枸杞多糖提取工藝優(yōu)化及藥理作用研究進(jìn)展

楊冬萍+俞洋

【摘 要】 枸杞多糖作為枸杞子的主要活性成分，具有抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、降血糖、降血脂、抗腫瘤、保護(hù)生殖系統(tǒng)等多種藥理學(xué)作用。筆者就枸杞多糖的提取工藝及藥理學(xué)研究作一綜述。

【關(guān)鍵詞】 枸杞多糖；提取工藝；藥理作用；抗氧化；降血糖

【中圖分類號(hào)】R284.2 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號(hào)】1007-8517（2016）12-0019-03

Abstract：Lycium barbarum polysaccharides （LBP），as the main active ingredient of Lycium barbarum，which have many harmacological actions， such as anti-oxidation， immunomodulatory， hypoglycemic， hypolipidemic，antitumor，protect the reproductive system and so on.This article reviews on extraction technology and pharmacology studies of LBP.

Keywords：Lycium barbarum polysaccharides （LBP）； extraction process；pharmacological effects；anti-oxidation；hypoglycemic

枸杞子為茄科灌木植物寧夏枸杞的成熟果實(shí)，屬傳統(tǒng)的名貴中藥材，早在《本草綱目》中記載：“枸杞，補(bǔ)腎生精，養(yǎng)肝，明目，堅(jiān)精骨，去疲勞，易顏色，變白，明目安神，令人長(zhǎng)壽”。中醫(yī)認(rèn)為它有補(bǔ)腎、明目、潤(rùn)肺的功效，用于肝腎不足所致的頭暈?zāi)垦?、視力減退、消渴等證，且療效確切顯著，故有“紅寶”之稱。枸杞子富含枸杞多糖、甜菜堿、氨基酸、胡蘿卜素、維生素B1、維生素B2、維生素C、鈣、磷、鐵等多種營(yíng)養(yǎng)成分，具有極高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。枸杞多糖（Lycium barbarum polysaccharides，LBP）是枸杞子的主要活性成分，藥理實(shí)驗(yàn)表明，LBP具有抗腫瘤、降血糖、保護(hù)肝臟、保護(hù)生殖系統(tǒng)、調(diào)節(jié)免疫等多種藥理作用，是近年來(lái)的研究熱點(diǎn)。由于枸杞多糖的提取工藝在很大程度上影響著多糖的得率、純度和功效，因此，本文就枸杞多糖提取工藝和藥理作用的研究進(jìn)展作一綜述。

1 提取工藝

汪琢[1]等利用水提醇沉法，獲取LBP最佳提取工藝為：提取料液比1∶35（g/ml），提取溫度90℃，pH值11，浸提時(shí)間3h，提取次數(shù)2次，合并提取液，加3倍體積95%乙醇沉淀6h，LBP提取率達(dá)到18.56%，并發(fā)現(xiàn)，若在提取時(shí)加30min超聲波輔助提取，則多糖提取率可有效提高。趙芩等[2]利用微波真空干燥法發(fā)現(xiàn)：微波功率密度2W/g，真空度0.08MPa，干燥時(shí)間34.56min，溶解時(shí)間為2.28min，多糖保留率高達(dá)95.14%。鄭玲利等[3]采用微波輔助的方式，發(fā)現(xiàn)枸杞多糖在微波功率320W，微波時(shí)間5min，料液比1∶10時(shí)，多糖提取率達(dá)到10.14%，此法操作簡(jiǎn)便，穩(wěn)定性好，且耗能低。于翠芳等[4]利用單因素實(shí)驗(yàn)聯(lián)合響應(yīng)面法優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，研究了復(fù)合酶法對(duì)枸杞多糖提取工藝的影響。結(jié)果表明，加酶量在0.32%，酶解溫度為51℃，提取時(shí)間為60min時(shí)，枸杞多糖的提取率為13.96%，表明利用該法得到的多糖提取率與單一酶法相比雖無(wú)明顯差異，但速度升高。另外，超聲法提取枸杞多糖與傳統(tǒng)水提法比較，具有耗材少、多糖提取率高等優(yōu)點(diǎn)[5]。王杉杉等[6]利用超聲波輔助復(fù)合酶法對(duì)枸杞多糖的提取工藝進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，最佳工藝條件料液比為1∶40（g/ml），溫度50℃，超聲時(shí)間為50min，復(fù)合酶添加量0.5% 時(shí)，枸杞多糖平均得率可達(dá)58.91%。

2 藥理作用

2.1 抗氧化作用 蔡玉芳等[7]研究發(fā)現(xiàn)，LBP對(duì)冷凍的卵巢組織具有良好的保護(hù)作用，效果不亞于β-巰基乙醇，且更具有安全性。汪琢等[1]研究發(fā)現(xiàn)1mg/ml的LBP對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化的抑制作用等同于0.2mg/ml的Vc。魯曉麗等[8]利用大孔樹(shù)脂脫色法和冷凍干燥法兩種不同處理方式得到的LBP1和LBP2，二者抗氧化活性有明顯差異，前者對(duì)清除DPPH自由基的能力最顯著，達(dá)到62.46%，而后者對(duì)清除羥基的能力最顯著，高達(dá)92.02%。

2.2 降血糖、降血脂作用 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明[9]，LBP能顯著抑制糖尿病大鼠胰腺組織中一氧化氮合酶（iNOS）的表達(dá)，減輕NO對(duì)胰島β細(xì)胞的氧化損傷程度。尹長(zhǎng)江等[10]通過(guò)高糖高脂飼養(yǎng)聯(lián)合鏈脲佐菌素的方式誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型，探討LBP對(duì)2型糖尿?。∟IDDM）大鼠的降血糖作用及作用機(jī)制，結(jié)果表明LBP能顯著減低糖尿病大鼠空腹血糖（FBG）水平，提高空腹胰島素（FINS）、C-P、HbAlc水平，且呈劑量依賴性，同時(shí)糖尿病大鼠胰腺組織形態(tài)均得到不同程度的改善。LBP還能有效改善2型糖尿病大鼠胰腺β細(xì)胞的合成和分泌功能，可能與其上調(diào)PDX-1和胰島素mRNA的表達(dá)有關(guān)[11]。此外，LBP能有效降低高脂血癥小鼠血清TG、TC、LDL水平，升高HDL水平，減少M(fèi)DA含量[12]。

2.3 生殖系統(tǒng)保護(hù)作用 LUO等[13]發(fā)現(xiàn)LBP對(duì)電離輻射引起的雄性大鼠生殖功能和生精功能障礙具有防護(hù)作用。LBP還能顯著降低熱應(yīng)激誘導(dǎo)的大鼠生殖細(xì)胞的凋亡指數(shù)，抑制Caspase-3的表達(dá)水平，降低細(xì)胞色素C（Cyt-C）的濃度。由此認(rèn)為L(zhǎng)BP對(duì)熱應(yīng)激致生殖細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用可能是通過(guò)線粒體途徑實(shí)現(xiàn)[14]。

2.4 抗腫瘤作用 蔣艷等[15]發(fā)現(xiàn)Hca-F肝癌模型小鼠經(jīng)腹腔注射LBP后，小鼠瘤體生長(zhǎng)明顯受到抑制，胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)均顯著上升，其中LBP 高劑量組（40mg/kg）可有效促進(jìn)IL-2的分泌，抑制VEGF蛋白的表達(dá)。肖佩玉等[16]在LBP對(duì)肝癌小鼠腫瘤抑制作用及與免疫功能的影響發(fā)現(xiàn)，與模型組相比，LBP治療小鼠在灌胃5d后體質(zhì)量明顯增加，10d后瘤質(zhì)量降低顯著，血清中AFP、CEA、TNF-α的表達(dá)減少，NK細(xì)胞的活性提高，SF、IL-2、INF-γ的分泌增多，說(shuō)明LBP的抗腫瘤作用可能與其提高機(jī)體免疫力有關(guān)。張鳴號(hào)等[17]發(fā)現(xiàn)LBP能抑制肝癌組織中hTERT蛋白的表達(dá)，降低端粒酶的活性。Mao等[18]發(fā)現(xiàn)LBP能夠誘導(dǎo)人結(jié)腸癌細(xì)胞發(fā)生G0/G1期阻滯，從而達(dá)到長(zhǎng)期抗增殖作用。此外，LBP作為一種輔助藥物與化療藥物聯(lián)合使用，具有增效減毒的作用[19-20]。

2.5 視網(wǎng)膜保護(hù)作用 董衛(wèi)紅等[21]研究證實(shí)LBP能抑制藍(lán)光誘導(dǎo)的hRPE細(xì)胞的凋亡。白雙等[22]研究發(fā)現(xiàn)LBP可預(yù)防性的減少NMDA導(dǎo)致的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的凋亡和內(nèi)叢狀層（IPL）的變薄。Li等[23]在探討LBP對(duì)視網(wǎng)膜缺血再灌注（I/R）損傷模型的影響中發(fā)現(xiàn)，LBP能有效減少大鼠神經(jīng)元細(xì)胞凋亡數(shù)量，減弱神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞活化能力，抑制水通道蛋白-4的表達(dá)，減輕血-視網(wǎng)膜屏障破壞及氧化應(yīng)激損傷程度。LBP對(duì)大鼠視網(wǎng)膜I/R損傷的神經(jīng)保護(hù)作用，可能與其激活Nrf2和增加HO-1蛋白的表達(dá)有關(guān)[24]。此外，Mi等[25]研究證實(shí)，LBP能降低青光眼高眼壓模型大鼠內(nèi)皮素-1（ET-1）的表達(dá)，并對(duì)其受體ETA和ETB的表達(dá)也有一定的影響。

2.6 對(duì)心、腦組織的保護(hù)作用 郝銀菊等[26]發(fā)現(xiàn)，LBP對(duì)腦缺血再灌注損傷后的腦組織具有一定的保護(hù)作用。王昕等[27]研究證實(shí)，30、60mg/kg的LBP能明顯降低腦缺血再灌注模型大鼠的神經(jīng)癥狀評(píng)分，減少腦組織含水量，抑制Caspase-12 mRNA及蛋白的表達(dá)。此外，LBP對(duì)阿霉素引起的大鼠急性心臟毒性也有明顯的改善作用[28]；LBP能顯著降低心臟缺血/再灌注模型大鼠乳酸脫氫酶（LD）水平，增強(qiáng)Na+-K+-ATP酶及Ca2+-ATP酶的活性，降低心肌Bax的陽(yáng)性率及心肌細(xì)胞的凋亡水平，提高Bcl-2的陽(yáng)性率，且呈明顯的劑量依賴性[29]。

2.7 保肝作用 藥理研究表明，300mg/kg LBP能有效減緩大鼠攝入乙醇后誘發(fā)的肝毒性和酒精性脂肪肝的發(fā)展[30]；100mg/kg LBP對(duì)CCl4誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷具有明顯的保護(hù)作用[31]；LBP預(yù)處理能明顯減少CCl4導(dǎo)致的肝壞死及血清ALT水平，抑制細(xì)胞色素P450 2E1表達(dá)，提高抗氧化酶活性，降低NO代謝和脂質(zhì)過(guò)氧化水平，促進(jìn)肝再生[32]。Xiao等[33]曾采用高脂飲食法飼養(yǎng)雌性大鼠誘導(dǎo)產(chǎn)生非酒精性脂肪肝（NASH），其中部分大鼠給予口服LBP預(yù)處理，結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組相比較，NASH組大鼠肝損傷、肝纖維化、脂質(zhì)含量、氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)和細(xì)胞凋亡數(shù)量均過(guò)多表達(dá)。相比之下，NASH+LBP組大鼠肝組織和游離脂肪酸水平明顯改善，脂質(zhì)代謝平衡、肝炎癥因子和趨化因子的表達(dá)明顯減少，肝細(xì)胞凋亡有效得到抑制，氧化應(yīng)激明顯得到緩解，β纖維化因子表達(dá)明顯減少。

2.8 免疫調(diào)節(jié)作用 研究發(fā)現(xiàn)LBP能有效提升小鼠吞噬細(xì)胞的吞噬百分比和吞噬指數(shù)[34]。郝文麗等[35]證實(shí)，LBP 400mg/kg能顯著增強(qiáng)亞健康小鼠的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、B淋巴細(xì)胞增殖能力、CD4+/CD8+比值、游泳力竭時(shí)間、下丘腦DA含量及谷氨酸受體NR2A mRNA的表達(dá)水平，降低5-HT含量。此外，LBP3a與豬流產(chǎn)衣原體DNA疫苗結(jié)合能顯著增強(qiáng)小鼠抗體水平、T細(xì)胞增殖能力、IFN-γ及IL-4的分泌，且小鼠脾臟沙眼衣原體和Th1型免疫應(yīng)答水平也明顯提高[36]。

2.9 其他作用 長(zhǎng)期服用枸杞葉和枸杞多糖能有效延緩去卵巢后大鼠骨密度的丟失[37]；100mg/L的枸杞多糖聯(lián)合10mg/L的原花青素對(duì)小鼠成釉細(xì)胞DNA損傷具有明顯的保護(hù)作用[38]；快速老化模型SAMP8小鼠服用一段時(shí)間的枸杞葉全汁和枸杞多糖后，老化征象明顯改善，學(xué)習(xí)記憶能力明顯提高[39]。

3 展望

枸杞是我國(guó)傳統(tǒng)的名貴中藥材，具有滋補(bǔ)肝腎、益精明目、潤(rùn)肺的功效，用于肝腎不足所致的頭暈?zāi)垦！⒁暳p退、消渴等，其療效顯著。枸杞多糖作為枸杞的主要活性成分，由阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、鼠李糖等6種單糖組成，含有多種微量元素和氨基酸的蛋白雜多糖，已被證實(shí)具有抗氧化、抗衰老、降血糖、降血脂、抗腫瘤、增強(qiáng)免疫、保護(hù)眼睛等多種功效，其在醫(yī)學(xué)方面有抗氧化、延緩衰老、促進(jìn)細(xì)胞活性、保護(hù)細(xì)胞膜、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫等作用，具有超高的藥用價(jià)值和保健功能，在臨床應(yīng)用及食品工業(yè)等方面均具有廣闊的應(yīng)用空間。研究發(fā)現(xiàn)，不同種類和產(chǎn)地的枸杞，其多糖的工藝提取條件，含量及功效的發(fā)揮也不盡相同。因此，尋求一種合理有效的方式使其得到最大化利用，值得我們不斷進(jìn)行深入研究。目前，枸杞多糖藥理功用的發(fā)揮大多處于動(dòng)物試驗(yàn)階段，臨床報(bào)道鮮見(jiàn)。此外，對(duì)于枸杞多糖的作用機(jī)制尚缺乏明確的報(bào)道，還仍需進(jìn)一步的研究。

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（收稿日期：2016.04.21）