• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    魔芋葡甘聚糖抗醉解酒作用機理研究

    2017-07-05 13:24:47鄭連姬
    食品與機械 2017年5期
    關鍵詞:勻漿醉酒灌胃

    鄭連姬

    鄧利玲1

    羅嘉妮1

    張 帥1

    鄧 利1

    鐘 耕1,3

    (1. 西南大學食品科學學院,重慶 400716;2. 重慶食品工業(yè)研究所,重慶 400042;3. 重慶市特色食品工程技術研究中心,重慶 400715)

    魔芋葡甘聚糖抗醉解酒作用機理研究

    鄭連姬1,2

    鄧利玲1

    羅嘉妮1

    張 帥1

    鄧 利1

    鐘 耕1,3

    (1. 西南大學食品科學學院,重慶 400716;2. 重慶食品工業(yè)研究所,重慶 400042;3. 重慶市特色食品工程技術研究中心,重慶 400715)

    以不同劑量的魔芋葡甘露聚糖(Konjac Glucomannan,KGM)灌胃昆明種小鼠,采用56%vol紅星二鍋頭灌胃方法進行造模,研究KGM對小鼠的抗醉解酒作用及機理。結果表明:中(240 mg/kg)、高(400 mg/kg)劑量組可有效延長醉酒潛伏期,顯著縮短醉酒小鼠的睡眠時間和醒酒時間,且高、中劑量組的血清乙醇濃度顯著低于模型組小鼠,高劑量組小鼠肝組織勻漿中乙醇脫氫酶(Alcohol dehydrogenase,ADH)、乙醛脫氫酶(Acetaldehyde dehydrogenase,ALDH)和細胞色素P450(Cytochrome P450,P450)含量均顯著升高;中、高劑量組小鼠胃黏膜組織和血清中丙二醛(Methane dicarboxylic aldehyde,MDA)含量顯著降低,過氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活力、一氧化氮(Nitric Monoxide,NO)含量、前列腺素 E2(Prostaglandin E,PGE2)含量顯著升高。其解酒機理: ①可能是其抑制酒精的吸收,降低血清中乙醇濃度;② 小鼠胃黏膜和血清中MDA含量的降低,SOD活力、NO 和 PGE 的升高減輕了酒精對胃黏膜的損傷,并提高了肝臟中ADH、ALDH、P450含量,通過乙醇脫氫酶和乙醇氧化酶系統(tǒng)加速酒精代謝,發(fā)揮其防醉解酒作用。

    魔芋葡甘露聚糖;抗醉解酒;作用機理;動物試驗

    適量飲酒具有促進血液循環(huán)、疏通經(jīng)脈、助氣健胃、散濕止痛等功效。但隨著經(jīng)濟的不斷發(fā)展和人際交往的增加,嗜酒人群所占比例上升,酒精所引發(fā)的疾病和問題也日益嚴重,急性酒精中毒己經(jīng)成為節(jié)假日發(fā)病率最高的疾病之一[1]。開發(fā)安全、高效的抗醉解酒制品,并對其作用效果和作用機理進行探索,更好地服務消費者,極為必要。

    目前中國關于解酒藥物的研究主要集中在傳統(tǒng)中藥的復方及初提物方面,如復方葛根合劑[2]、葛花[3]、枳椇子水提物[4]、茶及提取物[5-6]、橄欖解酒飲[7]等。而對于一種普通食品原料——KGM,其研究報道主要集中在作為增稠劑、保水劑、膠凝劑、成膜劑、改善食品品質(zhì)、模擬天然食品、改性等方面[8],在解酒功效研究方面還比較少。梁娜等[9]對KGM防醉解酒作用進行了評價。本試驗擬進一步確定試驗小鼠的醉酒劑量,并研究KGM抗醉解酒作用機理,以期為KGM及其相關解酒產(chǎn)品的開發(fā)和應用提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 試驗原料

    KGM(160~200目):含量>90%,重慶康家客食品有限公司;

    紅星二鍋頭:56%vol,北京紅星股份有限公司。

    1.1.2 試驗試劑

    氯化鈉:分析純,成都市科龍化工試劑廠;

    乙醇、異丙醇:色譜純,成都市科龍化工試劑廠;

    乙醇脫氫酶(ADH)試劑盒、乙醛脫氫酶(ALDH)試劑盒、細胞色素(P450)試劑盒、丙二醛(MDA)試劑盒:南京建成生物工程研究所;

    一氧化氮(NO)試劑盒、超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒、前列腺素(PGE2)試劑盒:鄭州唯爾生物科技有限公司。

    1.1.3 主要設備和儀器

    臺式高速離心機:5810型,德國Eppendorf公司;

    數(shù)顯恒溫水浴鍋:HH-4型,金壇市富華儀器有限公司;

    電熱恒溫鼓風干燥箱:DHG-9070A型,上海齊欣科學儀器有限公司;

    電子天平:JTI0001型,上海精天電子儀器有限公司;

    氣相色譜儀:GC-2010型,日本島津公司;

    酶標儀:HIMG型,基因有限公司。

    1.1.4 試驗動物 試驗動物昆明種小鼠,雄性,體重范圍(20±2) g,由騰鑫生物技術有限公司提供,動物合格證號:SCXK-(軍)2012-0011,檢疫后備用。小鼠飼料、墊料,由騰鑫生物技術有限公司提供。飼養(yǎng)環(huán)境:動物飼養(yǎng)房溫度保持在22~24 ℃,相對濕度40%~60%,定時通風換氣,自然明暗周期12 h(開燈8:00~20:00)。恒溫恒濕,標準飼料,自由飲水。

    1.2 KGM對急性酒精中毒小鼠的解酒作用

    1.2.1 醉酒劑量的確定 取昆明種小鼠40只,經(jīng)1周的適應性喂養(yǎng)后,隨機分為4組,每組10只。禁食12 h后,各組按體重分別灌胃56%vol白酒13,14,15,16 mL/kg·BW。記錄小鼠的醉酒率和死亡率。選擇醉酒率最高死亡率最低的灌酒劑量。翻正反射消失即為醉酒,反之為不醉。

    1.2.2 醉酒治療試驗 40只昆明種小鼠,適應性喂養(yǎng)1周后,將小鼠隨機分為4組,每組10只。4組小鼠處理前12 h禁食不禁水。每組小鼠按14 mL/kg體重灌胃56%vol紅星二鍋頭,再分別給藥:模型組小鼠(灌服等容積生理鹽水),低、中、高劑量組小鼠分別按0.4 mL/20 g體重灌胃濃度為170,240,400 mg/kg的KGM溶液。試驗前對各組小鼠進行稱量、標號并記錄。

    觀察各組小鼠的活動情況[9-10]并記錄小鼠醉酒數(shù)、死亡數(shù)、給酒時間、翻正反射消失時間和翻正反射恢復時間。醉酒潛伏期=翻正反射消失時間-給酒時間;睡眠時間=翻正反射恢復時間-翻正反射消失時間;醒酒時間=翻正恢復時間-給酒時間。

    1.3 KGM對急性酒精中毒小鼠的解酒機理探究

    1.3.1 試驗動物分組及給藥 昆明種雄性小鼠50只,適應性喂養(yǎng)1周后,將小鼠隨機分為5組(正常組,模型組,KGM低、中、高劑量組),每組10只。試驗前對各組小鼠進行稱量、標號并記錄。試驗前12 h禁食不禁水。試驗組分別按0.4 mL/20 g體重灌胃濃度為170,240,400 mg/kg的KGM溶液,空白組和模型組以等容積的生理鹽水灌胃,30 min后模型組和KGM組均以56%vol紅星二鍋頭白酒灌胃。各組均一次性灌胃給藥,灌胃容積均按14 mL/kg體重執(zhí)行。

    1.3.2 樣本采集和處理 各組小鼠造模后,于0.5,1.0,1.5,2.0,2.5 h各時間節(jié)點進行眼眶靜脈采血,并將其置于37 ℃的水浴鍋中,靜置2 h后,于3 000~4 000 r/min離心10 min,取上層血清,分裝于4 ℃冰箱保存。灌酒2.5 h后,脫臼處死小鼠,剖腹,分離出肝組織以制備肝組織勻漿;剖腹取胃,沿胃大彎剪開,用冷生理鹽水漂洗,濾紙吸干,將胃組織制備組織勻漿[11]。

    1.3.3 KGM對小鼠血清乙醇濃度的影響

    (1) 標準曲線的制作: 取濃度梯度為50,100,150,200,250,300,350 mg/100 mL的無水乙醇溶液(密度0.789~0.791 g/mL)100 μL,各加濃度為100 mg/100 mL的內(nèi)標物異丙醇溶液(密度0.784~0.786 g/mL)500 μL,3 000 r/min 離心5 min,取上清液0.6 μL進樣。并記錄各自的峰面積,每個梯度的樣品平行進樣3次,繪制內(nèi)標標準曲線,縱坐標為待測組分(乙醇)與內(nèi)標物(異丙醇)的峰面積之比,橫坐標為乙醇與異丙醇的含量之比。標準曲線見圖1。

    圖1 乙醇標準曲線Figure 1 The standard curve of ethanol

    (2) 樣品處理:取血清100 μL,并于0.45 μm濾膜濾過。加內(nèi)標物質(zhì)500 μL,3 000 r/min 離心5 min,取上清液0.6 μL注入進樣瓶[12]。

    (3) 分析條件:GC-2010 型氣相色譜儀,柱子:PEG-20M融硅石英毛細管柱;內(nèi)標物質(zhì):100 mg/100 mL 異丙醇;進樣口溫度190 ℃;分流進樣;檢測器(FID)溫度240 ℃;氣體流速:空氣400 mL/min,氫氣40 mL/min,尾吹(氮氣)40 mL/min,色譜柱流量0.97 mL/min;進樣量0.6 μL;柱溫:程序升溫,55 ℃保留6 min,再以5 ℃/min升溫至70 ℃,保留40 s,然后以30 ℃/min升溫至110 ℃[13]。

    1.3.4 對胃組織生化指標的檢測 采用酶聯(lián)免疫吸附法測定小鼠血清、胃組織勻漿中SOD活性、NO含量、PGE2含量;采用TBA法測定小鼠血清、胃組織勻漿中MDA含量,嚴格按照試劑盒說明書操作。

    1.3.5 對肝組織生理指標的檢測 采用酶聯(lián)免疫吸附法測定小鼠肝組織勻漿中ADH、ALDH、P450的水平,嚴格按照試劑盒說明書操作。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    采用SPSS 18.0軟件進行統(tǒng)計處理,計量資料用平均數(shù)±標準差表示,組間比較采用單因素方差分析(LSD)。當P<0.05時,有統(tǒng)計學意義,有顯著性差異。

    2 結果與分析

    2.1 KGM對急性酒精中毒小鼠的解酒作用

    2.1.1 醉酒劑量的確定 小鼠醉酒劑量的確定試驗,結果見表1。13 mL/kg灌胃劑量組醉酒率和死亡率分別為60%和0%,說明灌胃劑量偏小,未達到小鼠醉酒劑量。16 mL/kg灌胃劑量組小鼠醉酒率達到100%,但由于劑量太高,小鼠死亡率達到了40%。而14 mL/kg灌胃劑量組小鼠的醉酒率最高達到90%,而死亡率最低只有10%。因此選擇此劑量為后續(xù)小鼠急性酒精中毒試驗的最適灌酒劑量,與文獻[10]所得結果一致,與梁娜等[9]的結果稍有差異。

    2.1.2 醉酒治療試驗 為了研究KGM抗醉酒效果,試驗采取先酒后藥的處理,結果見表2。與模型組比較,高、中劑量組能顯著(P<0.05)縮短小鼠的睡眠時間和醒酒時間,并且高劑量組可以顯著(P<0.05)延長小鼠的醉酒潛伏期。低劑量組小鼠較模型組無顯著性差異(P>0.05)。進一步比較可見,高、中劑量組入睡小鼠數(shù)減少。結果揭示,KGM具有解酒的效果。

    表1 酒精劑量對小鼠醉酒的影響Table 1 The effects of ethanol dosage on mice ebriety (n=10)

    2.2 KGM對急性酒精中毒小鼠的解酒機理探究

    2.2.1 KGM對小鼠血清乙醇濃度的影響 各試驗組小鼠血清中乙醇濃度變化見表3。與模型組相比,KGM各試驗組可降低血清中乙醇含量:在60,90,150 min時,高、中劑量組小鼠血清中乙醇含量顯著(P<0.05)減少;而120 min時,雖然沒有顯著減少,但有減少的趨勢。模型組在 90 min時,血清中乙醇含量最高,而各KGM組在120 min時,達到最高,但高、中劑量組均低于模型組。而低劑量組小鼠血清中乙醇濃度較模型組變化無顯著性意義(P>0.05)。結果揭示KGM具有抑制乙醇吸收,降低血清中乙醇濃度的作用,且高、中劑量組效果更顯著,優(yōu)于低劑量組。

    2.2.2 各組小鼠胃組織勻漿的生化指標

    (1) 小鼠胃組織勻漿中SOD活力和MDA含量:文獻報道[14]表明胃黏膜損傷與自由基有關。酒精代謝過程中會產(chǎn)生大量的自由基,因而氧化損傷是酒精對機體產(chǎn)生毒性效應的重要原因之一[15]。MDA是重要的脂質(zhì)過氧化反應產(chǎn)物之一,可反映機體內(nèi)脂質(zhì)過氧化程度,測定其含量常能間接反映細胞損傷的程度。SOD是對機體氧化與抗氧化系統(tǒng)保持平衡起著重要作用的抗氧化酶之一,具有清除氧自由基,并保護細胞免受損傷的功能[16]。細胞受損傷的程度可由SOD活力水平間接地反應[14,17]。因此,SOD活性和MDA含

    表2 KGM對小鼠的醉酒治療效果?Table 2 Therapeutic effect of konjac gum powder on ebriety of mice (n≥7)

    ? 同列不同字母的組間存在顯著性差異(P<0.05)。

    表3 KGM對小鼠不同時間點血清中乙醇濃度的影響?Table 3 The effects of konjac gum powder on ethanol concentration of time courses in serum in mice (n≥8) mg/mL

    ? 同列不同字母的組間存在顯著性差異(P<0.05)。

    量的測定被認為是衡量由于脂質(zhì)過氧化作用和超氧自由基引起的胃黏膜損傷程度的“黃金標準”[18]。

    KGM對酒精致胃黏膜損傷小鼠胃黏膜組織MDA含量和SOD活力的影響見表4。與空白組比較,模型組小鼠胃黏膜組織中MDA含量顯著(P<0.05)升高,SOD活力顯著(P<0.05)降低,說明酒精致胃黏膜損傷模型的形成與胃黏膜MDA含量升高和SOD活力降低有關。與模型組比較,低、中、高劑量組小鼠胃黏膜組織中MDA含量顯著(P<0.05)降低,高劑量組SOD活力顯著(P<0.05)升高,中劑量組SOD活力也有增高的趨勢。而低劑量組小鼠SOD水平較模型組變化無顯著性差異(P>0.05)。中、高劑量組小鼠胃黏膜組織中SOD和MDA水平分別與空白組小鼠比較無顯著性意義(P>0.05)。說明KGM可以減少脂質(zhì)過氧化物反應,保護胃黏膜;降低胃黏膜中MDA含量,提高SOD活力是保護胃黏膜的有效途徑,且呈一定的量效關系,當劑量達到中、高劑量組效果更優(yōu)。由此提示,KGM可能通過降低小鼠胃黏膜組織中MDA含量,提高SOD活力來預防小鼠胃黏膜損傷。

    表4 KGM對酒精致胃黏膜損傷小鼠胃黏膜組織MDA含量和SOD活力的影響?

    Table 4 Effect of konjac gum powder on MDA content and SOD activity in mice gastric mucosa with alcohol-induced injury (n≥8)

    組別MDA含量/(nmol·mg-1·Pro)SOD活力/(U·mL-1·Pro)空白組 2.522±0.620c23.324±4.885a模型組 5.410±1.536a17.853±3.711b低劑量組3.936±0.786b17.790±2.271b中劑量組3.346±1.107bc19.407±4.198ab高劑量組2.849±1.033bc23.629±5.305a

    ? 同列不同字母的組間存在顯著性差異(P<0.05)。

    (2) 小鼠血清中SOD活力和MDA含量:KGM對酒精致胃黏膜損傷小鼠血清中MDA含量和SOD活力的影響見表5。與空白組比較,模型組小鼠血清中SOD活力顯著(P<0.05)降低,MDA含量顯著(P<0.05)升高,說明酒精致胃黏膜損傷模型的形成與小鼠血清中MDA含量升高和SOD活力降低有關。與模型組小鼠比較,中、高劑量組小鼠血清中MDA含量顯著(P<0.05)降低,SOD活力顯著(P<0.05)升高。而低劑量組小鼠較模型組小鼠血清中MDA含量和SOD活性變化無顯著性意義。高劑量組小鼠血清中SOD和MDA水平分別與空白組小鼠比較無顯著性意義(P>0.05)。由此提示,KGM可能通過降低小鼠血清中MDA含量,提高SOD活力來預防小鼠胃黏膜損傷,且呈一定的量效關系,當達到中、高劑量時發(fā)揮作用。

    (3) 小鼠胃組織勻漿及血清中NO含量:NO是胃黏膜重要的防御因子之一,具有自由基化學特性,是胃腸道非腎上腺素能使神經(jīng)釋放的一種信使分子和神經(jīng)遞質(zhì)。有研究[19-20]表明,NO對胃黏膜起到保護作用可能與其具有調(diào)節(jié)胃十二指腸黏膜血流量、胃脈管系統(tǒng)的基礎張力和胃的酸堿平衡,維持胃黏膜完整性和微血管屏障正常功能,改善血管通透性,減輕炎癥反應的作用有關。此外,NO可以降低胃黏膜中過氧化物酶活性,促進胃黏液分泌起到保護胃黏膜作用[21]。

    表5 KGM對酒精致胃黏膜損傷小鼠血清MDA含量和SOD活力的影響?

    Table 5 Effect of konjac gum powder on MDA content and SOD activity in mice serum with alcohol-induced injury (n≥8)

    組別MDA含量/(nmol·mL-1)SOD活力/(U·mL-1·Pro)空白組 14.492±2.840b58.199±1.982a模型組 18.224±2.566a49.912±3.919c低劑量組18.064±2.859a51.394±2.471bc中劑量組14.906±2.324b53.825±1.580b高劑量組13.684±2.279b60.431±4.973a

    ? 同列不同字母的組間存在顯著性差異(P<0.05)。

    由圖2、3可知,模型組小鼠胃黏膜和血清中NO含量顯著(P<0.05)低于空白組小鼠,說明酒精致胃黏膜損傷模型的形成和NO含量過低有關。中、高劑量組小鼠血清中NO含量與模型組小鼠相比均顯著(P<0.05)升高,高劑量組小鼠胃黏膜中NO含量較模型組小鼠顯著(P<0.05)升高,說明升高胃黏膜及血清中NO含量是KGM預防酒精致胃黏膜損傷的一個途徑。低劑量組對小鼠胃黏膜和血清中NO含量升高作用不明顯(P>0.05);中、高劑量組小鼠血清和胃黏膜中NO含量較空白組小鼠差異不顯著(P>0.05)。提示KGM只有達到一定的劑量作用效果才明顯;KGM可能通過升高小鼠胃黏膜和血清中NO含量來預防酒精致胃黏膜損傷。

    (4) 小鼠胃組織勻漿及血清中PGE2含量:前列腺素(PGs)是胃黏膜另一重要防御因子,廣泛分布于胃和十二指腸等消化道,研究[22]表明其與潰瘍病的發(fā)生有密切關系,具有很強的細胞保護作用。PGE2是花生四烯酸的衍生物,由胃黏膜上皮細胞和十二指腸黏膜不斷合成、釋放,是首先被發(fā)現(xiàn)具有細胞保護作用的內(nèi)源性物質(zhì)。PGE2通過增強胃黏膜的屏障作用,增加黏膜表面黏液分泌和黏膜血流量,刺激胃、十二指腸黏膜基底細胞向表面移動以促進其修復,清除氧自由基,抑制胃酸等來保護胃黏膜[23-25]。有研究[26]表明,乙醇通過抑制內(nèi)源性前列腺素合成所必需的環(huán)氧化酶活性來干擾前列腺素的合成,從而削弱其對胃黏膜的保護作用,導致胃黏膜損傷如潰瘍、出血、糜爛、穿孔等。

    不同字母表示組間存在顯著性差異(P<0.05)圖2 KGM對酒精致胃黏膜損傷小鼠胃黏膜組織NO 含量的影響

    Figure 2 Effect of konjac gum powder on NO content in mice gastric mucosa with alcohol-induced injury (n≥8)

    不同字母表示組間存在顯著性差異(P<0.05)圖3 KGM對酒精致胃黏膜損傷小鼠血清NO含量的影響

    Figure 3 Effect of konjac gum powder on NO content in mice serum with alcohol-induced injury (n≥8)

    由圖4、5可知,模型組小鼠胃黏膜和血清中PGE2含量顯著(P<0.05)低于空白組小鼠,說明酒精致胃黏膜損傷模型的形成和PGE2含量過低有關。與模型組比較,高劑量組小鼠胃黏膜中PGE2含量顯著(P<0.05)升高,中、高劑量組小鼠血清中PGE2含量均顯著(P<0.05)升高。雖然中劑量組小鼠胃黏膜PGE2含量較模型組差異無統(tǒng)計學意義,但有升高的趨勢。說明升高胃黏膜及血清中PGE2含量是KGM

    不同字母表示組間存在顯著性差異(P<0.05)圖4 KGM對酒精致胃黏膜損傷小鼠胃黏膜組織 PGE2含量的影響

    Figure 4 Effect of konjac gum powder on PGE2 content in mice gastric mucosa with alcohol-induced injury (n≥8)

    不同字母表示組間存在顯著性差異(P<0.05)圖5 KGM對酒精致胃黏膜損傷小鼠血清PGE2含量的影響

    Figure 5 Effect of konjac gum powder on PGE2 content in mice serum with alcohol-induced injury (n≥8)

    預防酒精致胃黏膜損傷的一個途徑。低劑量組對小鼠胃黏膜和血清中PGE2含量較模型組小鼠差異不顯著(P>0.05),試驗結果與黃進波等[27]的一致。提示KGM只有到一定的劑量作用效果才明顯;KGM可能通過升高小鼠胃黏膜和血清中PGE2含量來預防酒精致胃黏膜損傷。

    2.2.3 各組小鼠肝組織勻漿中ADH、ALDH及P450的含量 肝臟既是人體中最大的腺體也是極其重要的代謝器官。血液中90%的乙醇都在肝臟中代謝,當肝臟中乙醇濃度較低時,主要通過乙醇脫氫酶(ADH)和乙醛脫氫酶(ALDH)代謝。ADH將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛,在ALDH參與下乙醛轉(zhuǎn)變成乙酸,最后氧化成CO2和H2O,排除體外[28]。當乙醇濃度超過10 mmol/L,乙醇氧化系統(tǒng)(MEOS)被激活成主要的酒精代謝途徑,在細胞色素P450存在和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)參與下乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛,P450主要分布在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和細胞線粒體內(nèi),其中含量最高的是肝臟微粒體[29]。其中P450ⅡE1是P450家族中重要的成員,主要在肝臟中表達,可被乙醇誘導活化,參與酒精代謝,產(chǎn)生大量自由基,導致脂質(zhì)過氧化;并可以活化多種異源性物質(zhì)產(chǎn)生有毒物質(zhì)。近年來有研究[30]將其與酒精性肝病聯(lián)系起來,發(fā)現(xiàn)在乙醇的作用下,P450ⅡE1酶含量增強[30]。

    各試驗組小鼠肝組織勻漿中ADH、ALDH含量以及細胞色素P450含量的變化見表6。由表6可知,與模型組小鼠比較,高劑量組小鼠肝臟組織勻漿中ADH和P450含量均顯著(P<0.05)升高;中劑量組中ADH含量顯著(P<0.05)升高,ALDH、P450含量雖然沒有顯著升高,但是有升高的趨勢。而低劑量組ADH、ALDH、P450含量較模型組變化無顯著性意義(P>0.05)。結果提示一定濃度的KGM可以提高肝臟中ADH、ALDH和P450含量,存在量效效應,從而加速酒精代謝,發(fā)揮解酒作用。

    表6 KGM對乙醇小鼠肝中乙醇脫氫酶、乙醛脫氫酶和細胞色素P450含量的影響?

    Table 6 The effects of konjac gum powder on contents of ADH,ALDH and P450 in mice liver with acute alcoholism (n≥8)

    組別ADH含量/(μg·L-1·Pro)ALDH含量/(μg·L-1·Pro)P450含量/(pmol·L-1·Pro)空白組 7.359±0.452b5.750±1.264b108.226±11.905a模型組 8.093±1.608b6.121±1.375ab73.629±19.814b低劑量組7.794±0.669b6.460±1.303ab77.763±15.230b中劑量組11.529±2.362a7.879±1.094ab94.583±13.433ab高劑量組12.119±3.167a8.105±2.502a108.859±32.403a

    ? 同列不同字母的組間存在顯著性差異(P<0.05)。

    成楊等[31]的研究表明:急性酒精灌胃導致大鼠腸道細菌菌落發(fā)生明顯改變,而通過進藥干預,可調(diào)節(jié)酒精所致的腸道菌群失調(diào)。KGM對小鼠盲腸內(nèi)容物的體外厭氧發(fā)酵,可促進發(fā)酵液pH值明顯降低,短鏈脂肪酸、乳酸菌、雙歧桿菌的數(shù)量顯著增加,腸道潛在致病菌(大腸桿菌、梭狀桿菌、擬桿菌)的增值不明顯[32]。

    3 結論

    本試驗結果提示,中、高劑量的KGM具有防醉、解酒功效,作用機理:① 可能是其抑制酒精的吸收,降低血清中乙醇濃度;② 減輕了酒精對胃黏膜的損傷,并提高了ADH、ALDH、P450含量,通過乙醇脫氫酶和乙醇氧化酶系統(tǒng)加速酒精代謝,發(fā)揮其防醉解酒作用。但KGM在調(diào)節(jié)腸道微生物菌群達到抗醉解酒作用關系方面還有待進一步研究。

    [1] 徐正婕, 陸倫根. 酒精性肝病的流行病學和自然史[J]. 中國處方藥, 2010(1): 32-33.

    [2] 王晶, 李洪敏, 艾芳, 等. 葛根素的提取及對小鼠解酒護肝功能的鑒定[J]. 局解手術學雜志, 2015, 24(4): 358-361.

    [3] 高學清, 汪何雅, 錢和, 等. 葛根和葛花對急性酒精中毒小鼠的解酒作用[J]. 食品與生物技術學報, 2012, 31(6): 621-627.

    [4] 黃利民, 陳潔若, 唐苗, 等. 枳椇子復方制劑對急性酒精中毒的作用研究[J]. 華章, 2014(1): 369-370.

    [5] 王岳飛, 郭輝華, 丁悅敏, 等. 茶多酚解酒作用的實驗研究[J]. 茶葉, 2003, 29(3): 145-147.

    [6] 徐良, 鄒欣濤, 岑麗華, 等. 玉液康涼茶保健飲料的解酒護肝胃作用研究[J]. 中國醫(yī)藥導刊, 2012, 14(s1): 193-200.

    [7] 彭勃, 苗明三, 王穎芳. 橄欖解酒飲對大小鼠急性酒精性肝損傷的影響[J]. 上海中醫(yī)藥雜志, 2003, 37(10): 48-51.

    [8] 周韻, 趙丹, 辰巳英三, 等. 魔芋葡甘露聚糖在食品產(chǎn)業(yè)中的研究進展[J]. 食品與機械, 2013, 29(4): 258-262.

    [9] 梁娜, 秦清娟, 鄒勇, 等. 魔芋葡甘聚糖對小鼠的防醉解酒作用[J]. 食品工業(yè)科技, 2015, 36(14): 366-369.

    [10] 項偉. 常用調(diào)控酒精代謝物質(zhì)及其制品解酒效果的動物試驗研究[D]. 長沙: 湖南農(nóng)業(yè)大學, 2006: 23.

    [11] 梁桂寧. 紫菜多糖保護小鼠胃黏膜免受酒精急性損傷的機制研究[D]. 南寧: 廣西醫(yī)科大學, 2009: 9.

    [12] 李世杰, 鄭雯, 馮其光. 血液中乙醇濃度檢測方法[J]. 預防醫(yī)學情報雜志, 2007, 23(1): 124-126.

    [13] 茍錫斌. 氣相色譜法測定血液中乙醇含量[J]. 預防醫(yī)學情報雜志, 2003, 19(2): 188.

    [14] GRANGER D N, RUTILI G, MCCORD J M. Superoxide radicals in feline intestinal ischemia[J]. Gastroenterology, 1981, 81(1): 22-29.

    [15] PETERSEN O H, SUTTON R. Ca2+signalling and pancreatitis: effects of alcohol, bile and coffee[J]. Trends in Pharmacological Sciences, 2006, 27(2): 113-120.

    [16] MCCORD J M, KEELE B B, FRIDOVICH I. An enzyme-based theory of obligate anaerobiosis: the physiological function of superoxide dismutase[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 1971, 68(5): 1 024-1 027.

    [17] NARTEY E T, OFOSUHENE M, AGBALE C. Anti-ulcerogenic activity of the root bark extract of the African laburnum “Cassia sieberiana” and its effect on the anti-oxidant defence system in rats[J]. BMC Complementary and Alternative Medicine, 2012, 12(1): 247.

    [18] RAHIM N A, HASSANDARVISH P, GOLBABAPOUR S, et al. Gastroprotective effect of ethanolic extract of Curcuma xanthorrhiza leaf against ethanol-induced gastric mucosal lesions in Sprague-Dawley rats[J]. Bio Med Research International, 2014: 2 014.

    [19] YANG Li, WANG Wei-ping, WANG Hong-ying, et al. Intragastric administration of hepafin enhan ees gastric ulcer healing through a nitric oxide-dependent mechanism in rats[J]. European Journal of Pharmacology, 2000, 399(2): 205-214.

    [20] WU Da-feng, CEDERBAUM A I. Alcohol, oxidative stress, and free radical damage[J]. Alcohol Research and Health, 2003, 27: 277-284.

    [21] QUI Bo-sheng, MEI Qi-bing, LIU Li, et al. Effects of nitric oxide on gastric ulceration induced by nicotine and cold-restraint stress[J]. World Journal of Gastroenterology, 2004, 10(4): 594-597.

    [22] 曲怡, 才麗平, 鄭洪新, 等. 中藥消癰潰得康對乙酸胃潰瘍模型大鼠PGE2及EGF含量的影響[J]. 中華中醫(yī)藥雜志, 2011(10): 2 255-2 257.

    [23] 董秋梅, 米子良, 杜錦輝, 等. 胃和沖劑對乙酸法大鼠胃潰瘍模型及其血漿PGE_2含量的影響[J]. 中國中醫(yī)藥信息雜志, 2002(12): 26-28.

    [24] 李冀, 畢珺輝, 孫宇峰. 四逆散抗實驗性胃潰瘍的藥效學及作用機理研究[J]. 中華中醫(yī)藥學刊, 2007(7): 1 317-1 319.

    [25] 王長洪. 前列腺素與胃黏膜病變[J]. 中國中西醫(yī)結合脾胃雜志, 1995(1): 50-51.

    [26] OH T Y, AHN G J, CHOI S M, et al. Increased susceptibility of ethanol-treated gastric mucosa to naproxen and its inhibition by DA-9601, an Artemisia asiatica extract[J]. World Journal of Gastroenterology, 2005, 11(47): 7 450-7 456.

    [27] 黃進波, 蕭欽, 周佳佳, 等. 竹葉黃酮對乙醇誘導小鼠急性胃黏膜損傷的保護作用[J]. 現(xiàn)代藥物與臨床, 2015(7): 779-783.

    [28] YIN Shih-jiun, LIAO Chin-shya, WU Chew-wun, et al. Human stomach alcohol and aldehyde dehydrogenases: comparison of expression pattern and activities in alimentary tract[J]. Gastroenterology, 1997, 112(3): 766-775.

    [29] 胡屹屹. 豬肝微粒體細胞色素P450酶系的初步研究[D]. 南京: 南京農(nóng)業(yè)大學, 2006: 3.

    [30] 朱海珍, 魏文樹. 細胞色素P450 2E1與酒精性肝病[J]. 海峽藥學, 2008, 20(10): 11-14.

    [31] 成楊, 汪?;? 胡義楊, 等. 急性酒精肝損傷大鼠腸道細菌群落變化及健脾活血方干預的ERIC-PCR指紋圖譜檢測[C]// 中華中醫(yī)藥學會全國第十四次肝膽病學術會議論文匯編. 上海: 中華中醫(yī)藥學會內(nèi)科分會(肝膽病專業(yè)), 2010: 228-238.

    [32] 秦青娟, 鄧利, 徐小青, 等. 魔芋葡甘聚糖及其衍生物腸道益生性的體外發(fā)酵評價[J]. 食品科學, 2015, 36(15): 217-220.

    The mechanism for anti-drunk and anti-inebriation of Konjac Glucomannan

    ZHENGLian-ji1,2

    DENGLi-ling1

    LUOJia-ni1

    ZHANGShuai1

    DENGLi1

    ZHONGGeng1,3

    (1.CollegeofFoodScienceSouthwestUniversity,Chongqing400716,China; 2.ChongqingFoodTechnologyInstitute,Chongqing400042,China; 3.ChongqingEngineeringResearchCenterofRegionalFood,Chongqing400715,China)

    In this study, different doses of konjac gum powder (KGM) were administered to Kunming mice to study their the anti-drunk hangover effects and its mechanism, and the model was made by intragastric administration of 56 %vol liquor of Red Star Erguotou, China. The results showed that the middle dose (240 mg/kg) and high dose (400 mg/kg) of KGM could effectively prolong the climb time and Latency time of drunkenness, and could significantly shorten the drunken mice sleeping time and sobering time. The ethanol concentration of serum in the high and middle dose groups was significantly lower than that in the model group, and the contents of alcohol dehydrogenase (ADH), aldehyde dehydrogenase (ALDH) and cytochrome P450 (P450) in liver homogenate significantly increased in high dose group. The contents of malondialdehyde (MDA) in gastric mucosal tissues and serum in the middle and high dose groups significantly decreased, while the activities of superoxide dismutase (SOD), nitric oxide (NO) and prostaglandin E2 significantly increased. The anti-alcohol hangover mechanism of KGM might be as follows. On the one hand, alcohol absorption was inhibited by the KGM and the ethanol concentration in serum is reduced. On the other hand, the decrease of MDA content, and the increase of SOD activity, NO and PGE in gastric mucosa and serum decreased the damage of gastric mucosa, and increased the ADH, ALDH, P450. Thusand the alcohol metabolism was accelerated through alcohol dehydrogenase and ethanol oxidase system, then its anti-drunk hangover role was played.

    Konjac Glucomannan (KGM); anti-drunk & anti-inebriation; effect & mechanism; animal experiment

    重慶市基礎科學與前沿技術研究項目(編號:CSTC 2013jcyjA00028);重慶市“121”科技示范工程項目(編號:CSTC 2014fazktjcsf80052);重慶市特色食品工程技術研究中心能力提升項目(編號:CSTC 2014pt-gc8001)

    鄭連姬,女,重慶食品工業(yè)研究所高級工程師,西南大學在讀博士研究生。

    鐘耕(1964—),男,西南大學教授,博士。 E-mail:zhongdg@126.com

    2016—12—21

    10.13652/j.issn.1003-5788.2017.05.032

    猜你喜歡
    勻漿醉酒灌胃
    兔寶寶“醉酒”
    勻漿法提取沙棗果總黃酮工藝研究
    植物研究(2018年4期)2018-07-24 00:52:26
    Drunk 醉酒
    小鼠、大鼠灌胃注意事項
    醉酒八仙2
    醉酒八仙
    不同誘導方式制備的大鼠肝勻漿代謝酶活性及凍儲方式的比較
    來曲唑灌胃后EM大鼠病灶體積及COX-2 mRNA、survivin蛋白表達變化
    實驗小鼠的灌胃給藥技巧
    前列安丸對瓊脂所致慢性前列腺炎模型大鼠前列腺勻漿中IgG和血清Zn的影響
    老司机午夜十八禁免费视频| av在线蜜桃| 亚洲乱码一区二区免费版| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 在现免费观看毛片| 天堂网av新在线| 在线观看66精品国产| 搡老岳熟女国产| 欧美性感艳星| 美女高潮的动态| 怎么达到女性高潮| 麻豆成人av在线观看| www日本黄色视频网| 亚洲av免费高清在线观看| 色视频www国产| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 国产精品一区二区免费欧美| 午夜日韩欧美国产| 夜夜夜夜夜久久久久| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 久久久久久久久大av| 高清日韩中文字幕在线| 国产精品一区二区三区四区久久| 亚洲美女视频黄频| 美女大奶头视频| 午夜a级毛片| 免费电影在线观看免费观看| 精品久久久久久久久av| 51午夜福利影视在线观看| 国产亚洲精品久久久com| 在线看三级毛片| 久久久久精品国产欧美久久久| 麻豆一二三区av精品| 又黄又爽又免费观看的视频| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 午夜福利欧美成人| 色吧在线观看| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 久久亚洲真实| 亚洲天堂国产精品一区在线| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 床上黄色一级片| 久久久色成人| 男女那种视频在线观看| 亚洲成人久久性| 十八禁网站免费在线| 午夜福利视频1000在线观看| 丁香六月欧美| 亚洲美女黄片视频| 天天躁日日操中文字幕| 内地一区二区视频在线| 成人国产综合亚洲| 国产精品一及| 亚洲av免费高清在线观看| 亚洲在线观看片| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 国产精品免费一区二区三区在线| 亚洲国产色片| 久久久久久久亚洲中文字幕 | 欧美日韩乱码在线| 亚洲久久久久久中文字幕| 伦理电影大哥的女人| 丁香欧美五月| 性插视频无遮挡在线免费观看| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 日本熟妇午夜| 国产91精品成人一区二区三区| 午夜老司机福利剧场| 国产av一区在线观看免费| 又紧又爽又黄一区二区| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 麻豆国产av国片精品| 精品国内亚洲2022精品成人| 欧美日本亚洲视频在线播放| 老鸭窝网址在线观看| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 一个人看的www免费观看视频| 99久久精品热视频| 国产成人影院久久av| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 一区二区三区激情视频| 午夜福利免费观看在线| 国产精品久久久久久久久免 | 国产成人福利小说| 亚洲成a人片在线一区二区| 一本综合久久免费| 久久精品国产自在天天线| 色播亚洲综合网| 国产成人啪精品午夜网站| 波野结衣二区三区在线| 十八禁网站免费在线| 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 色噜噜av男人的天堂激情| 亚洲精品影视一区二区三区av| 别揉我奶头 嗯啊视频| 亚洲专区国产一区二区| 国产成人福利小说| 亚洲欧美精品综合久久99| 免费无遮挡裸体视频| 他把我摸到了高潮在线观看| 三级毛片av免费| 久久久久免费精品人妻一区二区| 黄色女人牲交| 亚洲人成电影免费在线| 日本熟妇午夜| 男女下面进入的视频免费午夜| 长腿黑丝高跟| 夜夜夜夜夜久久久久| 级片在线观看| 国产视频一区二区在线看| 一二三四社区在线视频社区8| 国产人妻一区二区三区在| 少妇的逼水好多| 成年女人看的毛片在线观看| 男女床上黄色一级片免费看| 免费在线观看成人毛片| 亚洲av五月六月丁香网| 九色成人免费人妻av| 美女 人体艺术 gogo| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 亚洲精品成人久久久久久| 色播亚洲综合网| 最近最新中文字幕大全电影3| 国内精品美女久久久久久| 亚洲内射少妇av| x7x7x7水蜜桃| av福利片在线观看| 有码 亚洲区| 亚洲一区高清亚洲精品| 在线天堂最新版资源| 久久人人爽人人爽人人片va | 永久网站在线| 欧美性感艳星| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 亚洲中文字幕日韩| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 国产视频内射| 小说图片视频综合网站| 久久久久久大精品| 婷婷丁香在线五月| 一区二区三区激情视频| 我要搜黄色片| 日本一本二区三区精品| 婷婷精品国产亚洲av在线| 亚洲av第一区精品v没综合| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 神马国产精品三级电影在线观看| 久久久久国内视频| 色5月婷婷丁香| 精品国产三级普通话版| 欧美日韩福利视频一区二区| 成年版毛片免费区| 亚洲自偷自拍三级| 免费在线观看成人毛片| 小说图片视频综合网站| 免费看美女性在线毛片视频| 99热这里只有是精品50| 亚洲国产精品999在线| 男女视频在线观看网站免费| 国产欧美日韩精品一区二区| 国产高清激情床上av| 1024手机看黄色片| 黄色一级大片看看| 天堂动漫精品| 首页视频小说图片口味搜索| 麻豆久久精品国产亚洲av| 舔av片在线| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 男插女下体视频免费在线播放| 国产av麻豆久久久久久久| 少妇人妻一区二区三区视频| 亚洲成av人片免费观看| 757午夜福利合集在线观看| 88av欧美| 亚洲人成网站在线播| 亚洲精品在线美女| 69人妻影院| av在线老鸭窝| 少妇被粗大猛烈的视频| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 欧美午夜高清在线| 欧美黄色淫秽网站| 人妻夜夜爽99麻豆av| 偷拍熟女少妇极品色| 中文字幕免费在线视频6| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 天美传媒精品一区二区| 欧美潮喷喷水| 在线观看一区二区三区| 免费在线观看亚洲国产| 一级黄色大片毛片| 欧美日韩乱码在线| 看片在线看免费视频| 精品久久久久久久久亚洲 | 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 国产男靠女视频免费网站| 九九热线精品视视频播放| 亚洲美女搞黄在线观看 | 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 欧美成人一区二区免费高清观看| 在线国产一区二区在线| 亚洲av美国av| 国产精品亚洲av一区麻豆| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 啪啪无遮挡十八禁网站| 色综合婷婷激情| 一进一出好大好爽视频| 免费在线观看成人毛片| 1000部很黄的大片| 69人妻影院| 淫妇啪啪啪对白视频| 日韩中文字幕欧美一区二区| 99热只有精品国产| 一个人看的www免费观看视频| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 精品国内亚洲2022精品成人| 看免费av毛片| 成人国产一区最新在线观看| 亚洲性夜色夜夜综合| 欧美3d第一页| 亚洲色图av天堂| 丰满的人妻完整版| 国产亚洲av嫩草精品影院| 成人欧美大片| 精品人妻1区二区| 毛片一级片免费看久久久久 | 精品熟女少妇八av免费久了| 国产免费男女视频| 国产欧美日韩一区二区三| 久久午夜福利片| av在线老鸭窝| 色在线成人网| 欧美成人一区二区免费高清观看| 日本一本二区三区精品| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 热99在线观看视频| 欧美成人a在线观看| 99热这里只有是精品50| 日韩免费av在线播放| 亚洲性夜色夜夜综合| 国产精品永久免费网站| 三级国产精品欧美在线观看| 欧美性感艳星| 午夜福利成人在线免费观看| 国产精品久久久久久久电影| 精品久久国产蜜桃| 91麻豆av在线| 欧美三级亚洲精品| 国产成人福利小说| 日本黄色片子视频| 又紧又爽又黄一区二区| 九色成人免费人妻av| 成年女人毛片免费观看观看9| 特级一级黄色大片| 美女大奶头视频| а√天堂www在线а√下载| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 亚洲欧美日韩东京热| 91久久精品电影网| 国产一区二区在线av高清观看| 成年人黄色毛片网站| 99精品在免费线老司机午夜| 亚洲精品在线观看二区| 丝袜美腿在线中文| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 亚洲欧美日韩东京热| av天堂在线播放| 日本免费a在线| 欧美中文日本在线观看视频| 老司机深夜福利视频在线观看| 午夜福利18| 69av精品久久久久久| 老司机福利观看| 欧美不卡视频在线免费观看| 精品久久久久久久久亚洲 | 99riav亚洲国产免费| 午夜视频国产福利| 国产不卡一卡二| 性色avwww在线观看| av专区在线播放| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 听说在线观看完整版免费高清| 国内精品久久久久久久电影| 久久久久久久久中文| 91字幕亚洲| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 国产精品久久久久久久久免 | 亚洲美女视频黄频| 久久久久国内视频| 国产在线精品亚洲第一网站| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 欧美一级a爱片免费观看看| 国产高清视频在线播放一区| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 国产亚洲欧美98| h日本视频在线播放| 欧美黄色片欧美黄色片| 精品人妻熟女av久视频| 欧美激情国产日韩精品一区| 久久精品国产自在天天线| 日本一二三区视频观看| 99精品在免费线老司机午夜| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 久久亚洲真实| 国产在视频线在精品| 欧美一区二区精品小视频在线| 精品免费久久久久久久清纯| 免费观看精品视频网站| 久久这里只有精品中国| 国内精品久久久久久久电影| 精品不卡国产一区二区三区| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 很黄的视频免费| 99久久九九国产精品国产免费| 亚洲精品粉嫩美女一区| bbb黄色大片| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲av.av天堂| 久久午夜福利片| a级一级毛片免费在线观看| 少妇被粗大猛烈的视频| 午夜激情欧美在线| 久久国产精品影院| av在线天堂中文字幕| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 免费看美女性在线毛片视频| 国产单亲对白刺激| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 国产成年人精品一区二区| 草草在线视频免费看| 一边摸一边抽搐一进一小说| 99精品在免费线老司机午夜| 3wmmmm亚洲av在线观看| 给我免费播放毛片高清在线观看| 国产熟女xx| 国产精品免费一区二区三区在线| 无人区码免费观看不卡| 亚洲色图av天堂| 久久久久久国产a免费观看| 中文字幕免费在线视频6| 日韩欧美 国产精品| 91久久精品国产一区二区成人| 成人一区二区视频在线观看| www日本黄色视频网| 日韩亚洲欧美综合| 免费看光身美女| 亚洲熟妇熟女久久| 首页视频小说图片口味搜索| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 乱人视频在线观看| 国产高清三级在线| 人人妻人人澡欧美一区二区| 午夜老司机福利剧场| 中文资源天堂在线| 人人妻人人澡欧美一区二区| 日本免费一区二区三区高清不卡| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国产在线男女| 成人三级黄色视频| 男人的好看免费观看在线视频| 亚洲,欧美,日韩| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 久久伊人香网站| 亚洲精品日韩av片在线观看| 国产亚洲精品久久久com| 伊人久久精品亚洲午夜| 欧美精品国产亚洲| 午夜激情福利司机影院| 在线观看66精品国产| 深夜精品福利| 少妇人妻精品综合一区二区 | 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产激情偷乱视频一区二区| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 国产日本99.免费观看| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 国产黄色小视频在线观看| 99精品在免费线老司机午夜| 久久亚洲精品不卡| 亚洲人成伊人成综合网2020| 日韩中文字幕欧美一区二区| 搡老妇女老女人老熟妇| 欧美潮喷喷水| 我的女老师完整版在线观看| 又爽又黄无遮挡网站| 亚洲一区二区三区色噜噜| 国模一区二区三区四区视频| 国产一级毛片七仙女欲春2| 一本一本综合久久| 此物有八面人人有两片| 久久99热6这里只有精品| 亚洲国产精品sss在线观看| 精品日产1卡2卡| 国产主播在线观看一区二区| 久久国产精品人妻蜜桃| 精品久久国产蜜桃| 亚洲一区二区三区不卡视频| 亚洲黑人精品在线| 久久香蕉精品热| 午夜精品在线福利| 久久精品人妻少妇| 欧美中文日本在线观看视频| 国产伦精品一区二区三区视频9| 亚洲天堂国产精品一区在线| 九色成人免费人妻av| 赤兔流量卡办理| 亚洲熟妇熟女久久| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | 亚洲av电影不卡..在线观看| 亚洲综合色惰| 窝窝影院91人妻| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 中亚洲国语对白在线视频| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 51国产日韩欧美| 国产野战对白在线观看| 国产精品久久电影中文字幕| 欧美黑人欧美精品刺激| 国产精品野战在线观看| 观看美女的网站| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 久久午夜福利片| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 美女 人体艺术 gogo| 深夜a级毛片| 亚洲不卡免费看| 宅男免费午夜| 亚洲三级黄色毛片| 超碰av人人做人人爽久久| 可以在线观看毛片的网站| 五月玫瑰六月丁香| 欧美高清成人免费视频www| 制服丝袜大香蕉在线| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 中国美女看黄片| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 桃红色精品国产亚洲av| 亚洲专区中文字幕在线| 免费看日本二区| 亚洲片人在线观看| 亚洲在线自拍视频| 午夜福利免费观看在线| 国内精品一区二区在线观看| 日韩av在线大香蕉| 动漫黄色视频在线观看| 国产麻豆成人av免费视频| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 男人狂女人下面高潮的视频| 欧美精品国产亚洲| 久久久久免费精品人妻一区二区| 欧美成人a在线观看| 国产一区二区三区视频了| 一本一本综合久久| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 亚洲欧美精品综合久久99| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 国产色婷婷99| 亚洲av一区综合| 欧美最新免费一区二区三区 | 国产精品人妻久久久久久| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 日韩精品中文字幕看吧| 成年人黄色毛片网站| 久久久久亚洲av毛片大全| 欧美成人免费av一区二区三区| 91麻豆精品激情在线观看国产| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 国语自产精品视频在线第100页| 久久久色成人| 日韩欧美精品v在线| 级片在线观看| 亚洲最大成人av| 免费无遮挡裸体视频| 亚洲欧美日韩高清专用| 日韩成人在线观看一区二区三区| 级片在线观看| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 伦理电影大哥的女人| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 黄色女人牲交| 国产色爽女视频免费观看| 淫秽高清视频在线观看| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 永久网站在线| 国产69精品久久久久777片| 久久久成人免费电影| 亚洲三级黄色毛片| 日日干狠狠操夜夜爽| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 久久99热6这里只有精品| 日本免费一区二区三区高清不卡| 极品教师在线视频| 我的女老师完整版在线观看| 亚洲午夜理论影院| 中亚洲国语对白在线视频| 久久热精品热| 亚洲久久久久久中文字幕| 长腿黑丝高跟| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 欧美色视频一区免费| 成人三级黄色视频| 99热这里只有是精品50| 观看美女的网站| 动漫黄色视频在线观看| 久久久国产成人精品二区| 宅男免费午夜| 一本综合久久免费| 国产亚洲av嫩草精品影院| 午夜福利18| 国产精品一区二区免费欧美| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 全区人妻精品视频| 欧美丝袜亚洲另类 | 欧美成人一区二区免费高清观看| 男人舔奶头视频| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 久久久久久久午夜电影| 婷婷精品国产亚洲av| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 国内揄拍国产精品人妻在线| a级一级毛片免费在线观看| 日韩av在线大香蕉| 好男人电影高清在线观看| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产三级黄色录像| 婷婷精品国产亚洲av| 国产成人av教育| 国产免费av片在线观看野外av| 午夜视频国产福利| 欧美成人一区二区免费高清观看| 午夜免费成人在线视频| 国产又黄又爽又无遮挡在线| av在线天堂中文字幕| 日本黄色视频三级网站网址| 性欧美人与动物交配| 天堂动漫精品| 99久久九九国产精品国产免费| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 中文字幕av在线有码专区| 国模一区二区三区四区视频| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| av在线老鸭窝| а√天堂www在线а√下载| 12—13女人毛片做爰片一| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 久久久久久国产a免费观看| 国产精品98久久久久久宅男小说| 久久久久性生活片| 国产精品一及| 伊人久久精品亚洲午夜| 亚洲成人久久爱视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 日韩欧美在线乱码| 男插女下体视频免费在线播放| 精品人妻视频免费看| 脱女人内裤的视频| 亚洲精品影视一区二区三区av| av天堂在线播放| 久久久久久久亚洲中文字幕 | 色哟哟哟哟哟哟| 色综合欧美亚洲国产小说| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 久久国产精品影院| 成人鲁丝片一二三区免费| 日本精品一区二区三区蜜桃| 成人国产综合亚洲| 国内精品久久久久久久电影| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 又黄又爽又免费观看的视频| 无人区码免费观看不卡| 亚洲,欧美精品.| 成人高潮视频无遮挡免费网站| bbb黄色大片| 我的女老师完整版在线观看| 天天一区二区日本电影三级| 国产麻豆成人av免费视频| 久久中文看片网| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 国产成人av教育| 日韩欧美三级三区| 欧美不卡视频在线免费观看| 免费在线观看成人毛片| 精品午夜福利在线看| 99久久九九国产精品国产免费| 老司机午夜十八禁免费视频| 日韩欧美三级三区| 国产伦一二天堂av在线观看| 亚洲精华国产精华精| 国产高潮美女av| 成人亚洲精品av一区二区| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 白带黄色成豆腐渣| 亚洲av免费高清在线观看| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 男女那种视频在线观看| 色播亚洲综合网| 久久人人精品亚洲av| 欧美潮喷喷水| 久久久久九九精品影院| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲三级黄色毛片| 午夜福利在线观看吧| 深夜a级毛片| 看黄色毛片网站| 日韩亚洲欧美综合|