用低溫高速離心法處理高脂標(biāo)本消除生化檢測干擾的探討

摘要：目的 利用低溫高速離心法處理高脂標(biāo)本消除高乳糜微粒對生化項(xiàng)目檢測的干擾 。方法 經(jīng)常規(guī)低速離心10 min后，將體檢收集到的標(biāo)本分為血清外觀澄清、無溶血、無黃膽正常組和血清混濁高脂標(biāo)本組（甘油三酯>12.0 mmol/L），分離血清用1.5 ml微量管分裝，再經(jīng)低溫高速離心30 min，棄去乳白色上清液，混勻下清液，分別測定兩種離心方法的生化項(xiàng)目，進(jìn)行兩種不同方法處理后的結(jié)果比對。結(jié)果 血清外觀正常組經(jīng)低溫高速離心前后生化項(xiàng)目結(jié)果無差異，高脂標(biāo)本組低溫高速離心后，消除乳糜微粒的影響，生化結(jié)果明顯改善。結(jié)論 利用低溫高速離心法處理高脂標(biāo)本可以消除高乳糜微粒對生化檢測項(xiàng)目的干擾。

關(guān)鍵詞：脂血；乳糜微粒；低溫高速離心；生化測定；干擾

體檢工作中常遇到的脂血標(biāo)本，如不處理，生化項(xiàng)目的測定會受到嚴(yán)重干擾，無法反映真實(shí)生化結(jié)果，尤其是高乳糜微粒血清，血清中含大量的甘油三酯和極低密度脂蛋白，標(biāo)本看起來像奶油樣，由于大量的高乳糜微粒對入射光產(chǎn)生散射，嚴(yán)重影響生化結(jié)果可靠性。我們采用低溫高速離心法除消高乳糜微粒的干擾，取得良好的效果。

1 資料與方法

1.1一般資料

1.1.1標(biāo)本來源 來我中心健康體檢人群。

1.1.2儀器與試劑 美國雅培CI16200SR生免一體機(jī)，德國eppendorf5424R小型臺式低溫高速離心機(jī)，中佳KDC-1044低速離心機(jī)，鈣、鎂測定試劑：上海德賽生物公司；總膽汁酸、磷測定試劑：北京利德曼公司；其它項(xiàng)目試劑均是雅培原裝進(jìn)口試劑。

1.2方法

1.2.1常規(guī)離心法 將收集的標(biāo)本在2 h內(nèi)以3500 rpm/min，離心力2352 g，離心10 min分離血清測定。

1.2.2低溫高速離心法 將常規(guī)離心法分離血清，用1.5 ml微量管分裝至少600 UL血清加蓋密封，經(jīng)15000 rpm/min，離心力21130 g，離心溫度4℃，離心30 min后，用移液器吸棄上層乳糜微粒層，混勻下清液測定。

2 結(jié)果

取外觀澄清、無溶血、無黃膽、無明顯脂血標(biāo)本20例，分成兩組，一組用常規(guī)離心法分離血清，另一組將常規(guī)離心后的血清進(jìn)行低溫高速離心法分離，進(jìn)行檢測，結(jié)果表明兩種離心法生化檢測結(jié)果基本一致。另外取20例高脂標(biāo)本（甘油三酯>12.0 mmol/L），分成兩組，一組用常規(guī)離心法分離血清，另一組將常規(guī)離心后的血清進(jìn)行低溫高速離心法分離，進(jìn)行檢測，見表1。

3 討論

對于外觀澄清、無溶血、無黃膽的標(biāo)本進(jìn)行常規(guī)離心和超低溫離心法處理后血清進(jìn)行檢測，兩種處理方法結(jié)果基本一致，可以分析出是低溫高速離心法分離血清對除血脂外其它項(xiàng)目結(jié)果無影響。全自動生化分析儀目前多采用雙試劑、雙波長技術(shù)，結(jié)合凹面光柵進(jìn)行后分光，分光后的各波長由8～16個(gè)固定檢測器同時(shí)接收，對其中的兩個(gè)波長的信息用兩具前置放大器放大并進(jìn)行對數(shù)放大，求出其吸光度差，來避免或減少來自試劑空白和樣品空白對測定光吸收的干擾，提高測定結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確度。當(dāng)標(biāo)本甘油三酯>12.0 mmol/L時(shí)，血脂渾濁度增高，大量的乳糜微粒對入射光產(chǎn)生散射使得一些生化項(xiàng)目如ALT、TP、GGT、BilT、LDH、HBDH等產(chǎn)生影響，甚至出現(xiàn)負(fù)值。從表中可見，通過低溫高速離心法可以消除脂血對生化結(jié)果的干擾。

乳糜微粒中含TG含量最多，達(dá)95%，膽固醇近4%，所以低溫高速離心法必然會導(dǎo)致甘油三酯、膽固醇降低，因此脂類項(xiàng)目不適合用此法測定，可采用稀釋法測定[1-3]。

近年來，由于糖尿病引起血脂代謝紊亂、家簇性高脂血癥及高脂蛋白的攝入等體檢者不斷增多，血清呈乳糜狀，報(bào)告單上只能備注“標(biāo)本嚴(yán)重混濁，結(jié)果僅供參考”，為了解決此問題，許多作者提出不同的方法，朱征等采用聚己二醇-4000法操作繁瑣，血清中加入附加成分，改變原有的反應(yīng)體系，不易做常規(guī)方法開展，而且沉淀后上清液只能測試部分生化項(xiàng)目；乙醚、磷鎢酸—鎂沉淀都會遇到相同的問題，本試驗(yàn)顯示高脂血癥標(biāo)本采用低溫高速離心法可以削除脂血的干擾。

參考文獻(xiàn)：

[1]朱征，丁顯平，楊敏，等.高脂血對臨床生化測定影響及處理方法的臨床研究.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（20）：2533-3560.

[2]劉萬彬，隆維東.聚乙二醇4000處理脂血后對生化結(jié)果的影響.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（4）：504-506.

[3]彭華，戴盛明.高脂血標(biāo)本對臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目的干擾及消除.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，31（10）：1140-1142. 編輯/肖慧