串聯(lián)質(zhì)譜分析對潰瘍性結(jié)腸炎診斷及治療的意義

韓丹　李靜　李迎杰

【摘要】 目的 分析潰瘍性結(jié)腸炎（UC）患者末梢血的串聯(lián)質(zhì)譜氨基酸含量的變化， 為早期治療提供依據(jù)。方法 選擇21例UC患者為研究組， 46例健康體檢正常者為對照組， 均采用串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)對末梢血中氨基酸進(jìn)行檢測， 比較兩組研究對象串聯(lián)質(zhì)譜檢測結(jié)果。結(jié)果 經(jīng)分析研究組患者脯氨酸、色氨酸和組氨酸濃度均低于對照組， 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。對這3種氨基酸指標(biāo)進(jìn)行線性回歸分析， 并得到了以下的Logistic線性回歸方程模型：In[P/（1-P）]=2.615-0.005×Pro-0.023×His。根據(jù)向后剔除法， 最終得到了在兩組數(shù)據(jù)中差異最顯著的2個指標(biāo)， 分別為脯氨酸、組氨酸， 且都表現(xiàn)為下降， 表示這2種氨基酸與UC有明顯的關(guān)聯(lián)。結(jié)論 UC患者中脯氨酸、色氨酸、組氨酸與健康體檢正常者存在明顯差異， 提示UC患者存在著氨基酸代謝的變化， 為UC的早期診斷及指導(dǎo)治療提供依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 潰瘍性結(jié)腸炎；代謝組學(xué)；串聯(lián)質(zhì)譜；氨基酸

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.20.031

潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis， UC）是一種炎癥性腸病（inflammatory bowel disease， IBD）， 主要累及結(jié)腸或直腸的黏膜和黏膜下層， 臨床癥狀以液膿血便、腹瀉、腹痛和（或）里急后重為主；重癥者可伴有肝膽疾病、關(guān)節(jié)炎、皮膚損害、心肌病變、虹膜睫狀體炎及內(nèi)分泌疾病等腸外表現(xiàn)[1， 2]。其病情輕重不等， 且病程長、遷延不愈， 復(fù)發(fā)率高并且有癌變的傾向。本研究采用串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)對UC患者末梢血中氨基酸進(jìn)行檢測、分析， 研究其氨基酸的變化， 尋找UC患者的代謝標(biāo)記物， 達(dá)到早期診斷和早期干預(yù)的目的?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 收集2015年11月1日～2016年12月31日于錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院消化科住院的， 并符合入選標(biāo)準(zhǔn)的UC患者21例作為研究組， 并隨機(jī)選取同期本院健康體檢正常者46例為對照組。兩組研究對象均知情同意， 按照醫(yī)院在臨床治療的程序?qū)ρ芯繉ο髮嶋H情況進(jìn)行調(diào)查。

1. 2 方法 兩組研究對象均采集末梢血。采集方法：研究對象需要在次日早晨空腹進(jìn)行血樣采集， 且在檢查前要告知其晚飯多以流食為主， 且進(jìn)食時間與檢查時間保持在4 h以上， 以干血點采樣（DBS）的方法進(jìn)行檢測[3]。采集結(jié)束后將樣本置放于4℃的密封箱中進(jìn)行保存， 交由遺傳病代謝研究中心進(jìn)行相關(guān)串聯(lián)質(zhì)譜檢測， 分析末梢血中20種氨基酸， 比較兩組研究對象串聯(lián)質(zhì)譜檢測結(jié)果。

1. 3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件對研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù) ± 標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 差異性指標(biāo) 經(jīng)分析研究組患者脯氨酸、色氨酸和組氨酸濃度均低于對照組， 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2. 2 差異最顯著指標(biāo) 對這3種氨基酸指標(biāo)進(jìn)行線性回歸分析， 并得到了以下的Logistic線性回歸方程模型：In[P/（1-P）]=

2.615-0.005×Pro-0.023×His。根據(jù)向后剔除法， 最終得到了在兩組數(shù)據(jù)中差異最顯著的2個指標(biāo)， 分別為脯氨酸、組氨酸， 且都表現(xiàn)為下降， 表示這兩種氨基酸與UC有明顯的關(guān)聯(lián)。

3 討論

本文通過對UC患者末梢血的串聯(lián)質(zhì)譜中代謝產(chǎn)物進(jìn)行分析， 與對照組比較， UC患者血清中脯氨酸、色氨酸和組氨酸的濃度水平均下降（P<0.05）。對所檢測氨基酸作為潛在的生物標(biāo)識， 以此能夠?qū)C發(fā)病動機(jī)進(jìn)行了解。如果通過檢查對UC病癥的發(fā)病因素仍不是特別了解， 也就對UC發(fā)病機(jī)制方面不能起到一定借鑒， 也就對發(fā)病因素等無從了解[2]。

本文研究發(fā)現(xiàn)UC患者脯氨酸濃度下降導(dǎo)致腸道黏膜上皮分泌功能障礙， 減弱了腸黏膜的保護(hù)作用， 故脯氨酸與UC患者的腸道黏膜的屏障功能具有重要的關(guān)系。

組氨酸為生糖氨基酸， 是一種半必需氨基酸， 其中所具有的物質(zhì)能夠?qū)ι窠?jīng)緊張性消化道潰瘍起到緩解作用， 能夠最大限度的促進(jìn)患者胃部吸收， 中和其胃酸， 對其提高吸收能力起到一定作用。而組氨酸脫羧能夠作為組胺， 對血管舒張情況起到良好效果， 且在多種并發(fā)癥所引起的炎癥中起到抵抗作用[3， 4]。

色氨酸作為一種氨基酸被人體所吸收， 且對患者生理平衡等起到重要作用， 可以說是患者體內(nèi)必須的一種氨基酸[5]。其可以對患者深度睡眠、緩解焦躁情緒等起到作用， 因色胺、5-羥色胺和褪黑素全部都是色氨酸逐漸形成的。根據(jù)國內(nèi)相關(guān)研究表明， N-乙酰-5-甲氧基色胺（melatonin， MEL）， 又名褪黑素、松果體素， 能夠?qū)C患者起到積極作用， 且在治療效果上得到一定認(rèn)可[6， 7]。而在相關(guān)研究中對UC患者疾病活動指數(shù)（disease activity index， DAI）進(jìn)行觀察， 其明顯要高于體檢健康者， 且對UC患者能起到緩解精神情緒的作用[8]。

UC患者身體中所含有的氨基酸指標(biāo)代謝情況與非UC患者之間具有明顯差異。如果患者體中3種以上氨基酸指標(biāo)出現(xiàn)下降， 那么則可以將這些異常指標(biāo)作為UC發(fā)病的潛在指標(biāo)， 以此來進(jìn)一步對其與UC發(fā)病聯(lián)系更加密切的指標(biāo)進(jìn)行觀察[9， 10]。通過研究分析了解到脯氨酸及組氨酸2個指標(biāo)與 UC發(fā)病關(guān)系最密切。因此得出結(jié)論， 人體內(nèi)脯氨酸及組氨酸的下降與UC的發(fā)生密切相關(guān)。

綜上所訴， UC患者中脯氨酸、色氨酸、組氨酸與健康體檢正常者存在明顯差異， 且內(nèi)脯氨酸及組氨酸的下降與UC的發(fā)生密切相關(guān)。提示UC患者存在著氨基酸代謝的變化， 為UC的早期診斷及指導(dǎo)治療提供依據(jù)。

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[收稿日期：2017-03-31]endprint