幾種常見(jiàn)野生菌多糖含量的比較

余麗 晏愛(ài)芬 張悅 高嫵媚 付瓊 字胡潤(rùn)

摘要[目的]對(duì)野生食用菌中的多糖含量進(jìn)行比較，為生產(chǎn)企業(yè)對(duì)多糖產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用以及消費(fèi)者選擇購(gòu)買(mǎi)食用提供參考。[方法] 以幾種常見(jiàn)野生食用菌為材料，采用水提醇析法進(jìn)行多糖提取。選擇料液比1∶25（g∶mL），時(shí)間2 h，在溫度60 ℃下提取3次。4 ℃醇析24 h 后，經(jīng)4 000 r/min 離心20 min，去上清，將沉淀溶于水作為待測(cè)液。利用苯酚-硫酸法進(jìn)行多糖含量的測(cè)定。[結(jié)果]從多糖含量的測(cè)定結(jié)果看，松茸菌最高，為7.70 mg/g；小美牛肝菌第二，為7.58 mg/g；而雞樅菌和青頭菌多糖含量差別不大。從該研究看，多糖含量高的野生菌在口感味道上更受人們喜愛(ài)，如小美牛肝菌、松茸，但同時(shí)價(jià)格也很高。說(shuō)明多糖含量高低與日常生活中人們對(duì)野生菌的選擇、野生菌的價(jià)格有一定的關(guān)系。[結(jié)論]多糖含量對(duì)野生食用菌口感和鮮美味道有一定的影響。

關(guān)鍵詞野生菌；多糖；含量；測(cè)定

中圖分類(lèi)號(hào)S646.9文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)0517-6611（2017）21-0080-03

Comparison of Polysaccharide Content of Several Common Wild Bacteria

YU Li，YAN Aifen，ZHANG Yue et al

（School of Resources and Environment， Baoshan University， Baoshan， Yunnan 678000）

Abstract[Objective] The content of polysaccharide in wild edible fungi was compared， which could provide reference for the development and application of polysaccharide products and the food selection by consumers. [Method] Several kinds of wild edible fungi were used as materials， and polysaccharide was extracted by water extraction and alcohol analysis.Material to water ratio 1∶25（g∶mL）， time was 2 h， temperature was 60 ℃， times was 3. 4 ℃ of alcoholprecipitation after 24 h ， 4 000 r/min 20 min， precipitation will dissolve in water to be checked. Determination of polysaccharide content by phenol sulfuric acid method. [Result] Results of polysaccharide content ， Tricholoma matsutake was the highest， 7.70 mg/g ，the second was Boletus speciosus，7.58 mg/g. There was little difference in the content of polysaccharides in Termitomyces striayus and Russula virescens. From the perspective of this study ， wild edible fungi with high polysaccharide content was more popular in taste and taste， such as Boletus speciosus， Tricholoma matsutake， but also has a high price. It also showed that the content of polysaccharide was related to the selection of wild bacteria and the price of wild bacteria in daily life. [Conclusion] The content of polysaccharide has a certain influence on the taste and delicious taste of wild edible fungi.

Key wordsWild bacteria；Polysaccharide；Content；Determination

保山得天獨(dú)厚的地理環(huán)境，給人們提供了豐富的野生菌資源。眾多的野生菌因其富含蛋白質(zhì)、碳水化合物、維生素及鈣、磷、鐵等礦物質(zhì)，味道鮮美，營(yíng)養(yǎng)豐富，具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值，深受廣大消費(fèi)者的喜愛(ài)，如牛肝菌、雞樅菌、松茸菌、奶漿菌等。在豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)中，多糖是一類(lèi)重要的藥用真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物，多糖及其復(fù)合物因其特殊的生物活性功能，在醫(yī)療衛(wèi)生、食品保健等領(lǐng)域都具有廣闊的應(yīng)用前景，成為天然藥物、生物化學(xué)、生命科學(xué)等領(lǐng)域的研究焦點(diǎn)。大量的醫(yī)學(xué)藥理研究表明，多糖類(lèi)化合物具有較強(qiáng)的抑制癌細(xì)胞的作用，在抗衰老、抗氧化、抗病毒、增強(qiáng)機(jī)體免疫力等多方面也顯示出了十分重要的功能[1-4]。多糖作為一種獨(dú)特的生物效應(yīng)調(diào)節(jié)劑，對(duì)正常的細(xì)胞沒(méi)有毒副作用，早已應(yīng)用于腫瘤等疾病的臨床輔助治療和藥物治療中[5]。自20世紀(jì)70年代香菇多糖的抗腫瘤活性被日本學(xué)者千原羽田率先證實(shí)以后，食用菌多糖就引起了各界學(xué)者的廣泛關(guān)注，引發(fā)了各領(lǐng)域?qū)Χ嗵巧锘钚缘闹匾暸c研究。多糖在國(guó)際上被稱(chēng)為“生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑（BRM）”，現(xiàn)已被開(kāi)發(fā)成多種藥物和功能性食品添加劑。

市場(chǎng)上野生菌種類(lèi)繁多，價(jià)格差別也很大，由于多糖作為食用真菌的代謝產(chǎn)物具有很高的食藥用價(jià)值，因此對(duì)野生菌中的多糖含量進(jìn)行比較，對(duì)了解野生菌的食用價(jià)值和指導(dǎo)消費(fèi)者理性消費(fèi)具有一定的實(shí)用性，同時(shí)也為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用野生菌提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1原料。

5種常見(jiàn)野生菌（圖1）：

奶漿菌（多汁乳菇，Lactarius volemus）；

條紋雞樅菌[黑雞樅，Termitomyces striayus（Beeli）R.Heim]；

松茸菌（Tricholoma matsutake）；

青頭菌[變綠紅菇，Russula virescens（Schaeff.ex Zant.）]；

小美牛肝菌（風(fēng)見(jiàn)手，Boletus speciosus Forst）。

1.1.2主要儀器及試劑。

主要儀器：755型分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、低速離心機(jī)、恒溫干燥箱、電子天平、移液槍及其他玻璃儀器。

主要試劑：葡萄糖、5%苯酚溶液（現(xiàn)配現(xiàn)用）、濃硫酸（比重1.84）、無(wú)水乙醇，以上試劑均為分析純。

1.2方法

1.2.1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn) 。

1.2.1.1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制。

準(zhǔn)確稱(chēng)取0.1 g烘干至恒重的分析純葡萄糖粉末至燒杯中，經(jīng)多次洗滌轉(zhuǎn)入100 mL的容量瓶中并定容為濃度1.0 mg/mL的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。

準(zhǔn)確量取上述葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)使用液：2.00、4.00、6.00、800、10.00 mL于50 mL容量瓶中，定容配制成濃度為40、80、120、160、200 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液，分別編號(hào)1、2、3、4、5。

1.2.1.2葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備。

利用苯酚-硫酸法進(jìn)行多糖含量的測(cè)定：粗多糖在硫酸的作用下水解成單糖，并迅速脫水生成糖醛衍生物，與苯酚縮合成有色化合物，可用分光光度法測(cè)定樣品粗多糖含量。

具體方法為：取6支試管分別編號(hào)0、1、2、3、4、5（0號(hào)為對(duì)照），依次向編號(hào)1、2、3、4、5的試管中加入編號(hào)1、2、3、4、5的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液0.8 mL，蒸餾水1.2 mL，5%苯酚10 mL，濃硫酸5.0 mL；0號(hào)試管加入蒸餾水2.0 mL，5%苯酚1.0 mL，濃硫酸5.0 mL，然后在60 ℃水浴中反應(yīng)15 min顯色后，用755型分光光度計(jì)在波長(zhǎng)490 nm處測(cè)定吸光度。以葡萄糖濃度（x）為橫坐標(biāo)、吸光度為縱坐標(biāo)（y）做出葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

1.2.2多糖的提取。

綜合文獻(xiàn)[2，6-7]的研究，選擇料液比1∶25（g∶mL），時(shí)間2 h、在溫度60 ℃下提取3次。即分別稱(chēng)取經(jīng)曬干粉碎的野生菌子實(shí)體10 g，加入250 mL蒸餾水，在恒溫水浴中浸提2 h后過(guò)濾，濾渣加入250 mL蒸餾水再重復(fù)提取2 次，將3次濾液合并，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至100 mL，冰箱中冷藏保存用于多糖的測(cè)定。

1.2.3多糖含量的測(cè)定。

取多糖提取液10 mL加入40 mL預(yù)冷（4 ℃）的無(wú)水乙醇，4 ℃醇析24 h 后，經(jīng)4 000 r/min 離心20 min，去上清，將沉淀溶于水并定容至50 mL 作為待測(cè)液。

測(cè)定時(shí)根據(jù)光密度值確定取樣的量，光密度值最好在01～0.3。為此確定松茸菌、小美牛肝菌、條紋雞樅菌取0.2 mL待測(cè)液，奶漿菌、青頭菌取0.5 mL，按葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的測(cè)定方法進(jìn)行多糖含量的測(cè)定。用蒸餾水反應(yīng)后做對(duì)照。

2結(jié)果與分析

2.1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

用上述方法得到葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，回歸方程：Y=0.005 x+0.023，R2=0.998。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖1。利用葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)可換算得到1 g牛肝菌的多糖量：

多糖量含量（x）=[（y-0.023）/0.005]×多糖提取液稀釋倍數(shù)×10-4（mg/g）。

2.2幾種常見(jiàn)野生菌多糖含量比較

利用上述方法，即熱水浸提、無(wú)水乙醇醇析沉淀、苯酚-硫酸法進(jìn)行多糖含量測(cè)定，幾種常見(jiàn)野生菌的多糖含量見(jiàn)表1。

從多糖含量的測(cè)定結(jié)果看，松茸菌最高，為7.70 mg/g；小美牛肝菌第二，為7.58 mg/g。在當(dāng)?shù)匾吧羞@2種菌都深受人們喜愛(ài)，同時(shí)價(jià)格也相對(duì)較高。雞樅菌和青頭菌多糖含量差別不大。

3討論

從該試驗(yàn)結(jié)果看，松茸菌多糖含量最高，為7.70 mg/g。倍受當(dāng)?shù)厝藗兿矏?ài)的小美牛肝菌多糖含量也很高，多糖含量

為7.58 mg/g。單從多糖含量方面看，在所有受測(cè)野生菌中

松茸菌是最高的，小美牛肝菌多糖含量在受測(cè)野生菌中居第二。從該研究看，多糖含量對(duì)牛肝菌口感和鮮美味道是有一定影響的，當(dāng)?shù)鼐用裣矏?ài)小美牛肝菌也是有其根據(jù)的，而且多糖含量高低與日常生活中人們對(duì)野生菌的選擇、野生菌的價(jià)格有一定的關(guān)系。多糖含量高的野生菌在口感味道上更受人們喜愛(ài)，如小美牛肝菌、松茸菌，但同時(shí)也有很高的價(jià)格。松茸菌市價(jià)200元/kg以上，而小美牛肝菌也要140～160元/kg。當(dāng)?shù)仉u樅菌價(jià)格也很高，而它的鮮美主要是由于含有豐富的必需氨基酸，多糖含量相對(duì)較低。若從多糖含量考慮，雞樅菌和青頭菌相比，可以選擇相對(duì)價(jià)格較低的青頭菌。

在多糖含量的提取方法上，該試驗(yàn)選擇了熱水浸提法。該方法提取多糖具有成本較低、設(shè)備簡(jiǎn)易、穩(wěn)定性好、適用面廣、溶劑無(wú)毒無(wú)污染等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)被實(shí)驗(yàn)室、企業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域廣泛使用。利用苯酚-硫酸比色法對(duì)牛肝菌多糖含量進(jìn)行測(cè)定時(shí)沒(méi)有對(duì)多糖進(jìn)行純化和脫色處理，因?yàn)槊撋幚頃?huì)使多糖遭受損失。但使用熱水浸提法提取多糖時(shí)，由于水的極性較強(qiáng)，容易將樣品中的蛋白質(zhì)也一并提取出來(lái)，因此多糖提取液不易長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)藏。

通過(guò)幾種野生菌多糖含量的比較，可以為生產(chǎn)企業(yè)對(duì)多糖產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用提供原材料選擇的參考，同時(shí)也為消費(fèi)者選擇購(gòu)買(mǎi)食用提供參考。當(dāng)然多糖及其復(fù)合物特殊的生物活性功能的形成也不僅是多糖單方面引起的，而是一系列復(fù)雜的生化反應(yīng)完成的。這里只是從多糖含量方面進(jìn)行了測(cè)定，僅供消費(fèi)者參考。

參考文獻(xiàn)

[1] 楊強(qiáng)，羅家雄，史俊友.六種常見(jiàn)牛肝菌多糖含量及其抗氧化活性研究 [J].科技展望，2014（15）：152-153.

[2] 杜敏華，張英君，劉明星，等.野生牛肝菌多糖提取工藝的優(yōu)化及其對(duì)自由基的清除作用[J].食品工業(yè)科技，2012，33（22）：292-295.

[3] 李世敏，劉冬.金針菇多糖提取新工藝的優(yōu)化[J].食品與發(fā)酵工業(yè)，2002，28（10）：45-48.

[4] 杜慶.食（藥）用真菌多糖的研究進(jìn)展[J].中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng)，2011，17（5）：75-77.

[5] 沈潔，劉昱均，胡學(xué)一.真菌多糖的提取、改性及抗腫瘤活性的研究進(jìn)展[J].天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā)，2014，26（10）：1723-1727.

[6] 陶美華，潘清靈，章衛(wèi)民，等.藥用真菌多糖含量測(cè)定方法研究[J].中國(guó)食用菌，2004，24（5）：37-38.

[7] 王雪冰，趙天瑞，樊建.食用菌多糖提取技術(shù)研究概況[J].中國(guó)食用菌，2010，29（2）：3-6.