瑪咖淫參顆粒的補腎壯陽功效研究

周丹丹 杭偉鋒 鄭少文 周春暉

廣東太陽神集團有限公司（廣州 510665）

瑪咖淫參顆粒的補腎壯陽功效研究

周丹丹 杭偉鋒 鄭少文 周春暉

廣東太陽神集團有限公司（廣州 510665）

目的 研究一種以由瑪咖、淫羊藿和西洋參為主要原料的復(fù)方顆粒的補腎、壯陽藥理作用。方法（1）瑪咖淫參對小鼠捕捉率和受孕影響實驗：將40只雄性小鼠隨機分4組，即空白對照組和瑪咖淫參高、中、低劑量組。給藥10d后，與同等數(shù)量的發(fā)情期雌性小鼠合籠，測試影響捕捉及受孕的實驗結(jié)果；（2）瑪咖淫參對大鼠陰莖勃起實驗：選取54只SD雄性大鼠，其中10只為假手術(shù)組（不摘除雙側(cè)睪丸），其余44只均切除雙側(cè)睪丸，隨機分為5組：瑪咖淫參高、中、低劑量組，模型對照組及龜鹿補腎丸對照組。除龜鹿補腎丸對照組4只大鼠外，其余4只每組均10只大鼠，給藥30d后，對大鼠進行陰莖電刺激實驗，記錄陰莖勃起潛伏期。隨后禁食12h，測定陰莖勻漿NOS含量及性器官臟器指數(shù)。結(jié)果（1）與同期空白組小鼠的捕捉潛伏期（1.44±6.89）min相比，瑪咖淫參中、高劑量捕捉潛伏期分別為（4.40±2.27）min、（4.14±1.74）min，明顯縮短，具有顯著性差異（P＜0.05、P＜0.001）；對雌鼠的1h內(nèi)捕捉次數(shù)及受孕數(shù)量15次、18次明顯增加，具有顯著性差異（P＜0.01、P＜0.001）；（2）與同期模型對照組22.5s相比，瑪咖淫參中、高劑量能明顯縮短大鼠的陰莖勃起潛伏期11.5s、9.5s，具有顯著性差異（P＜0.01、P＜0.001），瑪咖淫參高劑量摘除睪丸大鼠陰莖勻漿NOS活力明顯提高，具有顯著性差異（P＜0.05）。結(jié)論 瑪咖淫參能明顯提高性功能，具有補腎壯陽作用。這對開發(fā)瑪咖淫參補腎壯陽功能藥品或保健食品有一定的參考價值及科學(xué)依據(jù)。

補腎壯陽; 妊娠率; 陰莖勃起

中醫(yī)認為，腎為先天之本、性命之根，在人體生理上有著極其重要的地位和作用。這主要是由于腎中陰陽水火元氣與精血的相互依賴又相互斗爭，推動人體整個生命活動。《內(nèi)經(jīng)》里提到“腎者，主水，受五臟六腑之精而藏之；陰精所奉其人壽血者，以奉生身，莫貴于此?！?/p>

有研究表明[1-3]，瑪咖和淫羊藿均具有提高生育力、改善性功能、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌、改善免疫力和緩解疲勞等功能。西洋參具有免疫調(diào)節(jié)，增強免疫力的作用[4]。故取瑪咖和淫羊藿的填精益髓、補腎壯陽之功，再以西洋參的輔佐之力，配制成一個具有補腎、壯陽、益精等功效的顆粒。

本研究主要是對該復(fù)方顆粒進行了系統(tǒng)的補腎、壯陽等實驗研究，探討其藥理作用，為食品、保健食品或藥品的應(yīng)用提供科學(xué)的依據(jù)。

資料與方法

一、材料與試劑

瑪咖淫參，淡黃色顆粒，芳香帶酸味，廣東太陽神集團有限公司，主要成分瑪咖、西洋參、淫羊藿，批號：20141209。

氯化鈉（AR級），天津市福晨化學(xué)試劑廠，批號：20121212；水合氯醛，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司，批號：20140214；青霉素，華北制藥股份有限公司，國藥準字H13020657，批號：A130701811；龜鹿補腎丸，廣州市花城制藥廠，國藥準字Z44020148，批號：20140412。

二、儀器與設(shè)備

BSS電子天平，北京塞多利斯天平有限公司；ACS-A型電子計量秤，深圳愛華衡器有限公司OLYMPUS CX型顯微鏡，日本OLYMPUS公司生產(chǎn)；JL-B型電刺激器，上海嘉龍教儀廠。

三、試驗動物

KM小鼠，雄性，購于中山大學(xué)實驗動物中心，實驗動物生產(chǎn)許可證號：SCXK（粵）2011-0029。

SD大鼠，雄性，購于中山大學(xué)實驗動物中心，實驗動物生產(chǎn)許可證號：SCXK（粵）2011-0029。

四、設(shè)施及飼料許可證

中山大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院中藥與海洋藥物實驗室，實驗動物使用許可證：SYXK（粵）2014-0020；

大鼠和小鼠配合維持飼料，北京科澳協(xié)力飼料有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)許可證號：SCXK（京）2014-0010。

五、實驗方法

（一）瑪咖淫參對小鼠捕捉率影響實驗

選取健康KM鼠40只雄性小鼠和40只雌性小鼠；將40只雄性小鼠隨機分組，分別為空白對照組和實驗組（瑪咖淫參低、中、高劑量組），每組10只小鼠，整個實驗過程雄性小鼠處于獨居狀態(tài)。實驗組給予瑪咖淫參灌胃，劑量見表1所示；空白對照組給予純凈水，每日一次，連續(xù)灌胃10d。末次灌胃45min后，在每只獨居雄鼠籠中放入一只雌鼠（經(jīng)過陰道涂片檢定為發(fā)情期），隨即觀察1h，記錄其捕捉雌鼠的捕捉潛伏期、捕捉次數(shù)，計算各組的捕捉率，將以上結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)處理并比較組間差異。

實驗組捕捉率=[實驗組捕捉次數(shù)總和÷（實驗組+對照組）的捕捉次數(shù)總和]×100%。

對照組捕捉率=[對照組捕捉次數(shù)總和÷（實驗組+對照組）的捕捉次數(shù)總和] ×100%。

表1 按體質(zhì)量等效換算給小鼠灌胃的劑量

（二） 瑪咖淫參對小鼠受孕影響實驗

選取健康KM鼠40只雄性小鼠和40只雌性小鼠；將40只雄性小鼠隨機分組，分別為空白對照組和實驗組（瑪咖淫參低、中、高劑量組），每組10只小鼠，整個實驗過程雄性小鼠處于獨居狀態(tài)。實驗組給予瑪咖淫參灌胃，劑量見表1所示；空白對照組給予純凈水，每日一次，連續(xù)灌胃10d。于末次灌胃后，將雄鼠1只與具有生殖能力的1只雌鼠（經(jīng)陰道涂片為發(fā)情期）合籠，合籠后第2日檢查雌性小鼠陰道是否有陰栓或者陰道涂片鏡檢，能檢出精子者即為受孕鼠，記錄受孕鼠；連續(xù)5d記錄受孕鼠數(shù)量，將以上結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)處理并比較組間差異。

（三）瑪咖淫參對大鼠陰莖勃起實驗

選取健康SD雄性大鼠54只，其中10只做假手術(shù)組，不摘除雙側(cè)睪丸，僅打開皮膚后縫合；其余44只雄性大鼠均用10%水合氯醛生理鹽水腹腔注射麻醉，用75%酒精消毒陰囊皮膚，摘除雙側(cè)睪丸。隨機將這44只大鼠分為5組，即瑪咖淫參低、中、高劑量組和模型對照組、陽性藥龜鹿補腎丸對照組，除龜鹿補腎丸對照組4只大鼠外，其余每組均10只大鼠。大鼠于術(shù)后肌注青霉素2萬單位/kg，抗生素處理3d。

除了假手術(shù)組和模型對照組給予每日1次等體積的純凈水灌胃外，其余各組大鼠按表1的劑量進行灌胃。灌胃30d后，對各組大鼠進行陰莖電刺激實驗，將JL-B型電刺激器的電極置于大鼠陰莖部位，刺激參數(shù)：電壓50V，頻率30Hz，波寬0.2ms，幅度1，給予局部電刺激，記錄從刺激開始至陰莖勃起時間，即勃起潛伏期。實驗結(jié)束后禁食12h，摘眼取血，制備血清用于Zn含量的檢測。處死并立即取陰莖制備組織勻漿，用于陰莖組織總一氧化氮合酶（NOS）的測定。分離前列腺腹葉、精囊腺、提肛肌，稱量并計算相關(guān)指數(shù)。將陰莖勃起潛伏期及相關(guān)指數(shù)進行統(tǒng)計學(xué)處理并比較組間差異。

結(jié)果

一、瑪咖淫參對小鼠捕捉率實驗結(jié)果

瑪咖淫參中、高劑量小鼠的捕捉潛伏期明顯縮短，與同期空白對照組相比，具有顯著性差異（P＜0.05、P＜0.001）；同時，瑪咖淫參的中、高劑量組能夠增加小鼠1h內(nèi)對雌鼠的捕捉次數(shù)，與同期空白對照組相比，具有顯著性差異（P＜0.01、P＜0.001）（見表2）。以上提示瑪咖淫參對壯陽具有一定的促進作用。

二、瑪咖淫參對小鼠受孕實驗結(jié)果

每組獨居小鼠每日放入一只動情期雌鼠過夜后，各組的受孕雌鼠數(shù)量明顯增加（見表3）?，斂б鶇⒅?、高劑量雌鼠受孕總數(shù)與受孕率與同期空白對照組相比，具有顯著性差異（P＜0.01、P＜0.001）。提示瑪咖淫參對壯陽具有一定的促進作用。

三、瑪咖淫參對大鼠陰莖勃起實驗結(jié)果

除假手術(shù)組外，其余各組大鼠進行摘除睪丸手術(shù)，術(shù)后各組大鼠恢復(fù)良好，灌胃30d后測定陰莖勃起時間即陰莖勃起潛伏期的結(jié)果（見表4）、血清鋅以及陰莖勻漿測定NOS的結(jié)果（見表5）及大鼠處死后性器官稱量并計算內(nèi)臟指數(shù)結(jié)果（見表6）。

表2 瑪咖淫參對小鼠捕捉率實驗結(jié)果（±s，n=10）

表2 瑪咖淫參對小鼠捕捉率實驗結(jié)果（±s，n=10）

注：與空白對照組相比**P＜0.01，***P＜0.001

組別 給藥濃度(g/kg)捕捉潛伏期(min) 1h內(nèi)捕捉次數(shù)(n)捕捉率(%)空白對照組 等體積14.44±6.893.9±2.16.30瑪咖淫參低劑量0.16011.45±6.92 5.2±2.88.40中劑量0.3204.40±2.27***11.5±6.2**18.58高劑量0.9604.14±1.74***18.4±9.4***29.73

表3 瑪咖淫參對小鼠受孕率實驗結(jié)果（±s，n=10）

表3 瑪咖淫參對小鼠受孕率實驗結(jié)果（±s，n=10）

注：與空白對照組相比**P＜0.01;***P＜0.001

組別 給藥濃度(g/kg)受孕率(%)空白對照組 等體積10只×5d=50 714瑪咖淫參低劑量0.16010只×5d=50 1428中劑量0.32010只×5d=5015**30**高劑量0.960 10只×5d=50 18***36***合籠總次數(shù)(n)受孕總數(shù)(n)

表4 瑪咖淫參對大鼠陰莖勃起潛伏期的實驗結(jié)果（±s，n=10）

表4 瑪咖淫參對大鼠陰莖勃起潛伏期的實驗結(jié)果（±s，n=10）

注：與模型對照組相比*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001

組別 給藥濃度(g/kg)陰莖勃起潛伏期(s)空白對照組 等體積9.3±4.4***模型對照組 等體積22.5±9.2瑪咖淫參低劑量0.160 21.1±14.9中劑量0.320 11.5±6.6**高劑量0.960 9.5±4.0***龜鹿補腎組8.0 8.5±5.7*

表5 瑪咖淫參對大鼠血清鋅和陰莖勻漿測定NOS的實驗結(jié)果（±s，n=10）

表5 瑪咖淫參對大鼠血清鋅和陰莖勻漿測定NOS的實驗結(jié)果（±s，n=10）

注：與模型對照組相比*P＜0.05,**P＜0.01

組別 給藥濃度(g/kg)陰莖NOS (U/mL)空白對照組 等體積16.86±1.775.48±5.56*模型對照組 等體積16.38±2.471.04±0.43瑪咖淫參低劑量0.160 15.98±1.231.47±1.14中劑量0.320 14.89±0.911.65±1.50高劑量0.96015.93±1.52 3.20±2.93*龜鹿補腎組8.017.64±1.212.01±0.75**血清鋅(mmol/L)

表6 瑪咖淫參對摘除睪丸致腎陽虛大鼠的性器官臟器指數(shù)實驗結(jié)果（±s，n=10）

表6 瑪咖淫參對摘除睪丸致腎陽虛大鼠的性器官臟器指數(shù)實驗結(jié)果（±s，n=10）

與模型對照組相比*P＜0.05,**P＜0.01

組別 給藥濃度(g/kg)體質(zhì)量(g)前列腺腹葉指數(shù)(g/kg)精囊腺指數(shù)(g/kg)提肛肌指數(shù)(g/kg)包皮腺指數(shù)(g/kg)空白對照組 等體積310.2±23.92.24±0.35**4.16±0.35*0.63±0.12**0.45±0.12*模型對照組 等體積304.1±29.71.75±0.263.68±0.60 0.47±0.130.31±0.09瑪咖淫參低劑量0.160 289.1±23.81.91±0.494.40±1.14 0.46±0.110.39±0.08中劑量0.320291.5±24.62.24±0.65*4.44±1.02 0.56±0.080.40±0.07*高劑量0.960300.4±24.12.21±0.59*4.34±0.70*0.61±0.14*0.39±0.06*龜鹿補腎組8.0283.2±29.52.51±0.81*4.14±0.310.64±0.09*0.45±0.09*

由表4可得，模型對照組大鼠的陰莖勃起潛伏期明顯延長，與同期正常對照組相比，具有顯著性差異（P＜0.001），提示大鼠摘除睪丸后，其性功能明顯被抑制。瑪咖淫參中劑量和高劑量均能明顯縮短大鼠的陰莖勃起潛伏期，與同期模型對照組相比，具有顯著性差異（P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001），提示瑪咖淫參對去勢大鼠的性功能具有一定的調(diào)節(jié)作用。陽性藥龜鹿補腎丸能夠明顯地縮短大鼠陰莖勃起潛伏期，與同期模型對照組相比，具有顯著性差異（P＜0.05），提示其具有一定的壯陽作用，與其臨床作用效果相符合。

由表5可得，正常對照組與模型對照組大鼠的血清鋅水平相近，兩者間無顯著性差異（P＞0.05），提示大鼠摘除睪丸后一個月內(nèi)對血清鋅離子水平影響有限。瑪咖淫參各劑量組的血清鋅水平或高或低，但與同期模型對照組相比，均無顯著性差異（P＞0.05），此為動物的個體差異。從陰莖組織勻漿測定總一氧化氮合酶NOS活性結(jié)果可得，正常對照組大鼠的NOS水平升高，與同期模型對照組相比，具有顯著性差異（P＜0.05），提示摘除睪丸導(dǎo)致大鼠腎陽虛后，影響了NOS的活力?，斂б鶇⒏邉┝烤苊黠@提高NOS活力，與同期模型對照組相比，具有顯著性差異（P＜0.05、P＜0.01），提示瑪咖淫參對去勢大鼠的性功能具有一定的調(diào)節(jié)作用。陽性藥龜鹿補腎丸能夠明顯地升高陰莖NOS活力，與同期模型對照組相比，具有顯著性差異（P＜0.05），提示其具有一定的壯陽作用，與其臨床作用效果相符合。

由表6實驗結(jié)果可得，模型對照組大鼠前列腺腹葉、精囊腺、提肛肌以及包皮腺均出現(xiàn)不同程度的萎縮，與同期正常對照組相比，具有顯著性差異（P＜0.05、P＜0.01）；提示摘除睪丸后大鼠的雄性激素水平明顯降低，性器官出現(xiàn)了萎縮。灌胃30d后，瑪咖淫參的中劑量和高劑量均能夠明顯增加大鼠的性器官指數(shù)，與同期模型對照組相比，具有顯著性差異（P＜0.05、P＜0.01），提示瑪咖淫參均對去勢大鼠具有一定的類激素樣作用。陽性藥龜鹿補腎丸前列腺腹葉、提肛肌與包皮腺指數(shù)均較高，與同期模型對照組相比，具有顯著性差異（P＜0.05），提示其具有一定的類激素樣作用，與其臨床作用效果相符合。

討論

本研究較為全面的探討了由瑪咖、淫羊藿和西洋參為主原料組成的復(fù)方顆粒對小鼠、大鼠的補腎壯陽功能及其作用機制。從配方原料分析可見，瑪咖（Lepidium meyenii Walp）原產(chǎn)于秘魯?shù)貐^(qū)，具有豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸、多糖和礦物質(zhì)等多種營養(yǎng)物質(zhì)[5]，還含有生物堿、芥子油苷、瑪咖烯、瑪咖酰胺等活性物質(zhì)[6-9]。相關(guān)研究表明：瑪咖具有提高性欲、調(diào)節(jié)激素、促進精子發(fā)生、提高精子運動能力、提高生殖能力、改善勃起功能、緩解疲勞、抗氧化和抗衰老等功效[10-15]，作為營養(yǎng)食品具有安全性評價[16]。淫羊藿（Berberidaceae）性辛、甘，溫。歸肝、腎經(jīng)。能補腎陽，強筋骨，祛風(fēng)濕，用于腎陽虛衰，陽痿遺精[17]，氣虛陰虧，虛熱煩倦[17]等。其主要成分為淫羊藿苷，淫羊藿苷可增加小鼠前列腺、精囊的質(zhì)量，具有雄激素樣作用，同時也能促進大鼠睪丸間質(zhì)細胞睪酮基礎(chǔ)分泌和環(huán)磷酸腺苷的生成[18,19]。其還含有多糖、木脂素、生物堿、揮發(fā)油及微量元素等，具有延緩衰老和免疫調(diào)節(jié)等作用[20]。實驗證明，淫羊藿和瑪咖配伍使用是安全的[21]。西洋參的主要功效成分是皂苷、多糖、黃酮類物質(zhì)、氨基酸等[22,23]。研究表明，西洋參中的成分西洋參多糖具有免疫調(diào)節(jié)作用，促進IL-6、IL-13、TNF-α、IFN-γ等細胞因子釋放，具有提高調(diào)節(jié)力作用，同時也能抗氧化、抗腫瘤及降低血糖等作用[24-28]，具有重要的應(yīng)用價值。

本研究結(jié)果表明，中劑量和高劑量瑪咖淫參均能夠明顯提高正常雄性小鼠的捕捉雌鼠能力，以及對雌鼠受孕能力，表明其能改善受孕能力及對提高受孕率有顯著效果；對去腎陽虛模型大鼠能夠明顯縮短陰莖勃起潛伏期，增加陰莖NOS活力水平，與陰莖勃起最主要的分子信號通道是一氧化氮-環(huán)磷酸鳥甘（NO-cGMP）信號通道，該信號通道激活后可引起陰莖海綿體平滑肌舒張，導(dǎo)致陰莖勃起。藥品可能具有作用與NO-cGMP信號通道，能誘導(dǎo)產(chǎn)生并合成NO，舒張陰莖海綿體平滑肌，從而引起陰莖勃起[29]。同時，在提高性器官指數(shù)、減緩性器官的萎縮和發(fā)揮類激素樣等方面也具有顯著作用，由此達到補腎壯陽的作用功效。

本研究結(jié)果對開發(fā)瑪咖淫參補腎壯陽功能食品、保健食品及藥品等方面具有一定的科學(xué)參考價值。

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（2016-10-18收稿）

Study on tonifying kidney and strengthening yang for compounding rgranules

Zhou Dandan, Hang Weifeng, Zheng Shaowen, Zhou Chunhui
Guangdong Apollo Co., Ltd., Guangzhou 510665, China

Objective To study the effects of a compound rgranules derived from Maca, Herba Epimedii, and ginseng raw materials on tonifying kidney and strengthening yang. Methodss (1) Forty random male mice, who were administrated with a compound rgranules for 10 days, were put into the same cage with 40 rutting female mice, and then put the pregnancy test on the female; (2) The bilateral testis of 44 SD male rats were removed by surgical, another 10

sham operation. After administration of 30d, the latency of penis erection was recorded in the penis stimulation experiments. Then the NOS content in penis homogenate and the index of penis organ were tested after fasting 12h. Resultss (1) The latency of capture in medium dose and high dose group (4.40±2.27min, 4.14±1.74min) were significantly shorter than control group(1.44±6.89min) (P<0.05, P<0.001). The frequency of capture in 1h and the number of pregnant female mice obviously increased (15 times、18times) (P<0.01, P<0.001); (2) The latency of penis erection in medium dose and high doses (11.5s、9.5s) was significantly shorter than that in the model group (22.5s). (P<0.01, P<0.001). The NOS activity of rat testis homogenate in high doses increased signif cantly as compared with that in the control group. (P<0.05). Conclusion The compound rgranules can signif cantly improve sexual function, invigorate the kidney and strengthen yang. This study has a certain reference value and scientif c basis for medicine or health food.

s Reinforcing Kidney-Yang; pregnancy rate; penile erection

:10.3969/j.issn.1008-0848.2017.02.011

R 698.2