復(fù)方南星止痛膏中多成分含量測定方法研究

楊　惠　管大平

(1.安徽省銅陵市食品藥品稽查支隊，安徽 銅陵 244000；2.安徽省銅陵市食品藥品檢驗中心，安徽 銅陵 244000)

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復(fù)方南星止痛膏中多成分含量測定方法研究

楊惠1管大平2

(1.安徽省銅陵市食品藥品稽查支隊，安徽 銅陵 244000；2.安徽省銅陵市食品藥品檢驗中心，安徽 銅陵 244000)

摘要目的建立同時測定復(fù)方南星止痛膏中桂皮醛、樟腦、冰片、丹皮酚含量的方法。方法采用氣相色譜法，PEG-20M毛細(xì)管柱，F(xiàn)ID檢測器，程序升溫測定四種成分含量。結(jié)果桂皮醛、樟腦、冰片、丹皮酚分別在0.02～20 mg/mL、0.05～50 mg/mL、0.05～50 mg/mL、0.05～50 mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好；桂皮醛平均加樣回收率為96.35%(n=6)，RSD=0.8%。結(jié)論該方法操作簡單，重現(xiàn)性好，可用于復(fù)方南星止痛膏中桂皮醛、樟腦、冰片、丹皮酚的含量測定。

關(guān)鍵詞復(fù)方南星止痛膏；多成分；氣相色譜

文章編碼：1001-8131(2016)02-0151-02

復(fù)方南星止痛膏收載于國家食品藥品監(jiān)督管理局國家藥品標(biāo)準(zhǔn)零散標(biāo)準(zhǔn)，主要成分有生天南星、生川烏、丁香、肉桂、徐長卿、樟腦、冰片等12味[1]，具有散寒除濕，活血止痛的功效，主要用于寒濕瘀阻所致的關(guān)節(jié)疼痛，腫脹，活動不利，遇寒加重[2]。標(biāo)準(zhǔn)中只有次烏頭堿、丁香酚的含量測定項目，而與此兩種成分功效(鎮(zhèn)痛、抗炎)類似的桂皮醛、樟腦、冰片抗、丹皮酚四種成分則無含量控制。本實驗采用氣象色譜法同時測定上述四種成分含量[3-4]，可進一步控制復(fù)方南星止痛膏的質(zhì)量。

1儀器與試藥

1.1儀器 ：AB135-S電子天平(0.01 mg)、GB-204電子天平(0.1 mg)(梅特勒-托利多)；GC-2010 plus氣相色譜儀；色譜柱：PEG-20M(型號：RTX-WAX，美國RESTEK公司)；檢測器：FID ；色譜工作站：GC-Solution工作站。

1.2試藥：復(fù)方南星止痛膏(江蘇南星藥業(yè)有限責(zé)任公司,批號：140207、140608、141108)；乙酸乙酯(AR)、純化水；桂皮醛、樟腦、冰片、丹皮酚(中國食品藥品檢定研究院，供含量測定用)。

2方法與結(jié)果

2.1色譜條件[5]毛細(xì)管色譜柱(25 m，內(nèi)徑0.25 mm，膜厚0.25 μm)：以聚乙二醇(PEG-20M)為固定相，涂布濃度為10%(型號：RTX-WAX，美國RESTEK公司)，程序升溫，起始溫度90 ℃保持1min，終止溫度190 ℃，升溫速率4 ℃/min。分流體積比(1/30)。

2.2供試品溶液的制備：取本品4片，除去蓋襯，刮下藥膏，精密稱定，置500 mL燒瓶中，加水250 mL，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分，并溢入燒瓶為止，再加醋酸乙酯2 mL，連接回流冷凝管，緩緩加熱至沸，并保持微沸4 h，將揮發(fā)油測定器中的溶液移至分液漏斗中，分取醋酸乙酯層，水層用醋酸乙酯提取3次，再用醋酸乙酯多次洗滌揮發(fā)油測定器和分液漏斗，合并醋酸乙酯液，轉(zhuǎn)移至25 mL，量瓶中，加醋酸乙酯至刻度，搖勻，即得。

2.3對照品溶液的制備：取桂皮醛、樟腦、冰片、丹皮酚對照品適量，精密稱定，分別加乙酸乙酯配制成每2 mg/mL，5 mg/mL，5 mg/mL，5 mg/mL的溶液。

2.4陰性樣品溶液的制備[6]：按處方制備不含肉桂、徐長卿、樟腦、冰片的陰性樣品，照“2.2”供試品溶液的制備方法制得陰性樣品溶液。

2.5線性關(guān)系的試驗[7]：精密稱取桂皮醛、樟腦、冰片、丹皮酚對照品，桂皮醛用乙酸乙酯制成20 mg/mL的溶液；樟腦、冰片、丹皮酚用乙酸乙酯制成50 mg/mL的溶液搖勻。分別精密吸對照品溶液1μL注入氣相色譜儀中，以進樣量為橫坐標(biāo)，色譜峰面積為縱坐標(biāo)，經(jīng)線性回歸，表明桂皮醛在0.02～20.00 mg/mL；樟腦、冰片、丹皮酚在0.05～50.00 mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(進樣量1 μL，分流體積1/30)。2.6精密度試驗：精密吸取2.3項下對照品溶液1 μL重復(fù)進樣5次，測得桂皮醛、樟腦、冰片、丹皮酚峰面積的RSD為0.7%，0.5%，0.9%，0.8%(n=5)，結(jié)果表明儀器精密度良好。

2.7樣品測定：取樣品，按照供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，分別取供試品溶液及對照品溶液各1μL進樣測定峰面積，用外標(biāo)法(以峰面積)計算含量，結(jié)果見表1、圖1，圖2。

表1　樣品含量測定結(jié)果(%)

2.8穩(wěn)定性試驗：取供試品溶液[8]，分別在0 h，2 h，4 h，6 h，8 h，10 h進樣1μL，測得桂皮醛、樟腦、冰片、丹皮酚峰面積的RSD均小于1.0%(n=6)。實驗結(jié)果表明，供試品溶液在10 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

圖1 對照品色譜圖

圖2 樣品色譜圖

2.9重復(fù)性試驗[9]：精密稱取同一批樣品(批號：140207)5份，照“2.2”項下方法制備供試品溶液，進樣1 L 測定，桂皮醛、樟腦、冰片、丹皮酚，RSD均小于1.0%(n=5)。表明分析方法重現(xiàn)性好。

2.10加樣回收率試驗[10-11]：精密稱取已知含量的同一批號樣品(批號：140207)5份，每份約16 ，分別精密加入桂皮醛對照品10.12 mg，按“2.2”項下供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，進樣1 μL測定峰面積，計算回收率，結(jié)果見表2。同時對樟腦、冰片、丹皮酚等對照品按照上法進行加樣回收率試驗，回收率均在96.35%(n=6)，RSD=0.8%。

表2　桂皮醛加樣回收率試驗結(jié)果

3討論

中成藥療效的發(fā)揮通常都是多種成分協(xié)同作用的結(jié)果，處方中各味中藥的劑量和比例會影響藥效，多指標(biāo)質(zhì)量控制方法不僅能反映制劑的工藝水平，在一定程度上也能反映所有藥材的質(zhì)量，通過對多指標(biāo)成分的分離測定還可以客觀反映傳統(tǒng)中藥的配伍狀況，更符合中醫(yī)理論。本試驗采用氣相色譜法測定復(fù)方南星止痛膏中多成分的含量，可以更好地表征其內(nèi)在質(zhì)量，該法回收率高，分離效果好，操作簡便，方法可行。

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[中圖分類號]R917

[文獻標(biāo)識碼]B學(xué)科分類代碼：31047

收稿日期：2015-08-13