黃鱔藤各提取部位抗炎鎮(zhèn)痛活性的研究

摘要：目的 研究黃鱔藤各提取部位抗炎鎮(zhèn)痛的活性。方法 實(shí)驗(yàn)采用系統(tǒng)溶劑萃取法提取黃鱔藤不同的化學(xué)部位，制備粗提物，通過二甲苯致小鼠耳腫脹和乙酸引起小鼠扭體反應(yīng)藥理實(shí)驗(yàn)研究黃鱔藤抗炎和鎮(zhèn)痛的藥理作用。結(jié)果 目前兩種藥理實(shí)驗(yàn)尚不能確定黃鱔藤具有抗炎和鎮(zhèn)痛的活性。

關(guān)鍵詞：黃鱔藤；多花勾兒茶；抗炎鎮(zhèn)痛

多花勾兒茶Berchemia floribunda（Wall.）Brongn，又稱黃鱔藤，其入藥部位為根或莖、葉，其藥性味甘、微澀，性微溫，為福建等省民間藥，本品始載于《植物名實(shí)圖考》。該藥具有祛風(fēng)除濕、活血止痛的功效。主治風(fēng)濕痹痛、胃痛、痛經(jīng)、產(chǎn)后腹痛、跌打損傷、骨關(guān)節(jié)結(jié)核、骨髓炎、肝炎、肝硬化[1，2]。

相關(guān)記載表明，黃鱔藤具有祛風(fēng)除濕、活血止痛之功效，如《全國中草藥匯編》[3]、《福建藥物志》[4]、《土家族藥物志》[5]、《中國名族藥志要》[6]等，為今后臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。在現(xiàn)代研究中未見黃鱔藤抗炎鎮(zhèn)痛的相關(guān)報(bào)道，故本實(shí)驗(yàn)從抗炎鎮(zhèn)痛兩方面研究其藥理活性。

1 資料與方法

1.1器材 圓底燒瓶、分液漏斗、量筒、容量瓶、燒杯、水浴鍋、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、容量瓶、三角瓶電子秤、分析天平、小鼠灌胃器、剪刀、鑷子、打孔、器（直徑5mm）、秒表、注射器、微量進(jìn)樣器（25μl）。

1.2試劑 95%和70%乙醇、石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、甲醇、二甲苯、冰醋酸、酸性品紅、CMC-Na（分析純，天津江天公司）、阿司匹林腸溶片（拜耳醫(yī)藥保健有限公司，批號：119595）、扶他林（北京諾華制藥有限公司，批號：X0426）。

1.3實(shí)驗(yàn)動物 昆明種小鼠，體重為（20±2）g，由天津市山川紅實(shí)驗(yàn)動物科技有限公司提供，許可證號：SCXk（津）2009-0001。

1.4實(shí)驗(yàn)藥材經(jīng)生藥教研室李天祥老師鑒定系鼠李科勾兒茶屬黃鱔藤，拉丁名為Berchemia floribunda（Wall.）Brongn。

2 結(jié)果

2.1中藥材的提取與分離

2.1.1提取 取藥材，稱重為11.3kg，分別加95%、70%乙醇，浸泡1h，分別回流提取三次，第1、2次各提取1h，第3次提取0.5h。乙醇提取液減壓回收溶劑，得流浸膏，室溫干燥成型，在55℃，0.1kpa條件下干燥，稱重為1382g，計(jì)算總產(chǎn)率為12.23%。

2.1.2萃取 將上述浸膏加3倍量蒸餾水分散為混懸液，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，各萃取層回收溶劑后干燥，分別得到石油醚層為173.9g、氯仿層為146.1g、乙酸乙酯層為197.1g、正丁醇層為294.9g、水層及殘?jiān)鼮?70g。

2.2藥物配制 CMC-Na溶液的配制：稱取0.5gCMC-Na，用蒸餾水定容至100ml，配成0.5%的溶液。

黃鱔藤各提取部位干燥浸膏12g，用0.5%CMC-Na溶液定容至100ml，配成懸濁液。

阿司匹林250mg，用0.5%CMC-Na溶液定容至25ml，配成懸濁液。

扶他林20mg，用0.5%CMC-Na溶液定容至25ml，配成懸濁液。

2.3對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響 昆明種雄性小鼠80只，體重（20±2）g，隨機(jī)分為CMC-Na組（模型組）給藥0.02g/kg、中藥治療組（黃鱔藤組）給藥3g/kg、西藥對照組（阿司匹林組）給藥0.25g/kg。按表1灌胃給藥，連續(xù)4d，末次給藥45min后將每只小鼠右耳廓兩側(cè)用微量進(jìn)樣器均勻涂布10μL二甲苯致炎，左耳廓不做處理作對照。致炎20min后將動物脫臼處死，沿耳廓剪下雙耳，用打孔器分別在同一部位打下圓耳片，分析天平稱重。計(jì)算小鼠耳腫脹度[7-9，11]。

2.4對乙酸引起小鼠扭體反應(yīng)的影響 昆明種小鼠80只，雌雄各半，體重（20±2）g，隨機(jī)分為CMC-Na組（模型組）給藥0.02g/kg、中藥治療組（黃鱔藤組）給藥3g/kg、西藥對照組（扶他林組）給藥0.02g/kg。按表2灌胃給藥，連續(xù)4d，末次給藥45min后，腹腔注射0.6%冰乙酸0.2ml致痛。觀察和記錄首次扭體時(shí)間以及15min內(nèi)、20min內(nèi)扭體反應(yīng)的次數(shù)[7-10]。見圖1、圖2。

3 結(jié)論與討論

目前，從黃鱔藤中分離和鑒定出32個(gè)化合物，主要為黃酮類成分。成分的活性研究主要集中在抗腫瘤，抗白血病和保肝性。其中分離出的山柰酚和maesopsin對人白血病CCRF-CEM細(xì)胞及其多重耐藥性CEM/ADR5000亞細(xì)胞系具有明顯的細(xì)胞毒活性；化合物對半乳糖胺引起的肝細(xì)胞損傷具有較強(qiáng)的保護(hù)活性。

在本次實(shí)驗(yàn)中對二甲苯致小鼠耳腫脹的實(shí)驗(yàn)，黃鱔藤各提取部位均未見明顯的抑制作用。

對乙酸引起小鼠扭體反應(yīng)的影響的實(shí)驗(yàn)中，氯仿部位有減少扭體次數(shù)和延長首次扭體時(shí)間的趨勢。采用t檢驗(yàn)，黃鱔藤氯仿部位組與其他組比較，P<0.05，說明黃鱔藤提取物具有一定的鎮(zhèn)痛作用。在對黃鱔藤采用二甲苯性小鼠耳腫脹和乙酸引起小鼠扭體反應(yīng)藥理研究中，首次將功效主治與活性研究緊密聯(lián)系。通過以后更加深入的研究黃鱔藤的化學(xué)成分和藥理活性，為臨床應(yīng)用提供科學(xué)的依據(jù)。

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