補(bǔ)肺通絡(luò)方對(duì)肺纖維化大鼠模型IL-4、TNF-α、TGF-β1活性表達(dá)影響的研究*

毛 毳李 佳鄒 燕彭艷紅

（1.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，遼寧 沈陽 110032；2.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 沈陽 110032）

·研究報(bào)告·

補(bǔ)肺通絡(luò)方對(duì)肺纖維化大鼠模型IL-4、TNF-α、TGF-β1活性表達(dá)影響的研究*

毛 毳1李 佳2鄒 燕1彭艷紅1

（1.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，遼寧 沈陽 110032；2.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 沈陽 110032）

目的研究補(bǔ)肺通絡(luò)方對(duì)博萊霉素所致大鼠肺纖維化模型的治療作用，以及對(duì)肺組織內(nèi)IL-4、TNF-α、TGF-β1含量的影響，并初步闡釋其作用機(jī)制。方法將SPF級(jí)大鼠80只隨機(jī)分為4組，隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、西藥組（潑尼松）、聯(lián)合組（補(bǔ)肺通絡(luò)方+潑尼松）。采用氣管切開滴入博萊霉素方法建立大鼠肺纖維化模型，15 d后開始對(duì)西藥組及聯(lián)合組進(jìn)行灌胃治療，觀察大鼠肺組織中IL-4、TNF-α、TGF-β1的含量及肺組織病理情況。結(jié)果檢測(cè)結(jié)果提示造模成功，西藥組、聯(lián)合組與模型組相比IL-4、TNF-α、TGF-β1含量均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）。結(jié)論補(bǔ)肺通絡(luò)方對(duì)肺纖維化大鼠模型有顯著療效，其機(jī)制可能與下調(diào)IL-4、TNF-α、TGF-β1等因子的表達(dá)有關(guān)。

補(bǔ)肺通絡(luò)方 肺纖維化 IL-4 TNF-α TGF-β1

特發(fā)性肺纖維化（IPF）是臨床中一種以慢性炎癥為主的間質(zhì)性肺疾病，病因尚未有明確闡述，臨床特點(diǎn)主要為肺部出現(xiàn)成纖維細(xì)胞灶，同時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的沉積，導(dǎo)致肺泡結(jié)構(gòu)及相關(guān)肺組織呈現(xiàn)出慢性、進(jìn)行性破壞的現(xiàn)象。特發(fā)性肺纖維化的病理改變難以逆轉(zhuǎn)，是一種危險(xiǎn)性極高的肺疾?。?］。由于其發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，至今尚未完全明確，目前臨床上對(duì)特發(fā)性肺纖維化的治療主要使用糖皮質(zhì)激素、細(xì)胞拮抗劑等［2］，但費(fèi)用高，且副作用大，故尋求一種安全可靠的治療方法尤為重要。補(bǔ)肺通絡(luò)方為遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院臨床自擬方，依托國家重點(diǎn)專科絡(luò)病?？疲谇捌谂R床實(shí)踐研究和文獻(xiàn)研究的基礎(chǔ)上進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究［3-5］。補(bǔ)肺通絡(luò)方具有平補(bǔ)陰陽，理肺通絡(luò)的功效。為探討其作用機(jī)制，本課題組選擇IL-4、TNF-α及TGF-β1作為檢測(cè)指標(biāo)研究補(bǔ)肺通絡(luò)方對(duì)肺纖維化的防治作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選取SPF級(jí)大鼠80只，雌雄各40只，體質(zhì)量（200±20）g，由遼寧長生生物技術(shù)有限公司提供，動(dòng)物許可證號(hào)：SCXK遼2010-0001。

1.2 試藥與儀器 補(bǔ)肺通絡(luò)方中藥煎劑，組方：黃芪20 g，人參12 g，補(bǔ)骨脂12 g，當(dāng)歸12 g，川芎12 g，半夏12 g，海藻12 g，鉤藤6 g，雞血藤12 g（所用藥物由遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院提供），藥材加水1000 mL浸泡30 min后煮沸30 min濾過取汁，再加水1000 mL煮30 min濾過取汁，合并2次藥液，水浴濃縮成含藥1 g/mL的藥液，高壓滅菌后分裝，4℃冰箱保存?zhèn)溆?。博萊霉素（zeocin）（日本化藥株式會(huì)社高崎工廠，H20090885）；潑尼松片 （天津力生制藥股份有限公司，國藥準(zhǔn)字H12020123）；10%水合氯醛；PBS緩沖液（pH=7.4）；IL-4試劑盒（美國bender，BMS613）、TNF-α試劑盒（上海博邁生物科技有限公司，96T）、TGF-β1試劑盒 （上海中喬新舟生物科技有限公司，96 tests）。勻漿機(jī)（寧波新芝生物科技股份有限公司，DY89-II）；酶標(biāo)儀（上海永創(chuàng)醫(yī)療器械有限公司，SM800）；離心機(jī)（上海趙迪生物科技有限公司，GL-25MS）；培養(yǎng)箱（上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司，DRP-9052）。

1.3 分組與造模 造模分組前將實(shí)驗(yàn)大鼠于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)適應(yīng)性喂養(yǎng)2 d（實(shí)驗(yàn)室溫度控制在23~25℃；濕度控制在50%~60%），適應(yīng)性喂養(yǎng)后觀察大鼠一般情況，確保實(shí)驗(yàn)前大鼠的狀態(tài)良好，然后進(jìn)行分組。采用簡單隨機(jī)數(shù)字表法，將大鼠分為對(duì)照組、模型組、西藥組（潑尼松）、聯(lián)合組（潑尼松聯(lián)合補(bǔ)肺通絡(luò)方），每組20只，雌雄不限，分開飼養(yǎng)。對(duì)照組不進(jìn)行造模。其余3組于正式實(shí)驗(yàn)第1天進(jìn)行造模，選用10%水合氯醛（4 mL/kg），經(jīng)腹腔注射將3組實(shí)驗(yàn)鼠進(jìn)行麻醉，大鼠麻醉后將博萊霉素（5 mL/kg）一次性注入大鼠氣管，形成大鼠肺纖維化模型，期間注意觀察大鼠生理狀態(tài)，于實(shí)驗(yàn)第15天，完成大鼠肺間質(zhì)纖維化造模。

1.4 給藥方法 依照體表面積公式［6］，參照人的體質(zhì)量給藥量，計(jì)算出大鼠每天體質(zhì)量的給藥量，在實(shí)驗(yàn)第16天起，西藥組大鼠給予潑尼松（3 mL/kg）和生理鹽水的混合制劑（5 mL/kg）灌胃，聯(lián)合組大鼠用中藥煎劑（5 mL/kg）+潑尼松混合制劑 （3 mL/kg）灌胃，每天1次。在此期間對(duì)照組、模型組正常飼養(yǎng)。

1.5 標(biāo)本采集與檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行至30 d，給藥結(jié)束后，限制大鼠進(jìn)食不限制飲水，保證第31天取材時(shí)空腹時(shí)間8 h。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行至31 d進(jìn)行取材；麻醉采用10%水合氯醛腹腔注射；麻醉成功后于大鼠腹主動(dòng)脈取血留存；摘取大鼠雙側(cè)肺葉，切取400~500 mg大鼠左肺下葉于冰浴條件下制備肺組織勻漿，并在4℃、3000 r/min條件下進(jìn)行離心，時(shí)間為20 min，抽取上清液，送往生化實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。TGF-β1、IL-12和TNF-α的含量采用ELISA方法檢測(cè)。大鼠右肺上葉用于做病理檢測(cè)，將右肺上葉采用10%甲醛進(jìn)行固定，而后進(jìn)行石蠟包埋切片的制備，而后染色觀察。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)分析軟件，計(jì)量資料以（s）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。另外在數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布時(shí)采用方差分析；在數(shù)據(jù)為非正態(tài)分布時(shí)采用秩和檢驗(yàn)后，進(jìn)行組間的非參數(shù)檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 一般情況 對(duì)照組大鼠狀態(tài)良好，體態(tài)正常，活動(dòng)靈活，皮毛光亮，無脫毛，眼耳口鼻無異常分泌物，顏色淡紅；呼吸、飲食、排泄正常，無異常死亡；模型組大鼠消瘦明顯，行動(dòng)緩慢，皮毛顏色暗淡無光澤，口鼻存在少量分泌物，口唇、耳、鼻色偏暗紅，飲食較少，大便不成形甚至出現(xiàn)稀溏現(xiàn)象，部分大鼠出現(xiàn)喘息氣促，但無異常死亡；西藥組大鼠體態(tài)偏瘦，活動(dòng)量減少，皮毛色暗無光澤，口、鼻、耳分泌物量少，色暗紅，飲食偏少，出現(xiàn)大便稀溏現(xiàn)象，但無異常死亡；聯(lián)合組大鼠體態(tài)接近正常，但個(gè)別略瘦，皮毛光澤度欠佳，口、鼻、耳無異常分泌物，口唇色紅，飲食正常，大便正常但量稍多，質(zhì)地黏稠，無異常死亡。

2.2 肺組織形態(tài)學(xué)變化 （外觀檢查） 對(duì)照組兩肺葉表面光滑，色澤粉紅明潤，飽滿；模型組表面凸凹不平，為暗紅色，肺葉成灰白色，表面有灰白色斑點(diǎn)，邊緣有點(diǎn)狀出血點(diǎn)；西藥組、聯(lián)合組部分肺葉表面光滑，部分呈暗紅色。

2.3 肺組織形態(tài)學(xué)變化（光鏡檢查）

2.3.1 HE染色 見圖1。對(duì)照組支氣管腔內(nèi)整潔，外壁間質(zhì)狹窄，肺泡壁薄，肺泡皺壁、內(nèi)膜完整；模型組支氣管管腔存在脫落的黏膜上皮，外壁間質(zhì)明顯增厚，局限性肌層增厚，肺泡壁大部分增厚，肺泡結(jié)構(gòu)破壞，肺實(shí)質(zhì)結(jié)構(gòu)紊亂，局部炎細(xì)胞浸潤，西藥組、聯(lián)合組支氣管黏膜完整，肺泡壁大多較薄，支氣管壁輕度增厚或增厚不明顯，大多數(shù)肺泡壁較薄或增厚不明顯。

圖1 光鏡肺組織形態(tài)學(xué)變化（HE染色，20倍）

2.3.2 Masson染色 見圖2。對(duì)照組可見支氣管壁及血管壁內(nèi)存在少量的膠原纖維，而肺泡壁和肺間質(zhì)內(nèi)大部分則為肌纖維組織；模型組可見支氣管壁、血管壁、肺泡壁及肺間質(zhì)大量膠原纖維明顯增生，以大量的藍(lán)綠色膠原沉積模式為主，表現(xiàn)為灶性纖維形成，肺纖維化多為中重度。西藥組、聯(lián)合組支氣管壁、血管壁、肺泡壁及肺間質(zhì)僅存在少量的膠原纖維增生，纖維化程度遠(yuǎn)較模型組減輕。

圖2 光鏡肺組織形態(tài)學(xué)變化（Masson染色，20倍）

2.4 各組大鼠肺組織勻漿中IL-4、TGF-β1、TNF-α表達(dá)水平比較 見表2。模型組肺組織中TNF-α、TGF-β1及IL-4表達(dá)明顯高于對(duì)照組（均P＜0.01），說明模型組TNF-α、TGF-β1、IL-4增高屬于異常的病理狀態(tài)。治療后，西藥組及聯(lián)合組的大鼠肺組織勻漿中TNF-α、TGF-β1及IL-4表達(dá)均低于模型組，均有顯著差異（均P＜0.01）；聯(lián)合組TNF-α、TGF-β1及IL-4表達(dá)低于西藥組，差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.01）。故可認(rèn)為補(bǔ)肺通絡(luò)湯可以明顯抑制大鼠肺組織中TNF-α、TGF-β1及IL-4的表達(dá)，從而延緩纖維化的進(jìn)程。

表2 各組大鼠肺組織勻漿中IL-4、TGF-β1、TNF-α表達(dá)水平比較（ng/L，s）

表2 各組大鼠肺組織勻漿中IL-4、TGF-β1、TNF-α表達(dá)水平比較（ng/L，s）

與對(duì)照組比較，*P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.01；與西藥組比較，▲P＜0.01。

組別 n 大鼠T N F -α（n g / L）I L -4（n g / L） T G F -β 1（n g / L）對(duì)照組 2 0 2 0 3 . 6 7 ± 2 . 6 7 1模型組 2 0 2 7 0 . 6 6 ± 2 . 3 0 3*西藥組 2 0 2 4 0 . 3 8 ± 1 . 9 8 9△4 . 7 8 ± 1 . 3 6 7 2 6 . 4 7 ± 1 2 . 8 9 7 . 8 2 ± 1 . 7 8 6*1 1 0 . 8 9 ± 1 8 . 8 9*6 . 5 6 ± 2 . 0 8 9△8 9 . 3 7 ± 1 7 . 4 8△聯(lián)合組 2 0 2 2 0 . 4 5 ± 1 . 6 7 6△▲5 . 6 8 ± 1 . 5 8 9△▲4 7 . 8 9 ± 1 8 . 9 0△▲

3 討 論

肺纖維化在臨床中早期特點(diǎn)是出現(xiàn)肺泡炎癥，中晚期特點(diǎn)是肺出現(xiàn)纖維化，屬于一種慢性進(jìn)行性的復(fù)雜性疾病［7］。中醫(yī)亦無特定病名歸屬，大多數(shù)學(xué)者則根據(jù)肺纖維的發(fā)病特點(diǎn)、臨床表現(xiàn)、及病變趨勢(shì)等方面，將其劃分為中醫(yī)學(xué) “肺痿”“肺痹”“肺脹”“咳喘”等范疇，其病位在肺，與脾腎兩臟相關(guān)密切，病機(jī)為本虛標(biāo)實(shí)，即以肺氣虧虛為本，痰瘀互結(jié)阻于絡(luò)脈為標(biāo)，故肺纖維化的治療關(guān)鍵在于平補(bǔ)肺氣，化痰祛瘀通絡(luò)，使氣虛得以糾正，臟腑氣機(jī)運(yùn)行通暢，氣行則血行，肺宣發(fā)肅降權(quán)衡，通調(diào)水道規(guī)律，則痰瘀漸化，氣血津液運(yùn)行恢復(fù)至正常，則臨床癥狀逐步好轉(zhuǎn)［8-9］。本實(shí)驗(yàn)旨在研究補(bǔ)肺通絡(luò)方對(duì)肺纖維化的治療作用以及作用機(jī)制，縱觀全方，黃芪、人參補(bǔ)益肺脾，益氣活血；補(bǔ)骨脂補(bǔ)益肺腎，溫陽納氣；當(dāng)歸、川芎辛香走竄，養(yǎng)血行血；半夏、海藻祛濕化痰，通暢肺氣；鉤藤、雞血藤通補(bǔ)肺氣、榮養(yǎng)肺絡(luò)。諸藥合用，肺吸入清氣攝納有節(jié)，氣血津液輸布正常，痰濁瘀血?dú)w于正化，肺絡(luò)通暢，肺之氣血循脈絡(luò)流注不已，則肺體自安?，F(xiàn)代藥理學(xué)認(rèn)為［10］，人參總皂苷具有抗氧化損傷的作用，能夠保護(hù)纖維化的肺臟；黃芪多糖能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞因子Th1/Th2的平衡及NO代謝，提高機(jī)體抗氧化能力；當(dāng)歸多糖能夠改善肺功能和肺系數(shù)；川芎能夠改善機(jī)體自由基損傷，提高肺功能；異鉤藤堿能夠在肺動(dòng)脈高壓及PASMCs增殖的作用下起到對(duì)肺部的保護(hù)作用。

近年來，特發(fā)性纖維化的發(fā)病機(jī)制一直是研究的重點(diǎn)，TH1/TH2細(xì)胞因子失衡學(xué)說［11-12］更是成為肺纖維化發(fā)病機(jī)制的研究熱點(diǎn)，因此筆者選取TH2型細(xì)胞因子IL-4、TNF-α及TGF-β1作為觀測(cè)肺纖維化治療程度的指標(biāo)。TGF-β1是導(dǎo)致纖維化的機(jī)制成為近年來研究重點(diǎn)［13］，普遍認(rèn)為TGF-β1主要是通過介導(dǎo)肺泡炎癥、損傷以及促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的沉積兩種作用途徑，誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞分化為肌成纖維細(xì)胞，最終導(dǎo)致纖維化的形成。IL-4作為一種促纖維化細(xì)胞因子，主要通過促進(jìn)B細(xì)胞的增殖、促進(jìn)CD4+T細(xì)胞向Th2細(xì)胞分化和Th2細(xì)胞增殖以及產(chǎn)生炎性介質(zhì)3種作用途徑直接刺激成纖維細(xì)胞的趨化、增殖和分化，促進(jìn)膠原、纖連蛋白及細(xì)胞粘合素的合成［14］，促進(jìn)肺組織纖維化。TNF-α在肺纖維化形成中發(fā)揮著重要。Sullivan的研究發(fā)現(xiàn)，在博萊霉素致纖維化的大鼠模型中，TNF-α通過啟動(dòng)TNFRI、TNFRZ信號(hào)傳導(dǎo)，誘導(dǎo)TGF-β的表達(dá)，從而促進(jìn)膠原合成和成纖維細(xì)胞增殖，從而確定TNF-α的促纖維化作用［15］。黃成亮［16］經(jīng)臨床實(shí)驗(yàn)證實(shí)，丹參聯(lián)合川芎可以通過可能與減少血清TGF-β1和TNF-α的含量，從而起到防治肺纖維化的目的。TGF-β1、IL-4、TNF-α均是導(dǎo)致纖維化的發(fā)病過程的主要細(xì)胞因子［17-19］，故被選為本實(shí)驗(yàn)研究的效應(yīng)指標(biāo)，通過應(yīng)用補(bǔ)肺通絡(luò)方治療本病，觀察3組指標(biāo)的變化并解釋其作用機(jī)制。結(jié)果比較3組數(shù)據(jù)，模型組肺組織中，TGF-β1、IL-4、TNF-α的表達(dá)水平高于正常，說明高表達(dá)的3種指標(biāo)屬于本病的一種病例狀態(tài)；治療后，西藥組以及聯(lián)合組的大鼠肺組織勻漿中，TGF-β1、IL-4、TNF-α表達(dá)均低于模型組，均有顯著性差異，證明無論是西藥組或是聯(lián)合組均可以降低TGF-β1、IL-4、TNF-α的水平，即均對(duì)特發(fā)性肺纖維化有治療作用；最后西藥組與聯(lián)合組進(jìn)行組間比較：聯(lián)合組的大鼠肺組織勻漿中TGF-β1、IL-4、TNF-α表達(dá)均明顯低于西藥組，兩組結(jié)果具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01），證明聯(lián)合組的治療作用明顯優(yōu)于西藥組，由此可以確定補(bǔ)肺通絡(luò)湯對(duì)特發(fā)性纖維化的治療作用。綜上所述，補(bǔ)肺通絡(luò)方能夠明顯降低TGF-β1、IL-4、TNF-α在肺組織勻漿的表達(dá)，從而起到防治肺纖維化的作用，且結(jié)果優(yōu)于單純使用西藥潑尼松。

本研究基于肺纖維化的西醫(yī)發(fā)病機(jī)制以及中醫(yī)致病特點(diǎn)，在傳統(tǒng)經(jīng)方“補(bǔ)肺湯”的基礎(chǔ)上加減，自擬補(bǔ)肺通絡(luò)方，經(jīng)大鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，補(bǔ)肺通絡(luò)方可以明顯降低IL-12、TNF-α和TGF-β 3種指標(biāo)在肺組織中的表達(dá)，從而起到抑制成纖維細(xì)胞在肺部的增殖，同時(shí)降低膠原的合成，達(dá)到減緩本病發(fā)病的進(jìn)程的目的，為中醫(yī)學(xué)治療肺纖維化提供新的思路。

［1］ King TJ，Pardo A，Selman M.Idiopathic pulmonary fibrosis［J］. Lancet，2011，378（9807）：1949-1961.

［2］ Hauber HP，Blaukovitsch M.Current and future treatment options in idiopathic pulmonary fibrosis［J］.Inflame Allergy Drug Targets，2010，9（3）：158-172.

［3］ 姚明，王祺，于雪峰.中藥復(fù)方治療肺纖維化文獻(xiàn)分析［J］.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，14（5）：116-118.

［4］ 滑振，呂曉東，龐立健，等.基于現(xiàn)代文獻(xiàn)的肺纖維化中醫(yī)證候及證素特征數(shù)據(jù)挖掘［J］.世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2015，10（9）：1188-1121.

［5］ 任延毅，呂曉東，龐立健，等.補(bǔ)虛通絡(luò)療法治療特發(fā)性肺纖維化的預(yù)后分析［J］.2016，31（5）：1959-1962.

［6］ 徐叔云，卞如濂，陳修.《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》第2版出版發(fā)行［J］.中國藥理學(xué)通報(bào)，1992，1：19.

［7］ 李瑤，劉新橋.中醫(yī)藥治療肺纖維化研究進(jìn)展［J］.中醫(yī)學(xué)報(bào)，2015，30（3）：340.

［8］ 黃云鑒，龔婕寧.肺纖維化的中醫(yī)病名、病機(jī)及證治規(guī)律探析［J］.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2016，18（7）：239-241.

［9］ 韓素恒，劉妮波，郝彧，等.中醫(yī)藥治療特發(fā)性肺纖維化的文獻(xiàn)計(jì)量學(xué)分析［J］.中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2016，22（13）：64-67.

［10］汪駿，曾錦波，王世鑫.中藥防治肺纖維化的藥理學(xué)研究進(jìn)展［J］.武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2005，14（6）：489-492.

［11］張曉猛，劉超，夏光云.Th1/Th2型細(xì)胞因子在小鼠肺纖維化發(fā)病中的作用［J］.蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013，38（8）：932-934.

［12］莊誼，張德平.肺纖維化與Th1/Th2失衡［J］.國外醫(yī)學(xué)：呼吸系統(tǒng)分冊(cè)，2005，25（5）：349-351.

［13］Postelthwaite AE，Holness MA，Katai H，et al.Human fibroblasts synthesize elevated levels of extracellular matrix proteins in response to interleukin 4［J］.J Clin Invest，1992，90（4）：1479-1485.

［14］Postlethewaite AE，Seyer JM.Fibroblast chemotaxis induced by human recombinant interleukin-4：identification by synthetic peptide analysis of two chemotaxic domains residing in amino acid sequences 70-88 and 89-122［J］.J Clin Invest，1991（6）：2147-2152.

［15］Sullivan DE，F(xiàn)eris M，Pociask D，et al.Tumor necrosis factoralpha induces transforming growth factor-betal expression in lung fibroblasts through the extracellular signal-regulated kinase pathway［J］.American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology，2005，32（4）：342-349.

［16］黃成亮，李艷艷，范賢明，等.丹參聯(lián)合川芎嗪對(duì)肺纖維化大鼠血清、支氣管肺泡灌洗液中TNF-α和TGF-β1水平的影響［J］.細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2013，29（7）：673-676.

［17］隋君娜，張華，牟曉峰，等.TNF-α在矽肺纖維化發(fā)病機(jī)制中的作用研究［J］.工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病，2015，41（5）：389-393.

［18］常曉龍，王明臣，劉雪，等.鹽酸氨溴索在放射性肺損傷中的保護(hù)作用及對(duì)血漿TGF-β1和TNF-α水平的影響［J］.廣州醫(yī)藥，2015，46（1）：8-10.

［19］江柏華，李曉燕，張碧海，等.丹貝益肺方對(duì)肺纖維化大鼠血清IL-4、INF-γ水平的影響［J］.中國中醫(yī)藥科技，2015，22（5）：498-499.

Study on the Effect of Bufei Tongluo Decoction on the Expression of IL-4，TNF-α，TGF-β1 in the Rat Model of Pulmonary Fibrosis

MAO Cui，LI Jia，ZOU Yan，et al. Affiliated Hospital of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，Liaoning，Shenyang 110032，China.

Objective：To research on the therapeutic effect and influence of Bufei Tongluo decoction on the content of IL-4，TNF-α，TGF-β1 in lung tissue on pulmonary fibrosis rat model caused by zeocin and interpretate its mechanism.Methods：The SPF 80 rats were randomly divided into 4 groups，respectively group A（control group），group B（model group），group C（prednisone treatment group），group D（Bufei Tongluo decoction+prednisone treatment group）.Pulmonary fibrosis model was set up by tracheotomy driping zeocin.After 15 days，lavage treatment was applied to group C and group D.The content of IL-4，TNF-α，TGF-β1 in rat lung tissue and lung tissue pathology were observed.Results：Test result suggested model building success.Compared with model group，IL-4，TNF-α，TGF-β1 of prednisone treatment group，Bufei Tongluo decoction+prednisone treatment group had statistical significance（P＜0.05）.Conclusion：Bufei Tongluo decoction has significant curative effect on pulmonary fibrosis in rat model，the mechanism may be related to downgrade of IL-4，TNF-α，TGF-β1.

Bufei Tongluo decoction；Pulmonary fibrosis；IL-4；TNF-α；TGF-β1

R285.5

A

1004-745X（2017）03-0397-04

10.3969/j.issn.1004-745X.2017.03.007

2016-08-09）

遼寧省臨床能力建設(shè)項(xiàng)目（LNCCC-C04-2015）