燒傷膿毒癥患兒血清炎性因子TNF-α、IL-6水平及其臨床意義

徐郁萍，龔　芳，顧金花

(1.昆山市紅十字會血站檢驗科，江蘇昆山 215300；2.無錫市第三人民醫(yī)院檢驗科，江蘇無錫 214041；3.江蘇大學(xué)附屬昆山醫(yī)院檢驗中心，江蘇昆山 215300)

·臨床研究·

燒傷膿毒癥患兒血清炎性因子TNF-α、IL-6水平及其臨床意義

徐郁萍1，龔芳2，顧金花3△

(1.昆山市紅十字會血站檢驗科，江蘇昆山 215300；2.無錫市第三人民醫(yī)院檢驗科，江蘇無錫 214041；3.江蘇大學(xué)附屬昆山醫(yī)院檢驗中心，江蘇昆山 215300)

摘要:目的探討燒傷膿毒癥患兒血清炎性因子腫瘤壞死因子(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)水平及其臨床意義。方法將62例燒傷患兒根據(jù)膿毒血癥診斷標(biāo)準(zhǔn)，將燒傷患兒分為膿毒癥組和非膿毒癥組；根據(jù)膿毒癥組患者的預(yù)后情況，進(jìn)一步將其分為死亡組和生存組。另選擇年齡和性別相匹配的15例近期無感染且無其他急性疾病的健康兒童作為對照組。入選患兒分別于入院24 h內(nèi)采集血清，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA) 檢測血清中炎性因子TNF-α、IL-6的濃度。結(jié)果膿毒癥組患兒TNF-α、IL-6的濃度高于非膿毒癥組患兒，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，且均高于對照組(P<0.01)；死亡組患兒TNF-α、IL-6的濃度高于生存組患兒，兩組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論燒傷膿毒癥患兒血清炎性因子TNF-α、IL-6檢測對臨床小兒燒傷的診斷、治療和病情監(jiān)測具有重要意義。

關(guān)鍵詞:膿毒癥；兒童；腫瘤壞死因子；白細(xì)胞介素6

嚴(yán)重?zé)齻螅捎谌硌仔苑磻?yīng)使得機體蛋白分解代謝反應(yīng)加劇，從而導(dǎo)致機體多器官結(jié)構(gòu)或功能受損，并且燒傷越重、病程越長，感染發(fā)病率越高[1-2]。兒童正處于生長發(fā)育階段，各組織、器官的功能尚不完善，因此極易發(fā)生感染引起膿毒癥。據(jù)報道，膿毒癥已成為導(dǎo)致兒童燒傷后死亡的首要病因[3]。目前有關(guān)兒童燒傷膿毒癥的臨床研究相對較少。因此，重視兒童燒傷膿毒癥的臨床研究，并掌握其臨床特點，對兒童燒傷膿毒癥的早期診斷及防治具有重要意義。本研究通過檢測燒傷膿毒癥患兒血清炎性因子TNF-α、IL-6水平，探討燒傷后細(xì)胞因子的改變與疾病預(yù)后的關(guān)系及其臨床意義。

1資料與方法

1.1一般資料將2012年1月至2013年4月收治于昆山市第一人民醫(yī)院和無錫市第三人民醫(yī)院燒傷科的燒傷患兒作為本次研究的研究對象。入選標(biāo)準(zhǔn)：(1) 征得患者親屬知情同意；(2) 年齡小于18歲； (3)患兒無免疫缺陷情形(如器官移植或造血干細(xì)胞移植，HIV感染，先天性免疫缺陷或正在使用免疫抑制劑等)。根據(jù)國際兒童燒傷膿毒癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]，將入選的62例燒傷患兒分為膿毒癥組(29例)和非膿毒癥組(33例)。根據(jù)膿毒癥組患者的預(yù)后情況，將其分為死亡組(9例)和生存組(20例)。另選擇年齡和性別相匹配的15例近期無感染且無其他急性疾病的健康兒童作為對照組。見表1。

表1　　入選研究對象基本資料

-：此項無數(shù)據(jù)。

1.2膿毒癥診斷標(biāo)準(zhǔn)膿毒癥診斷標(biāo)準(zhǔn)參照國際兒童燒傷膿毒癥[4]：符合以下2項即診斷為全身炎性反應(yīng)綜合征(SIRS)，其中一項必須包括體溫或白細(xì)胞計數(shù)異常。SIRS出現(xiàn)在可疑或已證實的感染中，或由感染導(dǎo)致的即診斷為膿毒癥。(1) 中心體溫高于38.5 ℃或低于36 ℃；(2) 心率加快，大于其年齡段正常值的2個標(biāo)準(zhǔn)差；(3) 呼吸頻率增加，大于其年齡段正常值的2個標(biāo)準(zhǔn)差；(4) 外周血白細(xì)胞計數(shù)大于或小于其年齡段正常值2個標(biāo)準(zhǔn)差，或未成熟粒細(xì)胞大于0.1。入選患兒分別于入院24 h內(nèi)采集靜脈血3 mL，室溫放置30 min后，3 000 r/min，4 ℃離心8 min，分離血清，置-80 ℃凍存。本試驗獲江蘇大學(xué)及南通大學(xué)醫(yī)學(xué)倫理委員會的批準(zhǔn)。

1.3方法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清各細(xì)胞因子水平。TNF-α、IL-6試劑盒均購自美國R&D公司，檢測靈敏度分別為5.5 pg/mL和0.7 pg/mL。嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作。

2結(jié)果

2.1嚴(yán)重?zé)齻摱景Y患兒血清TNF-α、IL-6水平與對照組相比，膿毒癥組和非膿毒癥組患兒炎癥細(xì)胞因子TNF-α的濃度均明顯升高，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(t=28.446，P<0.01；t=12.690，P<0.01)。膿毒癥組和非膿毒癥組患兒炎癥細(xì)胞因子IL-6水平也顯著高于對照組(t=26.587，P<0.01；t=24.927，P<0.01)。并且膿毒癥組患兒TNF-α、IL-6的濃度均高于非膿毒癥組患兒(t=25.208，P<0.01；t=11.977，P<0.01)。見表2。

2.2血清TNF-α、IL-6水平與膿毒癥患兒預(yù)后情況死亡組患兒TNF-α和IL-6的濃度均顯著高于生存組患兒，兩組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.416，P<0.05；t=3.259，P<0.01)。見表3。

表2　　膿毒癥和非膿毒癥患兒血清TNF-α、IL-6水平

a：P<0.01，與對照組比較；b：P<0.01，與非膿毒癥組比較。

表3　　死亡組和生存組患兒血清TNF-α、IL-6水平

a：P<0.01，與生存組比較。

3討論

近年來，人們逐漸認(rèn)識到膿毒癥是一個失控的“全身自我破壞炎性反應(yīng)”過程。如果促炎介質(zhì)與抗炎介質(zhì)之間彼此取得平衡，則內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定得以保持。否則，當(dāng)出現(xiàn)過度炎性反應(yīng)時，機體發(fā)生組織細(xì)胞損傷、器官功能障礙；而出現(xiàn)過度抗炎性反應(yīng)時，機體處于抗炎性反應(yīng)綜合征(CARS)狀態(tài)，即“免疫麻痹”[5-6]。處于免疫麻痹的膿毒癥患者免疫功能低下，是后期疾病進(jìn)展為難以控制的感染和多器官功能障礙綜合征(MODS)的原因[6]。因此，近年來有很多關(guān)于膿毒癥預(yù)警指標(biāo)的研究[7-11]。

值得關(guān)注的是，以往的研究大多集中于成人，如目前已經(jīng)證實的參與成人膿毒癥炎性反應(yīng)的預(yù)警指標(biāo)主要有降鈣素原(PCT)、TNF-α、IL-6和白細(xì)胞介素-10(IL-10)等[8-11]。兒童的生理特點、器官發(fā)育狀況、藥物代謝能力以及機體對燒傷的反應(yīng)等都與成人不同。國外有學(xué)者通過對兒童和成人燒傷后6個不同時間點22種炎性介質(zhì)的研究發(fā)現(xiàn)[12]，燒傷后不同時間點特別是燒傷早期多種炎性因子的表達(dá)在兒童和成人之間存在顯著差異。最近研究發(fā)現(xiàn)，嚴(yán)重?zé)齻髢和纳媛食４笥诔扇?，并且年齡越大，燒傷面積越大，患者病死率越高；燒傷后炎性反應(yīng)而導(dǎo)致的機體高分解代謝狀態(tài)和病死率有關(guān)[13]。以上結(jié)果提示，燒傷后兒童和成人存在不同的炎性應(yīng)激反應(yīng)，因此兒童不能簡單地看成是成人的縮影。目前有關(guān)兒童燒傷膿毒癥預(yù)警指標(biāo)的國內(nèi)外臨床研究相對較少。埃及Abdel-Hafez 等[14]對42例平均年齡為4歲左右的燒傷患兒研究發(fā)現(xiàn)，膿毒癥患兒血清TNF-α、IL-6水平顯著升高，并且IL-6升高幅度與感染程度密切相關(guān)。美國Gauglitz等[15]報道，28例伴吸入性損傷的燒傷患兒血清IL-6水平和患兒病死率密切相關(guān)。

本研究發(fā)現(xiàn)，膿毒癥組患兒TNF-α、IL-6的濃度高于非膿毒癥組患兒，且均高于對照組；死亡組患兒TNF-α、IL-6的濃度高于生存組患兒，兩組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。這說明膿毒癥患兒TNF-α 和IL-6的持續(xù)升高預(yù)示患者的病情逐漸加重，且預(yù)后較差。目前研究結(jié)果多顯示，大面積燒傷并發(fā)的膿毒癥來勢兇猛，病情進(jìn)展迅速，患者病死率極高，給臨床救治工作帶來極大困難。且目前臨床上尚無有效措施從根本上終止已發(fā)生的膿毒癥，也缺乏促進(jìn)嚴(yán)重受損器官恢復(fù)的可靠辦法，因此發(fā)展膿毒癥患兒預(yù)警指標(biāo)的研究將有助于臨床小兒燒傷的診斷、治療和病情監(jiān)測。

參考文獻(xiàn)

[1]龔芳，潘宇紅，呂國忠，等．燒傷患者巨細(xì)胞病毒復(fù)發(fā)感染及其對患者預(yù)后的評估價值[J]．中國實驗診斷學(xué)，2013，17(1)：103-106．

[2]Rafla K,Tredget EE.Infection control in the burn unit[J].Burns,2011,37(1):5-15.

[3]彭毅志．兒童燒傷膿毒癥的臨床特點及診斷[J]．中華燒傷雜志，2013，29(1)：1-3．

[4]Goldstein B,Giroir B,Randolph A,et al.International pediatric sepsis consensus conference:definitions for sepsis and organ dysfunction in pediatrics[J].Pediatr Crit Care Med,2005,6(1):2-8.

[5]Hotchkiss RS,Monneret G,Payen D.Immunosuppression in sepsis:a novel understanding of the disorder and a new therapeutic approach[J].Lancet Infect Dis,2013,13(3):260-268.

[6]Aziz M,Jacob A,Yang WL,et al.Current trends in inflammatory and immunomodulatory mediators in sepsis[J].J Leukoc Biol,2013,93(3):329-342.

[7]Standage SW,Wong HR.Biomarkers for pediatric sepsis and septic shock[J].Expert Rev Anti Infect Ther,2011,9(1):71-79.

[8]Lavrentieva A,Papadopoulou S,Kioumis J,et al.PCT as a diagnostic and prognostic tool in burn patients.Whether time course has a role in monitoring sepsis treatment[J].Burns,2012,38(3):356-363.

[9]Kothari N,Bogra J,Abbas H,et al.Tumor necrosis factor gene polymorphism results in high TNF level in sepsis and septic shock[J].Cytokine,2013,61(2):676-681.

[10]Accardo Palumbo A,Forte GI,Pileri D,et al.Analysis of IL-6,IL-10 and IL-17 genetic polymorphisms as risk factors for sepsis development in burned patients[J].Burns,2012,38(2):208-213.

[11]周華，涂家金，黃毅，等．重度燒傷患者血清白細(xì)胞介素6、10含量變化與膿毒癥發(fā)生及預(yù)后的相關(guān)性研究[J]．中華燒傷雜志，2012，28(2)：111-115．

[12]Finnerty CC,Jeschke MG,Herndon DN,et al.Temporal cytokine profiles in severely burned patients:a comparison of adults and children[J].Mol Med,2008,14(9/10):553-560.

[13]Jeschke MG,Mlcak RP,Finnerty CC,et al.Burn size determines the inflammatory and hypermetabolic response[J].Crit Care,2007,11(4):R90.

[14]Abdel-Hafez NM,Saleh Hassan Y,El-Metwally TH.A study on biomarkers,cytokines,and growth factors in children with burn injuries[J].Ann Burns Fire Disasters,2007,20(2):89-100.

[15]Gauglitz GG,Finnerty CC,Herndon DN,et al.Are serum cytokines early predictors for the outcome of burn patients with inhalation injuries who do not survive?[J].Crit Care,2008,12(3):R81.

△通訊作者,E-mail：123460153@qq.com。

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.10.051

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)10-1415-03

(收稿日期：2016-01-04)