清熱化痰法對(duì)AECOPD痰熱證大鼠模型病理肺組織的影響*

李 杰，王林洋，程 涓，吳 珺，邱澤計(jì)，羅 慧

（1.北京中醫(yī)藥大學(xué)東直門(mén)醫(yī)院，北京 100700；2.北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，北京 100029）

Abstract:［Objective］To study the mechanisms and effects of Shengqing Jiangzhuo prescription to improve the insulin sensitivity of MSG rats.［Methods］Copy the MSG obese rat models，which were randomly divided into model group，rosiglitazone group，fenofibrate group，three dose of Shengqing Jiangzhuo prescription.Then choose 8 normal rats as the normal control group.Measure the levels of glucose in skeletal muscle and the level of leptin in serum after administration for 50 days.Real-time PCR detect the expression level of PPAR，leptin，IRS1，IRS2，GLUT4 in skeletal muscle.［Results］Compared with the normal group，the model group improved the level of glucose in skeletal muscle and the level of leptin in serum significantly （P＜0.01），and decreased the expression of PPAR，leptin，IRS1，IRS2，GLUT4 significantly（P＜0.01，P＜0.05）.Compared with the model group，each of groups had some improvements of the level of glucose in skeletal muscle and the level of leptin and the level of genes expression.［Conclusion］Shengqing Jiangzhuo prescription improve the insulin sensitivity in MSG rats which by activating the genes expression of PPAR and leptin.
Key words:Shengqing Jiangzhuo prescription；MSG rats；insulin resistance

清熱化痰法對(duì)AECOPD痰熱證大鼠模型病理肺組織的影響*

李 杰1，王林洋1，程 涓1，吳 珺2，邱澤計(jì)2，羅 慧1

（1.北京中醫(yī)藥大學(xué)東直門(mén)醫(yī)院，北京 100700；2.北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，北京 100029）

［目的］基于前期研究清熱化痰方可以提高青霉素在慢性阻塞性肺疾病急性加重期（AECOPD）痰熱證大鼠模型肺組織中藥物濃度基礎(chǔ)上，研究清熱化痰方是否通過(guò)改善AECOPD受損肺組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)來(lái)利于抗生素在肺組織內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)。[方法]50只Wistar雄性大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、氨溴索組、二陳湯組、蔞芩止嗽煎組各10只。用熏吸香煙加氣管內(nèi)注射內(nèi)毒素及鼻腔滴入金黃色葡萄球菌，鼓風(fēng)干燥箱中進(jìn)行風(fēng)熱刺激的方法建立大鼠AECOPD痰熱證模型，病理組織使用蘇木精-伊紅（HE）染色，應(yīng)用圖文分析軟件（IPP6.0）測(cè)量肺平均內(nèi)襯間隔（MLI）、平均肺泡數(shù)（MAN）、肺泡腔面積與總面積比（PAA）；同時(shí)對(duì)Weigert染色標(biāo)本測(cè)量彈力纖維的相對(duì)面積。[結(jié)果]病理結(jié)果顯示，AECOPD模型組與正常組比較肺組織結(jié)構(gòu)嚴(yán)重受損，炎癥細(xì)胞增多，說(shuō)明模型復(fù)制成功，蔞芩止嗽煎組與氨溴索組受到破壞相對(duì)較輕，二陳湯組次之。MAN及PAA：蔞芩止嗽煎組、氨溴索組、二陳湯組與模型組相比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Weigert染色顯示，肺泡壁彈力纖維，其中以蔞芩止嗽煎組彈力纖維含量最高，以模型組受破壞最嚴(yán)重，其順序從高到低依次為蔞芩止嗽煎組、氨溴索組、正常組、二陳湯組和模型組。[結(jié)論]中西醫(yī)化痰法對(duì)AECOPD痰熱證大鼠模型受損肺組織結(jié)構(gòu)均有較好的保護(hù)作用，以清熱化痰法最為明顯；清熱化痰法提高抗生素的肺內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)作用的機(jī)制可能是通過(guò)不同程度改善肺組織受損的形態(tài)結(jié)構(gòu)，降低受損肺泡結(jié)構(gòu)對(duì)抗生素的滲透限制來(lái)協(xié)助抗生素在肺組織中的正相擴(kuò)散，協(xié)同抗生素發(fā)揮作用。

清熱化痰法；AECOPD痰熱證大鼠模型；病理肺組織

基于前期研究清熱化痰方可以提高青霉素在慢性阻塞性肺疾病急性加重期（AECOPD）大鼠模型肺組織中的轉(zhuǎn)運(yùn)能力［1-2］，即提高抗生素在肺組織中的濃度，以合理的劑量達(dá)到良好的療效。本研究初步探究清熱化痰法指導(dǎo)下的蔞芩止嗽煎提高抗生素的肺內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)作用的機(jī)制，是否通過(guò)對(duì)病理肺組織的影響，不同程度的改善受損肺組織形態(tài)學(xué)定量指標(biāo)、減輕肺泡受損程度、保護(hù)彈力纖維等因素達(dá)到改善肺組織受損的形態(tài)結(jié)構(gòu)來(lái)利于抗生素在肺組織中的正相擴(kuò)散，提高其在肺組織中的藥物濃度。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 Wistar雄性大鼠50只，體質(zhì)量（200± 20）g，合格證號(hào)SCXK（京）2009－0007，由北京華阜康生物科技股份有限公司提供。

1.2 材料與試劑 內(nèi)毒素（L2880，由美國(guó)Sigma-Aldrich公司提供），青霉素（華北制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)F3056114），金黃色葡萄球菌（北京中醫(yī)藥大學(xué)醫(yī)學(xué)病原學(xué)與免疫實(shí)驗(yàn)室提供，菌號(hào)ATCC25923），哈德門(mén)香煙（焦油含量12 mg，煙堿含量1.2 mg，由上海卷煙廠生產(chǎn)），氨溴索（上海勃林格殷格翰藥業(yè)有限公司，批號(hào)227521）。二陳湯和蔞芩止嗽煎制備成免煎顆粒，由北京康仁堂藥業(yè)有限公司提供。

1.3 造模、分組及用藥 大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分成5組，即正常組、模型組、氨溴索組、二陳湯組和蔞芩止嗽煎組，每組各10只。除正常組外，其余4組用熏吸香煙加氣管內(nèi)注射內(nèi)毒素的方法［3］建立大鼠慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型，分別于實(shí)驗(yàn)第7、14、28天向氣管內(nèi)注入溶于注射用生理鹽水的內(nèi)毒素200 μL（1 g/L）。第1～28天（第7、14、28天除外）上午將大鼠置入自制密閉的有機(jī)玻璃倉(cāng)（30 cm×45 cm×50 cm）內(nèi)，注入濃度約5%（V/V）哈德門(mén)香煙煙霧每日30 min，制備COPD大鼠模型。在COPD模型基礎(chǔ)上，參照李建生［4］AECOPD痰熱證模型建立方法，于第29天開(kāi)始連續(xù)9 d置于溫度（38±1）℃、相對(duì)濕度50%、風(fēng)速0.7 m/s的鼓風(fēng)干燥箱中進(jìn)行風(fēng)熱刺激，每日2次，每次30 min，建立痰熱證模型，并于第38天經(jīng)鼻腔注入金黃色葡萄球菌2.4×109cfu/mL［5］，每日2次，每次0.3 mL，連續(xù)滴注細(xì)菌3 d，制備AECOPD大鼠模型。每組分別予股四頭肌肌內(nèi)注射青霉素16萬(wàn)U/（kg·d）（與人體肌注量等效），連續(xù)7 d。同時(shí)模型組予蒸餾水10 mL/（kg·d）灌胃，氨溴索組腹腔內(nèi)注射氨溴索6 mg/（kg·d），二陳湯組予二陳湯10 mL/（kg·d）（制備成免煎顆粒，每克生藥配成3 mL混懸液）灌胃，蔞芩止嗽煎組予蔞芩止嗽煎劑10 mL/（kg·d）（制備成免煎顆粒，每克生藥配成3 mL混懸液）灌胃。上述給藥均每日2次。

1.4 采集生物標(biāo)本 從造模后開(kāi)始用藥起計(jì)算，分別于第8天肌肉注射青霉素后15 min，每組隨機(jī)處置動(dòng)物各10只，留取肺組織。處死大鼠后，迅速開(kāi)胸分離支氣管與肺臟，夾閉右主支氣管，取大鼠右肺下葉，用4%多聚甲醛溶液固定48 h后，取肺組織常規(guī)脫水、透明、浸蠟、包埋，切成4 μm厚的切片，蘇木精-伊紅（HE）染色及Weigert彈力纖維染色，光鏡下觀察其病理形態(tài)學(xué)改變。

1.4.1 HE染色 肺組織常規(guī)包埋切片后用二甲苯分別脫蠟2次，每次10 min，再用無(wú)水乙醇各洗5min；依次經(jīng)95%、90%、80%、70%乙醇以及蒸餾水沖洗，各5 min；再用蘇木精液染色10 min后自來(lái)水沖洗2 min；鹽酸乙醇溶液（1%）短暫分化30 s，流水沖洗30 s；伊紅液（1%）染色3 min，蒸餾水洗2 min，再依次用70%、80%、90%及95%乙醇脫水各2 min；無(wú)水乙醇各脫水3 min；二甲苯2次各透明3 min；使用中性樹(shù)膠封固后在光學(xué)顯微鏡下觀察。

1.4.2 Weigert彈力纖維染色 肺組織包埋切片后常規(guī)脫蠟水洗；用酸性高錳酸鉀水溶液（0.5%高錳酸鉀水溶液50 mL，加0.5%硫酸水溶液2.5 mL）處理5 min，蒸餾水沖洗5次；1%草酸水溶液漂白3 min至無(wú)色，蒸餾水洗沖洗5次；70%乙醇浸洗，染色液浸染5 min；95%乙醇浸洗2次，無(wú)水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹(shù)膠封固。

1.5 標(biāo)本測(cè)定 病理形態(tài)觀察：光學(xué)顯微鏡下觀察HE染色標(biāo)本，應(yīng)用圖文分析軟件（IPP6.0）測(cè)量肺平均內(nèi)襯間隔（MLI）、平均肺泡數(shù)（MAN）、肺泡腔面積與總面積比（PAA），同時(shí)對(duì)Weigert染色標(biāo)本測(cè)量彈力纖維的相對(duì)面積。觀察方法：在同一放大倍數(shù)（10×10）及電壓的條件下，每張切片均選取上、中、下3個(gè)視野，用OLYMPUSU-CMAD-2顯微鏡進(jìn)行觀察，用NikonDSFi2進(jìn)行圖像采集，并用IMAGE-Pro plus 6.0圖文分析軟件對(duì)HE染色標(biāo)本以及Weigert染色標(biāo)本分別測(cè)量以下指標(biāo)，在測(cè)量時(shí)避開(kāi)支氣管及大、中血管。

1.5.1 MLI 在Image Pro plus 6.0圖像分析系統(tǒng)上，以視野正中為中心劃“十”字交叉線，計(jì)算通過(guò)該交叉線的肺泡間隔數(shù)（Ns），測(cè)出十字線的總長(zhǎng)度（L）=0.768×10-3m，以MLI=L/Ns得到平均內(nèi)襯間隔，其數(shù)值反映肺泡的平均直徑。

1.5.2 MAN 計(jì)算每個(gè)視野內(nèi)的肺泡數(shù)（Na），測(cè)出每個(gè)視野的面積（S）=0.144×10-6m2，以MAN=Na/S計(jì)算各個(gè)視野的平均肺泡數(shù)，其數(shù)值反映肺泡的密度。

1.5.3 PAA 測(cè)量每個(gè)視野內(nèi)肺實(shí)質(zhì)的灰度百分比，計(jì)算出每個(gè)視野內(nèi)肺泡腔的面積在肺總面積中所占的比例。

1.5.4 彈力纖維相對(duì)面積 Weigert染色的彈力纖維呈藍(lán)紫色，隨機(jī)選取3個(gè)視野測(cè)出藍(lán)紫色視野所占面積，以及每個(gè)視野肺總面積，計(jì)算出彈力纖維的相對(duì)面積。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0軟件統(tǒng)計(jì)。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，正態(tài)分布計(jì)量資料組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD法，偏態(tài)分布計(jì)量資料組間比較采用Kruskal-Wallis秩和檢驗(yàn)，組間兩兩比較采用Nemenyi法，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般情況 HE染色顯示，正常組氣管內(nèi)組織上皮結(jié)構(gòu)完整，表面纖毛整齊、豐富，未見(jiàn)有脫落現(xiàn)象，氣管壁結(jié)構(gòu)清晰，肺組織結(jié)構(gòu)正常，肺泡間隔完整，無(wú)氣腫以及炎癥，大小均勻一致。模型組肺泡間隔增厚，有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)（中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞），近胸膜處肺泡明顯擴(kuò)張，肺泡間隔變窄斷裂，擴(kuò)張的肺泡融合形成較大的含氣囊腔，呈肺大泡改變，肺泡壁毛細(xì)血管受壓且數(shù)量減少，支氣管內(nèi)纖毛柱狀上皮細(xì)胞部分剝脫，纖毛粘連、倒伏、變性和壞死，部分脫落，杯狀細(xì)胞增多。其中以蔞芩止嗽煎組與氨溴索組組大鼠肺泡有部分?jǐn)U張、少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、纖毛粘連、倒伏、變性，較模型組明顯破壞減輕，二陳湯組其次，以模型組破壞最重，見(jiàn)圖1。

2.2 觀察HE染色標(biāo)本情況 應(yīng)用圖文分析軟件（IPP6.0）測(cè)量MLI、MAN、PAA，見(jiàn)表1。結(jié)果顯示，MLI：組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。MAN：組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），進(jìn)一步兩兩比較顯示，與模型組相比，正常組、蔞芩止嗽煎組、氨溴索組與二陳湯組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），提示上述治療對(duì)肺組織均有保護(hù)作用，正常組、蔞芩止嗽煎組、氨溴索組與二陳湯組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但均值比較顯示正常＞蔞芩＞氨溴索＞二陳。PAA：組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），進(jìn)一步兩兩比較顯示，與模型組相比，正常組、蔞芩止嗽煎組與二陳湯組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），正常組、蔞芩止嗽煎組與二陳湯組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但均值比較正常＜蔞芩＜氨溴索＜模型。

表1 各組MLI、MAN、PAA情況（±s）

表1 各組MLI、MAN、PAA情況（±s）

注：與模型組比較，*P＜0.05；**P＜0.01。

組別 n MLI（mm） MAN（/cm2） PAA（%）正常組 10 83.00±9.93 112.27±11.70** 0.33±0.54*模型組 10 112.63±37.61 61.80±30.60 0.38±0.40氨溴索組 10 86.23±28.45 90.03±29.82** 0.36±0.24*二陳湯組 10 95.84±37.24 87.82±29.07** 0.34±0.39*蔞芩止嗽煎組 10 89.12±32.58 92.53±26.75** 0.34±0.41**

2.3 觀察Weigert染色標(biāo)本下的彈力纖維相對(duì)面積情況 見(jiàn)表2。

結(jié)果顯示，組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。正常組彈力纖維連續(xù)性好，結(jié)構(gòu)清楚；蔞芩止嗽煎組彈力纖維連續(xù)性較好，結(jié)構(gòu)相對(duì)清楚；氨溴索組、二陳湯組彈力纖維已有破壞；模型組彈力纖維明顯破壞，失去原有連續(xù)性，見(jiàn)圖2。

表2 彈力纖維相對(duì)面積（±s）

表2 彈力纖維相對(duì)面積（±s）

注：組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05。

組別 n 彈力纖維相對(duì)面積正常組 10 0.069±0.012模型組 19 0.065±0.018氨溴索組 16 0.069±0.017二陳湯組 19 0.068±0.012蔞芩止嗽煎組 15 0.071±0.018

3 討論

中醫(yī)認(rèn)為COPD是多種慢性肺系疾病長(zhǎng)期反復(fù)發(fā)作，傷及肺、脾、腎，使痰瘀阻肺，肺氣壅滯，肺體脹滿，肺不斂降而成。武維屏等［6］通過(guò)對(duì)228例肺脹病例的回顧研究發(fā)現(xiàn)痰、瘀、虛病機(jī)主次及兼雜變化貫穿了肺脹病機(jī)的演變過(guò)程。無(wú)論是采用回顧性研究還是采用前瞻性研究方法［7-8］均發(fā)現(xiàn)，實(shí)證方面痰證出現(xiàn)概率最高，其次為瘀證、熱證?？梢?jiàn)，痰邪貫穿了COPD的發(fā)病始終，既是病理產(chǎn)物又是致病因素。所以化痰法在COPD治療中占有重要位置之一。

圖1 各組病理形態(tài)觀察（HE染色×100）

圖2 各組病理形態(tài)觀察（Weigert染色×100）

依清熱化痰理氣立法組成的蔞芩止嗽煎是武維屏教授多年臨床經(jīng)驗(yàn)的總結(jié)，由《統(tǒng)旨方》中清金化痰湯化裁而成，方中瓜蔞皮能清肺化痰，理氣寬腸，黃芩長(zhǎng)于清肺熱，兩者相合清熱化痰，共為君藥；漏蘆、連翹均為清熱解毒之品，清半夏為燥濕化痰代表藥，浙貝母有化痰止咳、清熱散結(jié)之功，4味藥相合，共為臣藥，助君藥清熱、化痰、止咳；杏仁、前胡苦降辛開(kāi)，能宣能降，共奏宣降肺氣之功，在方中共為佐使，使氣降痰除。二陳湯源自《太平惠民和劑局方》，由法半夏、陳皮、茯苓、甘草組成，功能燥濕化痰、理氣和中，主治濕濁痰邪內(nèi)阻證，也是中藥化痰方的基本方。近年研究［9-10］發(fā)現(xiàn)清熱化痰理氣法指導(dǎo)下的蔞芩止嗽煎無(wú)論在臨床還是基礎(chǔ)研究中對(duì)COPD氣道黏液高分泌均有一定影響。

本研究病理觀察結(jié)果顯示，1）一般情況：AECOPD模型組［5］鏡下改變與正常組相比較有明顯差別，肺泡間隔增厚，炎性細(xì)胞增多，擴(kuò)張的肺泡融合形成肺大泡，支氣管內(nèi)纖毛柱狀上皮細(xì)胞部分剝脫、變性和壞死，杯狀細(xì)胞增多，說(shuō)明模型復(fù)制成功。2）MLI組間比較無(wú)差異，MAN及PAA結(jié)果顯示：蔞芩止嗽煎組、二陳湯組與氨溴索組在經(jīng)過(guò)對(duì)AECOPD痰熱證大鼠模型的干預(yù)之后，MAN及PAA與模型組相比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。MLI反映的是平均肺泡直徑，MAN反映的是平均肺泡個(gè)數(shù)，PAA反映的是肺泡進(jìn)行氣體交換的面積，所以三者的變化可代表肺組織結(jié)構(gòu)的受損程度。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型組大鼠較正常組肺泡直徑增寬，單位面積肺泡數(shù)明顯減少，肺泡腔面積與總面積比亦明顯減少，肺泡結(jié)構(gòu)破壞明顯，提示COPD病理狀態(tài)下肺組織結(jié)構(gòu)嚴(yán)重受損。蔞芩止嗽煎組、二陳湯組與氨溴索組MLI均較模型組沒(méi)有顯著差異，提示這3個(gè)治療組不能明顯減少COPD肺組織肺泡直徑。蔞芩止嗽煎組、二陳湯組與氨溴索組MAN、PAA均較模型組有顯著差異，提示這3組能明顯增加單位面積上肺泡數(shù)及肺泡腔面積，對(duì)肺臟結(jié)構(gòu)均有較好的保護(hù)作用。3）Weigert染色顯示肺泡壁彈力纖維，其中以蔞芩止嗽煎組彈力纖維含量最高，以模型組受破壞最嚴(yán)重，其順序從高到低依次為蔞芩止嗽煎組、氨溴索組、正常組、二陳湯組和模型組。

目前國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道氨溴索具有促進(jìn)抗生素在肺內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)的作用［11-13］，其作用機(jī)制可能是氨溴索是一種黏液溶解劑，能改變肺泡細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能，增加肺泡Ⅱ型細(xì)胞和表面活性物質(zhì)的合成［14-17］。本實(shí)驗(yàn)在對(duì)肺組織病理標(biāo)本進(jìn)行形態(tài)定量分析結(jié)果亦提示氨溴索增加單位面積上肺泡數(shù)及肺泡腔面積，增加肺泡壁彈力纖維。而清熱化痰方和化痰方也可以增加單位面積上肺泡數(shù)及肺泡腔面積，增加肺泡壁彈力纖維，從對(duì)受損病理形態(tài)改善的角度證明中西醫(yī)化痰法在COPD治療中的重要位置。

此外，本研究采用傳統(tǒng)、現(xiàn)代病證結(jié)合的方法，在大鼠體內(nèi)模擬復(fù)制出人體疾病、證候和病理改變相近的模型，即AECOPD痰熱證模型，在3種化痰法干預(yù)中，清熱化痰方對(duì)受損肺組織的保護(hù)作用更為明顯，體現(xiàn)中醫(yī)辨證論治和法證合一的治療特色。因此清熱化痰法指導(dǎo)下的蔞芩止嗽煎提高抗生素的肺內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)作用的機(jī)制可能是通過(guò)不同程度增加單位面積上的肺泡個(gè)數(shù)、增加肺泡腔面積、保護(hù)彈力纖維等因素達(dá)到利于COPD病理改變中肺泡結(jié)構(gòu)恢復(fù)，改善肺組織受損的形態(tài)結(jié)構(gòu)，降低受損肺泡結(jié)構(gòu)對(duì)抗生素的滲透限制來(lái)協(xié)助抗生素在肺組織中的正相擴(kuò)散，從而影響抗生素在肺組織內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)能力，協(xié)同抗生素發(fā)揮作用。

［1］李 杰，武維屏，羅 慧，等.中藥化痰法對(duì)青霉素在AECOPD大鼠肺組織轉(zhuǎn)運(yùn)能力的研究［J］.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，36（16）：404-408.

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The influence of clearing heat and dispersing phlegm method on the pathological lung tissue of AECOPD rat model（syndrome of phlegm and heat）

LI Jie1，WANG Lin-yang1，CHENG Juan1，WU Jun2，QIU Ze-ji2，LUO Hui1
（1.Dongzhimen Hospital，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100700，China；2.School of Basic Medical Sciences，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100029，China）

［Objective］Based on the previous research foundation that the way of clearing heat and dispersing phlegm can increase the concentration of antibiotic in AECOPD lung tissue，this study will explore the mechanism of action that Louqinzhisoujian improves transport of antibiotics in the lung tissue by the means of intervening AECOPD damaged lung tissue morphology.［Methods］Fivty Wistar male rats were randomly divided into normal group，model control group，ambroxol group，Erchentang group，Louqinzhishoujian group，10 in each group.To establish rat model of AECOPD （syndrome of phlegm and heat）by passive cigarette smoking，intratracheal instillation of lipopolysacchricle（LPY），intranose instillation of staphylococcus aureus，plus put in the Wind-heat oven.Pathological tissue using HE staining，apply image analysis software（IPP6.0）measuring the average lung lining interval（MLI），mean alveolar number（MAN），alveolar area and the total area ratio（PAA）；Weigert stained specimen while measuring relative area of elastic fibers.［Results］Pathology results showed：lung tissues structure of model control group were more severe damage than those of normal group，including increase of inflammatory cells.In this way the model successfully reproduced.The lung tissue destructions of Louqinzhishoujian group and ambrohexel group were relatively light，the second group followed Erchentang group.MAN and PAA：Compared with model control group，Louqinzhishoujian group，Erchentang group，and ambroxol group，they were statistically significant（P＜0.05）.Weigert staining showed the alveolar wall elastic fiber，Louqinzhisou group was the highest of elastic fiber content and model control group was the most serious damage among them，the orders from high to low were Louqinzhisou group，ambroxol group，normal group，Erchentang group and model control group.［Conclusion］The dispersing phlegm ways of TCM and WM also have better protection for damaged lung tissue of AECOPD rat model，the way of clearing heat and dispersing phlegm way is special evident.The mechanism of action that Louqinzhisoujian improves transport of antibiotics in the lung tissue may to some extent improve the damaged structure of pulmonary tissue to reduce the penetration of the antibiotic which helps it to play a role.

clearing heat and dispersing phlegm way；rat model of exacerbation chronic obstructive pulmonary disease（syndrome of phlegm and heat）；pathological lung tissue

R563

A

1673－9043（2016）01－0031-05

10.11656/j.issn.1673-9043.2016.01.09

國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金資助項(xiàng)目（81202681）。

李 杰（1976-），女，博士，副教授，研究方向?yàn)橹嗅t(yī)藥防治肺系疾病研究。

（2015-09-12）