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    頸動(dòng)脈粥樣硬化壓力感受器敏感性變化對(duì)兔注食前后血壓影響的實(shí)驗(yàn)研究

    2017-05-27 09:33:39盧水煥鄧澤熙詹球
    關(guān)鍵詞:頸動(dòng)脈粥樣硬化

    盧水煥 鄧澤熙 詹球

    [摘要] 目的 探討頸動(dòng)脈硬化(CA)導(dǎo)致的兔壓力感受器敏感性(BRS)變化,及其對(duì)注食前后血壓的影響。 方法 17只健康雄性新西蘭大白兔按抽簽法隨機(jī)分為4組:A組(普通喂養(yǎng))、B組(高脂喂養(yǎng))、C組(高脂喂養(yǎng)+單側(cè)手術(shù))和D組(高脂喂養(yǎng)+雙側(cè)手術(shù));其中A組2只,其余每組5只,喂養(yǎng)8周。C組、D組均于喂養(yǎng)1周后行右側(cè)頸動(dòng)脈內(nèi)膜氣體干燥術(shù),D組再于5周后行左側(cè)手術(shù)。喂養(yǎng)前和喂養(yǎng)結(jié)束稱重并測(cè)定總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)含量。喂養(yǎng)結(jié)束后,記錄4組兔注食前及注食后的收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、心率(HR),計(jì)算平均動(dòng)脈壓(MAP)、BRS。術(shù)后取頸動(dòng)脈段做病理觀察。 結(jié)果 喂養(yǎng)結(jié)束時(shí),B組、C組、D組的TG、TC、LDL-C均高于A組(P < 0.05),C組、D組體重分別較各自喂養(yǎng)前增加(P < 0.05),B組、C組、D組的TG、TC、LDL-C較喂養(yǎng)前升高(P < 0.05)。光鏡下觀察,經(jīng)氣體干燥術(shù)的頸總動(dòng)脈至竇部段形成CA病變。4組兔注食前及注食后的BRS組間比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0.05)。注食前D組HR顯著低于其他3組(P < 0.05);注食后D組SBP、DBP、MAP均較注食前下降,C組MAP較注食前下降,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0.05)。相關(guān)分析顯示,D組注食前后SBP、MAP變化均與BRS相關(guān)(P<0.05)。 結(jié)論 雙側(cè)CA與注食后血壓降低相關(guān),可能與雙側(cè)CA導(dǎo)致的BRS水平下降有關(guān)。

    [關(guān)鍵詞] 頸動(dòng)脈粥樣硬化;壓力感受器敏感性;進(jìn)食后;低血壓

    [中圖分類號(hào)] R543.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210(2016)12(c)-0041-05

    [Abstract] Objective To investigate the change of baroreceptor sensitivity (BRS) induced by carotid atherosclerosis (CA) and the effect of it on blood pressure before and after liquid food perfusion in rabbits. Methods 17 healthy male New Zealand White rabbits were randomly divided into four groups by sortition: group A(normal-fed), group B (high lipoid-fed), group C (high lipoid-fed and unilateral operated) and group D (high lipoid-fed and bilateral operated). 2 rabbits were in group A and respectively 5 rabbits were in the other three groups. All groups were fed 8 weeks. Group C and group D were operated by air-dry on right carotid artery after a week, and group D was operated again on left carotid artery after 5 weeks. All animals were weighed and determined total cholesterol (TC), triglyceride (TG) and low density lipoprotein cholesterol (LDL-C) before and after feeding. Systolic blood pressure (SBP), diastolic blood pressure (DBP) and heart rate (HR) in four groups were recorded before and after liquid diet perfusion. Then mean arterial blood pressure (MAP) and BRS were calculated. Finally, the carotid artery segments were evaluated by pathology. Results The levels of TG,TC and LDL-C in group B, group C and group D were higher than those of group A after feeding (P < 0.05). Weights in group C and group D after feeding were respectively heavier than those before feeding (P < 0.05). The levels of TG, TC and LDL-C in group B, group C and group D were also respectively higher than those before feeding (P < 0.05). The atherosclerosis was observed in carotid artery with sinus operated by air-dry under the optical microscope. The difference of BRS among four groups was not significant before and after food infusion (P > 0.05). HR in group D was lower than that in the other three groups before food infusion (P < 0.05). SBP, DBP and MAP after food infusion were decreased in group D, MAP decreased in group C (P < 0.05). SBP and MAP were related to BRS in group D (P < 0.05). Conclusion Bilateral CA relates with decrease of blood pressure after food infusion, it may accounts for the decrease of BRS which caused by bilateral CA.

    [Key words] Carotid atherosclerosis; Baroreceptor sensitivity; Postprandial; Hypotension

    餐后低血壓發(fā)病機(jī)制尚未明確,目前認(rèn)為其發(fā)病基礎(chǔ)為壓力反射遲鈍[1]。臨床觀察發(fā)現(xiàn),頸動(dòng)脈硬化(carotid atherosclerosis,CA)患者在進(jìn)食、透析、體位改變等誘因下易出現(xiàn)低血壓[2-4],推測(cè)原因可能是CA致頸動(dòng)脈竇壓力感受器敏感性(baroreceptor sensitivity, BRS)下降[2,5]和動(dòng)脈僵硬血管順應(yīng)性降低[4,6-7],由此導(dǎo)致壓力反射遲鈍,無(wú)法代償血壓下降。然而臨床上很難將兩者原因分開獨(dú)立研究。為此本實(shí)驗(yàn)采用高脂喂養(yǎng)+空氣干燥法建立家兔CA模型[8-9],觀察注食前后BRS、血壓變化,并進(jìn)一步分析在CA情況下BRS與血壓的直接關(guān)系,旨在從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)層面探討CA導(dǎo)致的BRS變化對(duì)餐后血壓的影響。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康雄性新西蘭大白兔17只,月齡21~24個(gè)月,體重(2.80±0.26)kg,由解放軍第一八一醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室提供,合格證號(hào):SCFK桂2014-0003。本實(shí)驗(yàn)經(jīng)解放軍第一八一醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

    1.1.2 試劑和儀器 總膽固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、三酰甘油(triglyceride,TG)檢測(cè)制劑盒,購(gòu)自四川邁克公司。全自動(dòng)生化分析儀(貝克曼AU5821);Picco2監(jiān)測(cè)儀(BeneviewT5,深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司)。

    1.2 方法

    1.2.1 動(dòng)物分組 將17只兔按抽簽法隨機(jī)分為4組:A組(普通喂養(yǎng))、B組(高脂喂養(yǎng))、C組(高脂喂養(yǎng)+單側(cè)手術(shù))、D組(高脂喂養(yǎng)+雙側(cè)手術(shù));其中A組2只,其余每組各5只。A組喂普通飼料,其余3組喂高脂飼料(2%膽固醇、6%花生油和92%普通飼料),100 g/d,共喂養(yǎng)8周。于喂養(yǎng)1周后對(duì)C組、D組實(shí)施右側(cè)頸動(dòng)脈內(nèi)膜氣體干燥術(shù),5周后再對(duì)D組實(shí)施左側(cè)頸動(dòng)脈內(nèi)膜氣體干燥術(shù)。喂養(yǎng)前和喂養(yǎng)結(jié)束均稱重,并測(cè)定TC、TG、LDL-C。

    1.2.2 頸動(dòng)脈內(nèi)膜氣體干燥術(shù) 術(shù)前禁食12 h,不禁水。予3%戊巴比妥鈉30 mg/kg經(jīng)耳緣靜脈麻醉后,仰臥位固定,頸部脫毛消毒,于頸正中旁開1 cm切皮,分離頸總動(dòng)脈至分叉處,長(zhǎng)約3 cm,兩端以動(dòng)脈夾阻斷血流。10 mL注射器接4.5號(hào)頭皮針并充滿生理鹽水,沿血管縱軸方向穿刺被阻斷的血管段兩端,生理鹽水沖洗置換出管腔內(nèi)的血液后,接上已調(diào)節(jié)好流量為250 L/min的醫(yī)用氧氣氣流,歷時(shí)5 min造成內(nèi)皮干燥,然后管腔內(nèi)重新充滿生理鹽水,放開動(dòng)脈夾恢復(fù)血流,棉片輕壓止血,縫合創(chuàng)口并包扎。

    1.2.3 血壓、心率(HR)、BRS的計(jì)算 喂養(yǎng)結(jié)束,4組兔分別予麻醉(方法同1.2.2),仰臥位固定。大腿內(nèi)側(cè)脫毛消毒,沿股動(dòng)脈搏動(dòng)方向切皮,分離股動(dòng)脈,行股動(dòng)脈插管,將壓力頭連接于Picco2監(jiān)測(cè)儀。經(jīng)鼻插入Fr14號(hào)胃管,插入成功后觀察5~10 min,記錄血壓、HR,監(jiān)測(cè)30 s,每2秒采樣1次,計(jì)算其平均值及平均動(dòng)脈壓(mean arterial blood pressure,MAP)。監(jiān)測(cè)完畢經(jīng)胃管注入流食60 mL(50%葡萄糖注射液40 mL,伊利純牛奶20 mL)。注食后30 min再次記錄,方法同前。由Logistic方程計(jì)算BRS[10]。HR=A/{1+exp[B(MAP-C)]}+D,BRS=-A(B/4)。其中A為HR變化的范圍,B為斜率相關(guān)系數(shù),C為HR變化中點(diǎn)對(duì)應(yīng)的血壓值(MAP50),D為最小的HR值。

    1.2.4 組織取材和病理學(xué)檢查 動(dòng)物由空氣栓塞法處死,剪取雙側(cè)頸總動(dòng)脈至分叉處,常規(guī)脫水、石蠟包埋、切片,行蘇木精-伊紅染色,觀察病理學(xué)形態(tài)改變。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    應(yīng)用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)量資料以(x±s)表示。同組計(jì)量資料前后對(duì)比采用配對(duì)樣本t檢驗(yàn);多組計(jì)量資料先采用方差分析進(jìn)行組間比較,有差異后再采用LSD-t進(jìn)行兩兩比較;雙變量的相關(guān)性檢驗(yàn)采用Pearson相關(guān)分析,以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 動(dòng)物數(shù)量及一般情況

    B組、C組、D組各死亡1只。組間比較。B組、C組、D組喂養(yǎng)結(jié)束時(shí)TG、TC、LDL-C均高于A組(P < 0.05)。各組前后對(duì)比,C組、D組喂養(yǎng)結(jié)束時(shí)體重顯著增加(P < 0.05),B組、C組、D組TG、TC、LDL-C均顯著升高(P < 0.05)。見表1。

    2.2 兔頸動(dòng)脈病理表

    光鏡下,經(jīng)氣體干燥術(shù)的頸總動(dòng)脈至竇部段管壁增厚,管腔狹窄,內(nèi)膜管腔面纖維組織細(xì)胞增生形成纖維帽,纖維帽下大量泡沫細(xì)胞堆積并有大量粉染的無(wú)定形物質(zhì),形成粥樣斑塊,中膜大量梭形增生的平滑肌細(xì)胞排列紊亂,彈性纖維破壞。經(jīng)氣體干燥術(shù)的頸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完整,單層緊貼內(nèi)彈力板,中層平滑肌細(xì)胞排列整齊,外膜為疏松結(jié)締組織。見圖1。

    2.3 注食前后BRS比較

    A組、B組、C組、D組注食前BRS分別為(-11.71±14.84)、(-10.71±10.61)、(-9.16±18.14)、(-1.48±1.90)ms/mmHg,注食后BRS分別為(-6.12±8.65)、(-11.60±10.30)、(-0.06±7.78)、(-0.33±5.21)ms/mmHg,組間比較及各組前后比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0.05)。

    2.4 注食前后血壓、HR比較

    組間比較,注食前D組HR顯著低于其他3組(P < 0.05)。各組前后對(duì)比,D組注食后SBP、DBP、MAP均較注食前下降,C組注食后DBP較注食前下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0.05)。見表2。

    2.5 注食前后血壓變化相關(guān)因素分析

    D組注食前后SBP、MAP變化均分別與BRS顯著相關(guān)(P < 0.05)。見表3。

    3 討論

    早在1995年,Jansen就曾報(bào)道餐后低血壓患者BRS有不正?,F(xiàn)象[11]。臨床研究發(fā)現(xiàn),餐后低血壓患者CA高發(fā),雙側(cè)CA與餐后血壓下降相關(guān)[2],雙側(cè)CA也與BRS水平下降有關(guān)[12]。因此,進(jìn)一步研究餐后低血壓、CA、BRS之間的相關(guān)性有重要意義。

    本實(shí)驗(yàn)采用高脂喂養(yǎng)+空氣干燥法建立家兔頸動(dòng)脈粥樣硬化模型,該方法技術(shù)成熟,建立的模型其病理變化與人的大動(dòng)脈粥樣硬化的病理改變相似[8-9]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,經(jīng)過(guò)8周的喂養(yǎng)可以形成高脂血癥,但僅有經(jīng)過(guò)空氣干燥術(shù)的頸動(dòng)脈段形成粥樣硬化,說(shuō)明單純高脂喂養(yǎng)不易在短時(shí)間內(nèi)形成動(dòng)脈硬化,血管內(nèi)皮損傷在動(dòng)脈粥樣硬化形成過(guò)程中起主要作用,高脂血癥是作為另一危險(xiǎn)因素起促進(jìn)作用[13]。模型的成功建立保證了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物僅有頸動(dòng)脈竇部局部硬化,無(wú)其他外周動(dòng)脈硬化順應(yīng)性降低。

    壓力感受器在動(dòng)脈血壓波動(dòng)的快速調(diào)節(jié)中起重要作用,尤其在動(dòng)脈血壓降低時(shí)的緩沖作用更為重要[14],壓力感受器受損,BRS下降,壓力反射功能被削弱,可能導(dǎo)致機(jī)體無(wú)法代償各種誘因發(fā)生的低血壓[15-16]。臨床研究發(fā)現(xiàn),雙側(cè)CA患者BRS顯著降低,但單側(cè)CA患者BRS下降不明顯[12],提示雙側(cè)CA可使壓力反射功能削弱。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示各組注食前、注食后BRS水平組間比較及組內(nèi)前后比較均無(wú)差異。但從數(shù)值上來(lái)看,雙側(cè)CA家兔的BRS在注食前、注食后均處于最低水平,單側(cè)CA家兔注食前BRS水平高于雙側(cè)CA組而低于無(wú)CA組,且注食后BRS水平較注食前有所下降,結(jié)果比較無(wú)差異,可能是由于樣本量較小,個(gè)體差異大,標(biāo)準(zhǔn)差偏大。臨床觀察發(fā)現(xiàn),雙側(cè)頸動(dòng)脈竇部硬化斑塊形成的患者早餐后SBP、DBP均較顯著低于無(wú)硬化斑塊的患者,而單側(cè)CA者餐后血壓無(wú)明顯變化[2]。本動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也得出相似結(jié)果,注食后雙側(cè)CA家兔SBP、DBP、MAP較注食前顯著下降,單側(cè)CA家兔僅MAP下降,提示雙側(cè)CA家兔無(wú)法代償進(jìn)食誘發(fā)的低血壓,單側(cè)CA家兔基本能代償進(jìn)食誘發(fā)的血壓下降,從而不致于出現(xiàn)低血壓。

    目前,餐后低血壓的發(fā)生機(jī)制尚未完全明確[17],影響B(tài)RS的因素眾多[18-20]。本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步將注食前后血壓有變化的單側(cè)、雙側(cè)CA家兔獨(dú)立出來(lái)分別進(jìn)行相關(guān)分析,結(jié)果表明只有雙側(cè)CA家兔注食后血壓降低與BRS水平下降密切相關(guān),提示雙側(cè)CA家兔注食后血壓下降,主要原因可能是雙側(cè)CA導(dǎo)致BRS水平下降。同時(shí),實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)4組動(dòng)物注食后HR較注食前均未加快,只有雙側(cè)CA家兔HR在注食前顯著低于其他3組,或可提示BRS正常的動(dòng)物對(duì)進(jìn)食后血壓下降的代償不是通過(guò)加快HR來(lái)實(shí)現(xiàn),也許主要是通過(guò)增加外周血管阻力;而雙側(cè)CA動(dòng)物BRS水平下降,是從壓力反射的起始環(huán)節(jié)就被削弱,無(wú)法啟動(dòng)加快HR或收縮外周血管來(lái)快速代償,此結(jié)果有待進(jìn)一步研究證實(shí)。

    綜上,雙側(cè)CA與注食后血壓降低相關(guān),主要原因可能是雙側(cè)CA導(dǎo)致的BRS水平下降。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示臨床上對(duì)CA進(jìn)行干預(yù)可能降低餐后低血壓的發(fā)生。

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    (收稿日期:2016-09-19 本文編輯:李岳澤)

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