布地奈德鼻噴霧劑粒度分布的測定及一致性分析

鐘瀟驍，曹雯，楊必勇（1.重慶市食品藥品檢驗檢測研究院，重慶401121；2.重慶市化學(xué)藥品質(zhì)量控制與評價協(xié)同創(chuàng)新中心，重慶401121）

布地奈德鼻噴霧劑粒度分布的測定及一致性分析

鐘瀟驍1，2＊，曹雯1，2，楊必勇1，2（1.重慶市食品藥品檢驗檢測研究院，重慶401121；2.重慶市化學(xué)藥品質(zhì)量控制與評價協(xié)同創(chuàng)新中心，重慶401121）

目的：建立布地奈德鼻噴霧劑樣品粒度分布的測定方法，并分析其粒度分布的一致性。方法：以水為分散劑，攪拌（1 800 r/m in）分散；分別以累積粒度分布為10%、50%、90%所對應(yīng)的粒徑[d（0.1）、d（0.5）、d（0.9）]為特征值。采用光散射法測定樣品的粒度分布，并采用SAS 9.3統(tǒng)計軟件分析2個廠家（A和B）樣品間、同一廠家不同批次間及同一批次內(nèi)樣品粒度分布的一致性。結(jié)果：A廠3批樣品d（0.1）平均值為3.96μm，d（0.5）平均值為29.58μm，d（0.9）平均值為67.10μm；B廠3批樣品d（0.1）平均值為2.00μm，d（0.5）平均值為7.53μm、d（0.9）平均值為28.51μm。通過分析得出，2個廠家樣品粒度分布差異較大，A廠樣品的粒徑大于B廠；B廠樣品各批次之間的一致性好于A廠；2個廠家各批次內(nèi)的一致性均較好。結(jié)論：所建立的方法適用于測定布地奈德鼻噴霧劑的粒度分布，并可用于分析其粒度分布的一致性。

布地奈德；鼻噴霧劑；粒度分布；光散射法；一致性

布地奈德是一種常見的糖皮質(zhì)激素，其噴霧劑在臨床上常用于變應(yīng)性鼻炎[1]、過敏性鼻炎[2]、鼻內(nèi)鏡手術(shù)后的慢性鼻-鼻竇炎伴變應(yīng)性鼻炎[3-5]等的治療。藥物被鼻黏膜吸收程度受多種因素影響，如鼻腔血液循環(huán)、鼻腔pH、藥物的脂溶性和粒子大小等。其中，不溶性藥物的粒子大小與其在鼻腔中的分布位置密切相關(guān)。研究表明，噴霧劑中約有60%粒徑范圍為2～20μm的粒子可分布在鼻腔吸收部位的前部，并能進一步被氣流、纖毛或膜擴散作用引入吸收部位后部[6]。因此，有必要對鼻噴霧劑的粒度進行控制，而現(xiàn)有標準中尚未有布地奈德鼻噴霧劑的粒度檢查項。

2013年2月國家食品藥品監(jiān)督管理總局啟動了仿制藥一致性評價，在已經(jīng)批準上市的仿制藥按與原研藥品質(zhì)量和療效一致的原則下進行，而粒度分布屬于制劑質(zhì)量控制。不同廠家、同一廠家批間及批內(nèi)粒度分布一致有利于保證藥物的療效，從而有利于患者的有效治療。2015年版《中國藥典》（四部）[7]采用光散射法來測定藥物制劑的粒度分布。光散射法采用激光散射粒度分布儀測定，其測量范圍可達0.02～3 500μm，廣泛應(yīng)用于藥物的粒度分布測定[8-11]。但尚未有測定布地奈德鼻噴霧劑中粒度的報道，因此筆者采用光散射法測定樣品的粒度分布，并采用SAS 9.3統(tǒng)計軟件分析原研藥和仿制藥兩個廠家樣品間、同一廠家不同批次間及同一批次內(nèi)樣品粒度分布的一致性，以期為該制劑的質(zhì)量控制提供參考。

1 材料

1.1 儀器

Mastersizer 2000型激光粒度分析儀，包括Hydro 2000MU（A）型濕法進樣器（英國Malvern公司）；M illi-Q Advantage A10型超純水儀（美國M illipore公司）；SK5200H型超聲波清洗器（上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司，功率：200W，頻率：53 kHz）；HJB-S180型實驗室攪拌機（杭州雷曼機械公司）。

1.2 藥品與試劑

布地奈德鼻噴霧劑[原研藥，阿斯利康制藥有限公司（A廠），批號：MARU1507123、MARY1508022、MASX 1602033（編號A1～3），規(guī)格：64μg/噴；仿制藥，健喬信元醫(yī)藥生技股份有限公司（B廠），批號：528471、529131、529161（編號B4～6），規(guī)格：64μg/噴]；水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 分散方法的考察

物理分散方法有攪拌和超聲兩種，均可以使樣品分散均勻。攪拌速率越大越有利于樣品的分散，但攪拌過快會產(chǎn)生氣泡而影響測量，因此選擇不產(chǎn)生氣泡的最大泵速1 800 r/m in進行測定。取A廠（編號：A1）、B廠（編號：B4）各1瓶上下顛倒混勻約10次，避免劇烈振搖，使樣品成為均勻分布的混懸液。將樣品加入盛有約700 m L超純水的燒杯中，為了在檢測器中產(chǎn)生可接受的信噪比，遮光度必須超過最低水平，為了避免多次散射，遮光度必須低于最大水平，因此選擇遮光度在5%～10%之間，平衡1～20m in進行測定。

藥物制劑的粒度分布常采用粒度分布特征值累積粒度分布為10%、50%、90%所對應(yīng)的粒徑[d（0.1）、d（0.5）和d（0.9）]來表示。不同分散方法下樣品粒度分布的測定結(jié)果見表1。由表1可知，僅在攪拌（1 800 r/m in）條件下，各時間點測得的兩個廠家的樣品d（0.1），d（0.5）和d（0.9）變化很小，RSD＜3%；而在攪拌（1 800 r/m in）+超聲條件下，A廠d（0.1），d（0.5）和d（0.9）均逐漸減小，B廠d（0.5）和d（0.9）逐漸減小，且粒徑較大的A廠樣品粒度分布特征值的變化更為明顯。這可能是因為超聲波產(chǎn)生的機械能使原始顆粒破裂[12]，從而導(dǎo)致粒徑測定的結(jié)果偏小，因此選擇攪拌（1 800 r/m in）方式進行樣品分散。又由于1～20m in的測定結(jié)果均較穩(wěn)定，綜合考慮選擇攪拌平衡時間為5min。

表1 不同分散方法下樣品粒度分布的測定結(jié)果Tab 1 Determ ination of particle size under differentdispersion conditions

2.2 儀器的校正和參數(shù)設(shè)置

為滿足測定要求，試驗前先采用粒度分布特征值[d（0.1）、d（0.5）、d（0.9）]已知的“標準粒子”對激光粒度分析儀進行校正參數(shù)設(shè)置。

分析模式：通用；顆粒折射率：1.520；顆粒吸收率：0.1；粒徑范圍：0.020～2 000.000μm；遮光度：5%～10%；分散劑：超純水；分散劑折射率：1.330；泵速：1 800 r/min。

2.3 粒度分布的測定

每批樣品取5瓶，將樣品上下顛倒混勻約10次，避免劇烈振搖，使樣品成為均勻分布的混懸液。用滴管將樣品加入盛有約700m L超純水的燒杯中，使遮光度在5%～10%之間，1 800 r/min的泵速攪拌5m in后進行測定。每個樣品平行測定2次，測定結(jié)果為2次讀數(shù)的平均值。結(jié)果，A廠3批樣品d（0.1）分布為2.99～5.33μm，平均值為3.96μm；d（0.5）分布為22.74～37.90μm，平均值為29.58μm；d（0.9）分布為55.00～79.58μm，平均值為67.10μm。B廠3批樣品d（0.1）分布為1.90～2.11 μm，平均值為2.00μm；d（0.5）分布為6.83～8.81μm，平均值為7.53μm；d（0.9）分布為24.95～34.94μm，平均值為28.51μm。A廠3批樣品中，A3批樣品的粒徑最小，A2批樣品的粒徑最大。B廠3批樣品中，B4批和B5批樣品的粒徑大小相似，且均小于B6批樣品。A廠和B廠樣品粒度分布圖見圖1。由圖1可知，2個廠家樣品的粒度分布圖形狀不一致，A廠3批樣品的粒度分布曲線形狀相似；B廠中B4批和B5批樣品的粒度分布曲線幾乎重合，與B6批樣品的粒度分布曲線形狀略有差異。

圖1 A廠和B廠樣品粒度分布圖Fig 1 Particle size distribution of the sam p les frommanufacturer A andmanufacturer B

2.4 粒度分布一致性分析

2.4.1 廠間一致性分析由“2.3”粒度分布的測定結(jié)果可知，2個廠家樣品粒度分布差異較大，A廠樣品的粒徑大于B廠。采用SAS 9.3統(tǒng)計軟件，統(tǒng)計粒度分布特征值，通過Wilcoxon秩和檢驗進行廠間一致性統(tǒng)計學(xué)驗證與上述結(jié)果一致。

2.4.2 批間一致性分析6批樣品，每批取5瓶，將6批樣品30瓶上下顛倒混勻約10次，避免劇烈振搖，使樣品成為均勻分布的混懸液，按“2.2”項下儀器參數(shù)進行設(shè)置，把測出的粒度分布特征值采用SAS 9.3統(tǒng)計軟件統(tǒng)計粒度分布特征值，通過Kruskal-Wallis檢驗進行批間一致性統(tǒng)計學(xué)分析，結(jié)果見表2。由表2可知，A廠3批樣品之間的粒度分布差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；B廠3批樣品之間的粒度分布差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；且從批間變異系數(shù)來看，A廠粒徑分布特征值的批間變異系數(shù)均＞B廠，說明B廠樣品各批次之間的一致性較A廠好。

表2 樣品批間及批內(nèi)粒徑統(tǒng)計結(jié)果（n＝5）Tab 2 Statistical resu lts of particle size among batchesand sam ebatch（n＝5）

2.4.3 批內(nèi)一致性分析6批樣品，每批樣品取5瓶，將每批樣品5瓶上下顛倒混勻約10次，避免劇烈振搖，使樣品成為均勻分布的混懸液，按“2.2”項下儀器參數(shù)進行設(shè)置，采用SAS 9.3統(tǒng)計軟件統(tǒng)計粒徑分布特征值，通過Kruskal-Wallis檢驗進行批內(nèi)一致性統(tǒng)計學(xué)分析，結(jié)果見表2。由表2可知，6批樣品粒度分布特征值的批內(nèi)變異系數(shù)均＜2，說明每批樣品之間的粒度分布一致性均較好。

3 討論

光散射法分為濕法測定和干法測定。濕法測定用于測定混懸樣品或不溶于分散介質(zhì)的樣品，干法測定用于測定水溶性或無合適分散介質(zhì)的固態(tài)樣品。由于布地奈德不溶于水和庚烷，微溶于乙醇，易溶于氯仿[13]，因此選擇濕法測定，以水為分散劑。

布地奈德鼻噴霧劑為混懸型噴霧劑，其制備需將原料藥細粉和附加劑充分混勻、研細，制成穩(wěn)定的混懸液。通過廠間一致性分析，A廠和B廠樣品的粒度分布差異很大，A廠樣品粒徑大于B廠。這可能與不同廠家的制備工藝不同、原料粉碎工藝及所添加的輔料不同有關(guān)。

2個廠家樣品的粒度分布存在一定的差異，B廠樣品各批次之間的一致性好于A廠，2個廠家各批次內(nèi)的一致性均較好。因此，建議患者在使用該鼻噴霧劑的過程中使用同一個廠家的藥品以獲得穩(wěn)定的治療效果。

進一步分析A廠和B廠的累積粒度分布可以發(fā)現(xiàn)，粒徑為20μm時，A廠3批樣品對應(yīng)的累積粒度分布為25.52%～44.50%，B廠3批樣品對應(yīng)的累積粒度分布為75.40%～85.06%。由于粒徑范圍為2～20μm的粒子更容易被鼻黏膜吸收，推測B廠的樣品更容易被鼻黏膜吸收，但由于影響鼻噴霧劑吸收的因素較多，因此需要更多臨床試驗來確認。

綜上所述，本研究所建立的方法適用于測定布地奈德鼻噴霧劑的粒度分布，并可用于分析其粒度分布的一致性。

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（編輯：劉柳）

Determination and Consistency Analysisof Particle Size Distribution of Budesonide Nasal Spray

ZHONG Xiaoxiao1，2，CAO W en1，2，YANG Biyong1，（21.Chongqing Institute for Food and Drug Control，Chongqing 401121，China；2.Chongqing Collaborative Innovation Center for Chem ical Medicine Quality Control and Evaluation，Chongqing 401121，China）

OBJECTIVE：To establish the method for the determ ination of particle size distribution of Budesonide nasal spray，and to analyze the consistency of particle size distribution of spray samples.METHODS：W ater was used as dispersant formixing and dispersing（1 800 r/m in）.The particle sizes[d（0.1），d（0.5），d（0.9）]corresponded to accumulative particle size of 10%，50%and 90%were used as characteristic value.The distribution of granularity was determined by laser scattering method.The consistency of particle size distribution of samples from 2 manufacturers（A，B）were analyzed among different batches or same batch of samemanufacturer by SAS 9.3 statistical software.RESULTS：The mean values of d（0.1），d（0.5）and d（0.9）were 3.96μm，29.58μm and 67.10μm in manufacturer A.Themean valuesof d（0.1），d（0.5）and d（0.9）were 2.00μm，7.53μm and 28.51μm inmanufacturer B.By analysis，there was great difference in particle size of samples from 2 manufacturers.The particle size of the samples from manufacturer A were larger than that ofmanufacturer B.The consistency among different batches from manufacturer B was better，and the consistency among same batch were all good from 2 manufacturers.CONCLUSIONS：The established method is suitable for particle size distribution of Budesonide nasal spray and the consistency analysisof particle size distribution.

Budesonide；Nasal spray；Particle size distribution；Light scatteringmethod；Consistency

R 944.9

A

1001-0408（2017）18-2560-04

2017-02-18

2017-04-11）

＊藥師，碩士。研究方向：藥物分析與藥品質(zhì)量標準。電話：023-86072741。E-mail：zxx-zoe@163.com

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.18.32