GC測(cè)定鹽酸帕洛諾司瓊原料藥中（S）-3-氨基-奎寧的含量

曹天海

（昆明積大制藥股份有限公司國(guó)際GMP認(rèn)證部，云南 昆明 650106）

GC測(cè)定鹽酸帕洛諾司瓊原料藥中（S）-3-氨基-奎寧的含量

曹天海

（昆明積大制藥股份有限公司國(guó)際GMP認(rèn)證部，云南 昆明 650106）

目的：建立氣相色譜法測(cè)定鹽酸帕洛諾司瓊原料藥中（S）-3-氨基-奎寧含量的方法。方法：采用SE-30色譜柱（53 mm×60 m，5 μm），起始溫度100℃，維持5 min，再以20℃/min的速度升溫至180℃，維持15 min，F(xiàn)ID檢測(cè)器。結(jié)果：（S）-3-氨基-奎寧線環(huán)性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為0.999 7，定量限為0.007 5 mg/mL，檢測(cè)限為0.002 5 mg/mL，方法回收率為101.4%，RSD為 3.2%，滿足要求。結(jié)論：本法靈敏、可靠，可用于鹽酸帕洛諾司瓊原料藥中（S）-3-氨基-奎寧的質(zhì)量控制。

鹽酸帕洛諾司瓊；氣相色譜；（S）-3-氨基-奎寧；含量

（S）-3-氨基-奎寧（圖1）是合成鹽酸帕洛諾司瓊的兩個(gè)起始物料之一，其合成路線見(jiàn)圖2［1］，本品在第2步加入，至最終產(chǎn)品還有2步反應(yīng)，合成1 g鹽酸帕洛諾司瓊需要加入1.9 g（S）-3-氨基-奎寧。因?yàn)椋⊿）-3-氨基-奎寧水溶性較好，不易去除，因此需要考慮它在原料藥中的殘留。由于沒(méi)有紫外吸收，一般衍生化后采用高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定［2］。由于鹽酸帕洛諾司瓊也具有氨基，衍生化時(shí)會(huì)產(chǎn)生雜質(zhì)干擾測(cè)定。因此，參照《中國(guó)藥典》2010年版附錄要求［3］，擬定了鹽酸帕洛諾司瓊原料藥中（S）-3-氨基-奎寧的氣相檢測(cè)方法，并進(jìn)行相關(guān)的分析方法學(xué)驗(yàn)證，結(jié)果表明本方法準(zhǔn)確、靈敏、可靠。

圖1　（S）-3-氨基-奎寧結(jié)構(gòu)式

圖2　鹽酸帕洛諾司瓊合成路線

1儀器與試藥

島津 GC-2010氣相色譜儀；FID檢測(cè)器；GC-Solution色譜工作站；CTC自動(dòng)進(jìn)樣器。

鹽酸帕洛諾司瓊（批號(hào)：130901，130902，131001），（S）-3-氨基-奎寧對(duì)照品（昆明積大制藥股份有限公司提供）。

2方法與結(jié)果

2.1溶液配制

取本品適量，精密稱定，加水制成每1 mL中含50 mg的溶液，作為供試品溶液。

精密稱?。⊿）-3-氨基-奎寧適量，加水制成每1 mL中含0.05 mg的溶液，搖勻，即得。作為對(duì)照品溶液，對(duì)照品溶液色譜圖見(jiàn)圖3。

2.2色譜條件

色譜柱：SE-30（53 mm×60 m，5 μm）（蘭州物化所）；柱溫：起始溫度100℃，維持5 min，再以20℃/min的速度升溫至180℃，維持15 min；進(jìn)樣口溫度：240℃；FID檢測(cè)器溫度：250℃；載氣：N2；分流比：5∶1；H2流速：38.5 mL/min；Air流速：400 mL/min；尾吹氣：N2，3 mL/min；進(jìn)樣體積：2.0 μL。理論塔板數(shù)按（S）-3-氨基-奎寧計(jì)算應(yīng)不低于5 000。

圖3　（S）-3-氨基-奎寧GC色譜圖

2.3專屬性試驗(yàn)

取濃度為0.05 mg/mL的（S）-3-氨基-奎寧水溶液進(jìn)樣，主峰保留時(shí)間為16.809 min。取純化水進(jìn)樣，純化水沒(méi)有干擾，（S）-3-氨基-奎寧主峰理論板數(shù)為66 517，拖尾因子為2.5，符合要求。

2.4精密度試驗(yàn)

取濃度為0.05 mg/mL的（S）-3-氨基-奎寧水溶液連續(xù)進(jìn)樣6次，計(jì)算（S）-3-氨基-奎寧主峰峰面積的RSD值為2.9%，小于5.0%，說(shuō)明本法重復(fù)性好。

2.5檢測(cè)限與定量限

取“2.3”中（S）-3-氨基-奎寧溶液0.5 mL，置于10 mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，作為檢測(cè)限溶液，取2 μL進(jìn)樣，信噪比約為3∶1，得出（S）-3-氨基-奎寧檢測(cè)限為0.002 5 mg/mL；取“2.3”中（S）-3-氨基-奎寧溶液1.5 mL，置于10 mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，作為定量限溶液，取2 μL進(jìn)樣，信噪比約為10∶1，得出（S）-3-氨基-奎寧定量限為0.007 5 mg/mL。結(jié)果表明本法靈敏可靠。

2.6線性和范圍

?。⊿）-3-氨基-奎寧25 mg，置于50 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，分別精密移取0.3，0.5，1.0，2.0，3.0 mL，分別置于 10 mL容量瓶中，加水稀釋至刻度。分別取2 μL進(jìn)樣，計(jì)算相關(guān)系數(shù)為0.999 7。

2.7準(zhǔn)確度試驗(yàn)

取本品已測(cè)定（S）-3-氨基-奎寧的原料藥1批，加水制成每1 mL中含有0.522 mg鹽酸帕洛諾司瓊的溶液，分別精密移取1 mL，置10 mL量瓶中，共制備9份，分別加入濃度為0.048 5 mg/mL的（S）-3-氨基-奎寧溶液0.4，0.5，0.6 mL各3份；依法測(cè)定，計(jì)算回收率，平均回收率為 101.4%，RSD為3.2%。

2.8樣品測(cè)定

本品3批樣品（批號(hào)：130901，130902，131001）對(duì)（S）-3-氨基-奎寧進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果均未檢出。

3討論

（S）-3-氨基-奎寧具有一定毒性，易溶于水，為鹽酸帕洛諾司瓊母環(huán)的一部分，性質(zhì)與其相似，必須測(cè)定其在本品中的殘留。

由于本品無(wú)紫外吸收，本文采用HPLC，先后試用了示差折光檢測(cè)器（RID）和蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSD），但均未出現(xiàn)色譜峰，因此只能選用GC方法，無(wú)須進(jìn)行衍生化試驗(yàn)，測(cè)定結(jié)果更為準(zhǔn)確、快速。

［1］楊新華，歐陽(yáng)強(qiáng).鹽酸帕洛諾司瓊合成路線圖解［J］.中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志，2009，40（3）：231-233.

［2］ Demian I，Gripshover DF.Enantiomeric purity determination of 3-aminoquinuclidine by diastereomeric derivatization and highperformance liquid chromatographic separation［J］.J Chromatography，1989，（466）：415-420.

［3］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（二部）［M］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄61-65.

Opicapone輔助左旋多巴用于帕金森病和劑末運(yùn)動(dòng)波動(dòng)患者有益

《柳葉刀神經(jīng)病學(xué)》雜志于 2016年2月第 15卷第2期發(fā)布了一項(xiàng)關(guān)于Opicapone輔助左旋多巴（通用名：Levodopa）用于帕金森病和劑末（endof-dose）運(yùn)動(dòng)波動(dòng)患者的臨床試驗(yàn)內(nèi)容。

Opicapone為在研、一日 1次、第三代強(qiáng)效兒茶酚胺氧位甲基轉(zhuǎn)移酶抑制藥。本項(xiàng)試驗(yàn)旨在評(píng)估Opicapone輔助左旋多巴用于帕金森病和劑末運(yùn)動(dòng)波動(dòng)患者與安慰劑或恩他卡朋相比的安全性和有效性。

本項(xiàng)試驗(yàn)為隨機(jī)、雙盲、安慰劑對(duì)照及活性對(duì)照試驗(yàn)。受試者按1∶1∶1∶1∶1的比例隨機(jī)分入Opicapone 5 mg組、Opicapone 25 mg組、Opicapone 50 mg組、安慰劑組或恩他卡朋組，用藥14～ 15周。試驗(yàn)的首要終末指標(biāo)為基線至治療結(jié)束后“關(guān)”狀態(tài)絕對(duì)時(shí)間的變化，經(jīng)患者日記評(píng)定。主要分析后，進(jìn)行分層步驟，首先在全面分析中評(píng)定3 種Opicapone劑量與安慰劑相比是否優(yōu)效，如優(yōu)效，則在符合方案分析中評(píng)定 3種 Opicapone劑量與恩他卡朋相比是否非劣效，非劣效性界限為30分鐘。

試驗(yàn)結(jié)果顯示，安慰劑組“關(guān)”狀態(tài)時(shí)間平均減少56分鐘，恩他卡朋組96.3分鐘，Opicapone 5 mg組91.3分鐘，Opicapone 25 mg組85.9分鐘，Opicapone 50 mg組116.8分鐘。Opicapone 50 mg療效優(yōu)于安慰劑，不劣于恩他卡朋。Opicapone 5 mg組或25 mg組療效與安慰劑組無(wú)顯著差異。最常見(jiàn)的不良事件有運(yùn)動(dòng)障礙、失眠、便秘。

總體而言，Opicapone 50 mg輔助左旋多巴用于帕金森病和劑末運(yùn)動(dòng)波動(dòng)患者，可潛在降低左旋多巴日劑量，延長(zhǎng)用藥間隔，使用藥獲益最大化。

（來(lái)源：http://www.thelancet.com）

Determination of（S）-3-Aminoquinuclidine Content in Drug Substance of Palonosetron Hydrochloride by GC

Cao Tianhai
（International GMP Certification Department，Kunming Jida Pharmaceutical Co.，Ltd.，Yunnan Kunming 650106，China）

Objective：To develop an GC method for determination of（S）-3-aminoquinuclidine content in drug substance of palonosetron hydrochloride.Methods：A SE-30 column（53 mm ×60 m，5 μm）was used at an initial temperature of 100℃ for 5 min，then the temperatureincreased at a rate of 20℃ /min to 180℃ and was maintained for 15 min.The detector used was FID.Results：The calibration curve of（S）-3-aminoquinuclidine showed good linearity，with a correlation coefficient of 0.999 7.The limit of quantitatiion（LOQ）and limit of detection（LOD）of the method were 0.007 5 and 0.002 5 mg/mL respectively，while the recovery rate was 101.4%，with a RSD of 3.2%，which met the relevant requirements.Conclusion：The developed method was sensitive and reliable，which was applicable for the quality control of（S）-3-aminoquinuclidine in drug substance of palonosetron hydrochloride.

Palonosetron Hydrochloride；GC；（S）-3-Aminoquinuclidine；Content

10.3969/j.issn.1672-5433.2016.03.007

曹天海，男，碩士，工程師。主要從事藥物研發(fā)工作。E-mail：skyrin_jida@126.com

2015-11-26）