阿奇霉素不同劑型的溶出度方法學(xué)研究

李嬌娜+顧先志

摘 要：建立反相高效液相色譜法測定阿奇霉素片、阿奇霉素膠囊、阿奇霉素分散片中阿奇霉素的含量并考察溶出度。方法：采用安捷倫C18色譜柱（218mm×4.6mm，5μm），磷酸鹽緩沖液（取0.05mol/L磷酸氫二鉀溶液，用20%的磷酸溶液調(diào)節(jié)pH至8.2）-乙腈（45∶55），檢測波長為210nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。阿奇霉素在6～72μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。結(jié)論：本法簡便、準(zhǔn)確，可用于阿奇霉素片、阿奇霉素膠囊、阿奇霉素分散片中阿奇霉素的溶出度方法學(xué)研究。

關(guān)鍵詞：阿奇霉素；含量；測定

阿奇霉素為半合成的十五元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素。白色或類白色結(jié)晶性粉末；無臭，味苦；微有引濕性。阿奇霉素適應(yīng)沙眼衣原體及非多種耐藥淋病奈瑟菌所致的尿道炎和宮頸炎；化膿性鏈球菌引起的急性咽炎、急性扁桃體炎；肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌以及肺炎支原體所致的肺炎；敏感細(xì)菌引起的鼻竇炎、中耳炎、急性支氣管炎、慢性支氣管炎急性發(fā)作；敏感細(xì)菌引起的皮膚軟組織感染等。溶出度是指藥物從片劑等固體制劑在規(guī)定溶劑中溶出的速度和程度。本實驗采用高效液相色譜法對阿奇霉素片、阿奇霉素膠囊、阿奇霉素分散片中的阿奇霉素的進行了含量測定并考察溶出度。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：756PC紫外可見分光光度計（四川匯巨儀器設(shè)備有限公司）；KQ5200B型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；實驗室高純水機（上海技舟化工科技有限公司）；LC-4000單泵液相色譜儀（山東金普分析儀器有限公司）；FA1204CFAC型全自動內(nèi)校電子分析天平（北京同德創(chuàng)業(yè)科技有限公司）；HH-601超級恒溫水?。ū本└蝗鸷銊?chuàng)科技有限公司）；RCZ-8智能溶出試驗儀（北京新諾立華儀器有限公司）。

1.2 色譜柱：安捷倫 C18 色譜柱（218 mm×4.6mm，5μm）。

1.3 對照品：阿奇霉素 購自中國藥品生物制品檢定所。

1.4 試劑：磷酸氫二鉀（北京亞太龍興化工有限公司）、磷酸（北京亞太龍興化工有限公司）、乙腈（北京亞太龍興化工有限公司）、三乙胺（南京大唐化工有限公司）、甲醇（北京亞太龍興化工有限公司）。水為純化水。

1.5 試藥：阿奇霉素片、阿奇霉素膠囊、阿奇霉素分散片

2 測定方法確定

2.1 色譜條件

分別考察甲醇-水（80∶20），磷酸鹽緩沖液（取0.05mol/L磷酸氫二鉀溶液，用20%的磷酸溶液調(diào)節(jié)pH至8.2）-乙腈（45∶55），甲醇-0.1moloL-1磷酸二氫鉀-三乙胺（50∶50：0.01），甲醇-水（92∶18）不同比例的流動相，結(jié)果以磷酸鹽緩沖液（取0.05mol/L磷酸氫二鉀溶液，用20%的磷酸溶液調(diào)節(jié)pH至8.2）-乙腈（45∶55）為流動相為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用磷酸鹽緩沖液（取0.05mol/L磷酸氫二鉀溶液，用20%的磷酸溶液調(diào)節(jié)pH至8.2）-乙腈（45∶55）為流動相為流動相。依據(jù)查閱文獻及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[1-5]。流動相：磷酸鹽緩沖液（取0.05mol/L磷酸氫二鉀溶液，用20%的磷酸溶液調(diào)節(jié)pH至8.2）-乙腈（45∶55），檢測波長：210nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。理論板數(shù)按阿奇霉素峰計算應(yīng)不得低于2000。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取阿奇霉素對照品適量，置容量瓶中，加流動相制成每1mL含10μg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備

取裝量差異項下的供試品精密稱定，精密稱取，置具塞錐形瓶中，精密加入流動相10mL，密塞，精密稱定重量，超聲處理10分鐘，放冷，精密稱定，用流動相補足重量，搖勻，濾過。取續(xù)濾液，即得。

2.4 精密度試驗

精密稱取阿奇霉素對照品適量，加流動相使溶解，制成濃度為10μg·mL-1的供試品溶液。照上述色譜條件，精密吸取10μl，連續(xù)進樣6次，記錄峰面積。結(jié)果，RSD=0.63%，表明本方法精密度良好。

2.5 對照品的線性考察

精密稱取阿奇霉素對照品15mg，置25ml容量瓶中，加入流動相溶液使溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取0.1、0.2、0.4、0.6、1.2mL，置于10mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照2.1項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，對照品進樣量（X）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算回歸方程。結(jié)果表明，阿奇霉素在6～72μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.6 重現(xiàn)性試驗

稱取同一批的阿奇霉素片、阿奇霉素膠囊、阿奇霉素分散片樣品6份，按測定方法項下的方法制備供試品溶液，測定含量，并計算樣品的RSD值，結(jié)果RSD為0.93%、0.67%、0.96%，結(jié)果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

2.7 準(zhǔn)確度試驗

精密稱取已知含量的樣品6份，分別加入一定量的阿奇霉素對照品，上述方法進行測定，計算回收率，平均回收率為99.1%、99.2%、99.5%，RSD=0.56%、RSD=0.63%、RSD=0.81%。結(jié)果表明此方法的回收率良好。

2.8 樣品穩(wěn)定性試驗

取同一批阿奇霉素片、阿奇霉素膠囊、阿奇霉素分散片樣品，按2.3項下的供試品制備方法制備供試品，將供試品置室溫下放置，分別于第0、2、4、6、8、10小時，精密吸取供試品溶液10？l注入液相色譜儀中，記錄色譜圖。測定阿奇霉素片、阿奇霉素膠囊、阿奇霉素分散片中阿奇霉素的RSD=0.73%、RSD=0.71%、RSD=0.69%。結(jié)果表明供試品10小時內(nèi)穩(wěn)定。

2.9 溶出度測定

照溶出度測定法（中國藥典2015版二部附錄ⅩC第二法）[1]及《中國藥品檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》對奇霉素片、阿奇霉素膠囊、阿奇霉素分散片溶出度進行測定。

3 討論

本實驗表明此方法可用于阿奇霉素片、阿奇霉素膠囊、阿奇霉素分散片中阿奇霉素的含量測定。溶出度實驗結(jié)果表明，三種劑型體外溶出度均符合有關(guān)規(guī)定，三種劑型之間有一定差異。

參考文獻

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