乙肝病毒DNA熒光定量PCR檢測及其意義

李 莎

（河南省濟源市中醫(yī)院檢驗科，河南 濟源 459000）

乙肝病毒DNA熒光定量PCR檢測及其意義

李 莎

（河南省濟源市中醫(yī)院檢驗科，河南 濟源 459000）

目的探究乙肝病毒DNA熒光定量PCR檢測的結果及其意義。方法 選取我院2016年1月～2017年1月來我科檢查的肝病變患者1500例，對其進行乙肝病毒DNA熒光定量PCR檢測，同時針對100例健康者血液樣本實施相同檢查，觀察其病毒標記物情況并進行比較分析。結果 本次入選者均順利實施檢驗，大三陽患者的陽性率明顯較高，同時病毒拷貝數(shù)較高，健康者相關指標均明顯較低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結論 乙肝病毒DNA熒光定量PCR檢測的特異性和靈敏性較高，能夠對患者疾病做出準確的判斷和分析，因此可以根據(jù)患者的乙肝病毒復制狀態(tài)對其實施治療，發(fā)揮臨床檢測的價值。

乙肝病毒DNA；熒光定量PCR檢測；肝病變

肝炎是臨床常見的傳染性疾病，因此對于肝炎的相關檢測也備受臨床關注，本次我們積極針對乙肝病毒DNA的熒光定量PCR檢測情況進行分析，目的在于總結臨床經(jīng)驗，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2016年1月～2017年1月來我科檢查的肝病變患者1500例，另外納入100例健康者血液樣本，均對其實施乙肝病毒DNA的熒光定量PCR檢測；研究開始前我們均對相關科室和工作人員說明了研究概況，其均表示已經(jīng)知曉本次研究概況且同意支持本次研究。

1.2 方法

針對受檢者均進行乙肝病毒DNA的熒光定量PCR檢測，檢測所用設備為達安基因DA7600設備；首先收集100 uL血清，對其中的HBV-DNA進行提取，使用PCR的反應液加入到HBV模板中，然后將其混勻并置于毛細管中；此后設置陰性、空白管、陽性對照。各個反應管均放入Roche熒光定量檢測儀實施PCR擴增，在50攝氏度的條件下激活其UNG，然后在93攝氏度下預變性2 min，同時在93攝氏度5sec，在60攝氏度35sec，一共40個循環(huán)[1]。同時應注意模板的工作溫度范圍應該控制在30～99攝氏度，電源電壓控制在220±22 V。此后根據(jù)標準曲線，使用計算機對待測樣本中的HBV-DNA含量進行測定，并針對擴增產(chǎn)物實施瓊脂凝膠電泳，和陽性模板進行對照，如果其特異性條帶的位置和陽性模板相同則為陽性，觀察實驗結果。

1.3 觀察指標

觀察檢測情況，同時按照乙肝患者的病情將其分為小三陽（HBsAg+、HBeAb+、HBcAb+），大三陽（HBsHg+、HBeAg+、HBcAb+），HBsAb單獨陽性組，HBsAg單獨陽性組。然后按照類別對其陽性率進行統(tǒng)計，并對比組間的病毒拷貝數(shù)（Log值）。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 21.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計數(shù)資料用例數(shù)（n）、百分數(shù)（%）表示，采用x2檢驗；計量資料用“x± s表示，采用t檢驗；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

本次入選者均順利實施檢驗，大三陽患者的陽性率明顯較高，同時病毒拷貝數(shù)較高，健康者相關指標均明顯較低，其詳細情況見下表1。

表1 乙肝病毒檢測的詳細情況（±s）

表1 乙肝病毒檢測的詳細情況（±s）

病毒拷貝數(shù)（Log值）大三陽 900 900 100.0 7.67±0.47小三陽 300 140 46.7 7.31±0.24 HBsAg 200 115 57.5 5.74±1.21 HBsAb 100 33 33.0 4.57±0.29健康者 100 5 5.0 3.44±0.14組別 例數(shù) HBV-DNA陽性數(shù)HBV-DNA陽性率

3 討 論

肝炎的發(fā)生主要是有肝炎并對感染引起，病發(fā)發(fā)生對患者的健康會產(chǎn)生嚴重影響，同時未經(jīng)及時治療的情況下，極有可能使得肝炎演變?yōu)楦斡不蚋伟?，因此我們應該早期對患者做出診斷并給予治療[2]。

目前臨床多數(shù)研究認為，肝炎疾病的傳染性尚不能完全明顯，但是病情進展必然和患者的病毒復制存在密切關系，此時有效的檢測方法就成為臨床關注的重點所在[3]。熒光定量PCR檢測是近年來臨床中逐漸應用的一種檢測方法，熒光技術在檢測中的聯(lián)合使用，使得PCR過程中的熒光信號能夠被準確的反應，從而通過其變化和檢測獲得較高的靈敏度和準確性[4]。本次我們通過對相關的受檢者樣本進行分析發(fā)現(xiàn)，大三陽患者的陽性率明顯較高，同時病毒拷貝數(shù)較高，健康者相關指標均明顯較低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。同時說明了乙肝病毒DNA對于患者病情程度的反應價值，臨床可及時根據(jù)患者的檢測結果對其實施干預和治療。

綜上所訴，乙肝病毒DNA熒光定量PCR檢測的特異性和靈敏性較高，能夠對患者疾病做出準確的判斷和分析，其臨床實施的意義則在于，可以根據(jù)患者的乙肝病毒復制狀態(tài)對其實施治療，最終幫助患者改善其預后。

[1]翟秀英.熒光定量PCR檢測乙型肝炎病毒DNA的臨床意義[J].臨床合理用藥雜志,2014,02(8):108-109.

[2]李秀義,高冬梅,潘繼文,等.熒光定量PCR檢測乙型肝炎病毒DNA的臨床價值[J].蚌埠醫(yī)學院學報,2014,06(12):804-806.

[3]顏 敏.血清HBV-DNA熒光定量PCR檢測與乙乙肝病毒標志物模式的相關因素探討[J].中外醫(yī)療,2014,26(10):193-194.

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ISSN.2095-8242.2017.053.10427.01

本文編輯：趙小龍