3種不同血瘀證動物模型的建立與評價

梁耀月，李佳佳，董世芬，張　榮，袁悅瑩，孫建寧

(北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院中藥藥理系，北京　100102)

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◇實驗方法學(xué)◇

3種不同血瘀證動物模型的建立與評價

梁耀月，李佳佳，董世芬，張榮，袁悅瑩，孫建寧

(北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院中藥藥理系，北京100102)

目的建立痰濁血瘀、氣滯血瘀、痰濁+氣滯血瘀大鼠模型，研究不同血瘀狀態(tài)動物模型的特征。方法選用SD大鼠，隨機(jī)分為正常對照組、高脂飼料組、慢性刺激組(chronic unpredictable mild stress，CUMS)、高脂飼料+慢性刺激組，分別采用相應(yīng)因素干預(yù)6周。于2、4、6周動態(tài)監(jiān)測動物體重、曠場行為、血脂和血清皮質(zhì)酮指標(biāo)；實驗終點(6周)采用小動物超聲和左心室插管法檢測心功能，采用黏度儀、紅細(xì)胞變形/聚集測試儀檢測血液流變性相關(guān)指標(biāo)。結(jié)果與正常對照組大鼠相比，采用高脂飼料、慢性不可預(yù)知性刺激后均可引起血瘀狀態(tài)，對動物的行為學(xué)、血脂、心臟功能、血液黏度造成了不同程度的影響，當(dāng)兩因素疊加時，血瘀相關(guān)指標(biāo)變化最明顯，表現(xiàn)為：與正常對照組比較，體重明顯降低(P<0.01)，2周時水平運動、垂直運動、運動時間均減少(P<0.01或P<0.05)，2周、4周時，血清皮質(zhì)酮上升(P<0.01或P<0.05)，4周、6周時TG明顯上升(P<0.01)。6周時，血流速度減慢(P<0.01)，收縮末期左室前壁、后壁厚度均增厚(P<0.01或P<0.05)，舒張期左心室指數(shù)上升(P<0.01)，左心室最大收縮速率降低(P<0.05)，全血黏度上升(P<0.01)。結(jié)論高脂飼料喂養(yǎng)和慢性不可預(yù)知性刺激均可形成血瘀狀態(tài)，但是具有不同的特點。當(dāng)兩因素疊加時，動物可明顯出現(xiàn)行為學(xué)、血液黏度、心臟功能、血脂等指標(biāo)的異常，可為血瘀證以及相關(guān)藥物的研究提供依據(jù)。

慢性不可預(yù)知刺激；高脂飼料；氣滯；痰濁；血瘀證；動物模型

血瘀證是臨床常見的癥候狀態(tài)，與冠心病、高血壓、高血脂、腫瘤等多種疾病形成有關(guān)。穩(wěn)定可靠的動物模型的構(gòu)建對闡述中醫(yī)證候狀態(tài)的病理生理機(jī)制以及相關(guān)藥物干預(yù)具有重要的意義。目前已經(jīng)有關(guān)于寒凝、痰濁、氣滯、氣虛等血瘀證動物模型的探討[1]。但是所獲得的數(shù)據(jù)主要為終點判斷，少有動態(tài)觀測血瘀過程的報道。本研究采用高脂飼料和/或慢性不可預(yù)知性刺激建立不同狀態(tài)的血瘀大鼠模型，結(jié)合動態(tài)觀測和終點指標(biāo)，綜合評價模型，以期為相關(guān)研究提供科學(xué)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1動物SPF級SD大鼠40只，體質(zhì)量120 g，♂，由斯貝福(北京)實驗動物科技有限公司提供，合格證號：[SCXK(京)2011-0004]。

1.2藥品與試劑高脂飼料(88%基礎(chǔ)飼料、2%膽固醇和10%豬油)，北京科澳協(xié)力飼料有限公司提供，許可證編號：[SCXK(京)2014-0010]。水合氯醛(批號：20140619)購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。甘油三酯(triglyceride，TG)、總膽固醇(total cholesterol，TC)、高密度脂蛋白膽固醇(high density lipoprotein cholesterol，HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein cholesterol，LDL-C)均購自南京建成生物工程研究所，批號分別是20151224、20151224、20151225和20151224。紅細(xì)胞變形性試劑(批號：20150610)購自北京世帝科學(xué)儀器公司。血清皮質(zhì)酮(corticosterone，CORT)放免試劑盒(批號：20160115)購自北京華英生物技術(shù)研究所。

1.3儀器LG-R-80A型自動沖洗血液黏度儀(北京世帝科學(xué)儀器公司)；LG-B190型紅細(xì)胞變形/聚集測試儀(北京世帝科學(xué)儀器公司)；GL-21M高速冷凍離心機(jī)(上海盧湘儀離心機(jī)儀器有限公司)；KH-100 DE型數(shù)控超聲波清洗器(昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司)； 自制敞箱(80 cm×80 cm×40 cm)；小動物行為分析系統(tǒng)(Ethovision XT 9)；XH-6020全自動放免計數(shù)儀(西安核儀器廠)；Epoch 酶標(biāo)儀(美國伯騰儀器有限公司Bio Tek Instruments Inc.Serial#：130315A)；Vevo 2100(維勝有限公司)；HZQ-C空氣浴振蕩器(哈爾濱市東明醫(yī)療儀器廠)；RM6240C多通道生理信號采集處理系統(tǒng)(成都儀器廠)。

1.4實驗方法

1.4.1造模方法適養(yǎng)3 d，將動物隨機(jī)分為正常對照組(control)、高脂飼料組(high fat diet)、慢性刺激組(chronic unpredictable mild stress，CUMS)、高脂飼料+慢性刺激組(high fat diet+CUMS)4組，每組10只。高脂飼料組，高脂飼料+慢性刺激組大鼠采用高脂飼料喂養(yǎng)，其余2組常規(guī)飼養(yǎng)。另外，慢性刺激組、高脂飼料+慢性刺激組大鼠給予CUMS的干預(yù)，刺激因素包括噪聲、夾尾、禁食禁水、電刺激、晝夜顛倒，具體操作見Tab 1。

Tab 1　The specific operation table of chronic unpredictable mild stress(CUMS)

One kind of the stimulation above was randomly arranged every day, which could not be predicted by the animals the next day,and the duration was 6 weeks.

1.4.2實驗指標(biāo)測定

1.4.2.1體重測定分別于大鼠造模0、2、4、6周對大鼠進(jìn)行體重測定。

1.4.2.2曠場實驗將動物置于高40 cm，邊長80 cm，四周及底部均為黑色的封閉方形曠場中心位置，用攝像系統(tǒng)觀察并記錄動物在曠場內(nèi)5 min的行為表現(xiàn)，包括水平活動距離、垂直運動次數(shù)、運動時間，其中水平活動距離、運動時間可以通過行為學(xué)分析系統(tǒng)獲得數(shù)據(jù)。分別于造模2、4以及6周對大鼠進(jìn)行水平運動、垂直運動、運動時間的測定。

1.4.2.3生化指標(biāo)測定于大鼠造模2、4周后眼眶取血，根據(jù)試劑盒說明書操作流程酶標(biāo)儀測TC、TG、HDL-C、LDL-C，放免法測CORT；造模6周后，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的水合氯醛按0.3 mL·(100 g)-1麻醉動物，頸總?cè)⊙? mL，靜置，3 500 r·min-1離心10 min，取血清酶標(biāo)法測定TC、TG、HDL-C、LDL-C，放免法測定CORT。

1.4.2.4心臟超聲檢測于取材前1 d進(jìn)行動物心臟超聲檢測(Vevo 2100，探頭MS250)，腹腔注射質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的水合氯醛，按0.3 mL·(100 g)-1麻醉大鼠后，左胸上至鎖骨下至肋骨下緣處備皮。分別對大鼠的射血分?jǐn)?shù)(ejection fraction，EF)、短軸縮短率(fractional shortening，F(xiàn)S)、流出道峰速(AV Peak Velocity)、舒張末期左室前壁厚度(left ventricular anterior wall thickness at end-diastolic，LVAWd)、舒張末期左室后壁厚度(left ventricular posterior wall thickness at end-diastolic，LVPWd)、舒張末期左室內(nèi)徑(left ventricular internal diameter at end-diastolic，LVIDd)、收縮末期左室內(nèi)徑(left ventricular internal diameter at end-systolic，LVIDs)、收縮末期左室前壁厚度(left ventricular anterior wall thickness at end-systolic，LVAWs)、收縮末期左室后壁厚度(left ventricular posterior wall thickness at end-systolic，LVPWs)。

舒張期左心室指數(shù)(m/g)=舒張期左室內(nèi)徑(LVIDd)(m)/心室重量(m)(g)

收縮期左心室指數(shù)(m/g)=收縮期左室內(nèi)徑(LVIDs)(m)/心室重量(m)(g)

1.4.2.5左心室插管測定心功能于造模6周后，腹腔注射質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的水合氯醛，按0.3 mL/100 g麻醉大鼠，固定后將右側(cè)頸總動脈分離，遠(yuǎn)心端結(jié)扎，近心端插管，即用20 G靜脈留置針經(jīng)頸總動脈插管至左心室，連接生物信號記錄儀記錄心率(heart rate，HR)、左心室收縮壓(left ventricular systolic pressure，LVSP)、左心室舒張末期壓力(left ventricular end diastolic pressure，LVEDP)和左心室最大收縮/舒張速率(the maximum rate of myocardial contraction and the maximum rate of myocardial diastole，±dp/dt max)。

1.4.2.6血液流變性相關(guān)指標(biāo)測定于造模6周后麻醉，頸總?cè)⊙? mL加入肝素鈉抗凝管，取全血血樣0.8 mL在LG-R-80A型自動沖洗血液黏度儀上測定全血黏度。另取全血血樣40 μL加懸浮液(紅細(xì)胞變形性試劑加入100 mL蒸餾水配制而成)1 mL混勻，取混合好的樣品0.8 mL在LG-B190型紅細(xì)胞變形/聚集測試儀上測定紅細(xì)胞最大變形指數(shù)(maximum deformation index，MAXDI)及曲線下的積分面積(SSS)。取全血血樣0.8 mL在LG-B190型紅細(xì)胞變形/聚集測試儀上測定紅細(xì)胞最大聚集指數(shù)(maximum aggregation index，MAXD)及曲線下的積分面積(SS)。

2　結(jié)果

2.1各組刺激因素對體重的影響如Tab 2所示，與正常對照組(Control)大鼠相比，造模2周開始，慢性刺激組(CUMS)大鼠、高脂飼料+慢性刺激組(High fat diet+CUMS)大鼠體重明顯降低(P<0.01)，而高脂飼料組(High fat diet)大鼠體重?zé)o明顯變化(P>0.05)。

Tab 2　Effects of different stimulation factors on body weight changes of ±s,n=10)

**P<0.01vscontrol

Tab 3　Effects of different stimulation factors on behavior index changes of rats in open ±s,n=10)

*P<0.05,**P<0.01vscontrol

2.2各組刺激因素對曠場試驗行為學(xué)的影響曠場試驗是評價動物模型在新環(huán)境中自主行為、探究行為和緊張度的一種方法。如Tab 3所示，與正常對照組大鼠相比，在造模2周后，接受慢性刺激大鼠和高脂飼料+慢性刺激組大鼠的水平運動距離、垂直運動次數(shù)、運動時間均明顯減少(P<0.05或P<0.01)，而高脂飼料喂養(yǎng)組大鼠僅僅在水平運動距離上減少(P<0.05)。造模4、6周后，只有慢性刺激組大鼠的水平距離、運動時間明顯減少(P<0.05)。結(jié)果提示，慢性不可預(yù)知刺激可導(dǎo)致情志異常，高脂飼料對情志有一定影響，但并不明顯。

2.3各組刺激因素對血清皮質(zhì)酮的影響情志異常會引起神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)紊亂，血清皮質(zhì)酮(CORT)是其重要指標(biāo)。如Tab 4所示，與正常對照組大鼠相比，造模2周后，各模型組大鼠CORT含量明顯上升(P<0.01)。造模4周后，高脂飼料組大鼠、高脂飼料+慢性刺激組大鼠CORT含量仍明顯上升(P<0.05或P<0.01)，而慢性刺激組大鼠CORT的含量差異消失。造模6周后，各模型組大鼠CORT含量均無明顯變化。

Tab 4Effects of different stimulation factors

GroupCORT/mg·L-1wk2wk4wk6Control0．308±0．0270．309±0．0280．336±0．015Highfatdiet0．347±0．025??0．348±0．032??0．324±0．027CUMS0．351±0．026??0．328±0．0210．352±0．024Highfatdiet+CUMS0．352±0．025??0．333±0．022?0．354±0．025

*P<0.05,**P<0.01vscontrol

2.4各組刺激因素對血脂水平的影響如Tab 5所示，與正常對照組大鼠相比，各模型組大鼠HDL-C含量無明顯變化，但造模4周后，慢性刺激組大鼠、高脂飼料+慢性刺激組大鼠LDL-C含量出現(xiàn)明顯降低(P<0.05)。在造模2、4周后，各模型組大鼠TC含量明顯升高(P<0.05或P<0.01)，但6周后，慢性刺激組大鼠TC含量明顯降低(P<0.05)，其他兩組模型鼠TC含量差異消失。造模4、6周后，高脂飼料+慢性刺激組大鼠TG含量明顯升高(P<0.01)；6周后，高脂飼料組大鼠TG含量也出現(xiàn)明顯升高(P<0.05)；而慢性刺激組大鼠在造模2、6周后TG含量卻出現(xiàn)明顯降低(P<0.05或P<0.01)。結(jié)果提示各模型組大鼠的脂代謝出現(xiàn)紊亂，但變化趨勢有所不同。

2.5各組刺激因素對心臟超聲檢測結(jié)果的影響如Tab 6所示，與正常大鼠比較，各模型組大鼠AV Peak Velocity明顯下降(P<0.05或P<0.01)，此外高脂飼料+慢性刺激組大鼠收縮末期左室前壁厚度(LVAWs)、收縮末期左室后壁厚度(LVPWs)、舒張期左心室指數(shù)(LVIDd/m)明顯增加(P<0.05或P<0.01)，而高脂飼料組大鼠僅舒張末期左室后壁厚度(LVPWd)明顯增加(P<0.05)，慢性刺激組大鼠僅LVIDd/m明顯增加(P<0.01)。結(jié)果提示高脂飼料復(fù)合慢性刺激對心臟功能的影響較單一因素更為明顯。

2.6各組刺激因素對血流動力學(xué)的影響心臟的收縮能力用LVSP和+dp/dtmax來表征，心臟的舒張能力用LVEDP和-dp/dtmax來表征。如Tab 7所示，與正常對照組大鼠比較，各模型組大鼠+dp/dtmax明顯下降(P<0.05)，此外高脂飼料組大鼠LVEDP的絕對值也出現(xiàn)了明顯下降(P<0.05)。結(jié)果提示高脂飼料可能對心臟的收縮和舒張功能有一定的影響，慢性刺激、高脂飼料復(fù)合慢性刺激可能僅對心臟的收縮功能有影響。

Tab 5　Effects of different stimulation factors on changes of blood lipids levels ±s,n=10)

*P<0.05,**P<0.01vscontrol

Tab 6　Effects of different stimulation factors on cardiac ultrasound examination in ±s,n=10)

*P<0.05,**P<0.01vscontrol

Tab 7　Effects of different stimulation factors on hemodynamics in ±s,n=10)

*P<0.05vscontrol

2.7各組刺激因素對全血黏度的影響如Tab 8所示，造模6周后，與正常對照組大鼠比較，各模型組大鼠全血黏度1/s明顯升高(P<0.05或P<0.01)，但高脂飼料+慢性刺激組大鼠在全血黏度50/s、100/s上也明顯升高(P<0.05)，其他2個模型組無明顯差異。結(jié)果提示，高脂飼料復(fù)合慢性刺激對全血黏度的影響較單一因素更為明顯。

GroupWholebloodviscosity/mPa·s-1200/s100/s50/s1/sControl6．2±0．86．9±0．97．8±1．042．1±5．4Highfatdiet6．7±1．07．5±1．28．6±1．350．1±9．2?CUMS6．7±1．17．5±0．88．5±0．947．9±5．0?Highfatdiet+CUMS7．1±0．97．9±1．0?9．0±1．2?51．2±6．9??

*P<0.05,**P<0.01vscontrol

2.8各組刺激因素對紅細(xì)胞變形性/聚集性的影響如Tab 9所示，造模6周后，與正常對照組大鼠比較，除慢性刺激組大鼠的MAXDI、SSS明顯降低(P<0.01)外，其余2個模型組大鼠僅有降低趨勢，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。各模型大鼠的MAXD、SS與Control大鼠比較，也僅有上升趨勢，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

Tab 9　Effects of different stimulation factors on

**P<0.01vscontrol

3　討論

根據(jù)中醫(yī)傳統(tǒng)思維及臨床癥狀所見，血瘀證有不同的中醫(yī)分型，兼有氣虛、氣滯、血虛和痰阻等情況。從西醫(yī)角度看，血瘀證可造成冠心病、高血壓、高血脂、腫瘤等嚴(yán)重疾病[2-5]。其中，氣滯血瘀證的主要病因是情志異常，血瘀兼有精神活動異常[6]。中醫(yī)認(rèn)為，情志異常會引起肝失疏泄，氣機(jī)不暢，氣郁不行，肝氣郁結(jié)或肝氣瘀滯。氣為血之帥，氣行則血行，氣滯則血停，從而導(dǎo)致氣滯血瘀之證。故氣滯可導(dǎo)致血瘀，血瘀也可引起氣滯。

氣滯病機(jī)與抑郁癥病理狀態(tài)相近。由Katz等[7]提出的慢性溫和刺激法是目前較成熟的抑郁情緒造模方法。王婷婷等[8]采用多種慢性刺激聯(lián)合應(yīng)用的方法造模4周后，模型大鼠全血高、中、低切黏度與血漿黏度明顯升高，纖維蛋白原含量明顯升高，成功建立氣滯血瘀證動物模型。下丘腦-垂體-腎上腺(HPA)軸的功能亢進(jìn)與抑郁癥關(guān)系密切[9]。長期應(yīng)激導(dǎo)致情志異常，會使HPA軸持續(xù)激活，糖皮質(zhì)激素大量分泌，從而引起神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)紊亂[10]，其中血清皮質(zhì)酮(CORT)是其重要指標(biāo)并且含量呈上升趨勢[11]。

據(jù)統(tǒng)計，痰濁阻遏和血瘀證約占高脂血癥的39.03%，氣滯和血瘀證約占高脂血癥的24.66%[12]。高脂血癥在中醫(yī)學(xué)中多歸于痰濁血瘀范疇。嗜食肥甘，化生痰濁，痰濁凝聚注入血脈是高脂血癥的關(guān)鍵病機(jī)。趙玲等[13]使用高脂飼料喂養(yǎng)大鼠，8周后，全血黏度、血漿黏度均明顯升高，成功建立痰濁血瘀模型。氣滯血瘀證是血脂異常在中醫(yī)癥型中常見的一類，若臟腑功能失調(diào)，脾失健運，腎失氣化，肝失疏泄，肺失宣肅，則氣血運行不暢，津液不歸正化，從而凝聚成痰生脂，阻塞脈道，導(dǎo)致氣滯血瘀，脈絡(luò)痹阻，隨之形成高脂血癥。傳統(tǒng)中醫(yī)認(rèn)為心主血脈，心臟功能正常，血液才能在脈中周流不息，為全身提供營養(yǎng)，以維持人體正常的生理功能。其中血脂異?？梢鹦呐K的病變，高脂膳食可影響心臟的重構(gòu)[14]。Velaqaleti等[15]研究認(rèn)為總膽固醇水平的升高會使血壓升高、冠狀動脈硬度增加以及左心室體積與室壁厚度增加。此外，還會造成左心室舒張末期容量和壓力的升高[16]。Rubinstein等[17]研究同樣認(rèn)為血清和心肌內(nèi)膽固醇水平的升高與心肌收縮和舒張功能降低明顯相關(guān)。

本研究采用高脂飼料飼養(yǎng)和/或慢性不可預(yù)知刺激分別復(fù)制痰濁/氣滯血瘀大鼠模型，在模型建立過程中，我們發(fā)現(xiàn)高脂飼料和CUMS干預(yù)均可能造成情志損傷，且加重動物血瘀的狀態(tài)(如血脂、血液黏度增加、心功能下降等)，且情志的損傷隨應(yīng)激的適應(yīng)，具有一定的時間窗。

綜上所述，我們發(fā)現(xiàn)高脂飼料、慢性不可預(yù)知刺激以及兩因素的疊加可以模擬出3種不同的血瘀證狀態(tài)，分別是痰濁、氣滯、痰濁兼有氣滯。3種模型可見不同的病理表征，分別為：痰濁血瘀動物模型的血脂水平出現(xiàn)異常，可能與大鼠的心功能異常形成有關(guān)；氣滯血瘀動物模型由于長期的不可預(yù)知性刺激，造成情志出現(xiàn)異常，血脂水平下降，紅細(xì)胞變形性、心功能均發(fā)生異常。而復(fù)合因素模型由于長期受到應(yīng)激加上高脂飼料長期喂養(yǎng)，可見痰濁和氣滯血瘀癥狀，不僅情志出現(xiàn)異常，而且血脂水平上升，心功能異常，且心功能異常較其他兩個模型明顯。

(致謝：本實驗是在北京中醫(yī)藥大學(xué)完成。感謝北京中醫(yī)藥大學(xué)為本實驗提供儀器設(shè)備的支持，感謝實驗過程中給予幫助和輔導(dǎo)的同學(xué)、老師們)

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The establishment and evaluation of three different kinds of animal model of blood stasis syndrome

LIANG Yao-yue, LI Jia-jia, DONG Shi-fen,ZHANG Rong, YUAN Yue-ying, SUN Jian-ning

(DeptofTraditionalChineseMedicinePharmacology,SchoolofChineseMateriaMedica,BeijingUniversityofChineseMedicine,Beijing100102,China)

AimTo establish phlegm and blood stasis, qi-stagnation and blood stasis, phlegm turbid+qi-stagnation and blood stasis model in rats and to study the characteristics of animal models with different blood stasis.MethodsSD rats were randomly divided into normal group, high fat diet group, chronic unpredictable mild stress group(CUMS) and high fat diet+chronic unpredictable mild stress group. Different states of blood stasis rat models were established by corresponding factors for 6 weeks. Indexes of weight, open field behavior, serum lipids and corticosterone were monitored dynamically at the 2nd, 4th, 6th weeks. At the end of the experiment(6th week), the heart function was detected by small animal ultrasound and the left ventricular intubation. The blood rheology indexes were detected by the viscosity tester and red blood cell deformation/aggregation test instrument.ResultsCompared with the normal group, blood stasis could be induced by high fat diet and chronic unpredictable mild stress, introducing the influence of different degree on animal behavior, blood lipids, heart function and blood viscosity. When the two factors were superimposed, the changes of the indexes about blood stasis were the most significant. Performance as: compared with normal control group, a significant reduction was observed in body weight(P<0.01); horizontal movement, vertical movement and movement time were reduced(P<0.01 orP<0.05) at the 2 nd week; at the 2 nd and 4 th week, serum corticosterone was increased(P<0.01 orP<0.05) as well as TG at the 4 th and 6 th week (P<0.01); at the 6 th week, velocity of blood was slowed down(P<0.01); left ventricular anterior wall and posterior wall thickness at end-systolic was increased(P<0.01 orP<0.05); left ventricular diastolic index was increased(P<0.01); the maximum rate of myocardial contraction was decreased(P<0.05); the whole blood viscosity was increased(P<0.01).ConclusionsBlood stasis could be formed by high fat diet and chronic unpredictable mild stress, which has different characteristics. When the two factors are superimposed, the abnormal behavior, blood viscosity, heart function, blood lipid and other indexes of the animal could obviously appear, which can provide the basis for the study of blood stasis syndrome and related drugs.

CUMS; high fat diet; qi-stagnation; phlegm; blood stasis syndrome; animal model

時間：2016-9-22 11:14

http://www.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20160922.1114.052.html

2016-06-03,

2016-08-16

國家自然科學(xué)基金資助項目(No 81503287，81430094)；教育部博士點基金項目(No 20130013120002)

梁耀月(1989-)，女，碩士，研究方向：中藥防治心腦血管疾病,E-mail：lyy2610@163.com;

孫建寧(1952-)，女，教授，博士生導(dǎo)師,研究方向：中藥防治心腦血管疾病，通訊作者,E-mail：jn_sun@sina.com

10.3969/j.issn.1001-1978.2016.10.026

A

1001-1978(2016)10-1468-06

R-332；R228；R255.7； R363-332