HPLC法同時(shí)測(cè)定補(bǔ)正片中虎杖苷、補(bǔ)骨脂素及異補(bǔ)骨脂素的含量

謝健鳴　隆穎

[摘要] 目的 建立補(bǔ)正片中虎杖苷、補(bǔ)骨脂素及異補(bǔ)骨脂素的液相色譜測(cè)定方法。方法 采用高效液相色譜法。色譜柱為Venusil XBP C18（250mm×4.6mm，5μm），采用甲醇-水作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫；流速為0.8mL/min，檢測(cè)波長為240nm。結(jié)果 虎杖苷、補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素在0.0627～1.881μg、0.01904～0.5712μg、0.0312～0.936μg范圍內(nèi)分別呈良好的線性關(guān)系（r=1），平均回收率（n=6）分別為102.3%、99.6%和103.6%，RSD分別為0.7%、1.5%和0.7%。 結(jié)論 本方法分析操作易行、結(jié)果可靠、重復(fù)性好，可用于補(bǔ)正片的質(zhì)量控制。

[關(guān)鍵詞] 補(bǔ)正片；HPLC；虎杖苷；補(bǔ)骨脂素；異補(bǔ)骨脂素

[中圖分類號(hào)] R917 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 2095-0616（2016）09-32-04

[Abstract] Objective To establish a HPLC method for the simultaneous determination of polydatin， psoralen and isopsoralen in Buzheng tablets by HPLC. Methods HPLC was performed on a Venusil XBP C18 column（250mm×4.6mm， 5m）.The mobile phase was Methanol-water at the flow rate of 0.8mL/min，The detection wave length was 240nm. Results There was a good linearity at the range of 0.0627～1.881μg for polydatin， 0.01904～0.5712μg for Psoralen， and 0.0312～0.936μg for isopsoralen. The average recoveries（n=6） were 102.3%， 99.6% and 103.6%， respectively. And RSDs were 0.7%、1.5% and 0.7%， respectively. Conclusion The method is for the determination of easy operation， reliable results， and reproducible. It can be used for the quality control of polydatin， psoralen and isopsoralen in Buzheng tablets.

[Key words] Buzheng tablets； HPLC； Polydatin； Psoralen； Isopsoralen

補(bǔ)正片是由補(bǔ)骨脂、生地黃、虎杖、酒黃精、赤芝、女貞子等十二味藥制成的醫(yī)療機(jī)構(gòu)中藥復(fù)方制劑，具有補(bǔ)益氣血，養(yǎng)陰填精，活血的功效。原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)僅有薄層鑒別和檢查項(xiàng)，標(biāo)準(zhǔn)的可控性差。為提高標(biāo)準(zhǔn)的可控性，研究建立了高效液相法對(duì)補(bǔ)正片中虎杖和補(bǔ)骨脂的有效成分虎杖苷（Psoralen）和補(bǔ)骨脂素（psoralen）、異補(bǔ)骨脂素（isopsoralen）的含量進(jìn)行測(cè)定，此方法專屬性強(qiáng)、靈敏度高、重現(xiàn)性好，可用于補(bǔ)正片的質(zhì)量控制。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 儀器和設(shè)備

Agilent Technologies1260 Infinity高效液相色譜儀，Sartorius 224S、225D電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器北京有限公司）。

1.2 試藥與試劑

虎杖苷、補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素對(duì)照品，均購于中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)分別為：111575-200502、110739-201202（含量99.3%）、110738-201012；甲醇為色譜純（由Honeywell提供）；水為超純水（由本所自制）；其他試劑均為分析純（均由廣州化學(xué)試劑廠提供）。補(bǔ)正片由廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院提供，規(guī)格：0.25g/片，批號(hào)為：131201、130601、140301。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱：Venusil XBP C18（L，250mm× 4.6mm， 5μm）；以甲醇（A）：水（B）為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫；洗脫過程見表1。流速：0.8mL/min，檢測(cè)波長：240nm，進(jìn)樣體積：10μL。理論塔板數(shù)按虎杖苷峰、補(bǔ)骨脂素峰、異補(bǔ)骨脂素峰計(jì)算均應(yīng)不低于3000；待測(cè)峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度均應(yīng)>1.5。

2.2 溶液制備

2.2.1 對(duì)照品溶液制備 取虎杖苷對(duì)照品0.01045g，置于10mL量瓶中，加入50%甲醇溶解后定容至刻度，搖勻，即得每毫升含1.045ng的虎杖苷儲(chǔ)備液；取補(bǔ)骨脂素對(duì)照品0.00952g，置于10mL量瓶中加入50%甲醇溶解后定容至刻度，搖勻，即得每毫升含0.9453ng的補(bǔ)骨脂素儲(chǔ)備液；取異補(bǔ)骨脂素對(duì)照品0.01040g，置于10mL量瓶中加入50%甲醇溶解后定容至刻度，搖勻，即得每毫升含1.040ng的異補(bǔ)骨脂素儲(chǔ)備液。精密移取虎杖苷、補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素對(duì)照品儲(chǔ)備液各3.0、1.0、1.5mL置于50mL量瓶，加50%甲醇稀釋至刻度，即得虎杖苷、補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素對(duì)照品混合液。

2.2.2 供試品溶液制備 取本品20片，研細(xì)，精密稱取1.0g，置錐形瓶中，精密量取50%甲醇20mL，稱定重量，加熱回流30min，放冷，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，混勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。