜法建立了甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽·甲氧蟲酰肼懸浮劑含量測(cè)定方法。結(jié)果表明，該方法能夠快速準(zhǔn)確測(cè)定該樣品中有效成分甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽及甲氧蟲酰肼的含量，符合對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量控制的要求。

關(guān)鍵詞 高效液相色譜法；甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽；甲氧蟲酰肼；含量測(cè)定

中圖分類號(hào) X839.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2017）21-0126-02

Abstract Determination of content on 10% emamectin benzoate·methoxyfenozide SC by HPLC was evaluated.The results showed that the method could be used for rapid and accurate determination of the effective components（emamectin benzoate and methoxyfenozide） in this sample.The aim of this study is to provide scientific basis for the laboratory quality management and control of this product.

Key words HPLC；emamectin benzoate；methoxyfenozide； content determination

10%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽·甲氧蟲酰肼懸浮劑為復(fù)配低毒殺菌劑，用于防治水稻二化螟與水稻大螟，效果佳[1-2]。因目前尚無(wú)該產(chǎn)品質(zhì)量分析方面的報(bào)道，故本文旨在建立高效液相色譜法測(cè)定該產(chǎn)品中有效成分含量的方法，以供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器及試劑

Agilent 1260高效液相色譜儀，美國(guó)安捷倫公司生產(chǎn)；250 mm×4.6 mm（i.d）不銹鋼柱，內(nèi)裝ODS-C18，粒徑5 μm填料；電子分析天平（XS105DU型，METTLER TOLEDO）；超聲清洗儀（KQ-300E，昆山市超聲儀器有限公司）；甲醇（含量99.9%，色譜純，德國(guó)Merck）；新蒸二次蒸餾水（18.2 MΩ·cm，Milli-Q）；甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽標(biāo)樣（純度96.9%，國(guó)家農(nóng)藥質(zhì)檢中心提供）；甲氧蟲酰肼標(biāo)樣（純度99.0%，國(guó)家農(nóng)藥質(zhì)檢中心提供）；10%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽·甲氧蟲酰肼懸浮劑（企業(yè)提供）。

1.2 色譜條件

流動(dòng)相：甲醇+乙腈+0.3%氨水溶液=45+55+10（v/v/v）；流速1.2 mL/min；柱溫25 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)230 nm；進(jìn)樣體積10 μL。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 標(biāo)樣溶液的配制。分別精密稱取0.02 g甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽標(biāo)樣及0.02 g甲氧蟲酰肼標(biāo)樣（精確至0.000 1 g），置于同一100 mL容量瓶中，加甲醇后超聲溶解，冷卻至室溫后用甲醇稀釋至刻度，搖勻并過濾即得[1-2]。

1.3.2 樣品溶液的配制。稱取0.4 g試樣（精確至0.000 1 g），置于100 mL容量瓶中，加甲醇后超聲溶解，冷卻至室溫后用甲醇稀釋至刻度，搖勻并過濾即得[3-4]。

1.3.3 測(cè)定。在上述條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針有效成分峰面積相對(duì)變化小于1.5%后，按標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序測(cè)定。

1.3.4 計(jì)算。試樣中甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽及甲氧蟲酰肼的質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω按下式計(jì)算：

1.4 方法學(xué)驗(yàn)證

1.4.1 檢出限及定量限。按照1.3.1所述，配置成0.2 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)混合溶液進(jìn)行測(cè)定，按3倍信噪比和10倍信噪比分別計(jì)算檢出限和定量限。

1.4.2 線性關(guān)系。分別精密稱取甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽標(biāo)樣及甲氧蟲酰肼標(biāo)樣各0.05 g（精確至0.000 1 g）置于同一50 mL容量瓶中，加入甲醇后超聲溶解并稀釋至刻度即得到1.0 mg/mL工作標(biāo)準(zhǔn)液，再分別稀釋至濃度為0.05、0.10、0.20、0.50 mg/mL的工作標(biāo)準(zhǔn)溶液，根據(jù)結(jié)果擬合回歸線性方程[5-6]。

1.4.3 精密度。將1.3.1所述配置的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)混合溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，計(jì)算平均峰面積及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）。

1.4.4 回收率。在空白樣品中分別添加0.05、0.20、1.00 mg/mL的混標(biāo)溶液，進(jìn)行加標(biāo)回收率測(cè)定，每個(gè)添加水平各配置3份供試品溶液（n=9），計(jì)算平均回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）。

2 結(jié)果與分析

2.1 檢出限及定量限

試驗(yàn)得出甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽和甲氧蟲酰肼的檢出限分別為1.98、0.16 μg/mL，定量限分別為 6.59、0.53 μg/mL。

2.2 線性關(guān)系

如圖1所示，甲氧蟲酰肼線性方程 y=6 560.7x+2 098.1（n=5，R2=0.999 8）；甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽線性方程y=3 966.5x+1 280.7（n=5，R2=0.999 4），線性范圍均為50～1 000 μg/mL。

2.3 精密度和回收率

如表1所示，該方法精密度良好，滿足檢測(cè)要求。被測(cè)物為甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽時(shí)，添加水平為0.05 mg/mL時(shí)，測(cè)得3 份供試樣品的平均回收率分別為98.7%、98.9%、98.9%；添加水平為0.20 mg/mL時(shí)，測(cè)得3份供試樣品的平均回收率分別為99.1%、99.0%、98.9%；添加水平為1.00 mg/mL時(shí)，測(cè)得3份供試樣品的平均回收率分別為99.1%、99.2%、98.9%。RSD為0.15%。被測(cè)物為甲氧蟲酰肼時(shí)，添加水平為0.05 mg/mL時(shí)，測(cè)得3份供試樣品的平均回收率分別為99.1%、99.0%、99.3%；添加水平為0.20 mg/mL時(shí)，測(cè)得3份供試樣品的平均回收率分別為99.3%、99.0%、98.9%；添加水平為1.00 mg/mL時(shí)，測(cè)得3份供試樣品的平均回收率分別為99.2%、98.8%、99.1%。RSD為0.18%?？梢?，在添加3個(gè)濃度混標(biāo)溶液后，回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均符合檢測(cè)要求。

2.4 樣品測(cè)定

用10%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽·甲氧蟲酰肼懸浮劑作樣品，對(duì)其有效成分進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如圖2、3所示。可知該檢測(cè)方法具有峰型好、分離度高、定量準(zhǔn)確等特點(diǎn)。

3 結(jié)論

建立的10%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽·甲氧蟲酰肼懸浮劑含量的高效液相色譜檢測(cè)方法，完全適用于該產(chǎn)品有效成分的含量測(cè)定。

4 參考文獻(xiàn)

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