虎掌南星及其混淆品的鑒別研究

裴文菡 周成惠 張 慧*

1．大連經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)第一中學(xué)，遼寧 大連 116600； 2．遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 大連 116600

虎掌南星及其混淆品的鑒別研究

裴文菡1周成惠2張 慧2*

1．大連經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)第一中學(xué)，遼寧 大連 116600； 2．遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 大連 116600

目的：建立鑒別虎掌南星及其5種混淆品的方法。方法：采用性狀鑒別方法，通過(guò)形狀、大小、表面、顏色、斷面、氣味對(duì)虎掌南星及其混淆品天南星、半夏、朝鮮南星、螃蟹七、白附子進(jìn)行鑒別；采用薄層色譜法對(duì)虎掌南星及其5種混淆品的甲醇提取溶液進(jìn)行鑒別。結(jié)果：虎掌南星“形如虎掌、色白粉性”的性狀特征可以區(qū)分正品和5種混淆品；薄層色譜中，虎掌南星甲醇提取液在紫外燈(365nm)和日光燈下，在Rf=0.48位置處分別有一藍(lán)色熒光斑點(diǎn)和一紫紅色斑點(diǎn)，而其他5種混淆品均無(wú)此斑點(diǎn)，可以區(qū)分正品與混淆品。結(jié)論：建立的性狀和薄層色譜方法專(zhuān)屬性強(qiáng)，可用于虎掌南星及其混淆品的鑒別。

虎掌南星；混淆品；性狀；薄層色譜；鑒別研究

虎掌南星為天南星科半夏屬植物掌葉半夏(PinelliapedatisectaSchott)的干燥塊莖，又稱(chēng)掌葉半夏、滇半夏、虎掌，其始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》[1]，全國(guó)各省均有分布，具有祛風(fēng)定驚、化痰散結(jié)的功效[2]?，F(xiàn)代研究證實(shí)，虎掌南星具有鎮(zhèn)靜和鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、抗心律失常、抗氧化、瀉下等作用，臨床上用于治療宮頸癌等疾病[3-4]。目前市場(chǎng)上虎掌南星藥材混亂現(xiàn)象嚴(yán)重，常見(jiàn)的混淆品主要為5種，分別為天南星、半夏、朝鮮南星、螃蟹七、白附子等，由于5種混淆品與虎掌南星均來(lái)自同一科，即天南星科，具有相近的生源關(guān)系，正品與混淆品的鑒別存在一定難度[5]。目前文獻(xiàn)采用近紅外光譜技術(shù)、性狀、顯微方法鑒別虎掌南星及其混淆品天南星[6-7]，采用DNA、性狀、顯微方法鑒別虎掌南星及其混淆品半夏和水半夏[8-10]，尚未見(jiàn)鑒別虎掌南星與其5種混淆品的相關(guān)報(bào)道。為解決虎掌南星藥材市場(chǎng)混亂現(xiàn)象，本文對(duì)虎掌南星及其5種混淆品的性狀、薄層鑒別進(jìn)行研究，建立同時(shí)區(qū)分藥材真?zhèn)蔚蔫b別方法。

1 儀器與材料

1.1 儀器 KQ-250DE型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；202-1型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(天津市泰斯特儀器有限公司)；ZF-2型三用紫外儀(上海市安亭電子儀器廠)。

1.2 材料 硅膠G(薄層層析用，青島海洋化工有限公司分廠；羧甲基纖維素鈉(批號(hào)：20141128，中國(guó)醫(yī)藥集團(tuán)上?；瘜W(xué)試劑公司)；甲醇(批號(hào)：20160512，上海市科密歐化學(xué)試劑有限公司)；石油醚(批號(hào)：20150901，天津市富宇精細(xì)化工有限公司)；三氯甲烷(批號(hào)：20141212，沈陽(yáng)經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)試劑廠)，試劑均為分析純。

虎掌南星與5種混淆品均由安國(guó)杏林藥材公司收集提供，由遼寧中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室張慧教授鑒定。見(jiàn)表1。

表1 藥材來(lái)源

2 方法與結(jié)果

2.1 性狀鑒別

2.1.1 鑒別方法 取虎掌南星和天南星、螃蟹七、半夏、白附子、朝鮮南星等5種混淆品，按照藥材的形狀、大小、顏色、斷面、氣味等分別進(jìn)行鑒別。

2.1.2 性狀鑒別 特征對(duì)虎掌南星和天南星、螃蟹七、半夏、白附子、朝鮮南星等混淆品的性狀特征進(jìn)行了歸納總結(jié)。結(jié)果顯示，虎掌南星與5種混淆品在氣味特征上均有麻辣味，基本相似，無(wú)法區(qū)分；在斷面特征上，除螃蟹七無(wú)粉性、角質(zhì)狀外，虎掌南星和其他4種混淆品均為色白粉性；在表面特征上，除白附子有7～8條環(huán)狀節(jié)，中心無(wú)凹陷的莖痕外，虎掌南星和其他4種混淆品均有凹陷莖痕和周?chē)新辄c(diǎn)狀根痕；在顏色特征上，僅螃蟹七顏色較深，為淡黃棕或綠黑色，其他藥材顏色均為淡黃色；在形狀特征上，除虎掌南星和螃蟹七有“形如虎掌”外，其他4種混淆品均無(wú)此特征，虎掌南星的“形如虎掌”是由主塊莖及多數(shù)附著的小塊莖組成，而螃蟹七有“形如虎掌”是由主塊莖及周邊的球狀側(cè)芽組成。綜合虎掌南星和其他5種混淆品的性狀特征，發(fā)現(xiàn)以“形如虎掌”為鑒別要點(diǎn)可區(qū)分虎掌南星和天南星、半夏、白附子、朝鮮南星4種混淆品，但無(wú)法區(qū)分螃蟹七，考慮到虎掌南星斷面色白粉性，而螃蟹七斷面為無(wú)粉性角質(zhì)狀，為此通過(guò)斷面可區(qū)分虎掌南星和螃蟹七。基于上述，確定虎掌南星與5種混淆品的性狀鑒別要點(diǎn)為“形如虎掌，斷面色白粉性”。見(jiàn)表2。

表2 虎掌南星及其5種混淆品主要性狀特征

2.2 薄層鑒別

2.2.1 供試品溶液的制備取虎掌南星及其混淆品各2g，粉粹成細(xì)粉，置50mL量瓶中，加入甲醇30mL，超聲提取30min，放冷，濾過(guò)，濾液濃縮至1mL，作為供試品溶液。

2.2.2 鑒別試驗(yàn) 吸取上述虎掌南星及5種混淆品的供試品溶液，分別點(diǎn)于同一羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G板上，點(diǎn)樣量20μL，以三氯甲烷-甲醇(6∶1)為展開(kāi)劑[8]，展開(kāi)，展距15cm，取出，晾干，分別噴以10%的硫酸乙醇溶液，置105℃烘箱內(nèi)約10min，取出，晾干，置紫外燈下(365nm)及日光下下檢視。結(jié)果顯示，在同一色譜條件，虎掌南星與其5種混淆品薄層色譜斑點(diǎn)有所區(qū)別，正品虎掌南星在Rf=0.48處日光下有一紫紅色斑點(diǎn)，紫外燈下(365nm)有一藍(lán)色熒光斑點(diǎn)，而其他5個(gè)混淆品均未見(jiàn)此斑點(diǎn)，可見(jiàn)，此斑點(diǎn)可用于正品和混淆品的鑒別。結(jié)果見(jiàn)圖1。

3 討論

3.1 提取溶劑的選擇 曾采用乙酸乙酯、三氯甲烷、正丁醇、甲醇、石油醚分別提取虎掌南星及其5種混淆品，制成不同極性的供試品溶液，進(jìn)行薄層色譜試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)僅有甲醇提取溶液中可檢測(cè)到具有鑒別意義的斑點(diǎn)，可將藥材正品與混淆品區(qū)分開(kāi)，而其他乙酸乙酯、三氯甲烷、正丁醇、石油醚的薄層圖譜正品與混淆品基本相似，為此未對(duì)其進(jìn)行深入研究。

3.2 展開(kāi)劑條件的選擇 曾采用三氯甲烷-甲醇(9.5∶0.5)[9]、三氯甲烷-甲醇(6∶1)、三氯甲烷-甲醇(4∶2)、三氯甲烷-甲醇(5∶3)、三氯甲烷-甲醇-水(20∶1∶0.8)、三氯甲烷-甲醇-水(20∶2∶1)、正丁醇-冰醋酸-水(8∶3∶1)[11]等為展開(kāi)劑進(jìn)行薄層色譜試驗(yàn)。結(jié)果顯示，僅有三氯甲烷-甲醇(6∶1)色譜斑點(diǎn)清晰，展開(kāi)良好，可將虎掌南星及其5種混淆品區(qū)分開(kāi)。

采用性狀鑒別和甲醇提取液的薄層色譜方法可將虎掌南星及其天南星、螃蟹七、半夏、白附子、朝鮮南星等5種混淆品區(qū)分開(kāi)。其中性狀鑒別的關(guān)鍵要點(diǎn)為天南星同時(shí)具有“形如虎掌，斷面色白粉性”兩個(gè)特征，而其他5種混淆品則不同時(shí)具備上述特征，其中天南星、半夏、白附子、朝鮮南星四個(gè)混淆品具有“斷面色白粉性”，但無(wú)“形如虎掌”特征；而螃蟹七有“形如虎掌”，但無(wú)“斷面色白粉性”特征，因此鑒別天南星真?zhèn)螘r(shí)，兩個(gè)特征必須同時(shí)具備，缺一不可。在薄層鑒別中，Rf=0.48處日光燈下呈現(xiàn)紫紅色斑點(diǎn)，紫外燈(365nm)下呈現(xiàn)藍(lán)色熒光斑點(diǎn)，兩種觀察條件下的薄層色譜均具有鑒別意義，此斑點(diǎn)在虎掌南星正品中含有，在其他5種混淆品中則無(wú)此斑點(diǎn)，因此通過(guò)薄層色譜方法可同時(shí)鑒別虎掌南星的真?zhèn)?。虎掌南星薄層色譜中Rf=0.48處的斑點(diǎn)，代表含有與其混淆品不同的化學(xué)成分，該成分的化學(xué)成分結(jié)構(gòu)目前尚不清楚，還有待進(jìn)一步研究。

綜上，本文建立的方法操作簡(jiǎn)單、重現(xiàn)性好、準(zhǔn)確可靠，可以準(zhǔn)確鑒別虎掌南星及其混淆品，建立的方法為解決虎掌南星藥材市場(chǎng)混亂現(xiàn)象提供參考，為控制虎掌南星藥材質(zhì)量奠定基礎(chǔ)。

[1]中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì).中國(guó)植物志[M].北京：科學(xué)出版社，1980：14.

[2]李彥文，李志勇，郭慶梅，等.虎掌南星的本草考證[J].現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐，2012，26(4)：18-20.

[3]汪榮斌，王存琴，劉曉龍.天南星(虎掌南星)的化學(xué)成分和藥理作用研究[J].長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，26(4)：590-592.

[4]張明星,李桂玲,徐叢劍.掌葉半夏提取物的有效部位不同給藥途徑對(duì)人宮頸癌細(xì)胞株CaSki裸小鼠移植瘤的抑制作用[J].中華中醫(yī)藥，2015，30(1)：199-202.

[5]中國(guó)生物制品檢定研究所.中國(guó)中藥材真?zhèn)舞b別圖典[M].廣州：廣東科技出版社，2002：37-40.

[6]陸丹，鄧海山，池玉梅，等.近紅外光譜技術(shù)鑒別虎掌南星與天南星.中成藥，2011，33(5):841-844.

[7]米正宇.天南星與虎掌南星的鑒別[J].西北藥學(xué)，1991， 6(4)：35-36.

[8]楊俊寶，彭正松.半夏與其偽品掌葉半夏的RAPD鑒別[J].現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐，2012，26(1):18-20.

[9]胡雙豐.半夏與其偽品掌葉半夏的鑒別[J].首都醫(yī)藥，2001，8(4)：54.

[10]崔光紅，唐曉晶，黃璐琦，等.利用等位基因特異 PCR鑒別虎掌南星及其部分混淆品[J].中國(guó)中藥，2008，33(10)：1109-1111.

[11]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015：119.

國(guó)家科技部科研行業(yè)專(zhuān)項(xiàng)(NO：201407002)。

裴文菡(1998-)，女，白族，漢族，研究方向?yàn)橹兴帉W(xué)。E-mail:14778071532@163.com

張慧(1970-)，女，漢族，博士，教授，主要從事中藥品質(zhì)評(píng)價(jià)與創(chuàng)新藥物的研究。E-mail:syyycs@163.com

R284

A

1007-8517(2017)05-0023-02

2016-12-22 編輯：穆麗華)