食品中菌落總數(shù)測(cè)定的不確定度分析

□ 陳彩彥　陳丹萍　鄧健娣　佛山出入境檢驗(yàn)檢疫局

食品中菌落總數(shù)測(cè)定的不確定度分析

□ 陳彩彥陳丹萍鄧健娣佛山出入境檢驗(yàn)檢疫局

根據(jù)食品中菌落總數(shù)測(cè)定的原理和步驟建立數(shù)學(xué)模型，對(duì)不確定度各分量進(jìn)行分析，找出影響不確定度的主要因素，最終得出食品中菌落總數(shù)測(cè)定的不確定度。結(jié)果表明：當(dāng)檢驗(yàn)結(jié)果以2次測(cè)量對(duì)數(shù)值的平均值表示時(shí)，其取值區(qū)間分布于±0.042之間。

菌落總數(shù)是食品微生物學(xué)檢驗(yàn)的一個(gè)常規(guī)項(xiàng)目，各類預(yù)包裝食品的衛(wèi)生指標(biāo)中均要求檢驗(yàn)菌落總數(shù)項(xiàng)目，其限量標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)產(chǎn)品類型的不同，可能低至10 CFU/g，也可能高達(dá)數(shù)萬(wàn)CFU/g。當(dāng)結(jié)果處于臨界值時(shí)，其取值區(qū)間就尤為重要。

檢驗(yàn)方法

按《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測(cè)定》（GB 4789.2-2010）規(guī)定，無(wú)菌操作取樣25 g，加入225 mL磷酸鹽緩沖液中制成1:10稀釋液，制備2個(gè)連續(xù)稀釋度的樣品勻液。每個(gè)稀釋度接種2個(gè)平皿各1 mL。傾注約15 mL平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，于36℃培養(yǎng)48 h。培養(yǎng)結(jié)束后，計(jì)算并報(bào)告菌落總數(shù)。

不確定度來源及分布

在菌落總數(shù)檢驗(yàn)中，引起結(jié)果不確定度的因素主要有取樣準(zhǔn)確性、樣品保存條件、人為操作的誤差、培養(yǎng)條件及重復(fù)測(cè)量等。經(jīng)總體評(píng)價(jià)認(rèn)為，B類不確定度對(duì)合成不確定度貢獻(xiàn)較小，重復(fù)測(cè)量帶來的不確定度占主要部分。所以，在此主要考慮重復(fù)測(cè)量的不確定度。

數(shù)學(xué)模型

設(shè)菌落總數(shù)為A，試驗(yàn)結(jié)果為x，則：A=xCFU/g。

計(jì)算不確定度分量

分40次對(duì)40個(gè)不同樣品進(jìn)行檢測(cè)，得到每個(gè)樣品的菌落總數(shù)結(jié)果，見表1。第j個(gè)樣品兩個(gè)平皿結(jié)果分別為x1j和x2j。由于是多次獨(dú)立檢測(cè)，故采用合并樣本標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行計(jì)算。

殘差平方和求和：

合并樣本標(biāo)準(zhǔn)差：

兩次檢測(cè)平均值的標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

取置信概率p=95%，v=40，查t分布表得t95(40)=2.02

報(bào)告：當(dāng)檢驗(yàn)結(jié)果以2次測(cè)量對(duì)數(shù)值的平均值表示時(shí)，其取值區(qū)間分布于±0.042之間。當(dāng)檢驗(yàn)結(jié)果以2次測(cè)量平均值表示時(shí)，相對(duì)于對(duì)數(shù)值的取值再取反對(duì)數(shù)得其取值區(qū)間分布，這個(gè)取值區(qū)間適合于任何一次測(cè)量。

表1　20個(gè)樣品菌落總數(shù)測(cè)試結(jié)果 單位：CFU/g

應(yīng)用實(shí)例

表1中，第1個(gè)樣品，對(duì)數(shù)值的平均值3.377，其取值區(qū)間在3.335～3.419，取反對(duì)數(shù)得2次測(cè)量平均值的取值區(qū)間為：2162～2624，菌落總數(shù)=2.39×103±2.3×102CFU/g。

第8個(gè)樣品，對(duì)數(shù)值的平均值1.477，其取值區(qū)間在1.435～1.519，取反對(duì)數(shù)得2次測(cè)量平均值的取值區(qū)間為：27～33，菌落總數(shù)=30±3 CFU/g。