腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c檢測在健康體檢宮頸癌檢出中的應(yīng)用分析

宋適恒，單先芬

1河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院，河北石家莊050023；2.山東省濟(jì)寧市兗州區(qū)中醫(yī)醫(yī)院，山東濟(jì)寧272100

腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c檢測在健康體檢宮頸癌檢出中的應(yīng)用分析

宋適恒1，單先芬2

1河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院，河北石家莊050023；2.山東省濟(jì)寧市兗州區(qū)中醫(yī)醫(yī)院，山東濟(jì)寧272100

目的分析健康體檢時(shí)進(jìn)行宮頸滲液腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c檢測篩查結(jié)果，并驗(yàn)證檢測方法的有效性。方法某體檢中心對(duì)19970名女性進(jìn)行健康體檢，有關(guān)項(xiàng)目包括常規(guī)婦科檢查、組織滲液、腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c檢測，陽性病例再進(jìn)行TCT檢查及病理學(xué)檢查。結(jié)果以病理學(xué)檢查作為診斷標(biāo)準(zhǔn)，檢出宮頸癌10例，檢出率為0.05%。另外，以TCT檢查作為診斷標(biāo)準(zhǔn)，檢出宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變1859例（其中CIN III 151例、CIN II 432例、CIN I 1276例），檢出率為9.32%。結(jié)論腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c檢測是宮頸癌篩查的適宜技術(shù)，在健康體檢人群中開展宮頸癌篩查具有明顯的實(shí)用價(jià)值。

宮頸癌；腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c檢測；宮頸癌篩查；檢出率

健康體檢宮頸癌是婦女健康的第二“殺手”。如果女性適時(shí)地進(jìn)行檢查，早期發(fā)現(xiàn)子宮頸癌，將其扼殺在萌芽階段的幾率將會(huì)大大增高。該文對(duì)19970健康體檢婦女，基于宮頸滲液“腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c檢測”篩查宮頸癌的臨床資料進(jìn)行分析，以求證婦女健康體檢時(shí)使用該技術(shù)篩查宮頸癌的可行性及該檢測方法的實(shí)用價(jià)值。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

該文收納該體檢中心2015年1—12月健康體檢的人員中，有3年性行為或21歲以上有性行為的婦女，非月經(jīng)期，婦科檢查除外宮頸息肉、重度宮頸糜爛、宮頸潰瘍、宮頸創(chuàng)傷、粘膜下子宮肌瘤等疾病，共19970例。所有患者均知情同意。

1.2 檢測試劑

該文所用宮頸滲液腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c檢測采用“苯胺藍(lán)染色液”（醫(yī)療器械產(chǎn)品備案/產(chǎn)品技術(shù)要求編號(hào)：魯濟(jì)械備20160006號(hào)/20160007號(hào)/20160042號(hào)）。

1.3 方法

①持取樣器在宮頸部位按右上、右下、左下、左上、宮頸管口循序擦拭獲取宮頸滲液，做腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c檢測，按照《苯胺藍(lán)染色液操作說明書》操作規(guī)程進(jìn)行；②宮頸滲液腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c檢測陽性受檢者再進(jìn)行TCT檢查和病理學(xué)檢查。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS for Windous 11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

19970例受檢者宮頸滲液腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c檢測陽性2246例，陽性率11.2%。

2246例腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c檢測陽性受檢者中，經(jīng)TCT檢查陽性1869例，腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c檢測與TCT檢查兩者符合率為83.21%。1896例TCT分類分布，見表1。

表11896 例受檢者TCT檢測分布表

151例CIN III和10例宮頸癌，經(jīng)病理學(xué)檢查均符合TCT檢測結(jié)果。

2246例腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c檢測陽性病例中，經(jīng)TCT檢查陰性377例。進(jìn)一步檢查結(jié)果見表2。

3 討論

開展對(duì)宮頸疾患患者的篩查，有利于宮頸癌的早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷及早期治療。如果宮頸癌得到及時(shí)診斷和治療，其治愈率可達(dá)80%以上［1］。目前，接受健康體檢的人群越來越大，通過健康體檢途徑進(jìn)行宮頸癌篩查，早期發(fā)現(xiàn)疾病線索和健康隱患，是一種切實(shí)可行的方法。該文以宮頸滲液腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c檢測篩查宮頸癌及癌前病變，檢出率高于國內(nèi)農(nóng)村婦女宮頸癌普查平均水平［2］，亦高于臨床機(jī)會(huì)性篩查，宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變的檢出率更高。這可能與篩查采用的方法比文獻(xiàn)中使用的巴氏涂片和醋酸染色法敏感度明顯提高有關(guān)。查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，以往用體檢套餐宮頸癌檢出率極低，而在體檢中加入宮頸滲液腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c檢測宮頸癌篩查項(xiàng)目，能顯著提高宮頸癌、尤其是宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變的檢出率，因而有助于降低宮頸癌的發(fā)病率，提高宮頸癌的治愈率［3-4］。

表2 腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c檢測假陽性原因分類

該文采用宮頸滲液腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c檢測進(jìn)行宮頸癌篩查。腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c苯胺藍(lán)染色是一項(xiàng)液體活檢病理檢測技術(shù)，是分析組織細(xì)胞異型性、異質(zhì)性變化的重要方法，可應(yīng)用于宮頸癌篩查及早期診斷。

血紅素在人體內(nèi)的存在形式是原血紅素，由原卟啉Ⅸ與鐵離子結(jié)合而成。據(jù)其分子結(jié)構(gòu)和功能不同又分為原血紅素a/b/c［5］。宮頸癌細(xì)胞釋放的原血紅素稱為腫瘤細(xì)胞原血紅素（Protoheme of Tumor Cells TCPH）。

細(xì)胞能量代謝異常是腫瘤細(xì)胞的重要異常。諾貝爾獎(jiǎng)獲得者德國生物化學(xué)家奧托.海因里希.瓦博格（Otto Heinnich Warburg）發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞主要通過有氧糖酵解、磷酸戊糖途徑產(chǎn)能，使腫瘤細(xì)胞的耗糖速度是正常細(xì)胞的10倍，卻僅產(chǎn)生1/10的能量，這稱為瓦博格氏效應(yīng)（Warburg effect）。中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院吳緬教授和美國賓夕法尼亞大學(xué)醫(yī)學(xué)院楊小魯教授的合作研究結(jié)果［6］顯示，這種代謝異常與抑癌基因p53等突變有關(guān)。在正常狀態(tài)下，p53與磷酸戊糖途徑上第一步反應(yīng)的關(guān)鍵酶“葡萄糖-6-磷酸脫氫酶”相結(jié)合，抑制它的活性，阻止磷酸戊糖途徑的進(jìn)行。細(xì)胞中的葡萄糖主要通過三羧酸循環(huán)途徑代謝，產(chǎn)生細(xì)胞生長所需的大量能量。但在p53發(fā)生突變或缺失的腫瘤細(xì)胞中，失去了p53與葡萄糖-6-磷酸脫氫酶結(jié)合能力和對(duì)該酶的抑制，大量的葡萄糖通過磷酸戊糖途徑代謝，產(chǎn)生大量NADPH，只能進(jìn)行大量的生物合成，使腫瘤細(xì)胞快速、無限生長。反應(yīng)過程中谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）以還原型谷胱甘肽作為供氫體來分解H2O2，生成氧化型谷胱甘肽（GSSG）。這一遞氫過程，同時(shí)是過氧化氫與體內(nèi)的功能性二價(jià)鐵離子產(chǎn)生活性氧（reactive oxygen species，ROS）的反應(yīng)，稱為芬頓（Ferton）氏反應(yīng)［7-8］。2%～4%的氧沒有被還原產(chǎn)生水，而是轉(zhuǎn)變成ROS。1 mol的H2O2與1 moL的Fe2+反應(yīng)后生成1 moL的Fe3+，同時(shí)伴隨生成1 moL的OH-外加1 moL的羥基自由基。據(jù)計(jì)算在pH=4的溶液中，OH·自由基的氧化電勢高達(dá)2.73 V。另外，還生成1 mol的過氧自由基O2·，但是過氧自由基的氧化電勢只有1.3 V左右，所以，在芬頓反應(yīng)中起主要氧化作用的是OH·自由基。ROS是終毒物，最常見的靶點(diǎn)是生物大分子，如核酸和蛋白質(zhì)。

但是，羥自由基半衰期短（不到1 μs），作用直徑很短（3 nm）。因而最鄰近羥自由基的部位受到攻擊的可到性最大。線粒體是體內(nèi)活性氧的一個(gè)重要來源。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，在線粒體氧化磷酸化電子傳遞過程中，至少有10個(gè)能產(chǎn)生ROS的位點(diǎn)。線粒體是細(xì)胞原血紅素a/b/c最集中的細(xì)胞器，線粒體內(nèi)膜基粒基片的血紅素蛋白是細(xì)胞原血紅素a/b/c最集中的蛋白質(zhì)。線粒體的氧化損傷使細(xì)胞原血紅素a/b/c釋放［9］。

測定宮頸滲液腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c含量，即可顯示子宮頸細(xì)胞是否存有癌變的可能。該資料顯示，宮頸滲液腫瘤細(xì)胞原血紅素a/b/c檢測與TCT檢查具有很高的診斷符合率。但是，它比TCT檢查方便、快捷、經(jīng)濟(jì)，更適合于宮頸癌健康體檢篩查和大規(guī)模人群普查。

［1］豐穎.HR-HPV、TCT、電子陰道鏡下宮頸活檢聯(lián)合篩查對(duì)宮頸癌前病變及宮頸癌診斷價(jià)值的臨床研究［D］.南昌：南昌大學(xué)，2013.

［2］任全廣，楊盛力.血紅素加氧酶-1與腫瘤的研究進(jìn)展［J］.實(shí)用腫瘤學(xué)雜志，2015，29（5）：476-480.

［3］Banerjee P，Basu A，Wegiel B，et al.Heme oxygenase-1 promotes survival of renal cancer cells through modulation of apoptosis-and autophagy-regulating molecules［J］.The Journal of biological chemistry，2012，287（38）：32113-32123.

［4］Jakszyn P，Luján-Barroso L，AgudoA，et al.Meat and heme iron intake and esophageal adenocarcinoma in the European Prospective Investigation into Cancer and Nutrition study［J］. International Journal of Cancer=：Journal International du Cancer，2013，133（11）：2744-2750.

［5］Jakszyn P，Agudo A，Lujan-Barroso L，et al.Dietary intake of heme iron and risk of gastric cancer in the European prospective investigation into cancer and nutrition study［J］. International Journal of Cancer，2012，130（11）：2654-2663.

［6］Wu Mian.P53 regulates biosynthesis throuth direct inactivation of glucose-6-phosphate［J］.Nature Cell Biology，2011（13）：310-316.

［7］Hiroshi Kondon.Cellular life span and the Warburg effect［J］. Exy Cell Res，2008，314（9）：1923-1928.

［8］Basanta D，Simon M，Deutsch A，et al.Evolutionary game theory elucidates the role of glycolysis in gliama progresion and invasion［J］.Cell prolif，2008，41（6）：980-987.

［9］Banerjee P，Basu A，Datta D，et al.The heme oxygenase-1 protein is overexpressed in human renal cancer cells following activation of the Ras-Raf-ERK pathway and mediates antiapoptotic signal［J］.The Journal of biological chemistry，2011，286（38）：33580-33590.

Application of Hematopoietic a/b/c Examination in the Detection of Cervical Cancer in Healthy Physical Examination

SONG Shi-heng1，SHAN Xian-fen2
1.First Hospital of Hebei Medical University，Hebei，050023 China；2.Yanzhou District Hospital of Traditional Chinese Medicine，Jining，Shandong Province，272100 China

Objective To analyze the cervical effusion tumor cell heme a/b/c detection screening results at the time of healthy physical examination and verify the effectiveness of the detection method.Methods 19970 cases of females were given the healthy physical examination，and the related projects included the routine gynecologial examination，tissue effusion and tumor cell heme a/b/c detection，and the positive cases were examined by TCT and pathobiology.Results 10 cases with cervical cancer were detected by the pathobiology examination and the detection rate was 0.05%，besides，1859 cases of cervical intraepithelial neoplasia including 151 cases of CIN III，432 cases of CIN II and 1276 cases of CIN I were detected by the TCT and the detection rate was 9.32%.Conclusion The tumor cell heme a/b/c detection is a proper technique of cervical cancer screening，which is of obvious practical value in the healthy population with physical examination.

Cervical cancer；tumor cell heme a/b/c detection；Cervical cancer screening；Detection rate

R194.3

A

1672-5654（2016）10（c）-0071-03

10.16659/j.cnki.1672-5654.2016.30.071

2016-07-20）

宋適恒（1976.2-），男，黑龍江海倫人，碩士研究生，副主任醫(yī)師，研究方向：臨床醫(yī)學(xué)病理。