1例類抗—Ec引起的聚凝胺法與抗人球蛋白法敏感性對比分析

隨著輸血醫(yī)學的快速發(fā)展，輸血安全越來越受到臨床廣泛的重視，紅細胞輸注前的交叉配血就顯得尤為重要，現(xiàn)在臨床上廣泛應(yīng)用的檢測IgG類不規(guī)則抗體的方法主要有聚凝胺法和抗人球蛋白法。兩種方法對不同紅細胞抗體敏感性各有不同，近期在臨床檢測中發(fā)現(xiàn)一例類抗-Ec抗體，該抗體用抗人球蛋白法時只能檢測出抗-E抗體，只有用聚凝胺法時才能檢測出類抗-Ec抗體，現(xiàn)報道如下：

1資料與方法

1.1一般資料 標本來自院普通外科，患者楊×× ，女，62歲，臨床診斷：直腸癌，消化道出血；現(xiàn)Hb：53g/L；曾有3次輸血史，共5～6單位，最近一次輸血為2個多月前。

1.2試劑 抗-A、抗-B血清（批號：20130509）、IgM抗D（批號：20130325）、反定型ABO紅細胞（批號：20145325）、IgM抗C（批號：20123003）、IgM抗E（批號：20133201）、IgM抗c（批號：20133102）、IgM抗e（批號：20123304）多特異性抗人球蛋白試劑（批號：20130904）、聚凝胺試劑（批號：20131113）、篩選細胞（批號：20145614）鑒定細胞（批號：20145703）均來自上海血液生物醫(yī)藥有限公司。酸放散試劑PeliStrip kit（批號：8000202877）來自Sanquin。

1.3方法 ABO正反定型（試管法）、RH分型（試管法）、抗體篩查和鑒定（鹽水：IS，抗人球蛋白法：IAT，聚凝胺法：Poly），放散實驗（酸放散）均嚴格按照試劑說明書及本室標準操作規(guī)程進行。

2結(jié)果

2.1患者ABO血型及RhD結(jié)果檢測 試管法結(jié)果為A型，RhD陽性。

2.2患者血清抗體篩查 患者血清聚凝胺法與抗人球蛋白法結(jié)果均為與Ⅰ，Ⅲ譜細胞出現(xiàn)凝集，根據(jù)圖譜初步判定可能含有抗-E和/或抗-c抗體，且自身對照結(jié)果陽性。

2.3患者紅細胞Coombs實驗（直接抗人球蛋白實驗）：陽性。

2.4患者血清抗體鑒定 根據(jù)譜細胞圖譜分析可鑒定患者血清中含有不規(guī)則抗-E抗體（見表1的IS與IAT）。

2.5患者Rh血型分型 試管法結(jié)果顯示患者Rh分型為Ccee

2.6患者紅細胞酸放散后放散液的抗體鑒定 上述結(jié)果初步得出結(jié)論為檢出不規(guī)則抗-E抗體，由于患者直抗實驗陽性，所以對患者紅細胞做了酸放散試驗，并用放散液進行抗體鑒定（放散液IS與放散液IAT）：顯示放散液與含有E抗原和/或c抗原的譜細胞有強凝集反應(yīng)，而與其他抗原均為弱反應(yīng)。根據(jù)譜細胞格局懷疑患者紅細胞放散液中含有類抗-Ec抗體，見表1。

2.7聚凝胺法復(fù)查患者血清的抗體鑒定 放散液中含有類抗-Ec抗體，但在患者血清中卻只檢出抗-E抗體，鑒于聚凝胺方法對Rh系統(tǒng)具有更高的敏感型，我們又用聚凝胺方法進行一次抗體鑒定復(fù)查，凝聚胺法中患者血清與含Ec抗原的譜細胞會有強凝集反應(yīng)。通過聚凝胺法抗體鑒定證實患者血清中含有抗-Ec抗體，見表2。

2.8患者紅細胞放散液用Rh分型為CCee紅細胞吸收后再放散的放散液進行抗體鑒定 上述實驗已初步鑒定患者血清中含有抗-Ec抗體，而患者c抗原陽性，所以該抗體應(yīng)為類抗體性質(zhì)的不規(guī)則抗體，為了進一步證實該結(jié)論，我們用相應(yīng)抗原陰性的紅細胞（即CCee）去吸收該抗體以確定其類抗體性質(zhì)，該抗-Ec抗體能被CCee紅細胞吸收并放散下來，所以可以確定該抗-Ec抗體為類抗體，見表3。

3討論

有一類抗體本身具有一定的特異性，同時又能被\"抗原陰性\"的紅細胞全部吸收，顯示出一種廣譜的特異性，Lssitt[1]將這些顯示出特異性的抗體成為\"類抗體\"，有報道認為，Rh抗原是溫自身抗體最常見的靶抗原，在自身溶血性貧血患者，抗-e自身抗體最常見，其次抗-c，-E，-D，-C也有發(fā)生[2-4]。本文實驗結(jié)果表明檢出一例類抗-Ec抗體，本案例的特別之處在于用抗人球蛋白法只檢測出患者血清中有抗-E抗體而未能檢測出有類抗體性質(zhì)的抗體，如果不是后續(xù)加做的凝聚胺法復(fù)查及酸放散液抗體鑒定則有可能漏檢類抗-c性質(zhì)的類抗體，由于患者Rh分型不存在E抗原，而在放散液中能檢測出抗-E抗體，再結(jié)合其輸血史，可初步判定抗-E抗體應(yīng)同為類抗體性質(zhì)。如果在血清中檢出特異性抗體， 則可使用不含該特異性（抗體所對應(yīng)抗原）的紅細胞進行吸收放散試驗， 以鑒別該抗體為同種抗體還是類同種特異性自身抗體。我們將患者紅細胞放散液用CCee紅細胞進行吸收后再進行酸放散，再用相應(yīng)細胞對抗體進行鑒定，進一步證實了檢出的抗體為類抗-Ec抗體見表3。在一些情況下， 患者體內(nèi)的類同種特異性自身抗體所具有的\"特異性\"， 可以針對患者自身紅細胞上的抗原。此時可不必考慮輸注的血液要與患者的紅細胞抗原類型相同，而要選擇避開類抗體特異性的紅細胞輸注[5]。有報道顯示， 避開類抗體特異性的紅細胞可以明顯延長體內(nèi)存活時間[6]。

很多醫(yī)院輸血科在日常工作中當發(fā)現(xiàn)患者血漿中含有不規(guī)則抗體時，由于試劑不全的原因在交叉配血時可能都選擇盲配，并且隨著自動化儀器的日益普及，抗人球蛋白法配血日漸成為各醫(yī)院的主流。從本案例看來，抗人球蛋白法對Rh系統(tǒng)的某些抗體敏感性不如聚凝胺法，甚至有漏檢的可能性，即使采用Rh同型輸注的方法，也不能避免類同種抗體的影響，所以輸血科日常工作的交叉配血中聚凝胺法仍然不可或缺！

參考文獻：

[1]（英）杰夫.丹尼爾.人類血型[M].朱自嚴，主譯.第2 版.北京：科學出版社，2007：292.

[2]Garratty G. Specificity of autoantibodies reacting optimally at 37℃[J]. Immunohematology， 1999，9（15）：24-40.

[3]Bell CA，Zwicker H，Sacks HJ. Autoimmune hemolytic anemia： routine serologic evaluation in a general hospital population.Am J Clin Pathol 1973，60：903-911.

[4]Issutt PD，Pavone BG，Goldfinger D，et al.Anti-Wrb ，and other Autoantibodies responsible for positive direct antiglobulin tests in 150 individuals.Br J Haematol 1976，34：5～18.

[5]向東，劉曦，王健蓮，等.紅細胞溫自身抗體的血清血特點分析及配血對策[J].中國輸血雜志，2008，21（12）：924-926.

[6]Mary A. Direct Antiglobulin Testing：Systematic Problem-Solving[M].//Sally V.Rudmann Serologic Problem-Solving：A Systematic Approach for Improved Practice 1th， AABB Press Bethesda Maryland， 2005：87-88.

編輯/丁一