黃精多糖通過TLR4-MyD88-NF-κB通路抑制缺氧/復(fù)氧H9c2心肌細(xì)胞炎性因子釋放

雷升萍，王 靚,2，龍子江,2，施 慧，高華武，2，朱永恒，李 麗

(1.安徽中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，安徽 合肥 230038；2.安徽省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院，安徽 合肥 230022)

黃精多糖通過TLR4-MyD88-NF-κB通路抑制缺氧/復(fù)氧H9c2心肌細(xì)胞炎性因子釋放

雷升萍1，王 靚1,2，龍子江1,2，施 慧1，高華武1，2，朱永恒1，李 麗1

(1.安徽中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，安徽 合肥 230038；2.安徽省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院，安徽 合肥 230022)

目的 探討黃精多糖(Polygonatumsibiricumpolysaccharides，PSP)對缺氧/復(fù)氧(hypoxia-reoxygenation，H/R)誘導(dǎo)H9c2心肌細(xì)胞Toll樣受體4(Toll-like receptor 4,TLR4)-髓樣分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)-核因子-κB(nuclear factor κB，NF-κB)信號通路的調(diào)節(jié)作用。方法 體外培養(yǎng)H9c2心肌細(xì)胞并隨機分組：正常對照組(C組)、模型組(H/R組)、黃精多糖組(PSP組)、TLR4抑制劑(TAK-242組)和PSP+TAK-242組。C組細(xì)胞用正常培養(yǎng)液常規(guī)培養(yǎng)27 h；H/R組細(xì)胞進(jìn)行缺氧21 h/復(fù)氧6 h處理；TAK-242組、PSP組和PSP+TAK-242組的細(xì)胞在缺氧培養(yǎng)21 h前分別加入含TAK-242、PSP和PSP+TAK-242的培養(yǎng)基培養(yǎng)12 h，在常規(guī)條件下復(fù)氧6 h。PSP和TAK-242的終濃度分別是1.5 g·L-1和1 μmol·L-1。處理結(jié)束后，采用MTT法檢測細(xì)胞活力，ELISA法檢測細(xì)胞上清液中腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和白介素(interleukin,IL)-1β含量，Western blot檢測NF-κB和inhibitor κBα(IκBα)的蛋白表達(dá)，熒光定量PCR法檢測H9c2心肌細(xì)胞中TLR4、MyD88的mRNA表達(dá)。結(jié)果 與H/R組比較，PSP組、TAK-242組和PSP+TAK-242組均能明顯提高H/R損傷后心肌細(xì)胞的存活率，減輕其炎性因子滲出，明顯下調(diào)NF-κB的表達(dá)，抑制H/R誘導(dǎo)的IκBα蛋白的降解，降低TLR4和MyD88基因的表達(dá)。結(jié)論 PSP保護H9c2心肌細(xì)胞H/R損傷的機制可能與抑制TLR4-MyD88-NF-κB信號通路有關(guān)。

黃精多糖；H9c2心肌細(xì)胞；缺氧/復(fù)氧；TLR4；MyD88；NF-κB；炎癥

心肌缺血/再灌注損傷是目前臨床面臨的主要挑戰(zhàn)及難題。氧化應(yīng)激和炎癥是心肌缺血/再灌注損傷的主要機制，研究發(fā)現(xiàn)Toll樣受體4(Toll-like receptor 4,TLR4)是參與心肌缺血/再灌注損傷的主要炎癥反應(yīng)[1]。TLR4在不同細(xì)胞中均可表達(dá)，被激活后導(dǎo)致促炎性細(xì)胞因子的產(chǎn)生及其表達(dá)上調(diào)[2]。據(jù)報道，TLR4與病原相關(guān)分子結(jié)合后，啟動髓樣分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，激活核因子-κB(nuclear factor κB，NF-κB)。NF-κB和IκBα是一個相互調(diào)節(jié)的系統(tǒng)，IκBα的迅速積累可抑制NF-κB活性，TNF-α誘導(dǎo)含IκBα的細(xì)胞后，可見NF-κB高度表達(dá)，進(jìn)而刺激一系列的炎癥介質(zhì)如TNF-α和IL-1β等的釋放，破壞機體心臟免疫系統(tǒng)，最終引起炎癥因子大量釋放，刺激炎癥反應(yīng)發(fā)生，致使心肌細(xì)胞發(fā)生凋亡等[3-5]。

黃精多糖(Polygonatumsibiricumpolysaccharides，PSP)是百合科黃精屬黃精的干燥根莖通過水提醇沉、超聲波提取或微波輔助提取等提取方法而得，主要由4種化學(xué)結(jié)構(gòu)不同的單糖組成，其中以β-(1,2)鍵相連的果糖為主鏈，以α構(gòu)型的葡萄糖為側(cè)鏈連接于主鏈上。PSP的相對分子質(zhì)量為8 921 u，其中果糖 ∶葡萄糖=8.7 ∶1[6]。PSP具有抗炎、抗腫瘤、抗凋亡和降低脂肪等多種生物活性[7-8]。研究報道，PSP對缺血/再灌注模型大鼠的心肌損傷具有改善作用，能夠減輕炎癥反應(yīng)，其修復(fù)缺血心肌損傷的機制可能與調(diào)節(jié)NF-κB信號通路有關(guān)[9]。TLR4是NF-κB上游調(diào)控基因，期間有依賴性分子MyD88銜接，但有關(guān)PSP對TLR4/MyD88/NF-κB信號通路的調(diào)節(jié)作用未見報道。因此，本研究采用TLR4抑制劑TAK-242[10]，以缺氧/復(fù)氧(hypoxia-reoxygenation，H/R)誘導(dǎo)H9c2心肌細(xì)胞損傷為模型，旨在探討：① PSP對H/R損傷心肌細(xì)胞的影響；② PSP能否降低H/R誘導(dǎo)H9c2細(xì)胞的TLR4/MyD88/NF-κB的炎性表達(dá)；③ PSP與H/R介導(dǎo)的TLR4/MyD88/NF-κB的關(guān)系如何；④ PSP能否通過調(diào)控TLR4/MyD88/NF-κB對抗H/R引起的心肌損傷。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 細(xì)胞株 H9c2大鼠胚胎心肌細(xì)胞株購于中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究所細(xì)胞資源中心。

1.1.2 藥物與試劑 黃精多糖(由安徽省醫(yī)學(xué)研究院提取并檢測，含多糖為97%，應(yīng)用前采用培養(yǎng)液稀釋成濃度為1.5 g·L-1使用)；TLR4抑制劑TAK-242(購于InvivoGen公司)；DMEM、胎牛血清、TRIzol、DMSO和Tween-20均購于美國Life Technologies公司；四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT,Sigma公司)；TNF-α、IL-1β酶聯(lián)免疫吸附試劑盒購自武漢博士德生物有限公司；NF-κB、IκBα和β-actin抗體購于Abcam公司；RIPA裂解液、BCA蛋白濃度測定試劑盒、SDS-PAGE凝膠配制試劑盒、超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒(上海碧云天公司)；PVDF膜(美國密理博公司)；引物由Invitrogen公司鑒定并合成；逆轉(zhuǎn)錄試劑盒(Revert AidTMFirst Strand cDNA Synthesis Kit)(Thermo公司)。

1.1.3 儀器 3111型-恒溫CO2培養(yǎng)箱(美國Thermo公司)；ATOM全自動酶聯(lián)免疫工作站(意大利MAROCHE)；3K15-高速冷凍離心機(德國Sigma公司)； SW-CJ系列潔凈工作臺(AIRTECH，蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司)；缺氧小室(加拿大Stem Cell公司)；CXY-6C型電泳儀(北京六一儀器廠)；熒光定量PCR儀(Thermo PIKOREAL96)。

1.2 方法

1.2.1 H9c2心肌細(xì)胞培養(yǎng) 將H9c2心肌細(xì)胞株放于37℃、95%空氣-5% CO2培養(yǎng)箱中，用含15%胎牛血清的DMEM完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。待細(xì)胞融合度為85%左右時，用質(zhì)量濃度為0.25 g·L-1的胰酶消化，計數(shù)，以1.0×106個細(xì)胞接種于25 cm2的培養(yǎng)瓶進(jìn)行傳代，每2 d換液1次，每3～4 d傳代1次。取對數(shù)生長期的心肌細(xì)胞用于后續(xù)實驗。

1.2.2 H9c2心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷模型建立 待細(xì)胞融合至95%后，棄掉細(xì)胞培養(yǎng)基，加入預(yù)先經(jīng)37℃、95% N2-5% CO2的混合氣體飽和30 min的無血清DMEM模擬缺氧液，放入缺氧小室中，通入95% N2-5% CO2的混合氣體5 min驅(qū)除氧氣，置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)21 h進(jìn)行缺氧，然后將缺氧液換為含正常培養(yǎng)基，于37℃、95%空氣-5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6 h模擬復(fù)氧[11-12]。

1.2.3 實驗分組及處理 將培養(yǎng)的H9c2心肌細(xì)胞隨機分為5組：正常對照組(C組)、H/R組、TAK-242組、PSP組和PSP+TAK-242組。C組細(xì)胞用正常培養(yǎng)液(質(zhì)量濃度為15 g·L-1胎牛血清的DMEM完全培養(yǎng)基)在37℃、95%空氣-5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)27 h；H/R組細(xì)胞處理同“1.2.2”步驟；TAK-242組、PSP組和PSP+TAK-242組的細(xì)胞在缺氧培養(yǎng)21 h前，缺氧處理方法同步驟“1.2.2”，先分別加入含TAK-242、PSP和PSP+TAK-242的培養(yǎng)基培養(yǎng)12 h，在37℃、95%空氣-5% CO2培養(yǎng)箱中復(fù)氧培養(yǎng)6 h。

1.2.4 MTT法檢測細(xì)胞存活率 將經(jīng)15%胎牛血清DMEM培養(yǎng)的細(xì)胞懸液制成5.0×107·L-1細(xì)胞懸液，以每孔0.1 mL接種于96孔板，邊緣孔用不含細(xì)胞的正常培養(yǎng)液填充，將細(xì)胞培養(yǎng)板置于37℃、95%空氣-5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞融合至95%后，按照“1.2.3”步驟進(jìn)行分組及處理，結(jié)束后每孔加入0.02 mL MTT溶液(0.5 mg·L-1)，于37℃、95%空氣-5% CO2培養(yǎng)箱孵育4 h，吸去細(xì)胞上清液，每孔加入0.15 mL二甲基亞砜，于低速搖床振蕩10 min，置于酶標(biāo)儀上490 nm測定各組吸光度值?？瞻讓φ战M只加培養(yǎng)液不加細(xì)胞，并將其設(shè)為調(diào)零孔。細(xì)胞存活率/%=(OD實驗組-OD空白對照組)/(OD正常對照組-OD空白對照組)×100%，并計算平均值。每組6個復(fù)孔，實驗獨立重復(fù)3次。

1.2.5 ELISA法檢測細(xì)胞培養(yǎng)液TNF-α和IL-1β含量 將經(jīng)15%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)的細(xì)胞懸液制成1.0×108·L-1細(xì)胞懸液，以每孔1 mL接種于無菌6孔板，將6孔板置于37℃、95%空氣-5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)，待細(xì)胞融合至95%后，按照“1.2.3”步驟進(jìn)行分組及處理細(xì)胞。結(jié)束后，收集孔板內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)液，3 000×g，離心10 min。取上清20 μL。嚴(yán)格按照ELISA試劑盒說明書操作。實驗獨立重復(fù)3次。

1.2.6 Western blot法檢測NF-κB、IκBα蛋白表達(dá) 將含細(xì)胞的培養(yǎng)液制成1.0×108·L-1細(xì)胞懸液，以每孔1 mL接種于無菌6孔板，將6孔板置于37℃、95%空氣-5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)，待細(xì)胞融合至95%后，按照“1.2.3”步驟進(jìn)行分組及處理細(xì)胞。結(jié)束后，每孔加入1 mL含PMSF質(zhì)量濃度為10 g·L-1的蛋白裂解液，于冰上裂解30 min后，將其置于4℃、20 000 r·min-1離心15 min，收集上清液，采用BCA蛋白定量法測定蛋白濃度并調(diào)整。應(yīng)用SDS-PAGE凝膠試劑盒配制分離膠，每個泳道蛋白上樣量為20 μg，跑膠時電壓為80 V，待條帶進(jìn)入分離膠，電壓增至120 V。于120 V、2 000 mA恒流轉(zhuǎn)膜120 min后，用質(zhì)量濃度為5 g·L-1脫脂奶粉將PVDF膜封閉2 h，之后置于搖床上，TBST漂洗3次，每10 min 1次，將含蛋白的PVDF膜孵一抗，4℃過夜。次日用TBST液于搖床上漂洗，每10 min 1次，3次后，將膜放入二抗中37℃孵育2 h，TBST漂洗3次后，采用ECL發(fā)光試劑盒，在Tanon全自動凝膠成像系統(tǒng)中自動曝光，采集圖像，并進(jìn)行蛋白條帶灰度掃描。目的蛋白相對表達(dá)量=目的蛋白條帶光密度值/β-actin條帶光密度值，再以C組為標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。

1.2.7 熒光定量PCR檢測心肌細(xì)胞TLR4、MyD88 mRNA表達(dá)水平 將含細(xì)胞的培養(yǎng)液制成1.0×108·L-1細(xì)胞懸液，以每孔1 mL接種于無菌6孔板，將6孔板置于37℃、95%空氣-5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)，待細(xì)胞融合至95%后，按照“1.2.3”步驟進(jìn)行分組及處理細(xì)胞。結(jié)束后，棄掉細(xì)胞培養(yǎng)液，PBS小心清洗2次，TRIzol試劑完全裂解細(xì)胞，將細(xì)胞裂解液用氯仿抽提，異丙醇沉淀，回收總RNA于-80℃貯存?zhèn)溆?。質(zhì)量濃度為1 g·L-1瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(A260/A280)鑒定RNA濃度及純度。取1 μL進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，在熒光定量PCR儀上進(jìn)行PCR擴增和檢測，反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)條件為：42℃、60 min，99℃、2 min，4℃保存。TLR4、MyD88、β-actin的引物序列見Tab 1。PCR反應(yīng)條件是：94℃ 45 s，55℃ 50 s，72℃ 75 s。循環(huán)擴增40次結(jié)束后，獲得TLR4 mRNA、MyD88 mRNA的循環(huán)閾值(cycle threshold，Ct)，應(yīng)用△△Ct(△△Ct=△Ct目的基因-△Ct內(nèi)參基因)方法分析，計算出2-△△Ct目的基因的相對表達(dá)量后，進(jìn)行統(tǒng)計分析。

Tab 1 Primers of detected genes

2 結(jié)果

2.1 PSP對H9c2心肌細(xì)胞H/R損傷后存活率的影響 如Fig 1所示，H9c2心肌細(xì)胞經(jīng)過缺氧21 h復(fù)氧6 h處理后，細(xì)胞存活率(45.08±0.08)%明顯降低，與C組(98.12±0.03)%比較差異有明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；PSP組(78.12±0.03)%、TAK-242組(76.26±0.08)%和PSP+TAK-242組(74.22±0.04)%的心肌細(xì)胞存活率明顯升高，與H/R組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。

Fig 1 Effect of PSP on survival rates of H9c2 cells exposed to simulated H/R

##P<0.01vscontrol；**P<0.01vsH/R

2.2 PSP對H/R誘導(dǎo)的H9c2心肌細(xì)胞TNF-α和IL-1β的影響 如Fig 2所示，與正常對照組相比，H/R組細(xì)胞培養(yǎng)液中炎性因子TNF-α和IL-1β的含量均明顯增多(P<0.01)；而PSP處理組的心肌細(xì)胞培養(yǎng)液中炎性因子TNF-α和IL-1β含量均明顯少于H/R組(P<0.01)，其中PSP+TAK-242組中炎性因子TNF-α和IL-1β的含量明顯下調(diào)(P<0.01)。

Fig 2 Effect of PSP on TNF-α and IL-1β expression of myocardial cells by H/R

#P<0.05,##P<0.01vsH/R；**P<0.01vscontrol

2.3 PSP對H9c2心肌細(xì)胞NF-κB、IκBα蛋白表達(dá)水平的影響 NF-κB是介導(dǎo)炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵調(diào)控蛋白。Fig 3 Western blot結(jié)果顯示，PSP能明顯抑制H/R刺激的H9c2心肌細(xì)胞NF-κB(0.88±0.13)至(0.52±0.19)(P<0.01)，抑制H/R誘導(dǎo)的IκBα蛋白的降解(0.59±0.04)至(1.30±0.22)(P<0.01)；其中TAK-242組中NF-κB和IκBα蛋白表達(dá)水平與PSP組比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

Fig 3 Effects of PSP on NF-κB and IκBα protein expression of H9c2 cells by H/R

A：Western blot analysis of NF-κB，IκBα and β-actin protein；B：The relative protein expression of NF-κB and IκBα bands was normalized to β-actin.##P<0.01vscontrol；*P<0.05，**P<0.01vsH/R

2.4 PSP對H9c2細(xì)胞TLR4、MyD88的mRNA表達(dá)的影響 結(jié)果如Fig 4所示，正常對照組中H9c2心肌細(xì)胞的TLR4和MyD88的mRNA表達(dá)水平很低(0.95±0.33)和(1.06±0.18)，H/R損傷后表達(dá)均明顯上調(diào)(5.83±2.04)和(2.56±0.24)(P<0.01)，PSP組和TAK-242組均能抑制上述基因的表達(dá)。

3 討論

TLR4是Toll家族的一類分子，它的結(jié)構(gòu)及其在促炎、促免疫細(xì)胞成熟分化及調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答等方面研究較清楚。機體受到外界刺激時，首先啟動先天性免疫反應(yīng)，激活TLR4表達(dá)，促使獲得性免疫應(yīng)答開啟，通過其依賴性接頭蛋白MyD88信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，誘導(dǎo)NF-κB活化。一些內(nèi)源性配體通過激活TLR4受體及激活NF-κB，致使炎性因子如TNF-α、IL-1β和IL-6等釋放[13]。MyD88是TLR4信號途徑中起重要作用的分子。MyD88有依賴性和非依賴性2種途徑，其依賴性途徑主要是通過介導(dǎo)NF-κB信號通路的活化及與相關(guān)細(xì)胞因子所產(chǎn)生。NF-κB是炎性反應(yīng)基因的重要轉(zhuǎn)錄激活因子，它的激活能調(diào)控許多炎性因子的表達(dá)，是炎癥反應(yīng)發(fā)生、發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[14]。

Fig 4 Effects of PSP on mRNA levels of TLR4 and MyD88 in H/R-stimulated H9c2 cells

**P<0.01vscontrol；#P<0.05，##P<0.01vsH/R

心肌缺血/再灌注患者的心肌組織嚴(yán)重受損，受損的心肌組織暴露于缺氧的環(huán)境中，促使大量TLR4等巨噬細(xì)胞的募集，明顯增加了心肌細(xì)胞對缺血/缺氧環(huán)境的敏感性，因此激活了TLR4/MyD88/NF-κB信號通路[15]。研究發(fā)現(xiàn)，TLR4抑制劑TAK-242對H/R細(xì)胞處理后，心肌細(xì)胞的炎性滲出因子、核因子和TLR4、MyD88的mRNA表達(dá)較H/R組明顯下降，提示TLR4抑制劑TAK-242可有效阻斷TLR4的啟動，中斷炎性因子的釋放及其對機體的損傷。PSP處理后TLR4、MyD88、NF-κB水平明顯下調(diào)，心肌細(xì)胞液中炎性因子TNF-α和IL-1β含量明顯降低，而同時加入PSP和TLR4抑制劑后，NF-κB蛋白表達(dá)明顯下調(diào)，有效抑制H/R刺激IκBα的降解，推測PSP保護心肌細(xì)胞的作用機制可能與抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路有關(guān)。

綜上所述，本實驗以體外培養(yǎng)H/R誘導(dǎo)H9c2心肌細(xì)胞為研究對象，發(fā)現(xiàn)PSP對H/R損傷H9c2心肌細(xì)胞具有保護作用，其保護作用機制通過阻斷TLR4-MyD88-NF-κB信號通路，下調(diào)H/R介導(dǎo)心肌細(xì)胞炎性因子表達(dá)，從而減輕細(xì)胞炎癥反應(yīng)。

(致謝：本文所有實驗均在安徽中醫(yī)藥大學(xué)中西藥研究與開發(fā)重點實驗室、安徽中醫(yī)藥大學(xué)科學(xué)實驗中心完成。)

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Inhibitory effect ofPolygonatumsibiricumpolysaccharides

on release of inflammatory cytokines of anoxia/reoxygenation H9c2 myocardial cells through TLR4-MyD88-NF-κB signaling pathway

LEI Sheng-ping1，WANG Liang1,2，LONG Zi-jiang1,2，SHI Hui1， GAO Hua-wu1，ZHU Yong-heng1，LI Li1

(1.CollegeofPharmacy，AnhuiUniversityofChineseMedicine，Hefei230038，China； 2.AnhuiAcademyofMedicalSciences，Hefei230022，China)

Aim To assess the regulatory effects ofPolygonatumsibiricumpolysaccharides(PSP) on Toll-like receptor 4(TLR4)-myeloid differentiation factor 88(MyD88)-nuclear factor κB(NF-κB) signaling pathway in anoxia/reoxygenation-H9c2 myocardial cells.Methods The H9c2 myocardial cells culturedinvitrowere randomly divided into groups：control group(C group)，hypoxia/reoxygenation group(H/R group)，PSP group，TLR4 inhibitor group(TAK-242 group)and PSP+TLR4 inhibitor group(PSP+TAK-242 group).The cells were cultured in normal condition for 27 h in C group.The cells were subjected to 21 h hypoxia followed by 6 h reoxygenation in H/R.Definitely，the cells in TAK-242，PSP and PSP+TAK-242 groups were treated with PSP and TAK-242 with the final concentration of 1.5 g·L-1and 1 μmol·L-1for 12 h before 21 h hypoxia, then the cells were exposed to the normal culture condition for another 6 h. After the treatment，cell survival rate was tested by MTT method.The contents of tumor necrosis factor-α(TNF-α)and interleukin-1β(IL-1β)were determined by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).The protein expression levels of NF-κB and inhibitor κBα(IκBα)were detected by Western blot，and the expression levels of TLR4 and MyD88 mRNA were detected by fluorescence quantitative PCR method.Results Compared with H/R group，the cell survival rates were significantly increased，while the inflammatory cytokines contents and NF-κB protein expression were dramatically decreased in groups PSP，TAK-242 and PSP+TAK-242，whereas the NF-κB expression was significantly down-regulated，and the IκBα protein expression was increased. The mRNA expression levels of TLR4 and MyD88 were markedly decreased.Conclusion PSP might protect H9c2 myocardial cells against H/R injury, which may be associated with the inhibition of TLR4-MyD88-NF-κB pathway.

Polygonatumsibiricumpolysaccharides；H9c2 myocardial cells；anoxia/reoxygenation；TLR4；MyD88；NF-κB；inflammation

時間：2017-1-13 11:38:00

http://www.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20170113.1138.042.html

2016-11-18,

2016-12-16

安徽省高校優(yōu)秀青年人才支持計劃重點項目(No 1608085QH222)；國家自然科學(xué)基金青年項目(No 81202631)；安徽省科技廳自然科學(xué)基金項目(No 1508085QH192)

雷升萍(1988-)，女，碩士生，研究方向：心腦血管藥理學(xué),E-mail: 1204026886@qq.com; 龍子江(1957-),男，博士，教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向：心腦血管藥理學(xué)，通訊作者，E-mail:lzjys@163.com

10.3969/j.issn.1001-1978.2017.02.021

A

1001-1978(2017)02-0255-06

R284.1；R322.11；R364.5；R392.12；R845.22