六倍體（AnAnCnCnCoCo）與白菜型油菜雜交可交配性及后代菌核病抗性

李勤菲，陳致富，劉瑤，梅家琴，錢偉

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六倍體（AnAnCnCnCoCo）與白菜型油菜雜交可交配性及后代菌核病抗性

李勤菲1,2，陳致富2，劉瑤2，梅家琴2，錢偉2

（1西南大學園藝園林學院，重慶 400715；2西南大學農(nóng)學與生物科技學院，重慶 400715）

【目的】利用親本種遺傳資源是改良甘藍型油菜的重要手段。以甘藍型油菜與菌核病抗性甘藍雜交合成的六倍體為橋梁，與大量的白菜型油菜雜交，合成雜種，探索改良甘藍型油菜菌核病抗性的策略。【方法】采用菌核病抗病甘藍（C01）與甘藍型油菜（中雙9號）雜交合成六倍體，通過分析六倍體的育性、菌病抗性和減數(shù)分裂行為來分析其作為橋梁材料轉移菌核病抗性的可能性；將六倍體與110份白菜型油菜雜交，通過考察雜種發(fā)育和可交配性來分析六倍體與白菜型油菜雜交的可行性；通過鑒定雜種的苗期表型特征、自交結實率及離體莖稈的菌核病抗性來分析雜種在改良甘藍型油菜遺傳背景上的利用潛力?！窘Y果】該六倍體的花粉育性為90.6%—92.7%，自交結實率為3—7粒/角果；菌核病抗性顯著高于對照品種（中雙9號）；處于減數(shù)分裂后期I的花粉母細胞中，68.80%（86/125）的染色體分離比為28﹕28。110份春性、冬性和半冬性的白菜型油菜與六倍體雜交，授粉15 d后的胚珠發(fā)育正常，并且都能收獲成熟種子，平均可交配性為（4.25±3.91）粒/角果。盡管不同基因型之間的可交配性存在顯著差異，但是不同生態(tài)型的白菜型油菜與六倍體雜交的可交配性無顯著差異（半冬性：（4.35±3.77）粒/角果，春性：（4.34±4.51）粒/角果，冬性：（4.01±3.43）粒/角果；=0.44）。六倍體作為母本或者父本與白菜型油菜雜交都能結籽，而且沒有顯著性差異（六倍體為母本：平均結實率為4.27粒/角果；六倍體為父本：平均結實率為3.95粒/角果；=0.69）。六倍體與白菜型油菜雜交創(chuàng)建的雜種，苗期形態(tài)似甘藍型油菜，但是表型變異豐富；雜種都能自交結籽，平均自交結實率為（7.72±4.45）粒/角果；來自不同生態(tài)型的白菜型油菜與六倍體合成的雜種自交結實率無顯著性差異（冬性白菜型油菜合成的雜種平均自交結實率：（8.07±3.43）粒/角果，半冬性：（7.88±4.64）粒/角果，春性：（6.41±3.00）粒/角果，=0.95）。經(jīng)過兩年的離體莖稈菌核病抗性鑒定，6份雜種的菌核病發(fā)病程度兩年均顯著低于中雙9號（＜0.05）?！窘Y論】以六倍體為橋梁能有效地將甘藍型油菜親本種的優(yōu)良性狀導入到甘藍型油菜中。

六倍體；甘藍型油菜；白菜型油菜；可交配性；菌核病

0 引言

【研究意義】前期研究中，Li等[1]提出了以六倍體AnAnCnCnCoCo為橋梁，與白菜型油菜雜交，創(chuàng)建新型甘藍型油菜，拓寬甘藍型油菜遺傳背景的策略。本研究將調查以甘藍型油菜與菌核病抗性甘藍雜交合成的六倍體為橋梁，與白菜型油菜雜交的可交配性，考察雜種的苗期表型和結實率，并以菌核病抗性為目標性狀，評價該策略的應用潛力。這對利用甘藍和白菜型油菜遺傳資源，拓寬和改良甘藍型油菜遺傳背景具有重要意義?！厩叭搜芯窟M展】甘藍型油菜（，AACC，2n=38）是世界上重要的油料作物之一，是由甘藍和白菜雜交，染色體自然加倍而成[2-4]。與親本種相比，甘藍型油菜的遺傳背景相對狹窄[5]，利用親本種遺傳資源是拓寬現(xiàn)有甘藍型油菜遺傳背景的重要途徑[6-10]。親本種的利用途徑主要有：（1）利用甘藍與白菜型油菜雜交，人工合成甘藍型油菜[11-12]，該方法需結合胚挽救和染色體加倍等組織培養(yǎng)技術；（2）利用甘藍型油菜與親本種雜交，自交或回交，選育新型甘藍型油菜[4,13-15]，該方法從后代中篩選新型甘藍型油菜所需的周期長，效率低。除此以外，錢偉等[16]發(fā)明了一種以甘藍型油菜與甘藍雜交創(chuàng)建的六倍體AnAnCnCnCoCo為橋梁，大量快速利用白菜型油菜遺傳資源，創(chuàng)建新型甘藍型油菜，拓寬甘藍型油菜遺傳背景的新策略。在此基礎上，Mei等[17]利用六倍體作為橋梁，與甘藍型油菜不斷回交，獲得了轉移甘藍菌核病抗性的甘藍型油菜?！颈狙芯壳腥朦c】本研究將采用改良菌核病抗性的六倍體為橋梁，與大量的白菜型油菜雜交，試圖導入甘藍型油菜親本種優(yōu)良遺傳性狀，并利用親本種廣泛的遺傳資源，改良現(xiàn)有甘藍型油菜遺傳背景?！緮M解決的關鍵問題】利用菌核病抗性甘藍與甘藍型油菜雜交獲得的六倍體為橋梁，與白菜型油菜雜交，通過考察可交配性、雜種育性和菌核病抗性來分析該策略對拓寬和改良甘藍型油菜背景的應用潛力。

1 材料與方法

試驗于2013—2015年在西南大學進行。

1.1 試驗材料

前期，利用甘藍型油菜（中雙9號）與菌核病抗性甘藍（C01）雜交，合成了六倍體（AnAnCnCnCoCo）[17]。2013年將74份半冬性、20份春性和16份冬性白菜型油菜（電子附表1）與六倍體雜交，創(chuàng)建新型甘藍型油菜。成熟期，統(tǒng)計各雜交組合的角果數(shù)和種子數(shù)，檢測可交配性。2014和2015年，雜種F1種植于西南大學油菜工程技術研究中心試驗地，用于雜種育性檢測和菌核病抗性鑒定。菌核病抗性鑒定采用耐病品種中雙9號作為對照。

1.2 試驗方法

1.2.1 染色體行為分析 現(xiàn)蕾期，取幼嫩花蕾，于卡諾固定液（酒精﹕醋酸=3﹕1）固定24 h以上，取幼嫩子房用于體細胞染色體數(shù)目的觀察；取幼嫩花藥用于減數(shù)分裂時期染色體行為觀察。具體方法參照LI等[18]。

1.2.2 菌核病抗性鑒定 本研究采用的菌核病接種和抗性鑒定方法，參照MEI等[19]的離體莖稈接種方法。在90 mm的無菌PDA培養(yǎng)基中，接種菌核病菌絲，于22℃，濕度85%的條件下培養(yǎng)菌絲2 d，待菌絲布滿整個培養(yǎng)基時，用直徑6 mm的打孔器沿培養(yǎng)皿邊緣一圈打孔，獲得的菌絲塊用于莖稈接種。青莢期，截取植株的莖稈，每個株系取3—5個單株，每個單株取30 cm長的莖稈，兩端包裹保鮮膜，每個莖稈接種2個菌絲塊于22℃、濕度85%的密閉環(huán)境中培養(yǎng)。接種3 d后，統(tǒng)計菌斑長度，并以中雙9號作為對照，計算材料的相對感病度=/對照，其中，為待測材料的菌斑長度，對照為‘中雙9號’的病斑長度。值越小，表示抗性越強；反之，抗性越弱。

1.3 數(shù)據(jù)分析

可交配性和育性均采用每角果粒數(shù)來衡量，六倍體與白菜型油菜雜交的可交配性=飽滿種子數(shù)/角果數(shù)；新型甘藍型油菜的育性為自交結實率，結實率=飽滿種子總數(shù)/取樣角果數(shù)。數(shù)據(jù)采用SAS version 8.0（SAS Institute）軟件進行方差分析（ANOVA）和相關性分析。

2 結果

2.1 六倍體的特點

本研究采用‘中雙9號’與菌核病抗性甘藍‘C01’（）雜交，合成了六倍體AnAnCnCnCoCo（圖1-A）。該六倍體的花粉育性是90.6%—92.7%，自交結實率為3—7粒/角果；菌核病抗性高于甘藍型油菜‘中雙9號’（六倍體：接種3 d后的病斑長度為4.6 cm，‘中雙9號’接種3 d后的病斑長度是9.6 cm）[17]。六倍體的體細胞染色體數(shù)目為56條（圖1-B），68.80%（86/125）處于減數(shù)分裂后期I的花粉母細胞是28﹕28分離（圖1-C）。

2.2 六倍體與白菜型油菜的可交配性

利用六倍體為橋梁，與110份來自3種不同生態(tài)型的白菜型油菜雜交，合成雜種。六倍體與白菜型油菜授粉后15 d的胚珠發(fā)育正常（圖1-D），平均可交配性為（4.25±3.91）粒/角果（最高結實率：17.83粒/角果；最低結實率：0.06粒/角果）。盡管不同基因型的白菜型油菜與六倍體雜交，可交配性存在明顯差異，但是來自半冬性、春性和冬性3種生態(tài)型的白菜型油菜與六倍體雜交，可交配性沒有顯著性差異（半冬性：（4.35±3.77）粒/角果；春性：（4.34±4.51）粒/角果；冬性：（4.01±3.43）粒/角果，=0.44，圖2）。六倍體與白菜型油菜雜交正、反交之間的可交配性沒有顯著性差異（六倍體為母本：平均結實率為4.27粒/角果；六倍體為父本：平均結實率為3.95粒/角果，=0.69）。本研究說明了六倍體與白菜型油菜正反交都能結籽。

A：六倍體花期形態(tài)；B：六倍體體細胞染色體數(shù)目（2n=56條）；C：六倍體減數(shù)分裂后期I染色體分離比（28﹕28）；D：六倍體與白菜型油菜授粉15 d后的胚珠發(fā)育

2.3 六倍體與白菜型油菜雜種的形態(tài)學和育性

選取種子量多的67份（來自46份半冬性、12份春性和9份冬性白菜型油菜）雜種種植于田間，觀察雜種的苗期表型和育性。雜種的苗期形態(tài)不同于白菜型油菜，與現(xiàn)有的甘藍型油菜類似，合成的雜種形態(tài)學表型變異豐富（圖3）。

收獲期，統(tǒng)計雜種的自交結實率，結果發(fā)現(xiàn)所有雜種都能自交結籽，平均結實率為（7.72±4.45）粒/角果。盡管不同雜種之間育性存在顯著性差異，但是根據(jù)白菜型油菜的生態(tài)型，不同生態(tài)型之間沒有顯著性差異（=0.95，冬性白菜型油菜合成的雜種平均自交結實率：（8.07±3.43）粒/角果；半冬性：（7.88±4.64）粒/角果；春性：（6.41±3.00）粒/角果）（圖4）。這說明了不同生態(tài)型的白菜型油菜與該六倍體雜交，合成的雜種都能結籽，并且白菜型油菜親本生態(tài)型對合成的雜種結實率沒有顯著性影響。六倍體與白菜型油菜雜種豐富的表型變異和育性說明了雜種具有拓寬甘藍型油菜遺傳背景的潛力。

圖2 六倍體與110份白菜型油菜雜交可交配性

A：甘藍型油菜（中雙9號），B：六倍體，C—F：六倍體與白菜型油菜雜種，G—I：分別為雜種D—F對應的白菜型油菜親本

圖4 67份白菜型油菜與六倍體雜種的結實率

2.4 六倍體與白菜型油菜雜種的菌核病抗性鑒定

隨機選取23份雜種于青莢期截取莖稈進行菌核病抗性鑒定，連續(xù)重復兩年。結果發(fā)現(xiàn)，2014年，這些雜種的平均菌斑長度為（5.77±2.39）cm，相對感病度為0.95±0.42，不同基因型之間存在顯著差異（＜0.0001）。7個雜種的菌核病抗性顯著高于‘中雙9號’（平均菌斑長度為：（6.01±1.41）cm），5份雜種的病斑顯著大于‘中雙9號’。2015年，該23份雜種的平均菌斑長度為：（4.33±1.69）cm，相對感病度為0.73±0.29，不同基因型之間存在顯著性差異（＜0.0012），11份雜種的病斑顯著小于‘中雙9號’。其中，6份雜種連續(xù)兩年的菌核病相對感病度顯著低于‘中雙9號’（圖5，表1）。

將兩年的菌核病抗性進行比較，結果發(fā)現(xiàn)，盡管不同年度間，雜種的菌核病平均菌斑長度和平均相對感病度存在顯著性差異（＜0.0001，= 0.0004），但是兩年的菌核病發(fā)病程度極顯著正相關（=0.74，＜0.00001）。說明六倍體與白菜型油菜雜種可轉移甘藍的菌核病抗性，表明該途徑具有利用甘藍親本的遺傳變異改良甘藍型油菜遺傳背景的潛力。

圖5 六倍體與白菜型油菜莖稈菌核病抗性鑒定

表1 23份六倍體與白菜型油菜雜種的莖稈菌核病抗性鑒定

*代表雜種在=0.05水平上與對照中雙9號存在顯著性差異

* represents significant difference of hybrids comparing with control Zhongshuang 9 at=0.05

3 討論

3.1 甘藍型油菜親本種的利用途徑

甘藍型油菜是由甘藍和白菜型油菜雜交，染色體自然加倍而成[2]。甘藍型油菜起源于7 500年前，但作為栽培種其栽培歷史短，經(jīng)過長期的馴化和進化，甘藍型油菜的遺傳背景比親本種相對狹窄[3,5,7]。白菜型油菜是一個古老的栽培作物，其農(nóng)藝特征和DNA結構上具有豐富的遺傳變異[20-21]。白菜型油菜與甘藍型油菜雜交和回交容易，利用該策略創(chuàng)建新型甘藍型油菜已經(jīng)在甘藍型油菜育種中廣泛應用[4,6,22]。甘藍具有豐富的栽培類型和野生資源，以及優(yōu)良的抗病、抗蟲資源[23]。甘藍型油菜與甘藍雜交，是利用甘藍遺傳資源的重要手段。將甘藍型油菜與甘藍雜交，不斷自交，后代也能利用甘藍遺傳資源，合成甘藍型油菜[14-15]。但是該策略的使用需結合胚挽救獲得雜種，雜種F1育性低，需大量的無性系隔離授粉方能獲得后代。目前，同時利用白菜型油菜和甘藍資源的主要途徑是人工合成甘藍型油菜。然而，該途徑仍需借助胚挽救等組織培養(yǎng)技術獲得雜種，并且后代染色體分離異常，基因組穩(wěn)定性差[7,24]。錢偉等[16]發(fā)明了一種以甘藍型油菜與甘藍雜交，染色體加倍獲得的六倍體為橋梁，與白菜型油菜雜交，創(chuàng)建新型甘藍型油菜的方法。該方法不僅利用了甘藍資源，還導入大量白菜型油菜遺傳成分，創(chuàng)建的新型甘藍型油菜能拓寬現(xiàn)有甘藍型油菜遺傳背景。該策略的提出為本研究的順利開展提供了思路。本研究提出了以菌核病抗性甘藍為親本，與甘藍型油菜雜交，創(chuàng)建了菌核病抗性改良的六倍體；以該六倍體為橋梁，與大量的白菜型油菜雜交的策略，該策略不僅能利用白菜型油菜豐富資源，還能將甘藍菌核病抗性導入到油菜中。

3.2 菌核病抗性的改良

菌核病是甘藍型油菜的主要病害之一，嚴重危害其生產(chǎn)。盡管育種家們已培育出一些相對耐病的油菜品種（‘中油821’和‘中雙’系列品種[25]；‘先鋒45S51’和‘先鋒45S52’[26]），然而，甘藍型油菜中缺乏菌核病抗性資源。筆者在甘藍資源中發(fā)現(xiàn)了一個野生甘藍（），對菌核病有突出抗性，其莖稈抗性是甘藍型油菜耐病品種‘中油821’的20倍[19]。目前，MEI[16]、劉瑤[27]利用該野生甘藍與甘藍型油菜雜交，合成了具有菌核病抗性的六倍體，該六倍體與甘藍型油菜不斷回交，選育出的甘藍型油菜具有改良的菌核病抗性。DING等[28]通過人工合成甘藍型油菜的途徑，將甘藍親本的菌核病抗性導入到油菜中。

本研究將菌核病抗性甘藍‘C01’與甘藍型油菜‘中雙9號’雜交，合成的具有菌核病抗性的六倍體為橋梁，與大量白菜型油菜雜交，合成雜種的菌核病抗性存在顯著性差異。相比對照品種‘中雙9號’，鑒定的23份雜種中，只有6份雜種菌核病抗性高于對照。產(chǎn)生這種現(xiàn)象的主要原因可能是：一方面，白菜型油菜中廣泛缺乏菌核病抗性，造成六倍體與白菜型油菜雜種的菌核病抗性降低；另一方面，甘藍型油菜與甘藍雜交合成的六倍體（AnAnCnCnCoCo），由于A、C基因組的高度同源性[29-31]，六倍體的染色體減數(shù)分裂中產(chǎn)生大量的染色體重排，可能導致配子中菌核病抗性位點的丟失。綜上所述，本研究實現(xiàn)了一種利用甘藍型油菜與菌核病抗性甘藍雜交，創(chuàng)建抗菌核病的六倍體為橋梁，與白菜型油菜雜交，利用親本種拓寬和改良甘藍型油菜遺傳背景的新途徑。

4 結論

本研究將菌核病抗性甘藍與甘藍型油菜雜交合成的六倍體，與110份春性、冬性和半冬性的白菜型油菜正反交均能結籽。雜種苗期形態(tài)似甘藍型油菜，但是表型變異豐富；雜種能自交結籽。經(jīng)過兩年的離體莖稈菌核病抗性鑒定，6份雜種的菌核病發(fā)病程度兩年均顯著低于中雙9號。本研究提出的利用菌核病抗性甘藍與甘藍型油菜雜交合成的六倍體為橋梁，與大量的白菜型油菜雜交合成的雜種策略，具有利用親本種遺傳資源，拓寬和改良甘藍型油菜遺傳背景的潛力。

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（責任編輯 趙伶俐）

附表1 110份白菜型油菜類型

Table S1 110 types of

編號Code類型Type來源Origin生態(tài)型Ecotype 1PI223501阿富汗 Afghanistan半冬性 Semi-winter 2PI432372孟加拉 Bangladesh半冬性 Semi-winter 3PI392024加拿大 Canada半冬性 Semi-winter 4PI226505伊朗Iran半冬性 Semi-winter 5PI227296伊朗Iran半冬性 Semi-winter 6PI138894伊朗Iran半冬性 Semi-winter 7PI458618新西蘭 New Zealand半冬性 Semi-winter 8PI443024挪威 Norway半冬性 Semi-winter 9PI269431巴基斯坦 Pakistan半冬性 Semi-winter 10PI209020波多黎各 Puerto Rico半冬性 Semi-winter 11PI263055俄羅斯 Russian Federation半冬性 Semi-winter 12PI360878瑞典 Sweden半冬性 Semi-winter 131075中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 140002-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 150005-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 160007-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 170010-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 180011-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 190014-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 200015-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 210016-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 220020-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 230021-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 240023-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 250027-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 260028-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 270237-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 280243-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 290245-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 300249-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 310260-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 320267-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 330281-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 340340-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 350426-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 360427-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 370434-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 380465-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 390475-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 400477-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 續(xù)附表1 Continued table S1 編號Code類型Type來源Origin生態(tài)型Ecotype 410489-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 420595-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 430768-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 440770-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 451773-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 46畢節(jié)油菜 Bijieyoucai中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 475K1002中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 48黃油1號 Huangyou 1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 496R095中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 506Y733中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 516Y812中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 527B12-1中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 537C-126中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 549B05-3中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 55高棋種 Gaoqizhong中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 56黃巖寧波種 Huangyanningbozhong中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 57R8021中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 58大冶矮腳白油菜 Daye aijiaobaiyoucai中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 59云夢半直立油菜 Yunmeng banzhiliyoucai中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 60沅江桂林子 Yuanjiang guilinzi中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 61治城小花油菜 Zhicheng xiaohuayoucai中國西南大學 Southwest University, China半冬性 Semi-winter 62Ames 30081美國 United States半冬性 Semi-winter 63巢湖油菜 Caohu youcai中國安徽 Anhui, China 半冬性 Semi-winter 64蘇州青 Suzhouqing中國江蘇 Jiangsu, China半冬性 Semi-winter 65豐城孫渡油菜 Fengcheng sunduyoucai中國江西 Jiangxi, China 半冬性 Semi-winter 66大悟洋白菜 Dawu yangbaicai中國湖北 Hubei, China 半冬性 Semi-winter 67宜昌三區(qū)油菜 Yichang sanquyoucai中國湖北 Hubei, China半冬性 Semi-winter 68湘鄉(xiāng)油菜 Xiangxiang youcai中國湖南 Hunan, China半冬性 Semi-winter 69武岡油菜白 Wugang youcaibai中國湖南 Hunan, China半冬性 Semi-winter 70長沙姑香 Changsha guxiang中國湖南 Hunan, China半冬性 Semi-winter 71永結油菜 Yongjie youcai中國甘肅 Gansu, China半冬性 Semi-winter 72秦油4號 Qinyou 4中國陜西 Shanxi, China 半冬性 Semi-winter 73寧強倉社矮油菜 Ningqiang cangsheaiyoucai中國陜西 Shanxi, China 半冬性 Semi-winter 74青油13號 Qingyou 13中國青海Qinghai, China半冬性 Semi-winter 75PI254543阿富汗Afghanistan春性 Spring 76PI254542阿富汗Afghanistan春性 Spring 77PI268371阿富汗 Afghanistan春性 Spring 78PI162778阿根廷Argentina春性 Spring 79PI365643加拿大 Canada春性 Spring 80CGN06842德國科隆 Cologne, Germany春性 Spring 81CGN06831德國科隆 Cologne, Germany春性 Spring 續(xù)附表1 Continued table S1 編號Code類型Type來源Origin生態(tài)型Ecotype 82CGN06832德國科隆 Cologne, Germany春性 Spring 83CGN06838德國科隆 Cologne, Germany春性 Spring 84CGN06839德國科隆 Cologne, Germany春性 Spring 85CGN06840德國科隆 Cologne, Germany春性 Spring 86CGN06841德國科隆 Cologne, Germany春性 Spring 87PI347605印度 India春性 Spring 88PI370740印度 India春性 Spring 89PI267726日本 Japan春性 Spring 90PI343183荷蘭 Netherlands春性 Spring 91PI458977美國 United States春性 Spring 92藏油10號 Zangyou 10中國西藏 Xizang, China 春性 Spring 93隆孜縣當日鎮(zhèn)俗坡村小油菜Supocun xiaoyoucai, Dangri, Longzi中國西藏 Xizang, China春性 Spring 94隆孜縣日當鎮(zhèn)日當村小油菜Ridangcun xiaoyoucai, Ridang, Longzi中國西藏Xizang, China春性 Spring 95PI254541阿富汗 Afghanistan冬性 Winter 96PI268369阿富汗 Afghanistan冬性 Winter 97PI432376孟加拉 Bangladesh冬性 Winter 98CGN06819德國科隆 Cologne, Germany冬性 Winter 99CGN15216德國科隆 Cologne, Germany冬性 Winter 100ECD04德國 Germany冬性 Winter 101Neib03-2德國 Germany冬性 Winter 102PI458616新西蘭 New Zealand冬性 Winter 103PI458931瑞典 Sweden冬性 Winter 104PI458932瑞典 Sweden冬性 Winter 105PI177286土耳其 Turkey冬性 Winter 106PI205283土耳其 Turkey冬性 Winter 107PI176885土耳其 Turkey冬性 Winter 108Ames 30084美國 United States冬性 Winter 109PI633153法國 France冬性 Winter 110PI603024巴基斯坦 Pakistan冬性 Winter

Crossability and Sclerotinia Resistance among Hybrids between Hexaploid (AnAnCnCnCoCo) and

LI Qinfei1,2, CHEN Zhifu2, LIU Yao2, MEI Jiaqin2, QIAN Wei2

(1College of Horticulture and Landscape Architecture, Southwest University, Chongqing 400715;2College of Agronomy and Biotechnology, Southwest University, Chongqing 400715)

【Objective】 Utilization of parental species is helpful to broaden and improve genetic basis of. A strategy of using hexaploid derived from hybrid betweenandas bridge was evaluated to improveby crossing with. 【Method】 Hexaploid derived from interspecific hybrid between(Zhongshuang 9) and(C01, high resistant to) was developed to cross withby evaluating its fertility, meiotic chromosome segregation and resistance to. Hybrids between hexaploid and 110were developed to evaluate crossability, seed setting percentage and resistance to. 【Result】Hexaploid had higher resistance tothan Zhongshuang 9. Its pollen fertility was 90.6%-92.7%, seed setting was 3-7 seeds/pod. The 68.80% pollen mother cells at anaphase I was 28﹕28. The hybrids between 110and hexaploid could be obtained when hexaploid was used as either female or male parent, with an average seed setting rate of (4.25±3.91) seeds/pod (hexaploid used as female parent: 4.27 seeds/pod, male: 3.95 seeds/pod on average,=0.69). Embryos 15 d after pollination grew well when crossing hexaploid with. Although crossability among genotypes ofwith hexaploid was different, no significant difference was detected in crossability among ecotypes of(semi-winter: (4.35±3.77) seeds/pod, spring: (4.34±4.51) seeds/pod, winter: (4.01±3.43) seeds/pod，=0.44). Hybrids owned kinds of morphology at the seedling stage, but were similar with. Seed setting rate of hybrids was (7.72± 4.45) seeds/pod on an average, without significant difference among hybrids derived from spring, winter and semi-winter ecotypes of(seed setting rate of hybrids derived from winter: (8.07±3.43) seeds/pod, semi-winter: (7.88±4.64) seeds/pod, spring: (6.41±3.00) seeds/pod,=0.95). Compared with Zhongshuang 9, 6 hybrids had higher resistance tovia two years identification (＜0.05). 【Conclusion】It was concluded that it is an efficient way to improveby transferring elite traits from parental species via hexaploid strategy.

hexaploid;;; crossability;

2016-04-28；接受日期：2016-08-19

中國博士后科學基金（2015M582500）、中央高?；究蒲袠I(yè)務費專項（XDJK2016C080）

李勤菲，E-mail：feifei1984998@126.com。通信作者錢偉，E-mail：qianwei666@hotmail.com