巴東冬凌草二萜成分的研究

舒佳為　袁芳　文楚毛　楊光忠

摘要：利用溶劑提取法，正、反相硅膠柱和半制備高效液相色譜法對巴東冬凌草乙酸乙酯提取物進(jìn)行了分離純化，從中分離得6個(gè)二萜化合物，并根據(jù)理化性質(zhì)和現(xiàn)代波譜技術(shù)對其進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定，其結(jié)構(gòu)分別鑒定為：冬凌草甲素（1）、lasiodin（2）、neolaxiflorin U（3）、hubeirubesin K（4）、hubeirubesin I（5）、epinodosinol（6）。其中化合物3～6為首次從該地區(qū)的植物中分離得到。

關(guān)鍵詞：巴東冬凌草；化學(xué)成分；二萜

中圖分類號(hào)：R927

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：16749944（2017）18021603

1引言

冬凌草系唇形科香茶菜屬植物碎米椏（Rabdosia rubescens（Hemsl.） Hara）的地上部分，由于其冬天全株結(jié)滿薄如蟬翼的銀白色冰凌片，又名冰凌草 ＼[1＼]。收載于2015年版《中國藥典》，味甘苦、性微寒，具有清熱解毒、消炎止痛等功效＼[2＼]。冬凌草富含對映-貝殼杉烯二萜類化合物，其代表性化合物為冬凌草甲素，具有抗炎、抗菌、抗腫瘤等多種生物活性＼[3＼]。目前，國內(nèi)學(xué)者相繼對產(chǎn)自河南、河北、貴州、湖北等多個(gè)不同地區(qū)的冬凌草的化學(xué)成分進(jìn)行了廣泛深入的研究，發(fā)現(xiàn)不同地區(qū)的冬凌草都富含對映-貝殼杉烯二萜類化合物，但不同產(chǎn)地的冬凌草含有不同結(jié)構(gòu)特點(diǎn)的二萜，呈現(xiàn)化學(xué)結(jié)構(gòu)的多樣性＼[4～7＼]。近年從湖北建始產(chǎn)的冬凌草中分得3個(gè)結(jié)構(gòu)新穎的二萜生物堿＼[8＼]，為進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)新的二萜化合物，筆者對產(chǎn)自湖北巴東冬凌草的二萜成分進(jìn)行了的研究，從其乙酸乙酯提取物分離得6個(gè)二萜化合物，其結(jié)構(gòu)分別鑒定為冬凌草甲素（1）、lasiodin（2）、neolaxiflorin U（3）、hubeirubesin K（4）、hubeirubesin I（5）、epinodosinol（6）。其中化合物3～6為首次從該地區(qū)的植物中分離得到（圖1）。

2材料與方法

2.1儀器與試劑

核磁共振波譜儀（Bruker AVANCEIII-500 MHz全數(shù)字化超導(dǎo)核磁共振儀，布魯克公司）；高效液相色譜儀（Ultimate 3000半制備型，美國戴安公司），VWD，DAD檢測器；半制備型色譜柱為5C18-MS-II（250 mm×10 mm，5 μm）；柱色譜用硅膠（200～300目和300～400目，青島海洋化工廠）；分析純?nèi)軇┯蓢幖瘓F(tuán)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)；色譜純?nèi)軇┯刹┡d業(yè)有限公司生產(chǎn)。

冬凌草采于湖北恩施土家苗族自治州巴東縣，經(jīng)中南民族大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院宋發(fā)軍教授鑒定為唇形科香茶菜屬植物碎米椏（Rabdosia rubescens（Hemsl.） Hara）。

2.2提取與分離

11.2 kg干燥冬凌草粉碎后用95%的乙醇室溫浸泡3次，每次24 h，提取液真空抽濾后減壓旋蒸得乙醇提取物。乙醇提取物用甲醇溶解，石油醚脫脂3次后，減壓旋蒸脫去甲醇，然后用水溶解，乙酸乙酯萃取3次，得乙酸乙酯提取物556 g，乙酸乙酯提取物經(jīng)硅膠柱（200～300目）層析分離，用氯仿∶丙酮（10∶0，9∶1，8∶2，7∶3，6∶4，1∶1，3∶7，0∶10）梯度洗脫，TLC檢測后合并相似組分，共收集到8個(gè)組分（Fr. A～H）。Fr. F（51.3 g）經(jīng)反相硅膠柱色譜分離，用水∶甲醇（7∶3，1∶1，8∶2，3∶7，0∶10）梯度洗脫以及反復(fù)硅膠柱層析和半制備高效液相色譜得到化合物1～6。

3結(jié)構(gòu)鑒定

4結(jié)語

對產(chǎn)自湖北巴東冬凌草的二萜成分進(jìn)行了研究，從中分離得6個(gè)二萜化合物，其結(jié)構(gòu)分別鑒定為冬凌草甲素（1）、lasiodin（2）、neolaxiflorin U（3）、hubeirubesin K（4）、hubeirubesin I（5）、epinodosinol（6）。研究結(jié)果表明：巴東冬凌草富含對映-貝殼杉烯二萜類化合物，其中冬凌草甲素的含量高，結(jié)構(gòu)類型以7，20-環(huán)氧類為主，同主產(chǎn)區(qū)河南濟(jì)源的冬凌草所含的活性成分極為相似，具有很好的開發(fā)價(jià)值。

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Diterpenoids From Badong Rabdosia rubescens （Hemsl.） Hara

Shu Jiawei1， Yuan Fang2， Wen Chumao2， Yang Guangzhong3

（1. College of Environment and Bio-resources， Dalian Minzu University， Dalian 116600， China；

2. College of Biomedical Engineering， South Central University for Nationalities， Wuhan 430074， China；

3. National Demonstration Center for Experimental Ethnopharmacology Education，

South-Central University for Nationalities， Wuhan 430074， China）

Abstract： The chemical constituents of Badong Rabdosia rubescens were isolated and purified by solvent extraction method， the normal and reverse phase silica gel column chromatography and semi-preparative HPLC. Their structures were elucidated on the basis of chemical and spectroscopic analysis. Six diterpenoids were isolated from the ethyl acetate extract of Rabdosia rubescens and were identified as oridonin （1） lasiodin （2） neolaxiflorin U （3） hubeirubesin K （4） hubeirubesin I （5） epinodosinol （6） Compound 3-6 were isolated from Badong Rabdosia rubescens for the first time.

Key words： Rabdosia rubescens； chemical Constituents； diterpenoidsendprint