• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    優(yōu)質(zhì)桔紅心大白菜種質(zhì)創(chuàng)新與新品種選育

    2017-06-05 12:54張一卉李化銀王鳳德李景娟丁謙
    山東農(nóng)業(yè)科學(xué) 2017年5期
    關(guān)鍵詞:分子標(biāo)記大白菜

    張一卉 李化銀+王鳳德 李景娟 丁謙 劉立鋒+孫令強(qiáng) 徐少君+孔濤+王翠花 何啟偉 高建偉 ??

    摘要:本試驗(yàn)利用分子育種手段開(kāi)展了優(yōu)質(zhì)桔紅心大白菜(Brassica rapa L. ssp. pekinensis)種質(zhì)創(chuàng)新與新品種選育研究。我們克隆了控制大白菜桔紅心的關(guān)鍵基因BrCRTISO,分析了桔紅心、白心大白菜之間BrCRTISO基因的結(jié)構(gòu)差異。根據(jù)啟動(dòng)子和編碼區(qū)序列的差異,篩選出了與桔紅心緊密連鎖的SNP和InDel分子標(biāo)記。在傳統(tǒng)有性雜交的基礎(chǔ)上,利用上述SNP和InDel標(biāo)記對(duì)后代分離群體進(jìn)行輔助選擇,篩選出了早熟、優(yōu)質(zhì)、抗病的桔紅心優(yōu)異純系種質(zhì)08428、08460、08468、08469自交不親和系。利用上述4個(gè)純系配置組合,選育出了早熟優(yōu)質(zhì)抗病的特色大白菜新品種“天正桔紅65”、“天正桔紅62”。連續(xù)多年(2010—2016)種植試驗(yàn)及抗病性鑒定的結(jié)果表明:這兩個(gè)新品種抗病性強(qiáng),適宜春秋種植,早熟(55~60天);葉球中小型,桔紅色。其中“天正桔紅65”β-胡蘿卜素含量高達(dá)26.163 mg/gDW,是普通大白菜的11.15倍;可溶性固形物含量高,口感品質(zhì)極佳。2014年,“天正桔紅62”成為泰安市岱岳區(qū)地理標(biāo)志性產(chǎn)品(商標(biāo)注冊(cè)號(hào):13066669)。2015—2016年,兩個(gè)品種通過(guò)了國(guó)家、?。ㄊ校┺r(nóng)作物品種審定委員會(huì)的審定(鑒定)。本研究是利用分子育種手段快速培育優(yōu)良大白菜新品種的成功范例,可為其它生物分子育種工作提供參考。

    關(guān)鍵詞:大白菜;桔紅心;分子標(biāo)記;種質(zhì)創(chuàng)新;新品種選育

    中圖分類號(hào):S634.103.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào):A文章編號(hào):1001-4942(2017)05-0014-10

    Germplasm Innovation and New Variety Breeding in Orange

    Leafy Head Chinese Cabbage (Brassica rapa L. ssp. pekinensis)

    Zhang Yihui1, Li Huayin1*, Wang Fengde1, Li Jingjuan1, Ding Qian1, Liu Lifeng1,

    Sun Lingqiang2, Xu Shaojun3, Kong Tao4, Wang Cuihua1, He Qiwei1, Gao Jianwei1

    (1. Institute of Vegetables and Flowers, Shandong Academy of Agricultural Sciences, Jinan 250100, China;

    2.Qingdao Seed Management Station, Qingdao 266071, China; 3. Qingdao Hefeng Seeds Co., Ltd.,

    Jiaozhou 266300, China;4. Daiyue District Agricultural Bureau, Taian 271021, China)

    AbstractIn this research, the molecular breeding was used to innovate germplasm and select new varieties in orange leafy head Chinese cabbage (Brassica rapa L. ssp. pekinensis). We cloned the candidate key gene BrCRTISO, which coded carotenoid isomerase controlling synthesis of orange pigments in leafy head. Differences in structure of BrCRTISO gene between orange and white leafy head Chinese cabbage were also analyzed, in which, one SNP(C952-T952)marker and one InDel marker Bror-intron1 closely linked with orange leafy head were developed. New good pure self-incompatible lines of orange leafy head germplasm had been innovated by molecular marker assisted selection, of which, 08428, 08460, 08468 and 08469 were better than others. These four lines were applied to make cross combinations, from which, new orange leafy head varieties Tianzhengjuhong 65 and Tianzhengjuhong 62 were obtained. Planting and disease resistance tests for several years (2010-2016) showed that these two new varieties had strong disease resistance, and their growth periods were short (55~60 days), which were suitable for being cultivated in spring or autumn. The β-carotene content of Tianzhengjuhong 65 reached 26.163 mg/gDW, 11.15 times of common Chinese cabbage. In addition, the content of soluble solids was also higher than other Chinese cabbage varieties, which owned good taste. In 2014, Tianzhengjuhong 62 was approved to be Chinese National Protected Geographic Indication Product (No. 13066669 ) in Taian, China. In 2015, Tianzhengjuhong 65 was approved by both National and Beijing Crop Variety Approval Committee. Meanwhile, Tianzhengjuhong 62 was approved by Beijing Crop Variety Approval Committee. In 2016, Tianzhengjuhong 65 was approved by Shandong Crop Variety Approval Committee. This paper would be useful to other plant molecular breeding because of our successful breeding work.

    KeywordsChinese cabbage; Orange leafy head; Molecular markers; Germplasm innovation; New variety breeding

    大白菜(Brassica rapa L. ssp. pekinensis)起源于中國(guó),是我國(guó)的特產(chǎn)蔬菜。韓國(guó)、日本等東亞國(guó)家種植的大白菜最早由我國(guó)傳入。長(zhǎng)期以來(lái),大白菜一直是我國(guó)和東亞國(guó)家的骨干蔬菜,其重要地位和生產(chǎn)面積是其它蔬菜難以相比的。在我國(guó)北方,大白菜是秋季栽培和冬春供應(yīng)的主要蔬菜,種植面積大、范圍廣[1]。山東省作為大白菜的主要起源地之一,栽培歷史悠久,種質(zhì)資源極為豐富,其中有譽(yù)滿海內(nèi)外的膠東大白菜,有特點(diǎn)鮮明的德州香把子,有深受濟(jì)南本地人喜愛(ài)的唐王大白菜等[2]。隨著我國(guó)農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)的調(diào)整和保護(hù)地栽培蔬菜的發(fā)展,大白菜一季生產(chǎn)半年供應(yīng)的格局已發(fā)生了顯著變化。隨著人們生活水平的不斷提高,人們將更多地關(guān)注大白菜的質(zhì)量,即形狀、大小、色澤、營(yíng)養(yǎng)、風(fēng)味口感及無(wú)公害等指標(biāo)。

    桔紅心大白菜因其色澤艷麗、富含胡蘿卜素等多種維生素、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高、口感好而倍受消費(fèi)者青睞。日本桔紅心大白菜育種起步較早,培育了許多優(yōu)良品種。但是在我國(guó),日本的桔紅心大白菜品種種子昂貴,不抗病毒病,病重地區(qū)和年份常常絕產(chǎn),難以獲得豐產(chǎn)和穩(wěn)產(chǎn)。因此,培育適宜山東等地種植的高抗病毒病、霜霉病、軟腐病的桔紅心大白菜新品種,實(shí)現(xiàn)其種子國(guó)產(chǎn)化顯得尤為重要[3]。

    針對(duì)上述問(wèn)題,本課題組自2002年起開(kāi)始收集、鑒定桔紅心大白菜資源材料,研究桔紅心性狀遺傳特性。2007—2010年間,我們通過(guò)拓寬育種資源,利用雜交組合選配測(cè)配,結(jié)合分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù),選育出適合春秋兩季種植的桔紅心大白菜新品種“天正桔紅65”、“天正桔紅62”。2014年,“天正桔紅62”成為泰安市岱岳區(qū)地理標(biāo)志性產(chǎn)品(商標(biāo)注冊(cè)號(hào):13066669)。2015年,兩品種通過(guò)了國(guó)家、北京市農(nóng)作物品種審定委員會(huì)的審定(鑒定);2016年,“天正桔紅65”又通過(guò)了山東省農(nóng)作物品種審定委員會(huì)的審定。

    1材料與方法

    1.1試驗(yàn)材料

    桔紅心大白菜一代雜交種:北京桔紅心、紅抗1號(hào)、長(zhǎng)研橘寶、申萌桔紅心、神獅桔紅心。桔紅心大白菜純系:桔08410、14-490、1480、14-102、14-245、14-253、14-257、14-277、14-426、14-662、14-669。白心(或者黃心)大白菜一代雜交種:寒秀、金典春王、凱春、日本夏陽(yáng)。白心(或者黃心)大白菜純系:新福08410、14-401、663、1466、1469、1505、1510、1720、疊錐抗2。雜交組合(14-401×14-490)及其F2代分離群體。

    1.2基因克隆及生物信息學(xué)分析

    1.2.1基因組DNA提取取大白菜葉片,液氮冷凍后快速研磨,采用快捷型植物基因組DNA提取系統(tǒng)(天根生化科技有限公司)提取基因組DNA,利用1%瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行DNA檢測(cè)。

    1.2.2總RNA提取和反轉(zhuǎn)錄取結(jié)球后期的球葉提取總RNA。采用TRNzol-A+試劑盒(天根生化科技有限公司)進(jìn)行RNA提取,方法參考說(shuō)明書(shū)。反轉(zhuǎn)錄按照TaKaRa PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (大連寶生物)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)操作。

    1.2.3PCR擴(kuò)增PCR反應(yīng)體系(20 μL)為:2×高保真PCR Mix 10 μL,上游引物(10 mmol/L)0.5 μL,下游引物(10 mmol/L)0.5 μL,模板cDNA 1 μL,ddH2O 8 μL。PCR反應(yīng)程序?yàn)椋?4℃ 3 min;94℃ 30 s,58℃ 30 s,72℃ 1 min,36個(gè)循環(huán);72℃ 10 min。

    1.2.4SDS-PAGE電泳檢測(cè)將PCR產(chǎn)物與上樣緩沖液混勻,然后將混合物95℃預(yù)變性10 min。取4 μL點(diǎn)樣,利用8%變性聚丙烯酰氨凝膠進(jìn)行電泳檢測(cè),在Sequi-Gen GT核酸電泳系統(tǒng)(Bio-Rad,USA)中進(jìn)行電泳分離,電極緩沖液為1×TBE,在25℃、55 W恒功率下電泳1 h,通過(guò)銀染法顯影、拍照并記錄結(jié)果。

    1.2.5生物信息學(xué)分析將克隆的基因序列在GenBank中進(jìn)行BLAST檢索,查找大白菜目標(biāo)基因在其它物種中的同源序列。利用DNAMAN 6.0軟件對(duì)來(lái)自不同物種的基因編碼的氨基酸序列進(jìn)行比對(duì)并構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)。

    1.3β-胡蘿卜素等營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定

    利用高效液相色譜法測(cè)定大白菜β-胡蘿卜素含量[5-7]。稱取5.0 g左右干凈的成熟期大白菜內(nèi)葉,剪碎,置于三角瓶中,用石油醚∶丙酮(體積比為80∶20)混合液振搖提取,移出上清液,重復(fù)提取直至提取液無(wú)色,合并提取液,轉(zhuǎn)入圓底燒瓶中,于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸發(fā)至干,用二氯甲烷溶液提取殘?jiān)?,過(guò)濾后用凝膠色譜儀凈化。凈化后的溶液用于HPLC分析。使用吉爾森高效液相色譜儀,色柱:C18柱,250 mm×4.6 mm,5 μm,流動(dòng)相為甲醇∶乙腈(體積比為90∶10),流速為1.0 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為450 μm,進(jìn)樣量20 μL。利用PAD在波長(zhǎng)200~800 nm范圍內(nèi)掃描,分析物質(zhì)的特征吸收峰。

    可溶性固形物含量的測(cè)定參照標(biāo)準(zhǔn)《NY/T 2637—2014 水果和蔬菜可溶性固形物含量的測(cè)定 折射儀法(2015-1-1實(shí)施)》。

    1.4分子標(biāo)記輔助選擇及常規(guī)雜交育種

    分子標(biāo)記輔助選擇育種及常規(guī)雜交育種參照錢(qián)前等(2012)[4]和柯桂蘭(2010)[1]。

    2結(jié)果與分析

    2.1控制大白菜桔紅心形成的關(guān)鍵候選基因的選擇策略

    與普通大白菜相比,桔紅心大白菜的葉球內(nèi)葉呈現(xiàn)桔紅色。切開(kāi)后剖面經(jīng)陽(yáng)光照射,球葉的桔紅色快速增強(qiáng)。以往研究表明,桔紅心大白菜內(nèi)葉含有類似番茄紅素的復(fù)合物等多種類胡蘿卜素[5-7]。類胡蘿卜素在植物體內(nèi)通過(guò)類異戊二烯途徑合成,呈現(xiàn)黃色、橙紅色和紅色。在擬南芥[6]、番茄[7]等模式植物中,人們對(duì)類胡蘿卜素生物合成途徑及其相關(guān)酶(或基因)的功能研究得很清楚[6-8]。植物中,許多桔紅色性狀的出現(xiàn)都與類胡蘿卜素異構(gòu)酶有關(guān)。類胡蘿卜素異構(gòu)酶CRTISO 能催化前番茄紅素形成全反式番茄紅素[9,10]。Park 等(2002)[6]在擬南芥中分離了CRTISO基因,通過(guò)分析其功能,發(fā)現(xiàn)類胡蘿卜素異構(gòu)酶缺失突變體主要積累前番茄紅素和前鏈孢紅素(7, 9, 9′–三順式–鏈孢紅素)。Isaacson 等(2002)[7]利用圖位克隆技術(shù)獲得了番茄桔紅色基因tangerine,該基因編碼一個(gè)類胡蘿卜素異構(gòu)酶CRTISO,tangerine突變體缺失CRTISO 導(dǎo)致番茄積累前番茄紅素和β-胡蘿卜素,果實(shí)呈現(xiàn)桔紅色。因此,在篩選控制大白菜桔紅心形成的關(guān)鍵候選基因時(shí),我們首先選擇了編碼類胡蘿卜素異構(gòu)酶的基因BrCRTISO作為候選基因。

    猜你喜歡
    分子標(biāo)記大白菜
    最好的老年人食譜——草菇大白菜
    大白菜價(jià)格高于往年 市場(chǎng)上購(gòu)銷兩旺
    蘿卜抽薹相關(guān)SRAP分子標(biāo)記篩選與分析
    軟棗獼猴桃性別相關(guān)的SRAP分子標(biāo)記
    軟棗獼猴桃性別相關(guān)的SRAP分子標(biāo)記
    大白菜種質(zhì)資源抗根腫病基因CRa和CRb的分子標(biāo)記鑒定與分析
    玉米大斑病的研究進(jìn)展
    大白菜
    山西大豆自然群體遺傳多樣性的研究
    精品人妻一区二区三区麻豆| 成在线人永久免费视频| 欧美xxⅹ黑人| 少妇人妻久久综合中文| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产精品.久久久| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 黑人猛操日本美女一级片| 日本欧美国产在线视频| 亚洲国产精品国产精品| 亚洲精品美女久久av网站| 欧美日韩成人在线一区二区| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 亚洲三区欧美一区| 久久久欧美国产精品| cao死你这个sao货| 婷婷丁香在线五月| 国产片特级美女逼逼视频| 97在线人人人人妻| 叶爱在线成人免费视频播放| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 91精品伊人久久大香线蕉| 老司机靠b影院| 免费在线观看完整版高清| 老鸭窝网址在线观看| av又黄又爽大尺度在线免费看| 一本综合久久免费| 国产又爽黄色视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 亚洲精品国产av成人精品| 亚洲精品国产av蜜桃| 久久久久久人人人人人| 国产精品一二三区在线看| 久热这里只有精品99| 精品免费久久久久久久清纯 | 一边摸一边抽搐一进一出视频| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 国产免费现黄频在线看| 国产国语露脸激情在线看| 日日夜夜操网爽| 999精品在线视频| 国产成人一区二区在线| 两性夫妻黄色片| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 黄色 视频免费看| 99国产精品免费福利视频| 欧美精品一区二区免费开放| 日日夜夜操网爽| 午夜视频精品福利| 国产免费现黄频在线看| 亚洲av男天堂| 老司机亚洲免费影院| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 叶爱在线成人免费视频播放| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 美国免费a级毛片| 涩涩av久久男人的天堂| 亚洲七黄色美女视频| 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产精品99久久99久久久不卡| 日韩精品免费视频一区二区三区| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 国产欧美日韩一区二区三区在线| 久久女婷五月综合色啪小说| 狂野欧美激情性xxxx| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| h视频一区二区三区| 老鸭窝网址在线观看| 欧美国产精品一级二级三级| 亚洲熟女毛片儿| 国产伦理片在线播放av一区| 免费观看a级毛片全部| 精品少妇久久久久久888优播| 亚洲精品国产区一区二| 精品少妇黑人巨大在线播放| 一区二区av电影网| 欧美乱码精品一区二区三区| 美女午夜性视频免费| 男女下面插进去视频免费观看| 2018国产大陆天天弄谢| 久久国产精品影院| 亚洲精品美女久久av网站| 在线观看免费午夜福利视频| 一区二区三区四区激情视频| 97在线人人人人妻| 欧美在线一区亚洲| 两个人看的免费小视频| 热99国产精品久久久久久7| 国产成人免费无遮挡视频| 午夜精品国产一区二区电影| 丝袜美腿诱惑在线| www.精华液| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产精品国产av在线观看| 一级片免费观看大全| 欧美少妇被猛烈插入视频| 久久人人爽人人片av| a级片在线免费高清观看视频| 一区二区三区精品91| 我的亚洲天堂| 成人国产一区最新在线观看 | 中国国产av一级| 国产成人欧美| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 国产精品人妻久久久影院| 欧美日韩精品网址| 在线精品无人区一区二区三| 两人在一起打扑克的视频| 中文字幕精品免费在线观看视频| 免费看不卡的av| 香蕉国产在线看| 在线观看免费高清a一片| 十八禁高潮呻吟视频| 天堂中文最新版在线下载| 国产精品免费大片| 一二三四在线观看免费中文在| 91麻豆精品激情在线观看国产 | xxxhd国产人妻xxx| 亚洲伊人色综图| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 一级a爱视频在线免费观看| 午夜福利,免费看| 亚洲人成电影免费在线| 一区二区三区乱码不卡18| 天天影视国产精品| 欧美精品一区二区免费开放| 丰满少妇做爰视频| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 日韩av在线免费看完整版不卡| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 免费看av在线观看网站| 国产精品av久久久久免费| 国产精品人妻久久久影院| 少妇 在线观看| 十八禁网站网址无遮挡| 桃花免费在线播放| 一边摸一边做爽爽视频免费| 国产高清不卡午夜福利| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 99热全是精品| 大香蕉久久网| 国产精品人妻久久久影院| 9热在线视频观看99| av在线老鸭窝| 赤兔流量卡办理| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 成人三级做爰电影| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 男女免费视频国产| 精品第一国产精品| 精品亚洲成国产av| 18在线观看网站| av国产精品久久久久影院| 男女午夜视频在线观看| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| av在线播放精品| 亚洲成人免费av在线播放| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 国产精品一区二区在线不卡| a级毛片黄视频| 国产日韩欧美亚洲二区| 在线观看免费日韩欧美大片| 久久 成人 亚洲| 精品亚洲成国产av| 90打野战视频偷拍视频| 精品视频人人做人人爽| 香蕉国产在线看| 国产成人精品久久二区二区免费| 日韩电影二区| 免费观看a级毛片全部| av国产久精品久网站免费入址| 少妇精品久久久久久久| 丝袜人妻中文字幕| 99久久综合免费| 欧美av亚洲av综合av国产av| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 我的亚洲天堂| 少妇精品久久久久久久| 久久久久久久久久久久大奶| 久久精品久久精品一区二区三区| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 性色av乱码一区二区三区2| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产精品国产三级国产专区5o| 国产成人一区二区在线| av又黄又爽大尺度在线免费看| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 国产在线视频一区二区| 亚洲国产欧美在线一区| 在线观看www视频免费| 精品久久久久久久毛片微露脸 | 欧美日韩福利视频一区二区| 我要看黄色一级片免费的| 精品视频人人做人人爽| 日本午夜av视频| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 久热这里只有精品99| 波多野结衣一区麻豆| 咕卡用的链子| 精品人妻在线不人妻| 国产一区二区三区av在线| 亚洲成人手机| av欧美777| 后天国语完整版免费观看| 99久久99久久久精品蜜桃| 成人午夜精彩视频在线观看| 亚洲av成人精品一二三区| 国产老妇伦熟女老妇高清| 亚洲视频免费观看视频| 性少妇av在线| 亚洲精品日本国产第一区| 欧美黑人精品巨大| 一级片免费观看大全| av网站在线播放免费| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 自线自在国产av| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 国产女主播在线喷水免费视频网站| av片东京热男人的天堂| 日韩人妻精品一区2区三区| 狂野欧美激情性xxxx| 精品久久久精品久久久| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 精品亚洲成国产av| 成年人免费黄色播放视频| 国产精品国产三级专区第一集| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 人妻人人澡人人爽人人| 嫩草影视91久久| 国产欧美亚洲国产| 欧美日韩视频精品一区| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 久久久久网色| 看免费成人av毛片| 国产视频首页在线观看| 男人添女人高潮全过程视频| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 日韩大片免费观看网站| 日韩大片免费观看网站| 婷婷成人精品国产| 满18在线观看网站| 精品国产国语对白av| 亚洲人成网站在线观看播放| 色婷婷av一区二区三区视频| 99热全是精品| 大话2 男鬼变身卡| 午夜福利视频精品| 国产成人一区二区在线| www.熟女人妻精品国产| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 亚洲人成电影免费在线| 蜜桃国产av成人99| 这个男人来自地球电影免费观看| 婷婷色综合www| 捣出白浆h1v1| 在线观看国产h片| 丝袜喷水一区| 日本wwww免费看| 一级a爱视频在线免费观看| 叶爱在线成人免费视频播放| 精品高清国产在线一区| 国产一区二区三区综合在线观看| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 午夜福利视频在线观看免费| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 免费看av在线观看网站| 伊人亚洲综合成人网| 午夜91福利影院| 99国产精品免费福利视频| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 亚洲国产精品国产精品| 午夜老司机福利片| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 成人手机av| 五月天丁香电影| 午夜福利免费观看在线| 国产av国产精品国产| kizo精华| 国产精品 欧美亚洲| 无遮挡黄片免费观看| 99香蕉大伊视频| 国产精品国产三级国产专区5o| 在线看a的网站| 国产成人精品久久二区二区免费| www.av在线官网国产| 伦理电影免费视频| 成年动漫av网址| e午夜精品久久久久久久| 国产精品久久久久久精品古装| cao死你这个sao货| 女性被躁到高潮视频| 国产高清不卡午夜福利| 亚洲国产欧美网| 久久久欧美国产精品| 亚洲国产欧美在线一区| 国产在线观看jvid| 99久久精品国产亚洲精品| 黄色 视频免费看| 18在线观看网站| 手机成人av网站| 中文字幕人妻丝袜制服| 欧美乱码精品一区二区三区| 色网站视频免费| 啦啦啦在线免费观看视频4| 熟女av电影| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产真人三级小视频在线观看| 操美女的视频在线观看| 精品人妻1区二区| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 久久毛片免费看一区二区三区| 777米奇影视久久| 国产亚洲精品第一综合不卡| 国产97色在线日韩免费| 丁香六月天网| 大陆偷拍与自拍| 成人国语在线视频| 日本91视频免费播放| 国产成人av教育| 蜜桃国产av成人99| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 亚洲精品成人av观看孕妇| 大型av网站在线播放| 无限看片的www在线观看| 国产男女超爽视频在线观看| 91精品伊人久久大香线蕉| 欧美日本中文国产一区发布| 国精品久久久久久国模美| 亚洲,欧美,日韩| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产淫语在线视频| 国产精品三级大全| 午夜免费男女啪啪视频观看| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 国产精品久久久人人做人人爽| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 亚洲,欧美,日韩| 久久影院123| 午夜福利一区二区在线看| 2018国产大陆天天弄谢| 久久狼人影院| 免费av中文字幕在线| 成年动漫av网址| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 校园人妻丝袜中文字幕| 亚洲,欧美精品.| 中国国产av一级| 1024香蕉在线观看| 我的亚洲天堂| 国产一区二区激情短视频 | 自线自在国产av| 精品熟女少妇八av免费久了| www.自偷自拍.com| 国产97色在线日韩免费| 国产又爽黄色视频| 男女边吃奶边做爰视频| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 高清av免费在线| 日韩精品免费视频一区二区三区| 精品一区在线观看国产| 免费在线观看黄色视频的| 纯流量卡能插随身wifi吗| 观看av在线不卡| 午夜视频精品福利| 精品国产乱码久久久久久小说| 飞空精品影院首页| 99精品久久久久人妻精品| 老司机靠b影院| 99精品久久久久人妻精品| 纯流量卡能插随身wifi吗| 又大又黄又爽视频免费| 午夜免费成人在线视频| 亚洲精品乱久久久久久| 欧美在线黄色| 黑人猛操日本美女一级片| 少妇被粗大的猛进出69影院| 黑人猛操日本美女一级片| 赤兔流量卡办理| 搡老乐熟女国产| 1024香蕉在线观看| 国产片内射在线| 1024香蕉在线观看| 一级毛片女人18水好多 | 免费日韩欧美在线观看| 人成视频在线观看免费观看| 狂野欧美激情性bbbbbb| 久久久亚洲精品成人影院| 久久国产精品影院| 男人操女人黄网站| www.自偷自拍.com| 日韩中文字幕视频在线看片| 成人午夜精彩视频在线观看| 国产精品一区二区免费欧美 | 国产欧美日韩综合在线一区二区| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 国产日韩欧美在线精品| 男女高潮啪啪啪动态图| 午夜免费男女啪啪视频观看| 亚洲精品久久午夜乱码| 精品久久久久久久毛片微露脸 | 黄网站色视频无遮挡免费观看| 中文欧美无线码| 99香蕉大伊视频| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 最新在线观看一区二区三区 | 女警被强在线播放| 91成人精品电影| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 国产又爽黄色视频| 搡老乐熟女国产| 亚洲久久久国产精品| 一区二区三区四区激情视频| 国产精品av久久久久免费| 欧美性长视频在线观看| 男女边摸边吃奶| 日韩一区二区三区影片| 观看av在线不卡| 乱人伦中国视频| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 美女午夜性视频免费| 欧美国产精品一级二级三级| 精品少妇黑人巨大在线播放| 午夜91福利影院| 大话2 男鬼变身卡| 国产亚洲av高清不卡| 日韩大码丰满熟妇| 午夜视频精品福利| 亚洲精品乱久久久久久| 热99久久久久精品小说推荐| 亚洲色图综合在线观看| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 久久精品久久久久久久性| 制服诱惑二区| 亚洲少妇的诱惑av| 国产男女内射视频| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 中文字幕av电影在线播放| 亚洲人成77777在线视频| 热99国产精品久久久久久7| 男女边摸边吃奶| 婷婷成人精品国产| 国产97色在线日韩免费| 久久久精品免费免费高清| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 亚洲国产日韩一区二区| 一本大道久久a久久精品| 欧美精品一区二区大全| 久久久精品区二区三区| 精品久久久久久电影网| 久久亚洲精品不卡| 免费在线观看日本一区| 香蕉丝袜av| 水蜜桃什么品种好| 麻豆国产av国片精品| av线在线观看网站| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 亚洲av美国av| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 天天操日日干夜夜撸| 麻豆乱淫一区二区| 最黄视频免费看| 少妇精品久久久久久久| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 国产成人精品在线电影| 国产精品久久久久久精品电影小说| 在线观看免费日韩欧美大片| 免费看av在线观看网站| 成年人黄色毛片网站| 欧美日韩黄片免| 国产成人av教育| 亚洲av在线观看美女高潮| 精品国产乱码久久久久久小说| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 高清av免费在线| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 美国免费a级毛片| 男女边摸边吃奶| 三上悠亚av全集在线观看| 成人国产av品久久久| 激情视频va一区二区三区| 国产国语露脸激情在线看| 国产xxxxx性猛交| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 成人亚洲精品一区在线观看| 国产精品久久久久久精品电影小说| 欧美成狂野欧美在线观看| 新久久久久国产一级毛片| 黑人猛操日本美女一级片| www.av在线官网国产| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 欧美成狂野欧美在线观看| 精品亚洲成a人片在线观看| 国产片内射在线| 女人久久www免费人成看片| 欧美性长视频在线观看| 午夜av观看不卡| av在线老鸭窝| 青青草视频在线视频观看| 丝袜美腿诱惑在线| 天堂俺去俺来也www色官网| 色婷婷av一区二区三区视频| 久久天堂一区二区三区四区| 国产1区2区3区精品| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 亚洲精品中文字幕在线视频| 精品久久蜜臀av无| 在线精品无人区一区二区三| 超碰成人久久| 一区在线观看完整版| 搡老乐熟女国产| 欧美日本中文国产一区发布| www日本在线高清视频| 久久九九热精品免费| 97在线人人人人妻| 青春草亚洲视频在线观看| 黑丝袜美女国产一区| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 日韩制服骚丝袜av| 久久天堂一区二区三区四区| 欧美乱码精品一区二区三区| 嫁个100分男人电影在线观看 | 欧美中文综合在线视频| 啦啦啦 在线观看视频| 亚洲一区中文字幕在线| 波多野结衣一区麻豆| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 伦理电影免费视频| 99国产综合亚洲精品| 亚洲成人免费电影在线观看 | 蜜桃在线观看..| 亚洲欧美一区二区三区久久| 亚洲五月婷婷丁香| 国产精品久久久av美女十八| 日本av手机在线免费观看| 天堂中文最新版在线下载| 亚洲精品中文字幕在线视频| 午夜激情久久久久久久| 欧美激情极品国产一区二区三区| 精品福利观看| 亚洲国产av影院在线观看| 免费看不卡的av| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 日本91视频免费播放| 青青草视频在线视频观看| 国产免费福利视频在线观看| 老汉色∧v一级毛片| 大片电影免费在线观看免费| 女人久久www免费人成看片| 久热爱精品视频在线9| 日本vs欧美在线观看视频| 国产伦理片在线播放av一区| 婷婷色综合www| 一区在线观看完整版| 成年动漫av网址| 亚洲av片天天在线观看| 国产精品偷伦视频观看了| 欧美精品高潮呻吟av久久| 亚洲精品久久午夜乱码| 美女大奶头黄色视频| 亚洲伊人色综图| 精品第一国产精品| 国产福利在线免费观看视频| 自线自在国产av| 在线观看国产h片| 男女之事视频高清在线观看 | 在线观看免费日韩欧美大片| 免费少妇av软件| 99国产精品99久久久久| 国产成人影院久久av| 亚洲欧美色中文字幕在线| av国产精品久久久久影院| 久久免费观看电影| 91成人精品电影| 精品少妇久久久久久888优播| av网站免费在线观看视频| 亚洲图色成人| 精品第一国产精品| 国产成人精品无人区| 嫩草影视91久久| 两个人看的免费小视频| 大型av网站在线播放| 99久久人妻综合| 9色porny在线观看| 欧美在线一区亚洲| 97在线人人人人妻| 久久久久久久精品精品| 久久免费观看电影| 一个人免费看片子| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 18在线观看网站| 日韩视频在线欧美| 国产免费一区二区三区四区乱码| 两性夫妻黄色片| 午夜福利乱码中文字幕| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 观看av在线不卡| 久久久欧美国产精品| 在现免费观看毛片| 美女福利国产在线| 色精品久久人妻99蜜桃| 久久精品国产a三级三级三级| 丰满迷人的少妇在线观看| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 亚洲精品一区蜜桃| 久久精品久久精品一区二区三区| 亚洲精品自拍成人|