四川省大竹縣規(guī)?；i場仔豬腹瀉的常見病因調(diào)查分析

魯志平，楊曉玲，尹念春，申曉莉

（1. 遂寧市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川遂寧　629000 2. 大竹縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川大竹　635100）

四川省大竹縣規(guī)?；i場仔豬腹瀉的常見病因調(diào)查分析

魯志平1，楊曉玲2，尹念春1，申曉莉2

（1. 遂寧市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川遂寧629000 2. 大竹縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川大竹635100）

為摸清大竹縣仔豬腹瀉的病因及流行現(xiàn)狀，通過走訪調(diào)查、回顧性調(diào)查、現(xiàn)場查看、臨床診斷及實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)等多種方法，對大竹縣41個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)56個(gè)豬場的9.07萬頭仔豬進(jìn)行了相關(guān)調(diào)查及病料樣品的實(shí)驗(yàn)室檢測。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：大竹縣仔豬腹瀉嚴(yán)重，流行范圍較廣，發(fā)病率高達(dá)50.32%，且病因復(fù)雜。非病原因素主要是季節(jié)、母豬胎次、仔豬日齡、仔豬補(bǔ)飼情況、飼料來源、驅(qū)蟲情況、母豬健康狀況、圈舍綜合環(huán)境等。病原因素主要有大腸桿菌、魏氏梭菌、蛇形螺旋體、豬傳染性胃腸炎病毒、輪狀病毒和寄生蟲等。其中大腸桿菌為主要致病微生物，主要血清型為O20、O101、O141，并且耐藥情況較為嚴(yán)重，呈現(xiàn)多重耐藥。調(diào)查認(rèn)為，仔豬腹瀉的防控不能單純針對某種病因進(jìn)行，需要針對所有病因?qū)嵤┫到y(tǒng)性地綜合管理和防控，以保證豬場的產(chǎn)仔成活率及仔豬育成率。

大竹；仔豬腹瀉；病因調(diào)查；規(guī)?；i場

仔豬腹瀉一直是大竹縣豬場暴發(fā)的主要疾病之一，嚴(yán)重影響了該地區(qū)畜牧業(yè)的跨越式發(fā)展。為尋找腹瀉的病因，以便采取針對性的防控措施，2010—2012年對大竹縣生豬養(yǎng)殖量較大的41個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)56個(gè)生豬養(yǎng)殖場進(jìn)行了仔豬腹瀉常見病因調(diào)查。

1　材料與方法

1.1調(diào)查對象

在大竹縣生豬飼養(yǎng)量較大的41個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，結(jié)合各鄉(xiāng)鎮(zhèn)豬場數(shù)量，在每個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)抽查1～3個(gè)養(yǎng)殖場。累計(jì)對41個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)56個(gè)豬場的9.07萬頭仔豬進(jìn)行了腹瀉病因調(diào)查。

1.2方法

1.2.1通過走訪、技術(shù)服務(wù)等方式，向畜主、動(dòng)物防疫站技術(shù)人員調(diào)查2010—2012年間仔豬腹瀉的發(fā)生情況。

1.2.2現(xiàn)場查看仔豬品種、臨床癥狀、治療措施、免疫、飼料及補(bǔ)飼、圈舍建設(shè)、圈舍環(huán)境（衛(wèi)生、溫度、濕度、通風(fēng)），以及飼養(yǎng)管理?xiàng)l件和營養(yǎng)水平等。從調(diào)查區(qū)域的56個(gè)豬場，無菌采集病死豬組織樣品134份（套），每份（套）含小腸、腸系膜淋巴結(jié)、扁桃體及各類臟器；用滅菌棉拭子采集腹瀉仔豬新鮮直腸糞便630份。病料按要求［1］保存、送檢。

1.3臨床診斷

通過調(diào)查，現(xiàn)場查看發(fā)病豬場仔豬腹瀉的臨床癥狀及病理剖檢，結(jié)合流行病學(xué)調(diào)查，按文獻(xiàn)方法［2］做初步診斷。

1.4實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)

采用快速檢測試紙分別進(jìn)行豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）、豬輪狀病毒（RV）、豬流行性腹瀉病毒、豬細(xì)小病毒等病原，以及豬偽狂犬病毒gE抗體的初篩。按常規(guī)RT-PCR進(jìn)行豬傳染性胃腸炎病毒、豬輪狀病毒、豬流行性腹瀉病毒的確診［3］；按常規(guī)PCR進(jìn)行豬細(xì)小病毒、豬偽狂犬病毒的確診［4］。寄生蟲檢驗(yàn)采用水洗沉淀集卵法和漂浮集卵法［5］。按文獻(xiàn)［6-7］進(jìn)行致病細(xì)菌檢驗(yàn)。

2　結(jié)果與討論

2.1調(diào)查結(jié)果

2.1.1仔豬腹瀉發(fā)病日齡、發(fā)病率及死亡率。調(diào)查56個(gè)豬場的9.07萬頭仔豬發(fā)現(xiàn)，1日齡至斷奶的仔豬均有發(fā)病，但主要集中在1～20日齡左右的乳豬。1～10日齡仔豬腹瀉發(fā)病率為65.25%，11～20日齡發(fā)病率為58.08%。隨著日齡增大，發(fā)病率和死亡率出現(xiàn)暫時(shí)性降低（表1）。

2.1.2仔豬腹瀉與季節(jié)關(guān)系。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，本病一年四季均有發(fā)生，但在較為寒冷的12月份至次年2月份發(fā)病率最高，平均發(fā)病率為59.20%，而在較為炎熱的6—8月份最低，平均發(fā)病率為33.52%。具體結(jié)果見表2。

2.1.3品種與仔豬腹瀉的關(guān)系。不同品種仔豬在腹瀉發(fā)病率、發(fā)病程度等均無明顯差異（表3）。各品種仔豬一年中均有腹瀉發(fā)生，同一季節(jié)中各品種仔豬腹瀉發(fā)病率無明顯差異（表4）。

表1　仔豬腹瀉流行情況調(diào)查結(jié)果

表2　各月份仔豬發(fā)病情況

表3　不同品種仔豬腹瀉情況

表4　發(fā)病品種與季節(jié)關(guān)系統(tǒng)計(jì)情況（發(fā)病率/%）

2.1.4補(bǔ)飼日齡、不同規(guī)模飼料廠家與仔豬腹瀉的關(guān)系。早期補(bǔ)料對仔豬腹瀉影響較大。隨著補(bǔ)飼日齡的延遲，仔豬腹瀉的平均發(fā)病率逐步遞增（圖1）。通過調(diào)查發(fā)現(xiàn)，以大廠家生產(chǎn)的乳豬料作補(bǔ)飼的仔豬腹瀉發(fā)病率較低，為48.45%，而以地方飼料（小廠家料）作補(bǔ)飼的仔豬腹瀉發(fā)病率較高，為58.93%。

2.1.5環(huán)境因素與仔豬腹瀉的關(guān)系。將豬場按衛(wèi)生條件、豬舍結(jié)構(gòu)，以及保溫、散熱、通風(fēng)情況，分為好、中、差三個(gè)等級，以及新建豬場、老豬場。結(jié)果表明，采用漏糞地板、衛(wèi)生條件好，以及保溫及散熱通風(fēng)效果良好豬舍的仔豬發(fā)病率較低，為47.11%；平養(yǎng)式飼養(yǎng)，衛(wèi)生條件差豬舍的仔豬發(fā)病率較高，為61.13%（表5）；新建場的發(fā)病率低，舊場發(fā)病率高（表6）。

圖1　補(bǔ)飼日齡與仔豬腹瀉關(guān)系圖

表5　豬場衛(wèi)生條件與仔豬腹瀉關(guān)系

表6　新舊豬場與仔豬腹瀉關(guān)系

2.1.6母豬與仔豬腹瀉的關(guān)系。母豬群健康、無慢性疾病，其所產(chǎn)仔豬的腹瀉發(fā)病率低，相反發(fā)病率高。如母豬豬瘟抗體水平高，并進(jìn)行腹瀉疫苗預(yù)防，所產(chǎn)仔豬腹瀉發(fā)病率較低（表7）。初產(chǎn)母豬所產(chǎn)仔豬的腹瀉發(fā)病率高于經(jīng)產(chǎn)3～5胎次以上母豬所產(chǎn)仔豬的發(fā)病率（表8）。

表7　母豬健康狀況與仔豬腹瀉的關(guān)系

表8　母豬胎次與仔豬腹瀉的關(guān)系

2.1.7驅(qū)蟲因素與仔豬腹瀉的關(guān)系。通過調(diào)查發(fā)現(xiàn)，長期使用單一的驅(qū)蟲藥物或不定期驅(qū)蟲的豬場易發(fā)生仔豬腹瀉；多種驅(qū)蟲藥輪換使用并定期驅(qū)蟲的豬場發(fā)生仔豬腹瀉的數(shù)量相對較低。結(jié)果見表9。

表9　仔豬腹瀉與驅(qū)蟲因素調(diào)查結(jié)果

2.2臨床診斷結(jié)果

通過對臨床癥狀及病理變化觀察進(jìn)行初步診斷。結(jié)合流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)：仔豬腹瀉在大竹縣多數(shù)養(yǎng)殖場均有發(fā)生，流行范圍廣，致死率高；發(fā)病因素復(fù)雜，既有病原因素，又有非病原因素，其中近50%的仔豬腹瀉由大腸桿菌引起（表10）。

表10　仔豬腹瀉病因分類

2.3實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果

2.3.1病毒學(xué)檢查

2.3.1.1試紙檢測。應(yīng)用病原快速檢測試紙卡，分別對630份新鮮直腸糞便及血清樣品進(jìn)行傳染性胃腸炎病毒、豬輪狀病毒、豬流行性腹瀉病毒、豬細(xì)小病毒、豬偽狂犬病毒檢測，結(jié)果傳染性胃腸炎病毒陽性率為2.54%，豬輪狀病毒陽性率為0.48%，豬偽狂犬病毒陽性率為0.16%，其他病毒的陽性率為0。

2.3.1.2分子生物學(xué)檢測。將采集的134份病死豬組織樣品，應(yīng)用PCR或RT-PCR診斷試劑盒進(jìn)行檢測，結(jié)果傳染性胃腸炎病毒陽性率為2.98%，豬輪狀病毒陽性率為1.49%，與試紙檢測的樣品來源場、來源圈舍一致（表11）。

表11　分子生物學(xué)檢測結(jié)果

2.3.2寄生蟲學(xué)檢查。將采集的630份新鮮直腸糞便進(jìn)行寄生蟲檢查，結(jié)果表明采樣豬場均有不同程度的寄生蟲感染存在（表12）。

表12　寄生蟲檢查結(jié)果

2.3.3豬痢疾蛇形螺旋體檢測。對630份病豬新鮮直腸糞便進(jìn)行涂片，用復(fù)紅色液染色、鏡檢，發(fā)現(xiàn)有2份在高倍鏡下每個(gè)視野見3個(gè)以上，且具有3～4個(gè)彎曲的較大螺旋體。

2.3.4細(xì)菌學(xué)檢查。按文獻(xiàn)資料方法對采集的630份新鮮直腸糞便，分別接種不同培養(yǎng)基培養(yǎng)，并逐一挑取單個(gè)菌落，革蘭氏染色、鏡檢，對疑似菌落重新接種純化培養(yǎng)，共分離出314株細(xì)菌。

2.3.4.1分離菌的菌落形態(tài)。觀察24 h培養(yǎng)物，其中307株細(xì)菌的菌落特征、培養(yǎng)特性等類似大腸桿菌，7株細(xì)菌類似魏氏梭菌。

2.3.4.2革蘭氏染色、鏡檢。分別取分離菌純培養(yǎng)物，進(jìn)行涂片、革蘭氏染色、鏡檢，發(fā)現(xiàn)兩種細(xì)菌：編號DZXXJ001為疑似大腸桿菌；編號DZXXJ002為疑似魏氏梭菌。

2.3.4.3生化鑒定試驗(yàn)。用接種針挑取編號為DZXXJ001的純化菌落接種于微量生化管，進(jìn)行生化試驗(yàn)鑒定并觀察結(jié)果。根據(jù)《常見細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊》，發(fā)現(xiàn)該菌生化特征與大腸桿菌相符。結(jié)合病癥、培養(yǎng)特性及菌體特性，確定該分離菌為大腸桿菌（表13）。用接種針挑取編號為DZXXJ002的純化菌落接種于微量生化管，按廠家說明書中的方法操作并觀察結(jié)果，發(fā)現(xiàn)該菌生化特征與魏氏梭菌相符。結(jié)合流行病學(xué)、病理變化、菌落特征及培養(yǎng)特性，確定該分離菌為魏氏梭菌（表14）。

2.3.4.4致病性試驗(yàn)。將每株生化試驗(yàn)鑒定為陽性菌株的菌液，腹腔接種體重18～22 g的小白鼠2只，0.5 mL/只；陰性對照組接種等量肉湯，空白對照組不接種。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，接種編號為DZXXJ001的分離菌6～72 h后，有35株致小白鼠死亡，其余的對小鼠無致死性。接種編號為DZXXJ002的分離菌12 h后，有2株致小白鼠死亡，其余小鼠至72 h仍健活。對死亡小白鼠剖檢，觀察病變，并從肝臟、脾臟取樣接種于相應(yīng)培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)菌株通過鑒定與接種菌株相同。

表13　分離菌DZXXJ001的生化鑒定結(jié)果

表14　分離菌DZXXJ002的生化鑒定結(jié)果

2.3.4.5血清型鑒定

2.3.4.5.1 大腸桿菌O抗原血清型鑒定。通過玻板凝集和試管凝集，對35株致病性大腸桿菌進(jìn)行血清型鑒定，發(fā)現(xiàn)優(yōu)勢血清型為O20、O101、O141，是大竹縣的主要流行血清型（表15）。

表15　分離菌DZXXJ001的O抗原血清型鑒定結(jié)果

2.3.4.5.2 魏氏梭菌血清型鑒定。通過鑒定，大竹縣流行的魏氏梭菌主要為豬A型魏氏梭菌。

2.3.4.6藥敏試驗(yàn)

2.3.4.6.1 大腸桿菌的藥敏試驗(yàn)。藥敏試驗(yàn)方法及判定標(biāo)準(zhǔn)按照藥敏片生產(chǎn)廠家“杭州微生物公司”所提供的方法、標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。試驗(yàn)結(jié)果表明：該分離菌對復(fù)達(dá)欣、多粘霉素B高度敏感；對氨芐西林、哌拉西林、頭孢呋辛、阿米卡星、新霉素等11種藥物為中度敏感；對苯唑西林、羧芐青霉素、先鋒霉素（Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ）等17種藥物為耐藥或高度耐藥。2.3.4.6.2魏氏梭菌的藥敏試驗(yàn)。同法進(jìn)行魏氏梭菌分離株藥敏試驗(yàn)。結(jié)果該分 離菌對泰樂菌素、環(huán)丙沙星等藥物高度敏感，對強(qiáng)力霉素中度敏感，對鏈霉素、卡那霉素、黏桿菌素等有耐藥性。

3　小結(jié)

通過近3年的系統(tǒng)調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)，引起大竹縣仔豬腹瀉的病因復(fù)雜，既有非病原性因素，也有病原性因素。非病原因素主要是季節(jié)、母豬胎次、仔豬日齡、仔豬補(bǔ)飼情況、飼料來源、驅(qū)蟲情況、母豬健康狀況、圈舍綜合環(huán)境等。病原因素主要有大腸桿菌、紅痢、痢疾、豬傳染性胃腸炎病毒、輪狀病毒和寄生蟲等。其中大腸桿菌為主要致病微生物，主要血清型為O20、O101、O141，并且分離菌耐藥情況較為嚴(yán)重，呈現(xiàn)多重耐藥。在治療過程中，只有通過藥敏試驗(yàn)，選擇有效的藥物和適當(dāng)劑量，制定合理的治療方案，才能做到“有的放矢”［8］。

仔豬腹瀉防控不能單純針對某一種病因進(jìn)行防控。仔豬腹瀉癥的控制是一項(xiàng)系統(tǒng)性、綜合性防控技術(shù)，需要采取多種管理和防控措施，以保證豬場產(chǎn)仔成活率及仔豬育成率。

［1］ 劉秀梵. 獸醫(yī)流行病學(xué)原理［M］. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1993：1544.

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［4］ 余波，譚詩文，冉懋韜. 豬細(xì)小病毒和豬偽狂犬病毒混合感染的診治［J］. 中國畜牧獸醫(yī)，2010（5）：170-171.

［5］ 秦建華，李國清. 動(dòng)物寄生蟲病學(xué)實(shí)驗(yàn)教程［M］. 北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2007.

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（責(zé)任編輯：朱迪國）

Investigation and Analysis on Common Causes for Piglet Diarrhea in Large-scale Pig Farms in Dazhu County of Sichuan Province

Lu Zhiping1，Yang Xiaoling2，Yin Nianchun1， Shen Xiaoli2
（1. Animal Disease Control and Prevention Center of Suining City，Suining，Sichuang 629000；2. Animal Disease Control and Prevention Center of Dazhu County，Dazhu，Sichuang 635100）

In order to fi nd out the causes of piglet diarrhea and its epidemic status in Dazhu county，a comprehensive survey on 90 700 piglets from 56 farms in 41 townships were conducted by investigation，retrospective survey，fi eld survey，clinical diagnosis，laboratory testing and some other methods. The results showed that the piglet diarrhea was a severe disease in Dazhu county and presented wide prevalence，the incidence rate was 50.32%，and the causes were complex. There were non-pathogenic factors and pathogenic factors. Non-pathogenic factors were closely related to season，parity，piglet ages，piglet supplementary feeding，feed sources，situation of expelling parasites，sow health and the integrated environment in breeding houses. Pathogenic factors included E.coli，Clostridium perfringens，Serpulina，Transmissible gastroenteritis virus，Totavirus and parasites，in which the E.coli was the major pathogenic microorganism and the main E.coli serotypes were O20，O101，O141. The isolates showed severe drug resistance and multiple resistance. Therefore，it should be applied an integrated management instead of aiming at only one factor to prevent and control the piglet diarrhea so as to achieve the purpose of improving survival rate of piglets and rearing rate.

Dazhu；piglet diarrhea；etiological investigation；large-scale pig farms

S851.3

B

1005-944X（2016）10-0013-05

10.3969/j.issn.1005-944X.2016.10.003