聯(lián)合檢測血清AFP、GGT、AFU、D—D在原發(fā)性肝癌診斷中的臨床應(yīng)用

張文娟+張莉輝

【摘要】 目的：探討甲胎蛋白（AFP）、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）、α-L-巖藻糖苷酶（AFU）及D-二聚體（D-D）聯(lián)合檢測在原發(fā)性肝癌診斷中的臨床意義。方法：選取60例原發(fā)性肝癌患者（原發(fā)性肝癌組）和60例健康體檢者（對(duì)照組），檢測其血清AFP、GGT、AFU、D-D的水平，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果：原發(fā)性肝癌組患者血清AFP、GGT、AFU、D-D單項(xiàng)檢測陽性率分別為83.33%、75.00%、85.00%、78.33%，均明顯高于對(duì)照組的5.00%、8.33%、3.33%、1.67%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。四項(xiàng)血清標(biāo)志物聯(lián)合檢測陽性率為88.33%，顯著高于各單項(xiàng)檢測，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。原發(fā)性肝癌組的聯(lián)合檢測的陽性率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：AFP、GGT、AFU及D-D是原發(fā)性肝癌診斷的有效指標(biāo)，聯(lián)合檢測對(duì)輔助診斷原發(fā)性肝癌及監(jiān)測預(yù)后有重要的臨床參考價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】 甲胎蛋白； 谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶； α-L-巖藻糖苷酶； D-二聚體； 原發(fā)性肝癌

Clinical Application of Combined Detection of Serum AFP，GGT，AFU，D-D in the Diagnosis of Primary Hepatic Cancer/ZHANG Wen-juan，ZHANG Li-hui.//Medical Innovation of China，2017，14（09）：125-128

【Abstract】 Objective：To investigate the clinical significance of the detection of alpha-fetoprotein （AFP） combined with glutamyl transpeptidase （GGT），alpha-L-fucosidase （AFU）and D-dimer（D-D） in the diagnosis of primary hepatic cancer（PHC）.Method：60 primary hepatic cancer patients（primary hepatic cancer group） and 60 heathy individuals（control group） were selected，the levels of serum AFP，GGT，AFU and D-D were detected and analyzed statistically.Result：The positive rates of serum AFP，GGT，AFU，D-D in primary hepatic cancer were 83.33%，75.00%，85.00%，78.33%，respectively，which were significantly higher than 5.00%，8.33%，3.33%，1.67% in control group，the differences were statistically significant（P<0.05）.The positive rate of combined detection of four serum markers was 88.33%，which was significantly higher than those of each single item，the differences were statistically significant（P<0.05）.The positive rate of combined detection of primary hepatic cancer group was higher than that of control group，the difference was statistically significant（P<0.05）.Conclusion：AFP，GGT，AFU and D-D are effective indicators for the diagnosis of primary liver cancer，joint detection has important clinical value in the diagnosis and prognosis of primary hepatic cancer.

【Key words】 Alpha-fetoprotein； Glutamyl transpeptidase； Alpha-L-fucosidase； D-Dimer； Primary hepatic cancer

First-authors address：The Peoples Hospital of Mengzi，Mengzi 661100，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.09.036

原發(fā)性肝癌（primary hepatic cancer，PHC）是一種進(jìn)展快、預(yù)后差，惡性程度僅次于胃癌、食道癌的惡性腫瘤，其全球死亡率和發(fā)病率逐年呈上升趨勢(shì)，分別占所有腫瘤的第4位和第7位[1]。該病的發(fā)生是一個(gè)多因素、多步驟的過程，發(fā)病較為隱匿，確診時(shí)多為中、晚期，因此早期診斷和治療成為臨床關(guān)注的焦點(diǎn)。甲胎蛋白（AFP）作為診斷肝癌的經(jīng)典血清學(xué)指標(biāo)，由于單項(xiàng)指標(biāo)檢測的靈敏度不高，以及假陽性和假陰性存在，容易造成漏診和誤診，有學(xué)者提出多種標(biāo)志物聯(lián)合可提高診斷的靈敏度和特異性[2-5]。目前，國內(nèi)關(guān)于AFP、AFU、GGT和D-D聯(lián)合檢測診斷肝癌患者的報(bào)道較少，本研究將聯(lián)合檢測AFP、AFU、GGT和D-D水平，探討它們對(duì)原發(fā)性肝癌診斷的臨床價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2014年1月-2016年12月在本院就治的原發(fā)性肝癌患者共計(jì)60例，納入標(biāo)準(zhǔn)均符合中國抗癌協(xié)會(huì)1999年修訂通過的肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）近期內(nèi)感染者；（2）接受放療和化療者；（3）近期應(yīng)用免疫抑制劑治療者；（4）有其他系統(tǒng)腫瘤者；（5）合并嚴(yán)重內(nèi)臟器官疾病的患者。其中男33例，女27例；平均年齡（53.26±15.15）歲。同期選健康體檢者

60例作為對(duì)照組，男30例，女30例，平均年齡（59.63±15.25）歲。兩組的性別、年齡比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 儀器與方法

1.2.1 儀器與試劑 儀器：AU5800全自動(dòng)生化分析儀檢測，希森美康SYSMEX全自動(dòng)血凝分析儀CA1500，貝克曼庫爾特UniCel DxI800 Access免疫分析儀。試劑：r-谷氨酰基轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒（速率法），D-二聚體測定試劑盒（免疫比濁法），α-L-巖藻糖苷酶測定試劑盒（CNPF底物法），甲胎蛋白測定試劑盒。

1.2.2 方法 血清D-二聚體檢測采用枸櫞酸鈉（109 mmol/L）0.2 mL，清晨空腹，采集上臂靜脈血1.8 mL，迅速搖勻后，3000 r/min高速離心15 min，提取血漿，應(yīng)用希森美康SYSMEX全自動(dòng)血凝分析儀CA1500，采用免疫比濁法檢測；GGT和AFU檢測采用真空采血管，清晨空腹采集靜脈血3 mL，分離血清后采用AU5800全自動(dòng)生化分析儀檢測，GGT采用γ-谷氨?；D(zhuǎn)移酶測定試劑盒（速率法），AFU采用α-L-巖藻糖苷酶測定試劑盒（CNPF底物法）；AFP采用UniCel DxI800 Access免疫分析儀，試劑為甲胎蛋白測定試劑盒。采集靜脈血取所有樣本及時(shí)分離血清和血漿，標(biāo)本均無溶血和脂血現(xiàn)象，所有操作步驟均在標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行，嚴(yán)格按照儀器及試劑盒說明進(jìn)行操作。

1.3 觀察指標(biāo) 生化指標(biāo)參考范圍：AFP為0～20 ng/mL，AFU為0～40 U/L，GGT為3～64 U/L，D-D為0～0.55 mg/L。D-D、AFP、GGT及AFU檢測水平高于參考值為陽性，任意一項(xiàng)條件滿足為聯(lián)合檢測陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，先進(jìn)行數(shù)據(jù)的正態(tài)性和方差齊性檢驗(yàn)，樣本均數(shù)以（x±s）表示，均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)；率的比較采用 字2檢驗(yàn)，多個(gè)樣本率多重比較采用bonferroni方法，以a=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 D-D、GGT、AFU、AFP檢測水平比較 原發(fā)性肝癌組的D-D、GGT、AFU、AFP檢測水平均明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2 D-D、GGT、AFU、AFP單獨(dú)檢測與聯(lián)合檢測陽性率比較 原發(fā)性肝癌組的D-D、GGT、AFU、AFP陽性率均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；原發(fā)性肝癌組D-D、GGT、AFU、AFP的單項(xiàng)檢測陽性率均低于四項(xiàng)聯(lián)合檢測的陽性率，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；原發(fā)性肝癌組的聯(lián)合檢測的陽性率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2。

3 討論

原發(fā)性肝癌是嚴(yán)重威脅人類健康的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和死亡率逐年不斷攀升。由于目前診斷、治療和監(jiān)測方法的局限性，以及病情發(fā)展過程中伴隨癌栓、血行轉(zhuǎn)移等，導(dǎo)致我國肝癌患者被診斷時(shí)多已處于肝癌晚期，PHC術(shù)后生存率一直處于較低水平，因此，早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷肝癌和改善其預(yù)后尤為重要[6]。僅用單一血清學(xué)標(biāo)志物檢測PHC由于假陽性和假陰性率高，容易造成漏診和誤診，聯(lián)合多種標(biāo)志物可提高PHC早期診斷率[7-8]。目前越來越多的學(xué)者開始著眼于新的肝癌血清標(biāo)志物，由于已知的血清標(biāo)志物種類繁多，又各自具有自己獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，將它們聯(lián)合進(jìn)行檢測將在一定程度上彌補(bǔ)PHC診斷假陽性和假陰性率高的問題，也顯著的提高了診斷的靈敏度[9-10]。本試驗(yàn)將研究D-D、GGT、AFU、AFP四種血清標(biāo)記物在原發(fā)性肝癌發(fā)生時(shí)的變化水平，來探討它們對(duì)原發(fā)性肝癌臨床診斷的價(jià)值。

AFP一直被作為肝癌診斷中的經(jīng)典血清學(xué)標(biāo)志物，但由于胃腸道惡性腫瘤、急慢性肝炎、肝硬化和妊娠婦女等人群AFP含量均有明顯升高，故特異性較低[11]。AFU是一種溶酶體酸性水解酶，存在于腎纖維細(xì)胞、肝、腦等溶酶體內(nèi)，主要以肝和腎組織中活性最高；當(dāng)肝細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)酶合酶蛋白合成增加及降解減慢有關(guān)或與腫瘤細(xì)胞壞死、破裂、酶釋放過多導(dǎo)致AFU升高[12]。相關(guān)文獻(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)肝細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，含鹽藻糖基的糖蛋白和糖脂代謝功能紊亂，肝癌細(xì)胞大量壞死，刺激溶酶體釋放AFU入血，導(dǎo)致肝癌患者體內(nèi)AFU水平明顯升高[13-15]。本研究中原發(fā)性肝癌組AFU水平明顯高于健康對(duì)照組，陽性率高達(dá)85.00%，且明顯高于AFP、GGT及D-二聚體，因此，AFU可作為診斷原發(fā)性肝癌的一種酶類指標(biāo)。

血液中GGT主要來自肝膽系統(tǒng)，當(dāng)肝內(nèi)和肝外膽管梗阻時(shí)，血清中GGT升高；PHC患者由于肝內(nèi)阻塞，酶因排泄障礙而逆流入血，使肝細(xì)胞產(chǎn)生大量GGT，同時(shí)癌細(xì)胞及周圍的炎癥刺激作用使肝細(xì)胞膜通透性改變，導(dǎo)致GGT含量明顯增高[16]。臨床GGT異常升高主要見于肝內(nèi)外膽道阻塞；中度升高見于胰腺疾病、各種肝炎、肝硬化；高度升高多見于原發(fā)和繼發(fā)性肝癌；總活力的測定中，GGT對(duì)肝癌診斷的敏感性高于AFP，但由于特異性較差，近年來多作為PHC的診斷的聯(lián)合檢查的指標(biāo)[17]。

D-二聚體主要反映纖維蛋白溶解功能，其在血漿中濃度增高，表示體內(nèi)有活化的血栓形成及纖維活性增強(qiáng)，惡性腫瘤患者的血漿D-二聚體都有升高，腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移時(shí)，升高的更加顯著[18]。血漿D-二聚體含量因病情的嚴(yán)重程度及肝功能損害程度加重而增高，故動(dòng)態(tài)觀察PHC患者的血漿D-二聚體可判斷病情的預(yù)后及指導(dǎo)治療[19]。本研究中，PHC組血清D-二聚體濃度較健康對(duì)照組明顯增高，可能是由于患者體內(nèi)的腫瘤細(xì)胞釋放出大量促凝物質(zhì)，導(dǎo)致凝血酶的產(chǎn)生而形成纖維蛋白[20]。

本研究結(jié)果顯示，PHC組D-D、GGT、AFU、AFP檢測結(jié)果分別為（3.78±1.98）mg/L、

（467.03±127.90）U/L、（50.07±16.28）U/L、

（525.88±159.70）ng/mL，均高于對(duì)照組的（0.18±0.02）mg/L、（28.50±15.71）U/L、（24.75±7.39）U/L、（3.32±2.69）ng/mL（P<0.05），這說明可以將D-D、GGT、AFU、AFP作為診斷PHC的有效指標(biāo)。且研究發(fā)現(xiàn)，PHC組的AFP、GGT、AFU、D-D單項(xiàng)檢測陽性率分別為83.33%、75.00%、85.00%、78.33%，四項(xiàng)聯(lián)合檢測使PHC的診斷率明顯提高，陽性率達(dá)88.33%。聯(lián)合檢測D-D、GGT、AFU、AFP能較早反應(yīng)肝功能損傷及合成功能，對(duì)PHC的診斷和預(yù)后有重要的臨床價(jià)值。D-D、GGT、AFU、AFP檢測具有創(chuàng)傷性小，操作簡單，實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)值得在臨床上推廣運(yùn)用。

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